一种鼠妇提取物及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及制药领域，具体涉及一种鼠妇提取物及其应用。
【背景技术】
[0002] 血栓是三大致死性心血管疾病（心脏病、中风和静脉血栓栓塞症）的根源，发病率 较高，在全球范围内呈现渐增之势。国际血栓与止血学会提供的资料显示，在美国，每年有 10万-30万人死于静脉血栓；在欧洲，每年有50万人死于静脉血栓，超过艾滋病、乳腺癌、 前列腺癌和高谏公路交通事故死亡人数之和;在中国，因血栓性疾病及其并发症死亡的人 数也众多。目前，临床应用的抗栓药物虽然能大幅度降低死亡率和致残率，但是这些溶栓药 物仍然存在缺点，诸如出血副作用大，剂量难以控制，可能出现再阻塞和再梗死。此外，在 临床治疗血栓性疾病过程中，一般先使用溶栓药物将已经形成的血栓溶解，然后使用抗凝 药物，避免血栓再次形成。然而，目前市场上很少有药物同时具有溶栓和抗凝作用，因此，寻 找一种副作用小，避免再阻塞和再梗死的溶栓抗凝药物势在必行。
[0003] 鼠妇为甲壳纲等足目鼠妇科动物鼠妇scaAer 的干燥虫体， 别名潮虫，地虱，西瓜虫，豌豆虫等，始载于《神农本草》，具有破血利水，解毒止痛之功效。鼠 妇是一味传统的虫类中药，可用于治疗中重度癌性疼痛，扁平疣，痔疮，百日咳等。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种鼠妇提取物，具有溶栓和抗凝活性，且溶栓活性较温和。
[0005] 本发明的另一目的是提供上述鼠妇提取物在制备治疗血栓性疾病药物中的应用。
[0006] 本发明的目的采用如下技术方案实现。
[0007] 本发明提供一种鼠妇提取物，具有溶栓和抗凝活性，采用如下方法制备：将鼠妇采 用湿法超微粉碎，离心，取上清液，得到鼠妇提取物。
[0008] 在本发明中，将所述上清液采用硫酸铵沉淀法进行纯化，得到鼠妇提取物。
[0009] 优选的技术方案中，所述硫酸铵沉淀法如下：在所述上清液中加入硫酸铵至饱和 度为55-65%，离心，取上清液，加入硫酸铵至饱和度为75-85%，离心，取沉淀，得到鼠妇提取 物。
[0010] 优选的技术方案中，将所述鼠妇提取物采用透析法除去硫酸铵。
[0011] 在本发明中，在鼠妇中加入所述鼠妇质量6-10倍的水，浸泡0. 5-2h，然后加入超 微粉碎机中进行湿法超微粉碎。
[0012] 优选的技术方案中，所述湿法超微粉碎的温度为0-40°C，时间为5-10分钟。
[0013] 本发明还提供所述鼠妇提取物在制备治疗血栓性疾病药物中的应用。
[0014] 本发明提供一种鼠妇提取物，具有溶栓和抗凝活性，且溶栓活性较温和。本发明鼠 妇提取物并非是直接溶解纤维蛋白，而是通过激活纤溶酶原，使纤溶酶原转化为纤溶酶，进 而溶解纤维蛋白，因此，该鼠妇提取物的溶栓作用相对温和，因而不会出现大量出血倾向， 降低了组织大出血的风险。另外，本发明所提供鼠妇提取物，制备方法行之有效，工艺过程 简便，易操作，适应于工业化生产。本发明鼠妇提取物还可以应用于制备治疗血栓性疾病药 物。
【附图说明】
[0015]图1是鼠妇湿法超微粉碎粗提物和水煎煮粗提物的体外溶栓活性比较。
[0016] 图2显示了鼠妇提取物溶栓活性。其中"高"对应的孔中加入高浓度鼠妇提取物 溶液，"中"对应的孔中加入了中浓度鼠妇提取物溶液，"低"对应的孔中加入低浓度提取物 溶液，"空白"对应的孔中加入去离子水，"尿激酶"对应的孔中加入了尿激酶。
[0017] 图3显示了阴、阳性平板中鼠妇提取物的溶栓活性。
【具体实施方式】
[0018] 实施本发明可以按如下实施例进行，但并不意味着对本发明范围的限制。
[0019] 实施例1鼠妇湿法超微粉碎和水煎煮粗提物的制备及活性比较。
[0020] 1.鼠妇湿法超微粉碎粗提物的制备 称取干燥鼠妇200. 0g，加入鼠妇质量8倍、25°C的蒸馏水，浸泡1h后，加入超微粉碎 机中在25°C条件下采用湿法超微粉碎10min。将粉碎后得到的浆料在4 °C条件下，10000 r/min离心10min，取上清液，冷冻干燥可得鼠妇湿法超微粉碎粗提物。
[0021] 2.鼠妇水煎煮粗提物的制备 称取200g干燥鼠妇，加入鼠妇质量8倍的蒸馏水，浸泡1h后煎煮3h。取煎煮液，在 4°C条件下，10000r/min离心10min取上清液，60 °C减压浓缩，冷冻干燥可得鼠妇水煎煮 粗提物。
[0022] 3.鼠妇湿法超微粉碎和水煎煮粗提物体内抗凝活性比较 将鼠妇湿法超微粉碎粗提物和水煎煮粗提物分别配制成生药浓度为200mg/mL和 400mg/mL的溶液。昆明小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，即空白对照组，湿法超微粉 碎高、低剂量组和水煎煮高、低剂量组。空白对照组灌胃生理盐水〇. 2mL/10g，湿法超微粉 碎高、低剂量组分别灌胃生药浓度为200mg/mL和400mg/mL的鼠妇湿法超微粉碎粗提物溶 液0? 2mL/10g，水煎煮高、低剂量组分别灌胃生药浓度为200mg/mL和400mg/mL的鼠妇水 煎煮粗提物溶液〇. 2mL/10g。连续给药7天，末次给药lh以后，摘眼球取血。分别按照 PT(凝血酶原时间)，TT(凝血酶时间)，APTT(活化部分凝血活酶时间）试剂盒(北京中勤世 帝科学仪器有限公司，批号分别为STY50101-52，STY50301-32，STY50201-39)说明测定各 组的PT，TT，APTT。各体外诊断试剂盒的测定结果见表1，与空白对照组相比，水煎煮低剂量 组的PT，TT，APTT均无显著性差异，水煎煮高剂量组仅能稍微延迟APTT。虽然湿法超微粉 碎低剂量组与空白对照组比较，PT，TT，APTT均无显著性差异，但是湿法超微粉碎高剂量组 均能显著延迟PT，TT，APTT，而且APTT的延迟时间显著大于水煎煮高剂量组。
[0023] 延迟率（小）=(给药组测定值-空白对照组测定值）/空白对照组测定值*100% 表1体内抗凝活性分析比较
【主权项】
1. 一种鼠妇提取物，其特征在于所述鼠妇提取物具有溶栓和抗凝活性，采用如下方法 制备：将鼠妇采用湿法超微粉碎，离心，取上清液，得到鼠妇提取物。
2. 根据权利要求1所述鼠妇提取物，其特征在于将所述上清液采用硫酸铵沉淀法进行 纯化，得到鼠妇提取物。
3. 根据权利要求2所述鼠妇提取物，其特征在于所述硫酸铵沉淀法如下：在所述上清 液中加入硫酸铵至饱和度为55-65%，离心，取上清液，加入硫酸铵至饱和度为75-85%，离 心，取沉淀，得到鼠妇提取物。
4. 根据权利要求3所述鼠妇提取物，其特征在于将所述鼠妇提取物采用透析法除去硫 酸铵。
5. 根据权利要求1-4之一所述鼠妇提取物，其特征在于在鼠妇中加入所述鼠妇质量 6-10倍的水，浸泡0. 5-2h，然后加入超微粉碎机中进行湿法超微粉碎。
6. 根据权利要求5所述鼠妇提取物，其特征在于所述湿法超微粉碎的温度为0-40°C， 时间为5-10分钟。
7. 权利要求1-6之一所述鼠妇提取物在制备治疗血栓性疾病药物中的应用。
【专利摘要】本发明提供一种鼠妇提取物及其应用，涉及制药领域。所述鼠妇提取物，具有溶栓和抗凝活性，采用如下方法制备：将鼠妇采用湿法超微粉碎，离心，取上清液，得到鼠妇提取物。该鼠妇提取物，具有溶栓和抗凝活性，且溶栓活性较温和。本发明鼠妇提取物并非是直接溶解纤维蛋白，而是通过激活纤溶酶原，使纤溶酶原转化为纤溶酶，进而溶解纤维蛋白，因此，该鼠妇提取物的溶栓作用相对温和，因而不会出现大量出血倾向，降低了组织大出血的风险。另外，本发明所提供鼠妇提取物，制备方法行之有效，工艺过程简便，易操作，适应于工业化生产。本发明鼠妇提取物还可以应用于制备治疗血栓性疾病药物。
【IPC分类】A61P7-02, A61K35-64
【公开号】CN104523758
【申请号】CN201510042710
【发明人】吴勉华, 李博, 郭立玮, 田周
【申请人】南京中医药大学
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2015年1月28日