专利名称：一种采用壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂防治果树根癌的方法
技术领域：
本发明涉及到应用新型生物农药壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂防治果树根癌的配方及其制备方法。
(二)、背景技术果树根癌又称冠瘿病、根头癌肿病，是由土壤根癌杆菌引起的一种世界性病害。它寄生范围广，可侵染93科331个属643个种的植物。它经伤口侵入植物细胞组织，引起染色体变异，使细胞分裂失控，形成根瘤而严重影响根部生长。根癌病主要发生在根颈部，也发生于侧根和支根，在嫁接处较为常见，症状表现为瘤大而硬，木质化。由于根部发生癌变，水份、养分流通受阻，根势日衰，叶薄、细瘦、色黄，严重时干枯死亡。目前，国内外学术界经大量研究，主流意见是果树一旦染上根癌则无法治愈。防治上强调以预防为主，即选用健康的苗木，栽培时尽量避免根系受伤。对于已经出现症状的植株，只能用先刮除肿瘤后再保护伤口的方法来减轻危害。在生物防治方面，澳大利亚学者Kerr1972年用放射土壤杆菌Agrobac terium Radioba Cter K84菌株对核果类果树根癌进行了生物防治，防效率90.5％～100％。之后，K84在世界上不少国家广泛应用推广。我国的研究者引进了K84进行研究，先后研发出根癌宁、抗根癌菌剂、WJ-K84-1等农杆菌素，均有不同程度的防治效果，但均无治愈报道。这是因为，生防菌株防治根癌的机理是以菌株抢占果树伤口位点，在其上定殖并产生农杆菌素，阻止病菌从伤口侵入，它的作用是预防而不是治疗，因此治疗效果较差。而且，这些生防菌株并不是对所有果树根癌都是有效的，它们只对侵染核果类苹果、梨、柿等含有胭脂碱Ti质粒的生物I型、生物II型根癌土壤杆菌具有防效，对含有章肉碱Ti质粒能引起葡萄根癌的生物III型根癌菌是无效的。即使K84等农杆菌素对生物I型、生物II型根癌土壤杆菌具有防效，但由于农杆菌素过于娇嫩，时间过长、过冷、过热，都会使它的防效大打折扣，甚至于失效。
(三)、发明内容本发明着重研究开发既能够有效预防、更能够治愈果树根癌的壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂，解决目前国内外生防药物、化学药物不能治愈根癌的世界性难题。
本明的技术方案是第一步按水、柠檬酸、氢氧化钠、维生素C、壳寡糖柠檬酸盐重量比100∶(10～15)∶(4.5～6)∶(2～2.5)∶(1～2)的比例，将柠檬酸、壳寡糖柠檬酸盐、维生素C、氢氧化钠依次倒入水中搅拌，溶解至透明，为A溶液。
第二步按水、碘化钾、碘、生物活性有机碘重量比100∶(0.5～1)∶(0.2～0.5)∶(0.1～0.3)的比例，将碘化钾、碘、生物活性有机碘置入水中，边搅拌边加热，加热40℃～70℃，溶解至透明，为B溶液。
第三步在搅拌状态中，将B溶液缓缓倒入A溶液中，混合均匀至透明，成为壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂。
本发明的有益效果是(1)、抑制细菌繁殖。根癌土壤杆菌呈革兰氐阴性反应，耐酸碱的范围为PH5.7～9.2。壳寡糖柠檬酸盐的C位氨基不但赋予了其抗菌性，而且壳寡糖这一带有正电荷的阳离子与微生物细胞壁的磷脂类等阴离子相互吸引，能够束缚微生物自由度，阻遏有害真菌繁殖。不仅如此，壳寡糖还可被微生物细胞吞噬，使微生物的DNA(去氧核糖核酸)向RNA(核糖核酸)转录，使蛋白质合成受阻而抑制病菌繁殖，表达出对真菌、细菌和病毒的抑灭。壳寡糖柠檬酸盐PH值＜5，它涂抹在根系伤口上，浇灌于果树根部土壤中，根癌土壤杆菌无法存活。(2)、诱导产生抵御病原物质的抗性蛋白---致病相关蛋白PR(pathogenesis-related proteins)。壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂所诱导的抗性蛋白主要为植物抗毒素、几丁质酶、壳聚糖酶和β-1、3-葡聚糖酶等。植物抗毒素是一种低分子质量化合物，具有明显的抗微生物活性，对植物有保护作用。几丁质和葡聚糖是真菌细胞壁的主要组分。几丁质酶与β-1、3-葡聚糖酶的共同作用，可分泌到细胞壁间，集聚在细胞内的液泡中，瓦解真菌细胞壁。壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂所诱导的抗性蛋白几丁质酶、壳聚糖酶和β-1、3-葡聚糖酶彼此之间还有协同效应，因此抗菌作用更为明显。(3)、它能够诱导木质素的形成和酚类代谢。木质素是由多种苯基类丙烷醇缩合而成的多聚物，是植物维管组织次生细胞壁的主要组分，决定细胞壁的强度和刚性。壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂可诱导植物在病菌侵染点周围产生木质素，形成一个物理屏障，从而阻止和延迟病菌的生长和扩散，增强植物的抗病力。同时，它能促进植物的酚类代谢，在植物的病菌侵染点处，杀菌性物质酚类(单宁、绿原酸等)物质大量积累。植物体内酚类的增多，不但自身可以抗病，而且还可促使病原侵染处木质化，增强植物的抗病能力。壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂诱导的细胞中酚类组成会迅速变化，苯丙烷、香豆酸和绿原酸等都明显增加。大量的田间试验证明了壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂的显著效果。2003年以来，我们在大连市甘井子区5000亩农田应用壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂示范工程中，对樱桃、苹果、葡萄等果树根癌进行了中试，当年防效率100％，治愈率99％以上，二次感染率和三年复发率均为零，植株开张度、座果率、果实含糖率、商品形状均明显优于未经处理的对照组，增产15％以上。2005年7月22日，大连市科技局对壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂进行了科技成果鉴定，鉴定意见这一科技成果居国际领先水平，应用于生产，将具有显著的经济效益和社会效益。2005年，该技术获得大连市科技进步三等奖、大连市甘井子区科技进步三等奖。
具体实施方式
实施例1本实施例的技术方案是第一步按水、柠檬酸、氢氧化钠、维生素C、壳寡糖柠檬酸盐重量比100∶10∶5∶2∶1的比例，将柠檬酸、壳寡糖柠檬酸盐、维生素C、氢氧化钠依次倒入水中搅拌，溶解至透明，为A溶液。
第二步按水、碘化钾、碘、生物活性有机碘重量比100∶0.5∶0.2∶0.1的比例，将碘化钾、碘、生物活性有机碘依次倒入水中，边搅拌，边加热，加热至70℃，溶解至透明，为B溶液。
第三步在搅拌状态下，将B溶液缓缓倒入A溶液中，混合均匀至透明，成为壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂。
田间对比试验2003年，我们在大连市甘井子区辛寨子镇前革果树精品园选择了16株患有根癌的樱桃树幼树，8株用壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂进行处理，8株不处理。对试验组幼树，我们先散开树盘表土，露出病根，将瘤状病部用快刀剔除干净，然后用壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂涂抹伤口。约20天，樱树树起死回生，长势旺盛。2004年春我们回访时，试验组樱桃树全部生长良好，有的树还挂了果。而未经处理的对照组，当年就陆续死亡，没死长势衰弱。
实施例2本实施例的技术方案是第一步按水、柠檬酸、氢氧化钠、维生素C、壳寡糖柠檬酸盐重量比100∶15∶∶5∶2.5∶2的比例，将柠檬酸、壳寡糖柠檬酸盐、维生素C、氢氧化钠依次倒入水中搅拌，溶解至透明，为A溶液。
第二步按水、碘化钾、碘、生物活性有机碘重量比100∶0.5∶0.2∶0.1的比例，将碘化钾、碘、生物活性有机碘依次置入水中，边搅拌边加热，加热至70℃，溶解至透明，为B溶液。
第三步在搅拌状态中，将B溶液缓缓倒入A溶液中，混合均匀至透明，成为壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂。
田间对比试验2004年，我们选择一片根癌病感染率30％的葡萄园，分成两个小区，每小区666m2，对试验组的病树，均先用快刀剔净瘤状病部，涂抹壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂，处理后的病树仅用半个月就恢复了元气，治愈率100％，当年增产高达40％。对照组未经任何处理，当年死树率5％，减产15％。
实施例3本实施例的技术方案为第一步按水、柠檬酸、氢氧化钠、维生素C、壳寡糖柠檬酸盐重量比100∶10∶4.5∶2∶1的比例，将柠檬酸、壳寡糖柠檬酸盐、维生素C、氢氧化钠依次倒入水中搅拌，溶解至透明，为A溶液。
第二步按水、碘化钾、碘、生物活性有机碘重量比100∶0.5∶0.2∶0.1的比例，将碘化钾、碘、生物活性有机碘依次置入水中，边搅拌，边加热，加热至70℃，溶解至透明，为B溶液。
第三步在搅拌状态中，将B溶液缓缓倒入A溶液中，混合均匀至透明，成为壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂。
田间对比试验2004年春，我们选择即将定植苹果树苗木的园区，分成试验组和对照组两个小区，每小区666m2，均定植80株苗木。对试验组的苗木，定植前先集中在壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂溶液中浸根6小时，然后定植。对照组的苗木，均用清水浸根6小时。定植后，试验组迅速返青，苗齐苗壮，秋后检查树根，试验组抑瘤率100％，对照组根癌感病率6％。
权利要求
1.一种采用壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂防治果树根癌的方法，其特征是第一步按水、柠檬酸、氢氧化钠、维生素C、壳寡糖柠檬酸盐重量比100∶(10～15)∶(4.5～6)∶(2～2.5)∶(1～2)的比例，将柠檬酸、壳寡糖柠檬酸盐、维生素C、氢氧化钠依次倒入水中搅拌，溶解至透明，为A溶液。第二步按水、碘化钾、碘、生物活性有机碘重量比100∶(0.5～1)∶(0.2～0.5)∶(0.1～0.3)的比例，将碘置入水中，边搅拌，边加热，加热40℃～70℃，溶解至透明，为B溶液。第三步在搅拌状态中，将B溶液缓缓倒入A溶液中，混合均匀至透明，成为壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂。
2.根据权利要求1所述的一种采用壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂防治果树根癌的方法，其特征是方案为第一步按水、柠檬酸、氢氧化钠、维生素C、壳寡糖柠檬酸盐重量比100∶10∶4.5∶2∶1的比例，将柠檬酸、壳寡糖柠檬酸盐、维生素C、氢氧化钠依次倒入水中搅拌，溶解至透明，为A溶液。第二步按水、碘化钾、碘、生物活性有机碘重量比100∶0.5∶0.2∶0.1的比例，将碘化钾倒入水中，边搅拌，边加热，加热至70℃，溶解至透明，为B溶液。第三步在搅拌状态下，将B溶液缓缓倒入A溶液中，混合均匀至透明，成为壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂。
3.如权利要求1所述的一种采用壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂防治果树根癌的方法，其特征是含有柠檬酸、壳寡糖柠檬酸盐、维生素C、碘(无机碘和生物活性有机碘)，PH值＜5。
全文摘要
一种采用壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂防治果树根癌的方法，涉及以新型生物农药防治果树根癌的配方及其制备方法。按水、柠檬酸、维生素C、壳寡糖柠檬酸盐重量比100∶(10～15)∶(2～2.5)∶(1～2)的比例制成A溶液。按水、碘化钾、碘、生物活性有机碘重量比100∶(0.5～1)∶(0.2～0.5)∶(0.1～0.3)的比例制成B溶液。将B溶液加入到A溶液中，制成壳寡糖柠檬酸盐愈伤剂，在果树定植前浸根或者在刮除根癌病瘤时涂刷在伤口上，可有效抑制根癌土壤杆菌，诱导果树产生抵御病原物质的抗性蛋白、木质素，促进酚类物质代谢，具有治愈果树根癌的显著疗效。
文档编号A01N37/02GK1846502SQ20061007490
公开日2006年10月18日 申请日期2006年4月3日 优先权日2006年4月3日
发明者刘福京 申请人:刘福京