专利名称：：一种消毒抗冻剂及其制备方法一种消毒抗冻剂及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及到一种消毒抗冻剂及其制备方法。在动物检疫中人们通常使用化学消毒剂进行一般性的消毒处理，而含氯消毒剂由于其价格低廉、使用方便、杀菌效果显著被广泛应用。但是由于我国地域广阔，在纬度较高地区尤其是东北和西北的口岸冬季气温很低，消毒剂经常会被冻结而导致丧失消毒效果。甲醇和乙二醇被作为抗冻剂广泛应用，目前通用的抗冻剂多以乙二醇为主要成分，通常与水按hi的比例混合使用时，将使冷却液的冰点降至-36.7°C。目前检疫中常使用加热处理防止消毒剂冻结。但一方面会加剧能源消耗，不利于环保，另一方面加热常导致含氯消毒剂的降解和对金属腐蚀性的增加。本发明的目的在于提供一种节能环保、使用方便、低腐蚀性、高抗冻性、杀菌效果显著的一种消毒抗冻剂及其制备方法，克服现有技术的缺点。本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的本发明消毒抗冻剂，包括抗冻剂和含氯消毒剂，体积比为(2-4):(8-12)，所述抗冻剂包括以下体积份组分浓度为99.9%的甲醇2-9和浓度为99.9%的乙二醇1-8;所述含氯消毒剂为漂白粉、次氯酸钠溶液、复方次氯酸钠消毒剂或市售84消毒剂。本发明消毒抗冻剂，包括抗冻剂和含氯消毒剂，体积比为3:10，所述抗冻剂包括以下体积份组分浓度为99.9%的甲醇3-8和浓度为99.9%的乙二醇2-7。本发明消毒抗冻剂的制备方法a.先按体积份称取原料；b,稀释含氯消毒剂至浓度为(15-30〉％的水溶液；C.按比例混合甲醇，乙二醇和含氯消毒剂，均匀混合后即得；d,步骤c还可以进一步制作成喷雾或浓缩液。本发明所使用的含氯消毒剂为漂白粉、次氯酸钠溶液、复方次氯酸钠消毒剂、84消毒剂、及以现有的有效氯杀菌的消毒剂。次氯酸钠溶液、复方次氯酸钠消毒剂、84消毒剂的主要成分都是次氯酸钠。漂白粉主要成分是次氯酸钙。抗冻剂又称阻冻剂，是一类加入到其他液体(一般为水)中以降低其冰点、提高抗冻能力的物质。它也具有溶解冰晶和阻止冰晶长大的作用。主要用于内燃机冷冻系统，还用于空调系统、太阳能系统、雪溶系统和冷冻干燥等方面。优良的抗冻剂的特点应该廉价、化学稳定性好、无腐蚀性、不易燃、低毒、低泡沬、无臭且粘度较小。一般使用的抗冻剂有甲醇、乙醇、乙二醇、水溶性酰胺和氯化钙、盐水等。分别检测了甲醇、乙醇、乙二醇、丙二醇和丙三醇在-25度的抗冻能力。发现甲醇和乙二醇在分别添加到终体积37.5%后可以抗-25度的低温，而乙醇、丙二醇、丙三醇的抗冻能力较差。为了进一步降低腐蚀性，及降低成本，进行了甲醇与乙二醇混合后使用的抗冻能力，发现甲醇和乙二醇在一定比例的配合使用下，只需占总体积(15-30)%就可以抗-25度低温(4小时以上)。在动物检疫中加入消毒抗冻剂添，发现也可以抗-30度的低温，并且未出现明显沉降现象。本发明具有价格低廉、使用方便、低腐蚀性、高抗冻性、杀菌效果显著等特点。为证明上述优点，本发明消毒抗冻剂组合物进行了以下实施例1浓缩液的抗冻杀菌效果验证，抗冻杀菌效果比较明显。试验过程如下1.消毒抗冻剂中有效氯含量。1.l有效氯含量测定根据卫生部2002年版消毒技术规范进行，略有改动。取lml待测消毒剂、1ml2mol/L硫酸、1ml10g/L碘化钾溶液于10m]碘量瓶中，摇匀后置暗处5min，用0.1moi/L硫代硫酸钠滴定液滴定，待溶液呈淡黄色时加入5g/L淀粉溶液几滴，继续滴定至蓝色消失。按下面公式计算有效氯含量<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中/为有效氯含量，g/L;c为硫代硫酸钠滴定液浓度，niol/L;Vst为滴定用去硫代硫酸钠滴定液体积，ml;V为碘量瓶中含液体消毒剂体积，ml。1.2有效氯含量是衡量含氯消毒剂杀菌能力的重要指标。我们对消毒抗冻剂有效氯含量进行了检测(表1)。与普通含氯消毒剂相比本发明的有效氯含量略有下降，但变化不大。据此，我们推测本发明的杀菌效果与普通含氯消毒剂相比不会显著降低。表l:有效氯含量测定结果有效氯含消毒剂消毒抗冻剂量(g/L〉2.31±0.032.29±0.01所有数据均为3次独立实验的平均结果。2.中和剂测定实验2.1中和剂测定实验根据卫生部2002年版消毒技术规范，设计5组，按照悬液杀菌实验进行。用于处理大肠杆菌的消毒剂1:25稀释使用，有效氯含量为0.092g/L;用于处理金黄色葡萄球菌的消毒剂l:5稀释使用，有效氯含量为0.46g/L;处理时间5min。其中"菌+消毒剂"组仅有少量菌生长；"菌+消毒剂+中和剂"组菌数较第一组多，但远少于后几组；"菌+中和剂"、"菌+(消毒剂+中和剂)"和"菌+水"三组菌数基本一致。2.2中和剂的鉴定为了检测消毒剂的杀菌效果，我们首先对反应所需的中和剂进行了鉴定。通过对消毒剂、中和剂、中和产物和水处理后的菌落进行了计数(表2)。鉴定结果表明，使用含5g/L硫代硫酸钠和0.5g/L吐温一80的.PBS作为中和剂，作用5min，可以有效中和消毒剂对大肠杆菌和金黄色葡萄球.菌的残留作用；并且中和剂和中和产物对受试微生物无毒性，符合规定要求。表2:中和剂的鉴定<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>用于处理大肠杆菌的消毒剂1:25稀释使用，有效氯含量为0.092g/L;用于处理金黄色葡萄球菌的消毒剂1:5稀释使用，有效氯含量为0.46g/L;处理时间5min,结果为3次独立实验的平均值。3.本发明消毒抗冻剂的杀菌效果。3.1悬液法定量杀菌实验[2一3]菌株.'金黄色葡萄球菌(&a/^yfo"ca^ATCC6538;大肠杆菌(Esc/im'c/w'flcoZi)8099;购自中科院微生物所。有机干扰物称取15g牛血清白蛋白(BSA)溶于水中，定容至500ml，0.22pm无菌滤膜过滤，保存于4"C冰箱。根据卫生部2002年版消毒技术规范进行，略有改动。取活化6代的菌株于3mlTSA培养基中37。C培养过夜；1:100扩大培养至OD6Q。=0.5;取0.5ml菌液与等体积有机干扰物混匀，为菌悬液。取60^菌悬液加入240^消毒液中，室温混匀并计时；取20^混合液加入180^中和液中5min终止反应；取50pl涂布TSB培养基，37。C培养过夜并进行菌落计数。检测-25r条件下的杀菌效果时，Wp菌悬液和40pl消毒液事先于4。C预冷，冰上混匀后放入-25T:低温冰箱内反应并计时；到预定时间加入450pl中和液5min终止反应；取50^涂布TSB培养基，37。C培养过夜并进行菌落计数。3.2为了检测消毒抗冻剂的杀菌效果，我们使用了实施例1消毒抗冻剂在室温和-25r下使用普通含氯消毒剂和消毒抗冻剂迸行了悬液杀菌实验。在室温条件下，水处理不能影响菌的生长，水处理后大肠杆菌的菌落数量维持在1.9x107cfu/ml，金黄色葡萄球菌数量维持在3.0x107cfu/ml。使用1:25稀释的消毒剂处理大肠杆菌约8.5min,死亡率可以达到99.99%，处理K)min，死亡率可以达到99.99999%;用消毒抗冻剂处理大肠杆菌8min，死亡率就可以达到99.99%，处理10min，死亡率可以达到99.99999%;使用1:5稀释的消毒剂处理金黄色葡萄球菌约9rain，死亡率可以达到99.99%,处理10min，死亡率可以达到99.99999%;用消毒抗冻剂处理金黄色葡萄球菌约9min，死亡率就可以达到99.99%，处理10fflin，死亡率可以达到99.99999%;我们的结果表明，消毒抗冻剂在室温条件下的杀菌效果比普通消毒剂的效果更好。表3:室温下抗冻剂对消毒剂杀灭大肠杆菌的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>数值为大肠杆菌菌落数的对数值。处理大肠杆菌的消毒剂为1-25稀释。所有数据均为3次独立实验的平均值。表4:室温下抗冻剂对消毒剂杀灭金黄色葡萄球菌的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>数值为金黄色葡萄球菌菌落数的对数值。处理金黄色葡萄球菌的消毒剂为1:5稀释。所有数据均为3次独立实验的平均值。在-25'C条件下，水处理对菌落数量没有影响；由于被冻结，普通消毒剂处理也对菌落数量没有明显影响。用消毒抗冻剂的4:25稀释的消毒剂处理大肠杆菌约8.5min，死亡率就可以达到99.99%，处理10min，死亡率可以达到99.99999%;用消毒抗冻剂的4:5稀释的消毒剂处理金黄色葡萄球菌约8.5min，死亡率就可以达到99.99%，处理10min，死亡率可以达到99.99999%;试验表明，添加实施例1消毒抗冻剂的可以在低温条件下保持杀菌效果；同时，我们的结果表明4倍于常温剂量的消毒剂可以有效的在低温下进行消毒。这个剂量可以为实际的消毒工作提供参考。表5:低温下抗冻剂对消毒剂杀灭大肠杆菌的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>数值为金黄色葡萄球菌菌落数的对数值。处理金黄色葡萄球菌的消毒剂为4:5稀释。所有数据均为3次独立实验的平均值。试验表明，本发明消毒抗冻剂相较于普通不消毒剂不仅不会降低反而会提高杀菌能力。这可能与消毒抗冻剂的成分有关。消毒抗冻剂中包含大量有机物，对细菌存在一定毒性，从而增强了它的杀菌效果。我们检测水和消毒抗冻剂处理5、10和15分钟后的两种菌的菌落数(表7和8)。发现消毒抗冻剂有一定抑菌作用，且对大肠杆菌的抑制效果更强。这些都与我们上面的抑菌实验一致。表7:抗冻剂对大肠杆菌的影响_不同处理时间(min)051015菌+水7.277.267.277.25—菌+消毒抗冻剂的水7.277.247.227.20~数值为大肠杆菌菌落数的对数值。所有数据均为3次独立实验的平均值。表8:抗冻剂对金黄色葡萄球菌的影响不同处理时间(min)051015菌+水7.497.477.497.47—菌+消毒抗冻剂的水7.497.457.487.46~~数值为金黄色葡萄球菌菌落数的对数值。所有数据均为3次独立实验的平均值。综上所述，本发明消毒抗冻剂可以在低温下使用，具有良好的杀菌效果，具有广泛的应用前景。具体实施方式实施例l喷雾原料(rd):抗冻剂和含氯消毒剂体积比为2:8;所述抗冻剂包括浓度为99.9%的甲醇20、浓度为99.9%的乙二醇10;含氯消毒剂为漂白粉；制备方法如下a.先按体积份称取原料；b.稀释含氯消毒剂至浓度为15%的水溶液；c.按权比例混合甲醇，乙二醇和含氯消毒剂，均匀混合后即得。d.步骤c还可以进一步制作成喷雾实施例2浓縮液原料(ml):抗冻剂和含氯消毒剂体积比为1:3;所述抗冻剂包括浓度为,99.9%的甲醇90、浓度为99.9%的乙二醇80;含氯消毒剂为市售84消毒液；制备方法如下-a.先按体积份称取原料；b.稀释含氯消毒剂至浓度为30%的水溶液；C.按权比例混合甲醇，乙二醇和含氯消毒剂，均匀混合后即得；d.步骤c还可以进一步制作成浓縮液。实施例3原料(ml):抗冻剂和含氯消毒剂体积比为3:10;所述抗冻剂包括浓度为99.9%的甲醇30、浓度为99.9%的乙二醇20;含氯消毒剂为次氯酸钠溶液；制备方法如下a.先按体积份称取原料；b.稀释含氯消毒剂至浓度为15%的水溶液；c.按权比例混合甲醇，乙二醇和含氯消毒剂，均匀混合后即得。d.步骤c还可以进一步制作成浓缩液实施例4原料(ml):抗冻剂和含氯消毒剂体积比为1:3;所述抗冻剂包括浓度为99.9%的甲醇80、浓度为99.9%的乙二醇70;含氯消毒剂为复方次氯酸钠消毒剂制备步骤同实施例l实施例5原料(ml):抗冻剂和含氯消毒剂体积比为2:8;所述抗冻剂包括浓度为99.9%的甲醇55、浓度为99.9%的乙二醇45;含氯消毒剂为次氯酸钠溶液；制备步骤同实施例2权利要求1、一种消毒抗冻剂，包括抗冻剂和含氯消毒剂，体积比为(2-4)∶(8-12)，所述抗冻剂包括以下体积份组分浓度为99.9％的甲醇2-9和浓度为99.9％的乙二醇1-8，所述含氯消毒剂为漂白粉、次氯酸钠溶液、复方次氯酸钠消毒剂或84消毒剂。2、根据权利要求1的消毒抗冻剂，所述抗冻剂和含氯消毒剂，体积比为3:10,所述抗冻剂包括以下体积份组分浓度为99.9%的甲醇3-8和浓度为99.9%的乙二醇2-7。3、根据权利要求i或2所述的消毒抗冻剂为喷雾或浓缩液。4、权利要求1-2之一的消毒抗冻剂的制备方法，包括以下步骤-a.先按体积份称取权利要求1或2之一所述甲醇和乙二醇；b.稀释含氯消毒剂至浓度为05-30)%的水溶液；c.按权利要求1或2中比例混合甲醇，乙二醇和含氯消毒剂，均匀混合后即得；d.步骤c还可以迸一步制作成喷雾或浓缩液。全文摘要本发明涉及到一种消毒抗冻剂，包括抗冻剂和含氯消毒剂，体积比为(2-4)∶(8-12)，所述抗冻剂包括以下体积份组分浓度为99.9％的甲醇2-9和浓度为99.9％的乙二醇1-8；所述含氯消毒剂为漂白粉、次氯酸钠溶液、复方次氯酸钠消毒剂或84消毒剂。按比例均匀混合甲醇、乙二醇和含氯消毒剂即得本发明消毒抗冻剂。本发明具有节能环保、使用方便、低腐蚀性、高抗冻性、杀菌效果显著等特点。文档编号A01N25/02GK101233845SQ20081000816公开日2008年8月6日申请日期2008年2月14日优先权日2008年2月14日发明者波刘,涛刘,张广平,亮徐,王跃进,詹国平申请人:中国检验检疫科学研究院检测技术与装备研究所