专利名称：一种羊肚菌栽培种培养基及其制备方法
技术领域：
本发明属于菌类作物栽培技术领域，涉及一种羊肚菌栽培种培养基及其制备方法
背景技术：
羊肚菌(Morehellaesculenta(L. )Pers)隶属于子囊菌亚门(Ascomycoti na)、盘菌纲(Discomycetes)、盘菌目(Pezizales)、羊肚菌科(Morchellaceae)、羊肚菌属(Morehella),因其子实体形态酷似羊肚而得名。羊肚菌味道鲜美，含有丰富的谷氨酸、赖氨酸、天冬氨酸，是世界性著名珍稀食用菌，拥有“ 食用菌皇后”之美誉。此外，羊肚菌还具有显著的药用价值，据《本草纲目》记载羊肚菌甘寒无毒，益肠胃，化痰理气。现代医学研究表明，羊肚菌含有多糖、酶类、吡喃酮抗生素、脂肪酸类等多种化合物，对降血脂、调节机体免疫力、抗疲劳、保肝、抗病毒、抑制肿瘤、减轻放化疗引起的毒副作用等方面具有较为显著的功效。羊肚菌作为一种珍稀的食、药用真菌，其人工栽培技术的突破一直是国内外菌物学界、微生物学界研究的热点和难点，目前已积累了大量的关于羊肚菌栽培的研究资料和数据。大量的试验数据使得越来越多的研究者认为菌核是羊肚菌子实体发生和分化的基础，因此如何培养出发育和分化能力强的菌核成为了突破羊肚菌人工栽培技术的关键技术。
发明内容
本发明解决的问题在于提供一种羊肚菌栽培种培养基及其制备方法，该方法制备的羊肚菌栽培种具有菌丝健壮、浓密、长速均匀、气生菌丝发达、菌丝扭结能力强等优良性状。本发明是通过以下技术方案来实现—种羊肚菌栽培种培养基，以充分吸水的木屑与棉籽壳、麸皮的混合物作为主料，添加辅料和核桃枝浸提液充分混合；以质量份数计，主料中包括2 10份的木屑、2 5份的棉籽壳和I 2份的麸皮；辅料中包括0. I 0. 5份的蔗糖、0. I 0. 6份的石膏、0. I 0. 6份的石灰、0. I 0. 5份的羊肚菌根际土、0 0. 05份的磷酸二氢钾、0 0. 05份硫酸镁和0 0. 02份的维生素B1 ;核桃枝浸提液是I 3份的核桃树枝条用其质量I. 5 5倍的水煎煮后的过滤液。以质量份数计，主料中包括4 5份的木屑、2 4份的棉籽壳和I 2份的麸皮；辅料中包括0. 2 0. 5份的蔗糖、0. 2 0. 5份的石膏、0. 2 0. 5份的石灰、0. 2 0. 5份的羊肚菌根际土、0. 01 0. 05份的磷酸二氢钾、0. 01 0. 04份硫酸镁、0. 01 0. 02份的维生素B:。所述的培养基的pH值控制为6. 5 7. 5。所述的培养基中水分质量含量控制为50% 65%。所述的培养基在118 126°C下灭菌I. 5 2. 5小时。
一种羊肚菌栽培种培养基的制备方法，包括以下步骤I)按质量份数，将I 3份新鲜、无虫害的核桃树枝条，剪成小段，加入其质量I. 5 5倍的水，煮沸10 30min，过滤，收集得到核桃枝浸提液；2)按质量份数，将2 10份的新鲜、无霉变、无虫蛀的木屑，加足量的水，搅拌均匀，使木屑充分吸水，过夜；3)按质量份数，将2 5份的棉籽壳、I 2份的麸皮与充分吸水的木屑混合后搅拌均匀，作为主料备用；按质量份数，将0. I 0.5份的蔗糖、0. I 0.6份的石膏、0. I 0.6份的石灰、 0. I 0. 5份的羊肚菌根际土、0 0. 05份的磷酸二氢钾、0 0. 05份硫酸镁和0 0. 02份的维生素B1以及核桃枝浸提液分别加入到水中，充分搅拌后加入到主料中，搅拌均匀，得到培养基；控制培养基中的水分质量含量为50% 65% ；4)将培养基装入菌袋中，然后在118 126°C下灭菌I. 5 2. 5小时。所述的木屑堆成龟背状，使木屑能够充分吸水。一种基于所述羊肚菌栽培种培养基的羊肚菌栽培种的制备方法，包括以下步骤羊肚菌栽培种培养基装入菌袋中，在118 126°C下灭菌I. 5 2. 5小时；待培养基冷却至30°C以下时，在无菌环境下将羊肚菌菌种接入菌袋，接种量为培养料干重的3% 5% ；2)将接种后的菌袋放在温度为22 28°C、相对湿度65% 80%的条件下，黑暗或暗光环境培养，35 50天菌丝即可长满菌袋；3)待菌丝满袋后，控制昼夜温度，白昼温度为15 22°C，黑夜温度为12 15°C，光照强度100 300勒克斯；通过温差刺激与弱光照刺激，7 10天菌丝即可扭结形成大量初期为白色的菌核，继续培养后菌核长大且颜色加深转成褐色或深褐色，至此羊肚菌的栽培种制作完成。与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果本发明提供的羊肚菌栽培种培养基，不仅可以使羊肚菌菌丝体在栽培种培养基上菌丝生长的健壮、浓密、长速均勻、菌丝扭结能力强且形成的菌核较大，直径多在5 8mm个别菌核直径在8mm以上，而且比普通栽培种能够多产生25% 35%的羊肚菌菌核，因此在羊肚菌人工驯化中能够提高子实体的产量。
具体实施例方式下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。—种羊肚菌栽培种培养基，以充分吸水的木屑与棉籽壳、麸皮的混合物作为主料，添加辅料和核桃枝浸提液充分混合；以质量份数计，主料中包括2 10份的木屑、2 5份的棉籽壳和I 2份的麸皮；辅料中包括0. I 0. 5份的蔗糖、0. I 0. 6份的石膏、0. I 0. 6份的石灰、0. I 0. 5份的羊肚菌根际土、0 0. 05份的磷酸二氢钾、0 0. 05份硫酸镁和0 0. 02份的维生素B1 ;核桃枝浸提液是I 3份的核桃树枝条用其质量I. 5 5倍的水煎煮后的过滤液。具体的，以质量份数计，主料中包括4 5份的木屑、2 4份的棉籽壳和I 2份的麸皮；辅料中包括o. 2 0. 5份的蔗糖、0. 2 0. 5份的石膏、0. 2 0. 5份的石灰、0. 2 0. 5份的羊肚菌根际土、0. 01 0. 05份的磷酸二氢钾、0. 01 0. 04份硫酸镁、0. 01 0. 02
份的维生素B:。更进一步，以质量份数计，主料中包括4. 5份的木屑(阔叶树木屑)、3份的棉籽壳和2份的麸皮；辅料中包括0. I份的蔗糖、0. I份的石膏、0. I份的石灰、0. I份的羊肚菌根际土、0. 05份的磷酸二氢钾、0. 04份硫酸镁、0. 01份的维生素B1, pH值为6. 5 7. 5 ;培养基中水分质量含量控制为60% 65%。实施例I一种羊肚菌栽培种培养基的制备方法，包括以下步骤I)称取新鲜、无虫害的核桃树枝条1000g，剪成2 4cm长的小段，加入3000g水，煮沸2(T30min,过滤取汁。 2)提前一天称取无虫害、无霉变的干燥木屑5000g，加入5000g清水，搅拌均匀并建堆将木屑堆成龟背状，让木屑能够充分吸水，过夜。3)称取棉籽壳3000g，麸皮1500g与预湿的木屑搅拌均匀；称取蔗糖100g、石膏100g、石灰100g、磷酸二氢钾50g、羊肚菌根际土 100g、硫酸镁40g、维生素B1IOg用水溶解后加入料中搅拌均匀，加入5000g清水。4)将搅拌均匀的料装入14X22cm规格的菌袋中，每袋装干料约为175g。然后将菌袋在121°C下，灭菌2小时，制成栽培种培养基。待培养基冷却的30°C以下时，在无菌接种间用无菌的接种铲将粗腿羊肚菌菌种切成小块接入菌袋，接种量规格约为2cmX2cm ；5)选用上海新苗医疗器械制造有限公司生产的QHX-300BS / H- III型人工气候箱对接种后的培养基进行培养。控制人工气候箱的昼夜温度，白昼温度为22°C，黑夜温度为16°C，相对湿度90%，并控制白昼光照时间为12h，黑夜时间为12h，暗光培养。待菌丝满袋后，调节人工气候箱的昼夜温度，白昼温度为18°C，黑夜温度为12°C，光照强度300Lx，通过温差刺激与弱光照刺激，7天后菌袋中即形成白色的小菌核，继续培养菌核长大至5 8mm且颜色加深转成褐色或深褐色，至此羊肚菌的栽培种制作完成。所形成的菌核较大，直径多在5 8mm个别菌核直径在8mm以上，而且比普通栽培种能够多产生25% 35%的羊肚菌菌核。实施例2一种羊肚菌栽培种培养基的制备方法，包括以下步骤I)称取新鲜、无虫害的核桃树枝条1500g，剪成2 4cm长的小段，加入3000g水，煮沸2(T30min,过滤取汁。2)提前一天称取无虫害、无霉变的干燥木屑6000g，加入5000g清水，搅拌均匀并建堆将木屑堆成龟背状，让木屑能够充分吸水，过夜。3)称取棉籽壳4000g，麸皮1200g与预湿的木屑搅拌均匀；称取鹿糖200g、石膏150g、石灰120g、羊肚菌根际土 200g、硫酸镁50g、用水溶解/混悬后加入料中搅拌均匀，加入5000g清水。4)将搅拌均匀的料装入14X22cm规格的菌袋中，每袋装干料约为175g。然后将菌袋在118°C下，灭菌I. 5小时，制成栽培种培养基。待培养基冷却的30°C以下时，在无菌接种间用无菌的接种铲将粗腿羊肚菌菌种切成小块接入菌袋，接种量规格约为2cmX2cm ；
5)选用上海新苗医疗器械制造有限公司生产的QHX-300BS / H- III型人工气候箱对接种后的培养基进行培养。控制人工气候箱的昼夜温度，白昼温度为25°C，黑夜温度为20°C，相对湿度90%，并控制白昼光照时间为12h，黑夜时间为12h，暗光培养。待菌丝满袋后，调节人工气候箱的昼夜温度，白昼温度为22°C，黑夜温度为15°C，光照强度300Lx，通过温差刺激与弱光照刺激，8天后菌袋中即形成白色的小菌核，继续培养菌核长大至5 8mm且颜色加深转成褐色或深褐色，至此羊肚菌的栽培种制作完成。实施例3一种羊肚菌栽培种培养基的制备方法，包括以下步骤I)称取新鲜、无虫害的核桃树枝条1000g，剪成2 4cm长的小段，加入2500g水，煮沸2(T30min,过滤取汁。2)提前一天称取无虫害、无霉变的干燥木屑5000g，加入4000g清水，搅拌均匀并 建堆将木屑堆成龟背状，让木屑能够充分吸水，过夜。3)称取棉籽壳2500g，麸皮2000g与预湿的木屑搅拌均匀；称取蔗糖150g、石膏120g、石灰80g、磷酸二氢钾60g、羊肚菌根际土 90g、硫酸镁50g、维生素BfOg用水溶解后加入料中搅拌均匀，加入5000g清水。4)将搅拌均匀的料装入14X22cm规格的菌袋中，每袋装干料约为175g。然后将菌袋在120°C下，灭菌2小时，制成栽培种培养基。待培养基冷却的30°C以下时，在无菌接种间用无菌的接种铲将粗腿羊肚菌菌种切成小块接入菌袋，接种量规格约为2cmX2cm ；5)选用上海新苗医疗器械制造有限公司生产的QHX-300BS / H- III型人工气候箱对接种后的培养基进行培养。控制人工气候箱的昼夜温度，白昼温度为22°C，黑夜温度为16°C，相对湿度90%，并控制白昼光照时间为12h，黑夜时间为12h，暗光培养。待菌丝满袋后，调节人工气候箱的昼夜温度，白昼温度为18°C，黑夜温度为12°C，光照强度300Lx，通过温差刺激与弱光照刺激，7天后菌袋中即形成白色的小菌核，继续培养菌核长大至5 8mm且颜色加深转成褐色或深褐色，至此羊肚菌的栽培种制作完成。实施例4一种羊肚菌栽培种培养基的制备方法，包括以下步骤I)称取新鲜、无虫害的核桃树枝条800g，剪成2 4cm长的小段，加入2000g水，煮沸2(T30min,过滤取汁。2)提前一天称取无虫害、无霉变的干燥木屑5000g，加入3500g清水，搅拌均匀并建堆将木屑堆成龟背状，让木屑能够充分吸水，过夜。3)称取棉籽壳4000g，麸皮2500g与预湿的木屑搅拌均匀；称取鹿糖180g、石膏100g、石灰150g、磷酸二氢钾65g、羊肚菌根际土 150g、硫酸镁30g、维生素BJ5g用水溶解后加入料中搅拌均匀，加入6000g清水。4)将搅拌均匀的料装入14X22cm规格的菌袋中，每袋装干料约为175g。然后将菌袋在120°C下，灭菌2小时，制成栽培种培养基。待培养基冷却的30°C以下时，在无菌接种间用无菌的接种铲将粗腿羊肚菌菌种切成小块接入菌袋，接种量规格约为2cmX2cm ；5)选用上海新苗医疗器械制造有限公司生产的QHX-300BS / H- III型人工气候箱对接种后的培养基进行培养。控制人工气候箱的昼夜温度，白昼温度为22°C，黑夜温度为16°C，相对湿度90%，并控制白昼光照时间为12h，黑夜时间为12h，暗光培养。
待菌丝满袋后，调节人工气候箱的昼夜温度，白昼温度为18°C，黑夜温度为12°C，光照强度300Lx，通过温差刺激与弱光照刺激，7天后菌袋中即形成白色的小菌核，继续培养菌核长大至5 8mm且颜色加深转成褐色或深褐色，至此羊肚菌的栽培种制作完成。实施例5一种羊肚菌栽培种培养基的制备方法，包括以下步骤I)称取新鲜、无虫害的核桃树枝条1500g，剪成2 4cm长的小段，加入2000g水，煮沸2(T30min,过滤取汁。2)提前一天称取无虫害、无霉变的干燥木屑5000g，加入3500g清水，搅拌均匀并建堆将木屑堆成龟背状，让木屑能够充分吸水，过夜。
3)称取棉籽壳3200g，麸皮1800g与预湿的木屑搅拌均匀；称取蔗糖200g、石膏50g、石灰100g、磷酸二氢钾50g、羊肚菌根际土 200g、硫酸镁50g、维生素Bi25g用水溶解后加入料中搅拌均匀，加入6000g清水。4)将搅拌均匀的料装入14X22cm规格的菌袋中，每袋装干料约为175g。然后将菌袋在125°C下，灭菌I. 5小时，制成栽培种培养基。待培养基冷却的30°C以下时，在无菌接种间用无菌的接种铲将粗腿羊肚菌菌种切成小块接入菌袋，接种量规格约为2cmX2cm ；5)选用上海新苗医疗器械制造有限公司生产的QHX-300BS / H- III型人工气候箱对接种后的培养基进行培养。控制人工气候箱的昼夜温度，白昼温度为20°C，黑夜温度为15°C，相对湿度90%，并控制白昼光照时间为12h，黑夜时间为12h，暗光培养。待菌丝满袋后，调节人工气候箱的昼夜温度，白昼温度为20°C，黑夜温度为14°C，光照强度200Lx，通过温差刺激与弱光照刺激，7天后菌袋中即形成白色的小菌核，继续培养菌核长大至5 8mm且颜色加深转成褐色或深褐色，至此羊肚菌的栽培种制作完成。
权利要求
1.一种羊肚菌栽培种培养基，其特征在于，以充分吸水的木屑与棉籽壳、麸皮的混合物作为主料，添加辅料和核桃枝浸提液充分混合； 以质量份数计，主料中包括2 10份的木屑、2 5份的棉籽壳和I 2份的麸皮；辅料中包括0. I 0. 5份的蔗糖、0. I 0. 6份的石膏、0. I 0. 6份的石灰、0. I 0. 5份的羊肚菌根际土、0 0. 05份的磷酸二氢钾、0 0. 05份硫酸镁和0 0. 02份的维生素B1 ；核桃枝浸提液是I 3份的核桃树枝条用其质量I. 5 5倍的水煎煮后的过滤液。
2.如权利要求I所述的羊肚菌栽培种培养基，其特征在于，以质量份数计，主料中包括4 5份的木屑、2 4份的棉籽壳和I 2份的麸皮；辅料中包括0. 2 0. 5份的蔗糖、0.2 0. 5份的石膏、0. 2 0. 5份的石灰、0. 2 0. 5份的羊肚菌根际土、0. 01 0. 05份的磷酸二氢钾、0. 01 0. 04份硫酸镁、0. 01 0. 02份的维生素Biq
3.如权利要求I所述的羊肚菌栽培种培养基，其特征在于，所述的培养基的PH值控制为 6. 5 7. 5。
4.如权利要求I所述的羊肚菌栽培种培养基，其特征在于，所述的培养基中水分质量含量控制为50% 65%。
5.如权利要求I所述的羊肚菌栽培种培养基，其特征在于，所述的培养基在118 126°C下灭菌I. 5 2. 5小时。
6.一种羊肚菌栽培种培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤 1)按质量份数，将I 3份新鲜、无虫害的核桃树枝条，剪成小段，加入其质量I.5 5倍的水，煮沸10 30min，过滤，收集得到核桃枝浸提液； 2)按质量份数，将2 10份的新鲜、无霉变、无虫蛀的木屑，加足量的水，搅拌均匀，使木屑充分吸水，过夜； 3)按质量份数，将2 5份的棉籽壳、I 2份的麸皮与充分吸水的木屑混合后搅拌均匀，作为主料备用； 按质量份数，将0. I 0.5份的蔗糖、0. I 0.6份的石膏、0. I 0.6份的石灰、0. I 0.5份的羊肚菌根际土、0 0. 05份的磷酸二氢钾、0 0. 05份硫酸镁和0 0. 02份的维生素B1以及核桃枝浸提液分别加入到水中，充分搅拌后加入到主料中，搅拌均匀，得到培养基；控制培养基中的水分质量含量为50% 65% ； 4)将培养基装入菌袋中，然后在118 126°C下灭菌I.5 2. 5小时。
7.如权利要求6所述的羊肚菌栽培种培养基的制备方法，其特征在于，所述的木屑堆成龟背状，使木屑能够充分吸水。
8.一种基于权利要求I所述羊肚菌栽培种培养基的羊肚菌栽培种的制备方法，其特征在于，包括以下步骤 1)将所述羊肚菌栽培种培养基装入菌袋中，在118 126°C下灭菌I.5 2. 5小时；待培养基冷却至30°C以下时，在无菌环境下将羊肚菌菌种接入菌袋，接种量为培养料干重的3% 5% ； 2)将接种后的菌袋放在温度为22 28°C、相对湿度65% 80%的条件下，黑暗或暗光环境培养，35 50天菌丝即可长满菌袋； 3)待菌丝满袋后，控制昼夜温度，白昼温度为15 22°C，黑夜温度为12 15°C，光照强度100 300勒克斯；7 10天菌丝即可扭结形成白色菌核，继续培养后菌核长大且颜色加深转成褐色或深褐色 。
全文摘要
本发明公开了一种羊肚菌栽培种培养基及其制备方法，以充分吸水的木屑与棉籽壳、麸皮的混合物作为主料，添加辅料和核桃枝浸提液充分混合；以质量份数计，主料中包括2～10份的木屑、2～5份的棉籽壳和1～2份的麸皮；辅料中包括0.1～0.5份的蔗糖、0.1～0.6份的石膏、0.1～0.6份的石灰、0.1～0.5份的羊肚菌根际土、0～0.05份的磷酸二氢钾、0～0.05份硫酸镁和0～0.02份的维生素B1；核桃枝浸提液是1～3份的核桃树枝条用其质量1.5～5倍的水煎煮后的过滤液。该方法制备的羊肚菌栽培种菌丝健壮、浓密、长速均匀、气生菌丝发达、菌丝扭结能力强、能够比普通栽培种多产生25%～35%的羊肚菌菌核。
文档编号A01G1/04GK102757291SQ20121028455
公开日2012年10月31日 申请日期2012年8月10日 优先权日2012年8月10日
发明者吴小杰, 张黎光, 戴璐, 李安利, 李峻志, 祁鹏 申请人:陕西省微生物研究所