专利名称：一种器官保存液的制作方法
技术领域：
本发明涉及器官移植技术中保存器官的制剂，即一种(KYL)器官保存液。
背景技术：
随着器官移植技术的飞速发展，对器官保存液的要求也越来越高。从单器官保存液至多器官保存液，从单纯保存发展为集保存与治疗为一体。Belzer[1]等将成功的器官保存液应该满足的条件总结为以下六点1、减少因低温保存导致的细胞水肿；2、防止细胞的酸化作用；3、防止灌洗保存过程中的细胞间隙膨胀；4、防止或减轻再灌注损伤；5、提供再生高能磷酸化合成的底物；6、保持细胞内环境稳定。
目前，国内外公认的器官保存液有美国设计的UW液和欧洲设计的HTK液。UW液是由Belter学者在威斯康星大学设计的一种新型器官保存液，并已证实用其保存的肾、胰、肝、心等临床应用效果良好。乳糖醛酸、羟乙基淀粉、25mol/L磷酸缓冲液、谷胱甘肽和腺苷是UW液中的主要成分。另外UW液中还有一些添加剂，如青霉素、复方磺胺增效剂、地塞米松、胰岛素等。总之UW液明显延长了供体器官冷保存时间(肾72小时，肝72小时，肺30小时，心脏24小时)，使保存液进入一个新时期，国际、国内已广泛应用。但它仍有不足之处，如1、含有高分子量羟乙基淀粉、高粘滞度，导致肝窦的灌注不充分，局部循环紊乱，并因此影响移植后肝脏功能[2]；2、高钾不符合生理；3、引起较高的缺血型胆道损伤发生率[3]；4、价格昂贵限制了它的广泛应用，尤其是对于我国现有的经济水平。HTK与UW液一样为较理想的器官保存液。但Mangus等[4]报道保存时间超过10小时，与UW液相比原发移植物无功能的发生率会大幅度上升。Moray等[5]报道，HTK液和UW液在活体器官移植物的灌注上，有着相同的效果和安全性，但HTK液能节省费用，其最大的优点在于它的低粘滞性[6]，可改善保存器官的微循环，提高组织氧化等，HTK液对器官的保存主要体现在受时间限制方面。
参考文献 [1]Belzer FD，southward TH.Principles of solid organ preservation by coldstorage[T].Transplantation，1988，45(4)673-676 [2]Van der Plaats A，′t Hart NA，Morariu AM，Verkerke GJ，et al.Effect of university of Wisconsinorgan-preservation solution on haemorhealogy.Transplant Int.2004，17227-233 [3]Li S，Stratta RJ，Langnas AN，et al.Diffuse biliary tract injury after orthotopic liver transplanstation.tm JSurg 1992164536-540 [4]Momyus RS，Tector AJ，Auarwal A，et al.Comparison of histidine-tryptophan-ketoglutarate solution(HTK)and University of Wisconsin solution in adult liver transplantation，Liver Transpl 2006，226-230 [5]Moray G，Seumis S，Karakayali FY，et al.Comparison of histidine-tryptophan-ketoglutarate and Wisconsinin living-donor liver transplantation.Transplant Proc 2006，383572-3575 [6]Pokorng H，Rasoul-Rockenschanb S，Langer F，et al.Histidine-tryptophan-ketoglutarate Solution for organpreservation in human liver transplantation a prospective multi-centre observation study.Transplant，2004，17256-260
发明内容
本发明的目的是克服目前器官保存液高粘滞度、高钾、价格昂贵和保存时间受限等方面的不足，提供一种器官保存液，该保存液不仅在保存效果方面与UW液相当，在对肝细胞功能及肝脏微循环，肝窦内皮细胞的保护作用上，比UW液略显优势，而且配制简易，价格便宜，更适合我国国情。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是对UW液成分进行全面分析，1、去除羟乙基淀粉，用蔗糖代替棉子糖，即以蔗糖作为保存液中的主要非通透性成份，来抑制细胞水肿，既减少了液体中的非通透性成份，又避免了细胞水肿。另外由于其低粘滞性，有利于器官原位灌注。2、添加了价格低廉对器官循环及细胞有保护作用的K(丹参)、Y(三七)、L(甘氨酸)。3、加入KH2PO4-Na2HPO4和药物L-NaOH两组缓冲对，缓冲能力强大。4、改变UW液的高K+低Na+组成，替换成高Na+低K+更接近生理。能有效避免再灌时由于对供体的冲洗不彻底，大量钾离子进入循环所导致的心跳骤停。5、添加了自选配方外源性三磷酸腺苷及MgSO4，通过ATP-Mg2+为细胞提供能量。6、去除UW液中青霉素、复方磺胺增效剂、地塞米松、胰岛素等一些不必要的添加剂，降低配制成本。7、添加乌斯他丁作为细胞膜稳定剂。8、添加抗氧化还原剂还原性谷胱苷肽，可保护肝脏内皮细胞免遭毒性损害，间接抑制了炎性细胞因子的释放及中性粒细胞的浸润能力，对缺血再灌注肝脏起到积极的保护作用。
具体配方如下 器官保存液组成成分
本器官保存液配制方法按照上述配方将药物用电子天平精确称量，用适量蒸馏水(600-700ml)完全溶解后，加蒸馏水至足量(1000ml)，测定PH值、渗透压、离子浓度。用真空过滤器(0.22μm)过滤，抽取样本做细菌培养，将液体装入三升袋，置4℃冰箱保存备用。所得液体呈浅棕色、半透明、无浑浊、无沉淀及絮状物。上述操作过程均在无菌配液室完成，所用器具均经过无菌处理。
本发明的有益效果是配制简便，保存效果与UW液相当，在对肝细胞功能及肝脏微循环，肝窦内皮细胞的保护作用上，比UW液效果要好，价格便宜。
具体实施例方式 实施例1 原料配方如下
配制方法按照上述配方将药物用电子天平精确称量，用适量蒸馏水(600-700ml)完全溶解后，加蒸馏水至足量1000ml，测定pH值(为7.40±0.05)、渗透压(＝340±5mOsm/L)、离子浓度(按照添加配方重量除以水的重量计算得出离子浓度)。用真空过滤器(0.22μm)过滤，抽取样本做细菌培养，将液体装入三升袋(三升输液袋，能容纳三升液体。主要材质为聚丙烯[PP]聚乙烯[PE]，是目前最安全的输液包装材料之一，不含任何增塑剂，包材与药液接触无任何反应，无吸附现象，无玻璃瓶的析碱现象，是一种优质的材质。)，置4℃冰箱保存。所得液体呈浅棕色、半透明、无浑浊、无沉淀及絮状物。上述操作过程均在无菌配液室完成，所用器具均经过无菌处理。
实施例2 原料配方如下
配制方法与实施例1相同。
权利要求
1、一种器官保存液，其特征在于由以下重量配比的原料配制而得
以上原料用适量蒸馏水完全溶解后，加蒸馏水至足量即可。
全文摘要
本发明是一种(KYL)器官保存液。由以下重量配比的原料配制而得(用量g/L)蔗糖40-45，还原性谷胱甘肽1-3，三磷酸腺苷3-4，乌斯他丁0.12-0.18，硫酸镁0.6-0.8，氢氧化钠0.5-0.8，磷酸二氢钾2-3，磷酸氢二钠2-4，丹参0.6-1，三七0.6-0.9，甘氨酸10-12。本发明的有益效果是配制简便，保存效果与UW液相当，在对肝细胞功能及肝脏微循环，肝窦内皮细胞的保护作用上，比UW液效果要好，价格便宜。
文档编号A01N1/02GK101491238SQ200910094158
公开日2009年7月29日 申请日期2009年3月6日 优先权日2009年3月6日
发明者立 李 申请人:立 李