一种用于提高植物抗病能力和促进植物生长的包含壳聚糖的组合物的制作方法

专利名称：一种用于提高植物抗病能力和促进植物生长的包含壳聚糖的组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及通过使用包含壳聚糖作为主要成分并含有有机酸的组合物来保护植物免于疾病和促进植物生长的领域。
与目前常用的农药(杀菌剂)相比，本发明组合物在环境安全方面非常出色，并且其对病原体的作用与农药(杀菌剂)相当。
背景技术：
在农业领域，将包含壳聚糖和有机酸的组合物用作调控植物生长或防治病害的试剂的技术属于已有技术(参见美国专利US4,812,159、JP-A-10-309129(“JP-A”表示未审查但已公开的日本专利申请)和未审查但已公开的日本国际申请No.2001-507361)。这些现有技术公开的组合物使用了壳聚糖和一种或多种有机酸，例如谷氨酸、乳酸和丁二酸。制备这种组合物所用的有机酸的用量范围是从其提供的羧基含量是壳聚糖的氨基的1.02倍或更多倍到等于壳聚糖的量(质量比)，该组合物能被用作植物生长调节剂。然而，使用两种或多种不同分子量的壳聚糖的事例至今没有报道。
在上述出版物中，包含壳聚糖和有机酸的组合物能被用作植物生长调节剂、病害防治剂等，然而这些组合物都存在问题，如应用范围窄或应用效果不稳定。在这种情况下，本发明的目的是提供一种能够提高植物抗病能力且能促进植物生长的组合物，该组合物包含壳聚糖作为成分且应用效果提高。
作为一个扩宽提高植物抗病性和促进植物生长用的组合物应用范围的研究结果，本发明人发现，当使用至少两种不同分子量的壳聚糖时，由植物种类或施用方法带来的效果差异将被减少，提高植物抗病和促进植物生长的作用将被提高。本发明就是基于这个发现而完成的。
发明概述具体来说，本发明是由例如以下事项组成的。一种用于提高植物抗病能力和促进植物生长的组合物，包含(A)分子量为3,000-6,000的壳聚糖，(B)分子量为35,000-90,000的壳聚糖(条件是壳聚糖A和B的分子量不同)和(C)乳酸和/或丁二酸。如[1]所述的组合物，其中壳聚糖(A)和(B)的脱乙酰度是60-90％(条件是壳聚糖A和B的脱乙酰度可以相同或者不同)。如[1]或[2]所述的组合物，其中壳聚糖(A)和(B)的含量比为1∶0.9-1.1。如[1]-[3]中任一项所述的组合物，其中壳聚糖(A)和(B)的总含量占组合物总质量的5-15％。如[1]-[4]中任一项所述的组合物，其中(C)乳酸和/或丁二酸的含量占组合物总质量的2-15％。如[1]-[5]中任一项所述的组合物，其中丁二酸的含量占组合物总质量的0.5-5％，乳酸的含量占组合物总质量的1-10％，它们的总量是壳聚糖总量的0.4-1.0倍。如[1]-[6]中任一项所述的组合物，它还包含除乳酸和丁二酸之外的有机羧酸(D)。如[7]中所述的组合物，其中有机羧酸(D)是至少一种选自下组的酸谷氨酸、水杨酸、花生四烯酸和吲哚乙酸。如[7]或[8]中所述的组合物，其中有机羧酸(D)的含量占组合物总质量的0.0001-5％。如[1]-[9]中任一项所述的组合物，它还包含无机盐(E)。如[10]中所述的组合物，其中无机盐(E)是至少一种选自下组的盐硅酸盐、亚磷酸盐和磷酸盐。如[10]或[11]所述的组合物，其中无机盐(E)的含量占组合物总质量的1-5％。如[1]-[12]中任一项所述的组合物，它包含二甲基亚砜(F)，其含量占组合物总质量的3-15％。如[1]-[3]中任一项所述的组合物，它包含一种醇(G)，该醇含有一个有1-8个碳原子的烷基基团，该烷基基团可以是分支的。如[14]中所述的组合物，其中醇(G)为异戊醇。如[14]或[15]所述的组合物，其中醇(G)的含量占组合物总质量的0.5-5％。如[1]-[16]任一项所述的组合物，其还包含表面活性剂(H)。如[17]中所述的组合物，其中的表面活性剂是至少一种选自下组的表面活性剂聚氧乙烯烷基苯基醚、聚氧乙烯烷基醚、聚亚烷基二醇烷基醚、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯树脂酸酯、聚氧乙烯己糖醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯和失水山梨糖醇脂肪酸酯。如[17]或[18]中所述的组合物，其中表面活性剂(H)的含量占组合物总质量的0.5-3％。如[1]-[19]中任一项所述的组合物，其包含水(I)。如[20]所述的组合物，其中水(I)的含量占总质量的40-93％。一种[1]-[21]任一项所述的组合物的使用方法，包括在使用前用水稀释该组合物。如[22]中所述的使用方法，其中水的稀释倍数是组合物总质量的30-700倍。
发明详述本发明所用壳聚糖由下式(1)代表的几丁质水解脱乙酰基将乙酰氨基转化为氨基而制得，几丁质是天然的多糖。
乙酰氨基和氨基之间的比率随水解程度而变，氨基数目/(乙酰氨基数目+氨基数目)×100被称为脱乙酰度(用％表示，测量方法在后面详述)本发明中，可以使用具有60-90％脱乙酰度的壳聚糖。脱乙酰度优选65-80％。如果脱乙酰度太低，那么壳聚糖在水中的溶解度会降低从而造成它应用困难，而且应用效果也会变差，然而，如果脱乙酰度过高，则产品的效果也不稳定。
本发明所用壳聚糖可以通过水解、过滤和干燥天然存在的几丁质而制得。通过改变水解条件可以获得所需分子量的壳聚糖。本发明中所用的壳聚糖也可以从大日精化工业株式会社、烧津水产化学工业株式会社等买到。在本文中，除非另有说明，壳聚糖的分子量均为重均分子量。壳聚糖的分子量是用按照Ostwald粘度测定方法(测定方法在后面有详述)测得的粘度换算确定的。
在本发明中，使用了两种或更多种类的壳聚糖，也就是说使用了至少一种分子量是3,000-60,000的壳聚糖(A)和一种分子量是35,000-90,000的壳聚糖(B)。然而，要选择壳聚糖(A)和壳聚糖(B)使它们分子量不同。此时，壳聚糖(A)和(B)之间的分子量差异优选是10,000或10,000以上，更优选的是20,000或20,000以上。至于分子量范围，壳聚糖(A)的分子量优选是3,000-30,000，壳聚糖(B)的分子量优选是35,000-80,000。(A)更优选的分子量范围是5,000-20,000，(B)更优选的分子量范围是40,000-70,000。用包含两种或多种分子量的壳聚糖获得的植物抗病害效果比用只有一种分子量的壳聚糖的效果好。而且，针对植物病原体的抗菌谱也被扩宽，并获得了显著改善抗病害能力和促进植物生长的效果。
在本发明中，乳酸和/或丁二酸(C)与壳聚糖联合使用是必需的。需要乳酸和/或丁二酸溶解壳聚糖，因此其用量必需满足的条件是羧基等于或多于壳聚糖中氨基的摩尔数。过大量地使用乳酸和/或丁二酸并不可取，因为酸性增强会对植物产生不利的影响。
乳酸和/或丁二酸用量的优选范围是占组合物总质量的2-15％。具体而言，对于丁二酸和乳酸成分优选的用量范围是丁二酸的含量占组合物总质量的0.5-5％，乳酸的含量占组合物总质量的1-10％。而且，乳酸和丁二酸的总量优选是所用壳聚糖质量的0.4倍至不到1倍。这里所指的用量是指羧基处于游离态的酸的用量，当用碱中和酸时，中和部分的量要被除去。
在本发明中，可单独或者联合使用除丁二酸和乳酸之外的有机酸(D)，其目的在于提高植物抗病能力、促进植物生长，条件是酸不会对植物产生不利影响。对生物有生物活性的有机酸是有效的和优选的。这些有机羧酸的实例包括谷氨酸、水杨酸、花生四烯酸和吲哚乙酸。这些酸可以被单独使用或其中的两种或多种联合使用。
只要所用有机羧酸的量不会对植物产生不利影响，对有机羧酸的用量并没有特殊限制。然而，这里有机羧酸的用量理所当然的受它的活性的限制。例如，一种具有植物激素活性的化合物，当大量使用时，它就会产生反作用。通常，有机羧酸优选的用量占组合物总质量的0.0001-5％。
在本发明中，可以使用无机盐(E)。作为无机盐，优选硅酸盐、亚磷酸盐和磷酸盐，因为它们对植物特别有效。这些盐可以单独或联合使用。硅酸盐对草本植物特别有效，并且预计会显示出例如提高产量的活性。无机盐优选的用量占组合物总质量的1-5％。
在本发明中，可以使用(F)二甲基亚砜(DMSO)。DMSO可以促进本发明组合物中的组分如壳聚糖被植物吸收，同时能使它们的作用容易地表现出来。DMSO的用量不能影响植物生长但必须使上述的无机盐保持溶解状态。DMSO优选的用量是组合物总质量的3-15％，更优选地用量是组合物总质量的5-10％。
本发明中，可以使用醇(G)，它包含有1-8个碳原子的烷基，而且该烷基可以是分支的。该醇在抑制组合物起泡和维持组合物稳定方面非常有效。有4-6个碳原子的烷基醇是优选的，而异戊醇是特别优选的。醇优选的用量占组合物总质量的0.5-5％。
在本发明中，可以使用表面活性剂(H)。表面活性剂可以增加药剂如壳聚糖在植株表面的附着。只要它不会影响植物的生长，对表面活性剂的使用并没有特殊的限定，但优选使用那些可用于农业化学品的铺展的表面活性剂。非离子表面活性剂是更优选的，其中包括以下实例聚氧乙烯烷基苯基醚、聚氧乙烯烷基醚、聚亚烷基二醇烷基醚、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯树脂酸酯、聚氧乙烯己糖醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯和失水山梨糖醇脂肪酸酯。
表面活性剂(H)的优选用量是组合物总质量的0.5-3％。
在本发明的组合物中，其它的溶剂也可以被用来提高组合物的稳定性，只要这些溶剂对植物没有危害，但其余的成分基本上是水(I)。水用于将以上所述的各成分的量的总和补足100％。然而，水的具体用量取决于所用的成分，水的优选用量是40-93％。
在本发明中，从壳聚糖在水中溶解状态的稳定性和对植物的安全性来看，组合物的pH值是很重要的。通常情况下，用市售pH计测定的pH值优选为4.0-5.5，但只要使用了上述各成分并且它们的用量都分别在范围内，则通常不需要特别地调节pH。然而，在组合物的pH值显著偏离上述范围的情况下，例如当使用的水的pH显著地偏向酸性或碱性范围，当使用有强酸性的有机羧酸或当使用大量的酸(如乳酸、丁二酸)以促进壳聚糖溶解时，在碱性pH情况下，用乳酸或丁二酸调节pH；酸性pH情况下，用一种碱性物质如碳酸钠、氢氧化钠和氢氧化钾调节pH。
在本发明所述组合物的制备过程中，只要能获得均匀的水溶液，上述各种必需的成分可以以任意方式混合，不需考虑混合顺序等。然而，壳聚糖在中性水中不容易溶解，因此制备组合物时，优选先将乳酸和/或丁二酸溶解在水中(优选蒸馏水或净化的水)，在搅动过程中，加入壳聚糖并溶解，然后添加其它必需的成分，这些成分必要时可溶解在水等溶剂中。
实际上，用本发明的组合物处理植物体时，组合物必须用所需量的水稀释后才能用。此时，稀释倍数主要是依据植物种类而变化，但通常是总量的30-700倍，更优选地是总量的50-350倍。
脱乙酰度的测定方法脱乙酰度的测定方法在1995年6月1日由日本健康与营养食品协会财团出版的“Public Notice of Standards of Healthy Foods”中有记载。下面使用的方法与上面提到的参考资料中的方法是相似的。
壳聚糖的脱乙酰度可以由聚乙烯硫酸钾(PVSK)进行胶体滴定测定游离氨基得到。
按照干燥失重测定方法干燥后，精确地取1.0g壳聚糖样品放入一个体积200ml的烧瓶中。向其中加入0.5％的乙酸溶液，壳聚糖溶解后恰好使体积达到200ml。然后，准确取出1.0克的壳聚糖溶液样品放入滴定管中，再加入50ml水和0.2ml的甲苯胺蓝检测溶液(指示剂)，将溶液充分混合，所得溶液用聚乙烯硫酸钾溶液滴定。滴定终点是溶液从蓝色变为紫红色。这里的滴定度是Vml。
用同样的方法滴定未加壳聚糖样本的溶液。这里的滴定度是Bml。
聚乙烯硫酸钾溶液的当量浓度被精确地测定为约1/400N。它的浓度是[PVSK]。
壳聚糖中游离氨基的质量X(相当于葡糖胺残基的质量)和壳聚糖中结合的氨基的质量Y(相当于N-乙酰基葡糖胺残基的质量)是X＝壳聚糖中游离氨基的质量＝[PVSK]×161/1000×(V-B)，和Y＝壳聚糖中结合氨基的质量＝0.5×1/100-X
脱乙酰度根据下面的公式计算脱乙酰度(％)＝(X/161)/(X/161+Y/203)×100注161代表葡糖胺残基的当量分子量，203代表N-乙酰基葡糖胺残基的当量分子量。
壳聚糖分子量的测定方法用奥斯特瓦尔德(Ostwald)粘度计测定比粘度，通过下面表1中的换算表确定壳聚糖的分子量。
将50ml 4％的乙酸水溶液和50ml 0.6M/L的盐水加入到50mg壳聚糖样品中并溶解制得测定液。用Shibata生产的奥斯特瓦尔德(Ostwald)粘度计的毛细管，它的内径为0.5mm，测定从标线a到标线b所用的时间。该时间是t。
制备未溶解壳聚糖的溶液，用同样的方式测定从标线a到标线b所用的时间。该时间是t0。
t和t0分别测定三次，取平均值。
根据下式计算比粘度比粘度＝t/t0-1
表1壳聚糖比粘度和分子量之间的换算表
(*)当比粘度在以上数值范围内的情况下，分子量能被确定是由于认为分子量和粘度之间存在比例关系。
实施例组合物实施例1组分名称组分含量(质量百分比)(A)壳聚糖(分子量16,000， 3.5％脱乙酰度为85.1％)(B)壳聚糖(分子量40,000， 3.5％脱乙酰度为78.8％)(C)乳酸 0.7％丁二酸2.8％(D)水杨酸2.0％(E)磷酸二氢钠2.1％(F)二甲基亚砜7.0％(G)异戊醇0.7％(H)表面活性剂(*)0.7％(*)聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐单硬脂酸酯(I)水77.0％组合物实施例2组分名称 组分含量(质量百分比)(A)壳聚糖(分子量16,000， 3.5％脱乙酰度为85.1％)(B)壳聚糖(分子量40,000， 3.5％脱乙酰度为78.8％)(C)乳酸 4.0％丁二酸0.7％(D)花生四烯酸0.5％(F)二甲基亚砜7.0％(G)异戊醇0.7％
(H)表面活性剂(*) 0.7％(*)聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐单硬脂酸酯(I)水 79.4％组合物实施例3组分名称 组分含量(质量百分比)(A)壳聚糖(分子量16,000， 3.5％脱乙酰度为85.1％)(B)壳聚糖(分子量40,000， 3.5％脱乙酰度为78.8％)(C)乳酸2.8％丁二酸 2.5％(D)硅酸钠 1.4％(F)二甲基亚砜 7.0％(G)异戊醇 0.7％(H)表面活性剂(*) 0.7％(*)聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐单硬脂酸酯(I)水 77.9％组合物实施例4组分名称 组分含量(质量百分比)(A)壳聚糖(分子量10,000， 3.5％脱乙酰度为70％)(B)壳聚糖(分子量40,000， 3.5％脱乙酰度为70％)(C)乳酸6.2％丁二酸 1.5％(D)花生四烯酸 2.0％
(E)磷酸二氢钠2.1％(F)二甲基亚砜7.0％(G)异戊醇0.7％(H)表面活性剂(*)0.7％(*)聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐单硬脂酸酯(I)水72.8％组合物实施例5组分名称 组分含量(质量百分比)(A)壳聚糖(分子量10,000， 3.5％脱乙酰度为85.1％)(B)壳聚糖(分子量80,000， 3.5％脱乙酰度为78.8％)(C)乳酸 0.7％丁二酸2.8％(D)水杨酸2.0％(E)磷酸二氢钠2.1％(F)二甲基亚砜7.0％(G)异戊醇0.7％(H)表面活性剂(*)0.7％(*)聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐单硬脂酸酯(I)水77.0％组合物实施例6组分名称 组分含量(质量百分比)(A)壳聚糖(分子量50,000， 3.5％脱乙酰度为85.1％)(B)壳聚糖(分子量80,000， 3.5％脱乙酰度为78.8％)
(C)乳酸 0.7％丁二酸 2.8％(D)水杨酸 2.0％(E)磷酸二氢钠 2.1％(F)二甲基亚砜 7.0％(G)异戊醇 0.7％(H)表面活性剂(*) 0.7％(*)聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐单硬脂酸酯(I)水 77.0％对比组合物实施例1组分名称 组分含量(质量百分比)壳聚糖(分子量16,000， 3.5％脱乙酰度为85.1％)(C)乳酸 0.7％丁二酸 2.8％(D)水杨酸 2.0％(E)磷酸二氢钠 2.1％(F)二甲基亚砜 7.0％(G)异戊醇 0.7％(H)表面活性剂(*) 0.7％(*)聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐单硬脂酸酯(I)水 77.0％对比组合物实施例2组分名称 组分含量(质量百分比)壳聚糖(分子量40,000， 3.5％脱乙酰度为78.8％)
(C)乳酸0.7％丁二酸 2.8％(D)水杨酸 2.0％(E)磷酸二氢钠 2.1％(F)二甲基亚砜 7.0％(G)异戊醇 0.7％(H)表面活性剂(*) 0.7％(*)聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐单硬脂酸酯(I)水 77.0％对比组合物实施例3组分名称 组分含量(质量百分比)壳聚糖(分子量6,400， 2.7％脱乙酰度为85％)乙酸 5.4％水 91.9％对比组合物实施例4组分名称 组分含量(质量百分比)壳聚糖(分子量10,000， 7.0％脱乙酰度为85.1％)(C)乳酸0.7％丁二酸 2.8％(D)水杨酸 2.0％(E)磷酸二氢钠 2.1％(F)二甲基亚砜 7.0％(G)异戊醇 0.7％
(H)表面活性剂(*) 0.7％(*)聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐单硬脂酸酯(I)水 77.0％对比组合物实施例5组分名称 组分含量(质量百分比)壳聚糖(分子量50,000， 7.0％脱乙酰度为85.1％)(C)乳酸0.7％丁二酸 2.8％(D)水杨酸 2.0％(E)磷酸二氢钠 2.1％(F)二甲基亚砜 7.0％(G)异戊醇 0.7％(H)表面活性剂(*) 0.7％(*)聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐单硬脂酸酯(I)水 77.0％对比组合物实施例6组分名称 组分含量(质量百分比)壳聚糖(分子量80,000， 7.0％脱乙酰度为78.8％)(C)乳酸0.7％丁二酸 2.8％(D)水杨酸 2.0％(E)磷酸二氢钠 2.1％(F)二甲基亚砜 7.0％(G)异戊醇 0.7％
(H)表面活性剂(*) 0.7％(*)聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐单硬脂酸酯(I)水 77.0％实施例1将2-3叶期的黄瓜(品种TOKIWA HIKARI3号，类型P)种在罐中作为测试样品。组合物实施例1、对比组合物实施例1和对比组合物实施例2的组合物都分别用水稀释200倍，喷洒在黄瓜第一、二叶的前后叶表面，用量是45ml/3罐。
第二天，将含有灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的孢子悬液(最终的浓度是3×105/ml，DIFCO马铃薯葡萄糖液体培养基1.2％)喷洒在第1叶和第2叶的前后叶表面进行接种。
5天后，分别调查第2、3和4叶的受害面积百分比，从而确定病害发生水平。而且，与未处理区比较计算得出保护值。
3罐平均值的结果如下所用制剂 稀释倍数受害面积百分比 保护值组合物实施例1200倍 13.3％ 86.7％对比组合物实施例1200倍 33.3％ 66.7％对比组合物实施例2200倍 80.0％ 20.0％未处理区 100％ 0％实施例2将2-3叶期的黄瓜(品种TOKIWA HIKARI3号，类型P)种在罐中作为测试样品。组合物实施例1、对比组合物实施例3分别用自来水稀释50倍，并以50ml/2罐的用量喷洒在测试样品上。
第二天，喷洒灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的孢子悬液(2×106/ml)进行接种。然后，立刻将测试样品放入一个湿房间中放置3天，室内温度是20℃、相对湿度是100％。
分别调查第1和第2叶的受害面积百分比，从而确定病害发生水平。同样，与未处理区比较计算得出保护值。
6罐平均值的结果如下所用制剂 稀释倍数受害面积百分比 保护值组合物实施例150倍 23.5％ 74.1％对比组合物实施例350倍 61.7％ 32.1％未处理区90.8％0％实施例3针对灰葡萄孢(Botrytis cinerea)病害防治效果的田间试验在春季甘蓝菜上进行。在幼苗生长期间，用水将组合物实施例1稀释50倍，喷洒一次。移栽后，用水将组合物实施例1稀释200倍并喷洒两次。为了对比，使用常用的农药(在幼苗生长期间使用Jimandaisen和Benlate，移栽后使用Robural和Benlate)或组合物实施例1和农药联合使用测定效果。每次试验确定三个区域内100株植物中有病植株的数目。每三个区域的平均值如下所示。
所用制剂 稀释倍数病株的数目组合物实施例1 200倍5.3常用的农药 10.3组合物实施例1+常用农药 200倍2.7实施例4检测对水稻枯萎病的防治效果。
将水稻种(品种Koshihikari)用Benlate T hydrate 20进行湿包衣处理(干带壳重量的1％)、空气干燥、在15℃条件下浸泡在水中，浴比1∶2，浸泡6天，在30℃条件下发芽1天，然后在每个直径为9cm的塑料罐中播种4g。在播种后幼苗覆土前，浇灌稀释500倍的Danicol 1000溶液，浇灌比率是每个常规幼苗箱500ml。幼苗在30℃条件下贮存3天并因此开始发芽。开始发芽后，避免灌水过多，然后将幼苗移到可以控制条件的玻璃温室中直到试验结束。
将组合物实施例3稀释35或70倍制得试验液。在水稻生长期，也即水稻2叶期和3叶期，用小喷雾器分两次在整个植株上喷洒试验液，喷撒量是6ml/每罐。
在最后一次喷洒试验液两天后，将稻瘟霉(Pyricularia oryzae)的孢子悬浮液(2×105细胞/ml)主要喷在叶背面，用量是5.6ml/每罐。接种3天后，将幼苗贮存在湿润状态以加剧病害发生。
在最后一次喷洒试验液9天后，调查每罐中100个叶鞘内有无病害的情况和第2、3叶中病害的数目，根据获得的数值，计算病害百分率、病害总数和保护值。结果如下所示。
所用制剂 稀释倍数 病害百分率 病株总数 保护值组合物实施例335倍 25.0％ 50.0 41.0组合物实施例370倍 23.3％ 41.7 50.8未处理区 37.0％ 84.7 -没有明显观察到植物毒性。
实施例5用组合物实施例2进行实际田间试验，调查对马铃薯(Norin No.1)收获产量的影响。
将200ml组合物实施例2稀释35倍，根据用杀菌剂的常规处理，每3公亩进行表2中所示的处理。
收获时，挖1.65平方米(9个根)调查，确定作物的总重量(三部分的平均值)。结果如下。
所用制剂 稀释倍数总重量 每10公亩的产量组合物实施例2 35倍 8.5kg 5,100kg未处理区 7.2kg 4,320kg在生长过程中没有发现叶面上有特别明显的病害状况。
表2
(*)五月二日，进行种植，步行道宽度是75cm。实施例6用组合物实施例2进行实际田间试验，调查对马铃薯(May queen)收获产量的影响。
将组合物实施例4稀释300倍，在开花前每6天喷洒一次，开花后间隔10天喷洒两次。
收获时，挖1.65平方米(9个根)调查，确定作物的总重量(三部分的平均值)。结果如下。
所用制剂 稀释倍数总重量每10公亩的产量组合物实施例4300 10.4kg6,240kg未处理区 8.9kg 5,340kg
实施例7组合物实施例5、组合物实施例6、对比组合物实施例4、对比组合物实施例5或对比组合物实施例6用水稀释70倍的测试溶液，用手动喷雾器以45ml/3罐的用量喷洒在3叶期的黄瓜幼苗上(品种Hikari No.3，类型P，在塑料杯中)。
幼苗在空气中干燥48小时后，将含有在PDA介质上培养的灰葡萄孢(Botrytis cinerea)孢子悬浮液(最终浓度1×105/ml，DIFCO马铃薯葡萄糖培养基1.2％)喷洒在第1和2叶的前后叶表面，将幼苗在温度为20℃、相对湿度为100％的湿房间中放置3天。在室内空气干燥后，分别调查第1和2叶的受害(斑)面积百分比从而确定病害发生水平。通过测试溶液病害发生水平之间的比较可以计算保护值。
3罐的平均结果显示如下。
所用制剂稀释倍数 保护值组合物实施例5 70倍58.7％组合物实施例6 70倍57.8％对比组合物实施例4 70倍25.1％对比组合物实施例5 70倍26.1％对比组合物实施例6 70倍14.3％结果使用两种具有不同分子量的壳聚糖对植物产生了增强稳定性和高抗病力并改善生长的作用。
权利要求
1.一种用于提高植物抗病能力和促进植物生长的组合物，含有(A)分子量为3,000-60,000的壳聚糖，(B)分子量为35,000-90,000的壳聚糖(条件是壳聚糖A和B的分子量不同)和(C)乳酸和/或丁二酸。
2.如权利要求1中所述的组合物，其中壳聚糖(A)和(B)的脱乙酰度是60-90％(条件是(A)和(B)的脱乙酰度可以相同或者不同)。
3.如权利要求1中所述的组合物，其中壳聚糖(A)和壳聚糖(B)的含量比是1∶0.9-1.1。
4.如权利要求1中所述的组合物，其中壳聚糖(A)和(B)的总含量占组合物总质量的5-15％。
5.如权利要求1中所述的组合物，其中(C)乳酸和/或丁二酸的含量占组合物总质量的2-15％。
6.如权利要求1中所述的组合物，其中包含的丁二酸的含量占组合物总质量的0.5-5％，乳酸的含量占组合物总质量的1-10％，它们的总含量是壳聚糖含量的0.4-1.0倍。
7.如权利要求1中所述的组合物，还包含除乳酸和丁二酸之外的有机羧酸(D)。
8.如权利要求7中所述的组合物，其中有机羧酸(D)是至少一种选自下组的酸谷氨酸、水杨酸、花生四烯酸和吲哚乙酸。
9.如权利要求7或8中所述的组合物，其中有机羧酸(D)的含量占组合物总质量的0.0001-5％。
10.如权利要求1中所述的组合物，还包含无机盐(E)。
11.如权利要求10中所述的组合物，其中无机盐(E)是至少一种选自下组的盐硅酸盐、亚磷酸盐和磷酸盐。
12.如权利要求10或11所述的组合物，其中无机盐(E)的含量占组合物总质量的1-5％。
13.如权利要求1中所述的组合物，还包含占组合物总质量3-15％的二甲基亚砜(F)。
14.如权利要求1所述的组合物，还包含一种含有1-8个碳原子的烷基的醇(G)，其中的烷基可以是分支的。
15.如权利要求14所述的组合物，其中的醇(G)是异戊醇。
16.如权利要求14或15所述的组合物，其中醇(G)的含量占组合物总质量的0.5-5％。
17.如权利要求1中所述的组合物，还包含表面活性剂(H)。
18.如权利要求17中所述的组合物，其中表面活性剂(H)是至少一种选自下组的表面活性剂聚氧乙烯烷基苯基醚、聚氧乙烯烷基醚、聚亚烷基二醇烷基醚、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯树脂酸酯、聚氧乙烯己糖醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐酯肪酸酯和失水山梨糖醇脂肪酸酯。
19.如权利要求17或18中所述的组合物，其中表面活性剂(H)的含量占组合物总质量的0.5-3％。
20.如权利要求1中所述的组合物，还包含水(I)。
21.如权利要求20中所述的组合物，其中水(I)的含量占组合物总质量的40-93％。
22.一种使用权利要求1-8、10、11、13-15、17、18、20和21任一项所述的组合物的方法，包括在使用前将组合物用水稀释。
23.如权利要求22中所述的使用方法，其中水的稀释倍数是组合物总质量的30-700倍。
全文摘要
本发明提供一种用于提高植物抗病能力、促进植物生长的组合物，该组合物含有(A)分子量为3,000－60,000的壳聚糖，(B)分子量在35,000－90,000的壳聚糖(条件是壳聚糖A和B的分子量不同)和(C)乳酸和/或丁二酸。本发明含有两种不同分子量的壳聚糖的组合物应用于植物时，植物抗病能力的稳定性和有效性被提高，而且植物生长也被促进。
文档编号A01N43/16GK1642419SQ0380639
公开日2005年7月20日 申请日期2003年3月20日 优先权日2002年3月20日
发明者樱井长谷雄, 福家裕树, 安斋福实 申请人:昭和电工株式会社