在昆虫害虫中下调基因表达的制作方法

文档序号:255827阅读:415来源:国知局
在昆虫害虫中下调基因表达的制作方法
【专利摘要】本发明涉及使用干扰核糖核酸(RNA)分子对昆虫害虫物种的侵扰进行的遗传控制,特别是对植物的害虫侵扰的预防和/或控制。本发明还涉及用于在供局部应用中使用的,例如呈杀虫剂形式的含有本发明的干扰RNA分子的组合物和组合。
【专利说明】在昆虫害虫中下调基因表达
发明领域
[0001] 本发明总体上涉及对昆虫害虫物种的侵扰的遗传控制,特别是对植物的害虫侵扰的预防和/或控制。更具体地说,本发明涉及通过干扰核糖核酸(RNA)分子下调昆虫害虫物种中靶基因的表达。还提供了包含本发明的干扰RNA分子的组合物和组合,它们适用于局部应用,例如呈杀虫剂形式。
[0002] 发明背景
[0003]存在大量能够侵染或侵扰多种环境和宿主生物体的昆虫害虫物种。昆虫害虫包括以下昆虫目中的多个物种:半翅目(Hemiptera)(蝽类昆虫)、鞘翅目(Coleoptera)(甲虫)、蚤目(Siphonaptera)(跳蚤)、网翅目(Dichyoptera)(蟑螂和虫堂螂)、鳞翅目(Lepidoptera)(蛾和蝴蝶)、直翅目(Orthoptera)(例如蚱由孟)以及双翅目(Diptera)(苍蝇)。害虫侵扰会导致严重的损害。侵扰植物物种的昆虫害虫在农业上特别成问题,因为它们会对作物造成严重损 害并且显著降低植物产量。多种不同类型的植物都对害虫侵扰敏感,包括经济作物,如水稻、棉花、大豆、马铃薯以及玉米。
[0004]传统上,通过使用化学杀虫剂来预防或控制昆虫害虫的侵扰。然而,这些化学品不总是适用于处理作物,因为它们可能对其他物种有毒并且会造成显著的环境损害。在最近几十年中,研究者已经开发出控制害虫侵扰的更环境友好的方法。举例来说,已经使用了天然地表达对昆虫害虫有毒的蛋白质的微生物,如苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)细菌。科学家还分离出编码这些杀虫蛋白的基因并使用它们来产生对昆虫害虫具有抗性的转基因作物,例如基因工程化为产生Cry家族蛋白质的玉米和棉花植物。
[0005]虽然细菌毒素在控制某些类型的害虫方面一直非常成功,但是它们并非对所有的害虫物种都有效。因此,研究者们已经寻找到其他更有针对性的害虫控制方法,特别是将RNA干扰或‘基因沉默’作为在遗传水平上控制害虫的手段的方法。
[0006]RNA干扰或‘RNAi’是用以在细胞或整个生物体环境下以序列特异性方式下调基因表达的一种方法。RNAi是目前本领域中用于抑制或下调多种生物体(包括害虫生物体,如真菌、线虫以及昆虫)中的基因表达的一种成熟的技术。此外,之前的研究已经显示,下调昆虫害虫物种中的靶基因可以被用作控制害虫侵扰的一种手段。
[0007]W02007/074405描述了抑制无脊椎动物害虫(包括科罗拉多马铃薯甲虫)中靶基因的表达的方法。另外,W02009/091864描述了用于抑制昆虫害虫物种(包括来自草盲蝽(Lygus)属的害虫)中的靶基因的组合物和方法。
[0008]虽然使用RNAi来下调害虫物种中的基因表达在本领域中是已知的,但是将这种技术用作害虫控制措施的成功取决于选择最适当的靶基因,即功能缺失导致必需生物过程严重破坏和/或生物体死亡的那些基因。因此,本发明针对将下调害虫中的特定靶基因作为一种手段来实现昆虫害虫侵扰,特别是植物的昆虫害虫侵扰的更有效预防和/或控制。

【发明内容】

[0009]本发明人试图使用遗传方法来鉴定用于预防和/或控制昆虫害虫侵扰的改良的手段。具体来说,他们研究了使用RNAi按以下方式来下调基因:削弱昆虫害虫存活、生长、定殖特定环境和/或侵扰宿主生物体的能力并且由此限制由该害虫造成的损害。
[0010]因此,根据本发明的一个方面,提供了一种干扰核糖核酸(RNA或双链RNA),它在被一种昆虫害虫物种摄入后起到下调所述昆虫害虫中的一种靶基因的表达的作用,
[0011]其中该RNA包含至少一个沉默元件,其中该沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域,其中一条链包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成,并且其中该靶基因
[0012]⑴选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、
181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、
143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、
131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237、302 至Ij 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、
177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、
203、306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少 80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致,或
[0013](ii)选自以下基因的组,这些基因具有由SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、
181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、
7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、
178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、
134,222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155,250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、
164,266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个组成的一种核苷酸序列,或
[0014](iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26.75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、
146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000或3000个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID N01、174、404、
180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、
6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286 到 289、298 到 301、
145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、
2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26.75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、
146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致,或
[0015](iv)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、
175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到
249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500,2000或3000个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42,9,10,43 到46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、
130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、
138,238到 241、150、151、242到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187,203,306到309、318到321、386、387、388、389中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、
121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、
179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致,或[0016](V)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、
139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、
15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、
24,71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、
133,218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、186、202、187、203、306 到 309、318到 321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、
148,136,230到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、
159,258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306到309、318到321、386、387、388、389所表示的序列中的任一个至少75%,优选至少80%,85%、90%、95%、98% 或 99%—致,或
[0017](vi)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205,55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、
25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、
145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、`138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一个所编码的氨基酸序列至少70%,优选至少75%、80%、85%、90%、95%、98%或99%—致。[0018]在本发明的一个特定方面,本发明的干扰RNA分子包含至少一个双链区,典型地是干扰RNA的沉默元件,它包含通过与一个反义RNA链互补碱基配对而退火的一个有义RNA链,其中dsRNA分子的有义链包含与位于该祀基因的RNA转录物内的一个核苷酸序列互补的一个核苷酸序列。
[0019]在一个实施例中,本发明涉及一种干扰核糖核酸(RNA或双链RNA),它在被一种昆虫害虫物种摄入后起到下调所述昆虫害虫中的靶基因的表达的作用,其中该RNA包含至少一个沉默元件,其中该沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域,其中一条链包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成,并且其中该靶基因
[0020](i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、
181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、121、142、176、182、130、177、183、206到
209,286IlJ 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、132、214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136,230到233或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、
132.214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230到233或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致,或`
[0021](ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、
175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、
132.214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、
127、148、136、230到233或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID NOU
174、404、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、
176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、
126、135、226到229、127、148、136、230到233中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297、310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、
144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、
125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233 或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致,或
[0022](iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、
175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、
132.214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230到233或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230到233中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、
131、179、210到213、290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222到225、147、126、135、226到229、127、148、136、230到233或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致,或
[0023](iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、
182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126,135,226到229、127、148、136、230到233或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30,282到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、1 25、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233 所表示的序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致,或
[0024](V)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、
177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到229、127、148、136、230到233中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%,优选至少90%、95%、98%或 99%—致。
[0025]这些靶基因编码在肌钙蛋白/肌丝复合物内的蛋白质。
[0026]在又一个实施例中,本发明涉及一种干扰核糖核酸(RNA或双链RNA),它在被一种昆虫害虫物种摄入后起到下调所述昆虫害虫中的靶基因的表达的作用,其中该RNA包含至少一个沉默元件,其中该沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域,其中一条链包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成,并且其中该靶基因
[0027](i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205,55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与 SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到269、165、167、166、270到273或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98% 或 99%—致,或
[0028](ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205.55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到269、165、167、166、270到273中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与 SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到269、165、167、166、270到273或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98% 或 99%—致,或
[0029](iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、`9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205.55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到273中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与SEQ ID N03、4、31到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到66、21、22、67 到 70、150、151、242到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166,270到273或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98% 或 99%—致,或
[0030](iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID N03、4、31到 34、139、5、6、35到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、
159.258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与由SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 至Ij 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、 51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、
159.258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 所表示的序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致,或
[0031](V)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID N03、4、31到34、139、5、
6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、
16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 中的任一个所编码的氨基酸序列至少85 %,优选至少90 %、95 %、98 %或99 % —致。
[0032]这些靶基因编码昆虫核糖体蛋白。
[0033]在某些实施例中,本发明涉及一种干扰RNA分子,该干扰RNA分子包含至少一个双链区,典型地是该干扰RNA分子的沉默元件,它包含通过与一个反义RNA链互补碱基配对而退火的一个有义RNA链,其中dsRNA分子的有义链包含一个至少17、18、19、20、21、22、23、
24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、
250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、I100、1200、1300、1400、1500、2000或3000个连续核苷酸的序列,该序列与位于来自肌钙蛋白/肌丝复合物的靶基因的RNA转录物内的一个核苷酸序列至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%、99%或100%互补。
[0034]在一个实施例中,该革巴基因编码一种昆虫wings up A (肌钙蛋白I)蛋白(例如CG7178Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N01、2、174、404、175、180、
181、188和189表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N079、349、405、352或356中的一个或多个具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨
基酸序列一致性。
[0035]在一个实施例中,该靶基因编码一种支持蛋白(例如CG7107Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0121、130、142、143、176、177、182和183表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N0330、350或353中的一个或多个具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的氨基酸序列一致性。
[0036]在一个实施例中,该靶基因编码原肌球蛋白I蛋白(例如CG4898Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)或原肌球蛋白2蛋白(例如CG4843Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0123和132表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ IDN0332具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0037]在一个实施例中,该靶基因编码肌球蛋白重链(例如CG17927Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0122、131、144、145、178和179表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N0331或351中的一个或多个具有至少85%、90%、92%、94 %、96%、98 %、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0038]在一个实施例中,该靶基因编码肌球蛋白轻链细胞质蛋白(例如CG3201Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0124和133表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N0333具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0039]在一个实施例中,该靶基因编码鱼翅瓜蛋白(例如CG3595Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0125和134表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0334 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的一致性。
[0040]在一个实施例中,该靶基因编码拉链蛋白(例如CG15792Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0126和135表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0335 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的一致性。[0041 ] 在一个实施例 中,该靶基因编码肌钙蛋白C (例如CG2981、CG7930、CG9073、CG6514、CG12408、CG9073、CG7930、CG2981、CG12408 或 CG6514Dm 蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0127和136、或128和137、或184和185表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N0336、337和354中的一个或多个具有至少85%、90 %、92 %、94 %、96 %、98 %、99 % 或 100 % 的氨基酸序列一致性。
[0042]根据另一个实施例,本发明涉及一种干扰RNA分子,该干扰RNA分子包含至少一个双链区,典型地是该干扰RNA分子的沉默元件,它包含通过与一个反义RNA链互补碱基配对而退火的一个有义RNA链,其中dsRNA分子的有义链包含一个至少17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000或3000个连续核苷酸的序列,该序列与位于编码一种昆虫核糖体蛋白的一种祀基因的RNA转录物内的一个核苷酸序列至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%、99%或100%互补。
[0043]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S3A(例如CG2168Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N011、12和141表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N084或328中的一个或两个具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0044]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白LPl (例如CG4087Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N03和4表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N080 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的氨基酸序列一致性。
[0045]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S3(例如CG6779Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N07和8表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N082 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基酸序列
一致性。
[0046]在一个实施例中,由SEQ ID N09和10表示的靶基因编码核糖体蛋白LlOAb (例如CG7283Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQID N083具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0047]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S18(例如CG8900Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N013和14表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N085 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的氨基酸序列一致性。
[0048]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L4(例如CG5502Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N05和6表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N081 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基酸序列
一致性。
[0049]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S27(例如CG10423Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N015和16、204和205表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N086和359中的一个或两个具有至少85%、90%、92%、94%、96 %、98 %、99 %或100 %的氨基酸序列一致性。
[0050]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L6(例如CG11522Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N017和18表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N087 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的氨基酸
序列一致性。
[0051]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S13(例如CG13389Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N019和20表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N088 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的氨基酸
序列一致性。
[0052]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L12(例如CG3195Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N021和22表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N089 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的氨基酸
序列一致性。
[0053]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L26(例如CG6846Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0158和159表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0343 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0054]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L21(例如CG12775Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0165U66以及167表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0347 和 348 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0055]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S12(例如CG11271Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0156和157表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0342 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0056]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S28b (例如CG2998Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0160和161表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0344 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0057]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L13(例如CG4651Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0154和155表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0341 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0058]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白LlO (例如CG17521Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0163和164表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0345 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0059]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L5(例如CG17489Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由S`EQ ID N0152和153表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0340 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0060]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S15Aa(例如CG2033Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0150和151表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0339 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的
氨基酸序列一致性。
[0061]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L19(例如CG2746Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0200和201表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0357 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0062]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L27(例如CG4759Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0386表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0390 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基酸序
列一致性。
[0063]在一个实施例中,该靶基因编码线粒体细胞色素c氧化酶亚单位II蛋白(例如CG34069Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N025和26表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N091具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0064]在一个实施例中,该靶基因编码ATP合酶-餉链(例如CG7610Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0129和138表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0338 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0065]在一个实施例中,该靶基因编码泛蛋白-5E (例如CG32744Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0186和187、202和203表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N0355和358中的一个或两个具有至少85%、90%、92%、94%、96 %、98 %、99 %或100 %的氨基酸序列一致性。
[0066]在一个实施例中,该靶基因编码蛋白酶体β型亚基(例如CG17331Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0387表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0391 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基
酸序列一致性。
[0067]在一个实施例中,该靶基因编码是CG13704Dm蛋白的一种昆虫直向同源物的蛋白质,所述靶基因是由SEQ ID N0388表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQID N0392 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基酸序列一致性。[0068]在一个实施例中,该靶基因编码Rpnl2蛋白(例如CG4157Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0389表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0393 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基酸序列一致性。
[0069]根据本发明的一个第二方面,提供了一种用于预防和/或控制昆虫害虫侵扰的组合物,该组合物包含至少一种干扰核糖核酸(RNA)和至少一种合适的载体、赋形剂或稀释剂,其中该干扰RNA在被害虫摄入后起到下调所述害虫内靶基因的表达的作用,
[0070]其中该RNA包含至少一个沉默元件,其中该沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域,其中一条链包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成,并且其中该靶基因
[0071](i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、
181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、
7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、
131、179、210到213、290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个至少75%—致,或
[0072](ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、
146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、
181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、
7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62`、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、
178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、
134,222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、
155,250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、
164,266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、
189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、
131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个至少75%—致,或
[0073](iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、
140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、
122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、
146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、
163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、
11、12、47 到 50 、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、
177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203,306到309、318到321、386、387、388、389中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到
30,282到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、
17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、
142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、
147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%—致,或
[0074](iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、
24,71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、
133,218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309、318到 321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与由 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 至Ij 30、282 到 285、294 到 297,310到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到
50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、
21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、
148,136,230到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、
159,258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、
168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306到309、318到321、386、387、388、389所表示的序列中的任一个至少75%—致,或
[0075](V)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205,55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、
25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、
145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、
163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%—致。
[0076]本发明的组合物可以用于预防和/或控制害虫侵扰。在某些实施例中,该组合物可以用作一种用于植物或用于植物的繁殖或生殖材料的杀虫剂。在另一个方面,在此提供了一种用于预防和/或控制害虫侵扰的组合,该组合包含本发明的组合物和至少一种其他活性剂。
[0077]在又一个方面,在此提供了一种用于下调昆虫害虫物种中靶基因的表达以便预防和/或控制害虫侵扰的方法,该方法包括使所述害虫物种与一种有效量的至少一种干扰核糖核酸(RNA)接触,其中该干扰RNA在被害虫摄入后起到下调所述害虫中的一种靶基因的表达的作用,其中该RNA包含至少一个沉默元件,其中该沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域,其中一条链包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成,并且其中该靶基因
[0078](i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、
181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、
7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、
143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、
131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、 135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237、302 至Ij 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、
11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、
177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、
203、306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少 80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致,或
[0079](ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、
175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、
140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、
122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、
146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、
134,222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、
155,250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、
164,266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、
189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、
143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、1`35、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个至少75% (优选地至少80%、85%、90%、95%、98%或99%) —致,或
[0080](iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、
175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、
140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、
122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、
146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到
249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203,306到309、318到321、386、387、388、389中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到
30,282到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、
142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、
147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75% (优选地至少80%、85%、90%、95%、98%或99%) —致,或
[0081](iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、
139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、
15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、
24,71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、
133,218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309、318到 321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、
148,136,230到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、
159,258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306到309、318到321、386、387、388、389所表示的序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98% 或 99%—致,或
[0082](V)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205,55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一个所编码的氨基酸序列至少85% (优选地至少90%、95%、98%或99% ) —致。
[0083]根据本发明的另一个方面,提供了一种分离的多核苷酸,该多核苷酸选自下组,该组由以下各项组成:
[0084](i)包含如由 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138,238到241、150、151、242到245、152、153、246到249、154、155、250到253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、
187、203、306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个所表示的一种核苷酸序列的至少 21 个,优选至少 22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 个连续核苷酸的一种多核苷酸,或
[0085](ii)由如 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个所表示的一种核苷酸序列的至少 21 个,优选至少 22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000或3000个连续核苷酸组成的一种多核苷酸,或
[0086](iii)包含如在 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 至Ij
285,294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、
130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、
138,238到 241、150、151、242到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187,203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个中所表示的一种核苷酸序列的至少21个,优选至少22,23或24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 个连续核苷酸的一种多核苷酸,由此使得当最佳地比对并且比较两种序列时,所述多核苷酸与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205,55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、
145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致,或[0087](iv)包含如在 SEQlD N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285、294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、
130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、
135,226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、
129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、
157,254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、
167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个中所表示的一种核苷酸的一个至少21个,优选至少22,23或24、25、26、27、28、29、30、35、40、
45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 个连续核苷酸的片段的一种多核苷酸,并且其中所述片段或所述互补序列具有一种核苷酸序列,当将所述片段与SEQ ID 勵1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、
3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、
14,51到 54、15、2 04、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到321、386、387、388、389中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到313、3、4、31 到 34、139、5、6、35到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22,67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到209,286 IlJ 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、132、214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、
136,230到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151,242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、
169,274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%,优选至少 80%、85%、90%、95%、98% 或 99%—致,或
[0088](V)由如在 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、
141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、
130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、
135,226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、
129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、
157,254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、
167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个中所表示的一种核苷酸的一个至少21个,优选至少22,23或24、25、26、27、28、29、30、35、40、
45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 个连续核苷酸的片段组成的一种多核苷酸,并且其中所述片段或所述互补序列具有一种核苷酸序列,当将所述片段与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 2 89,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、
148,136,230到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、
159,258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、
168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306到309、318到321、386、387、388、389中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少 75%,优选至少 80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致,或
[0089](vi)编码一种氨基酸序列的一种多核苷酸,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到285,294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、
130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、
138,238到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、
166,270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、
202、187、203、306到309、318到321、386、387、388、389中的任一个所编码的氨基酸序列至少 70%,优选至少 75%、80%、85%、90%、95%、98% 或 99%—致,并且
[0090]其中所述多核苷酸不长于10000、9000、8000、7000、6000、5000、4000、3000、2000或1500个核苷酸。
[0091]由本发明的靶基因编码的氨基酸序列是由SEQ ID N079、349、405、352、356、80、326、81、327、82、83、328、84、329、85、86、359、87 到 91、330、350、353、331、351、332 到 336、337、354、338 到 344、346、345、347、348、357、355、358、390 到 393 分别表示。
[0092]在本发明的一个具体方面,该分离的多核苷酸是干扰RNA分子的一部分,典型地是沉默元件的一部分,它包含至少一个双链区,该双链区包含通过与一个反义RNA链互补碱基配对而退火的一个有义RNA链,其中dsRNA分子的有义链包含与位于该靶基因的RNA转录物内的一个核苷酸序列互补的一个核苷酸序列。更具体地说,该分离的多核苷酸是以有义和反义定向克隆到一种DNA构建体中使得有义和反义多核苷酸转录后形成一个dsRNA分子,该分子在被害虫摄入后起到抑`制或下调所述害虫内靶基因的表达的作用。
[0093]在一个实施例中,本发明涉及一种分离的多核苷酸,该多核苷酸是以有义和反义定向克隆到一种DNA构建体中使得有义和反义多核苷酸转录后形成一个dsRNA分子,该分子在被昆虫摄入后起到抑制或下调肌钙蛋白/肌丝复合物内靶基因的表达的作用。
[0094]在一个实施例中,该革巴基因编码一种昆虫wings up A (肌钙蛋白I)蛋白(例如CG7178Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N01、2、174、404、175、180、
181、188和189表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N079、349、405、352或356中的一个或多个具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0095]在一个实施例中,该靶基因编码一种支持蛋白(例如CG7107Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0121、130、142、143、176、177、182和183表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N0330、350或353中的一个或多个具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99% 或 100% 的氨基酸序列一致性。
[0096]在一个实施例中,该靶基因编码原肌球蛋白I蛋白(例如CG4898Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)或原肌球蛋白2蛋白(例如CG4843Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0123和132表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ IDN0332具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0097]在一个实施例中,该靶基因编码肌球蛋白重链(例如CG17927Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0122、131、144、145、178和179表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N0331或351中的一个或多个具有至少85%、90%、92 %、94 %、96 %、98 %、99 %或100 %的氨基酸序列一致性。
[0098]在一个实施例中,该靶基因编码肌球蛋白轻链细胞质蛋白(例如CG3201Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0124和133表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N0333具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0099]在一个实施例中,该靶基因编码鱼翅瓜蛋白(例如CG3595Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0125和134表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0334 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的一致性。
[0100]在一个实施例中,该靶基因编码拉链蛋白(例如CG15792Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0126和135表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0335 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的一致性。
[0101]在一个实施例中,该靶基因编码肌钙蛋白C (例如CG2981、CG7930、CG9073、CG6514、CG12408、CG9073、CG7930、CG2981、CG12408 或 CG6514Dm 蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0127和136、或128和137、或184和185表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N0336、337和354中的一个或多个具有至少85%、90 %、92 %、94 %、96 %、98 %、99 % 或 100 % 的氨基酸序列一致性。[0102]根据其他实施例,本发明涉及一种分离的多核苷酸,该多核苷酸是以有义和反义定向克隆到一种DNA构建体中使得有义和反义多核苷酸转录后形成一个dsRNA分子,该分子在被昆虫摄入后起到抑制或下调一种编码昆虫核糖体蛋白的靶基因的表达的作用。
[0103]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S3A(例如CG2168Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N011、12和141表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N084或328中的一个或两个具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0104]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白LPl (例如CG4087Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N03和4表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N080 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的氨基酸序
列一致性。
[0105]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S3(例如CG6779Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N07和8表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N082 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基酸序列
一致性。
[0106]在一个实施例中,由SEQ ID N09和10表示的靶基因编码核糖体蛋白LlOAb (例如CG7283Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQID N083具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0107]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S18(例如CG8900Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N013和14表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N085 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的氨基酸序列一致性。
[0108]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L4(例如CG5502Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N05和6表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N081 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基酸序列
一致性。
[0109]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S27(例如CG10423Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N015和16、204和205表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与SEQ ID N086和359中的一个或两个具有至少85%、90%、92%、94%、96 %、98 %、99 %或100 %的氨基酸序列一致性。
[0110]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L6(例如CG11522Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N017和18表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N087 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的氨基酸
序列一致性。
[0111]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S13(例如CG13389Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N019和20表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N088 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的氨基酸
序列一致性。
[0112]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L12(例如CG3195Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N021和22表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N089 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100% 的氨基酸
序列一致性。
[0113]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L26(例如CG6846Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0158和159表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0343 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0114]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L21(例如CG12775Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0165U66以及167表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0347 和 348 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或100%的氨基酸序列一致性。
[0115]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S12(例如CGl 1271Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0156和157表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0342 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0116]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S28b (例如CG2998Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0160和161表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0344 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0117]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L13(例如CG4651Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0154和155表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0341 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0118]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白LlO (例如CG17521Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0163和164表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0345 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0119]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L5(例如CG17489Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0152和153表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0340 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0120]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白S15Aa(例如CG2033Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0150和151表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0339 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的
氨基酸序列一致性。
[0121]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L19(例如CG2746Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0200和201表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0357 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨
基酸序列一致性。
[0122]在一个实施例中,该靶基因编码核糖体蛋白L27(例如CG4759Dm蛋白的一种昆虫直向同源物),所述靶基因是由SEQ ID N0386表示。在一个优选实施例中,该昆虫直向同源物与 SEQ ID N0390 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%或 100%的氨基酸序
列一致性。
[0123]优选地,本发明的方法可实际应用于预防和/或控制昆虫害虫侵扰,特别是控制以下作物植物的害虫侵扰:例如(但不限于)棉花、马铃薯、水稻、草莓、苜蓿、大豆、番茄、卡诺拉、向日葵、高粱、珍珠粟、玉米、茄子、胡椒以及烟草。此外,可以通过常规遗传工程技术将本发明的干扰RNA弓丨入到有待保护的植物中。
[0124]在本发明的所有方面,在优选实施例中,该靶基因
[0125](i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、121、142、176、182、130、177、183、206到
209,286IlJ 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、132、214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136,230到233或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、
132,214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230到233或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致,或
[0126](ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、
132.214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230到233或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种 核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID NOU
174、404、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、
176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、
126、135、226到229、127、148、136、230到233中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297、310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、
125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233 或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致,或
[0127](iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、
175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、
132.214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、
127、148、136、230到233或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230到233中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、
131、179、210到213、290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222到225、147、126、135、226到229、127、148、136、230到233或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致,或
[0128](iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、
182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到
213,290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126,135,226到229、127、148、136、230到233或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233 所表示的序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致,或
[0129](V)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到229、127、148、136、230到233中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%,优选至少90%、95%、98%或 99%—致。
[0130]这些靶基因编码在肌钙蛋白/肌丝复合物内的蛋白质。
[0131]在本发明的所有方面,在优选实施例中,该靶基因
[0132](i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205.55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与 SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到269、165、167、166、270到273或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98% 或 99%—致`,或
[0133](ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205.55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到269、165、167、166、270到273中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与 SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到269、165、167、166、270到273或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98% 或 99%—致,或[0134](iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205,55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到58、322到325、17、18、59到62、19、20、63到66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到273中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与SEQ ID N03、4、31到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166,270到273或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98% 或 99%—致,或
[0135](iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID N03、4、31到 34、139、5、6、35到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、
159.258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两 种基因时,该直向同源物所具有的序列与由SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、
159.258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 所表示的序列中的任一个至少75%,优选至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致,或
[0136](V)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID N03、4、31到34、139、5、
6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、
16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242到 245、152、153、246到 249、154、155,250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%—致。
[0137]这些靶基因编码昆虫核糖体蛋白。
[0138]在本发明的所有方面,在优选实施例中,该靶基因(i)选自以下基因的组,这些基因具有包含 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297、310到313或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、
181、189、27到30,282到285,294到297,310到313或其互补序列中的任一个至少75%,优选至少 80%、85%、90%、95%、98% 或 99%—致,或
[0139](ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30,282到285,294到297,310到313或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285、294到297、310到313中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID NOU
174、404、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313 或其互补序列中的任一个至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致,或
[0140](iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、
175、181、189、27到30,282到285,294到297,310到313或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313 或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75 %,优选至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致,或
[0141](iv)为 一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30,282到285,294到297,310到313所表示的序列中的任一个至少75%,优选至少 80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致,或
[0142](V)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313 中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%,优选至少90%、95%、98%或99%—致。
[0143]表格和附图的简要i兑明
[0144]表1由第一次筛选鉴定的豆荚草盲蝽(Lygus hesperus)新颖革巴。
[0145]表1B在Lh594途径中的豆荚草盲蝽新颖靶。
[0146]表1C由第二轮筛选签定的豆荚草盲蝽新颖靶。
[0147]表2在豆荚草盲蝽中鉴定的靶基因的多核苷酸序列。
[0148]表3在豆荚草盲蝽中鉴定的靶基因的氨基酸序列。
[0149]表4相应于豆荚草盲蝽靶基因的dsRNA(由等效DNA序列表示的有义链)和用于产生这些dsRNA的引物。
[0150]表5根据剂量反应曲线(DRC)并且与基准靶Lh423和Lhl05相比较进行分级的豆
荚草盲蝽靶。
[0151]表6来自第二轮筛选的豆荚草盲蝽靶-根据DRC并且与基准靶Lh423和Lh594相比较进行分级。
[0152]表7在科罗拉多马铃薯甲虫(CPB)中鉴定的靶基因的多核苷酸序列。
[0153]表8在CPB中鉴定的靶基因的氨基酸序列。
[0154]表9相应于CPB基因的dsRNA (由等效DNA序列表示的有义链)和用于产生这些dsRNA的引物。
[0155]表10在褐色飞虱(BPH)中鉴定的靶基因的多核苷酸序列。
[0156]表11在BPH中鉴定的靶基因的氨基酸序列。
[0157]表12相应于BPH基因的dsRNA(由等效DNA序列表示的有义链)和用于产生这些dsRNA的引物。
[0158]表13基于豌豆蚜虫基因组序列而用于扩增蚜虫cDNA的引物。
[0159]表14在蚜虫中鉴定的靶基因的多核苷酸序列。
[0160]表15在蚜虫中鉴定的靶基因的氨基酸序列。
[0161]表16相应于蚜虫靶基因的dsRNA(由等效DNA序列表示的有义链)和用于产生这些dsRNA的引物。
[0162]表17用于扩增CPB Ld594cDNA的简并引物
[0163]表18用于扩增BPH cDNA的简并引物
[0164]表19:来自该筛选的马铃`薯叶甲(Leptinotarsa decemlineata)新颖革巴。
[0165]表20:褐飞風(Nilaparvata Iugens)的新颖鉴定的革巴。
[0166]表21:豌豆姆(Acyrthosipon pi sum)的新颖鉴定的革巴。
[0167]图1:板Lh001_009的第二次确认测定。暗条:在第3天到第6天的死亡率;亮条:在第6天到第8天的死亡率。使用“ygxxx”筛选代码和“hxxx”靶命名代码将候选克隆命名。
[0168]图2 -M Lh010_020的第二次确认测定。暗条:在第3天到第6天的死亡率;亮条:在第6天到第8天的死亡率。使用“ygxxx”筛选代码和“hxxx”靶命名代码将候选克隆命名。
[0169]图3:来自板LhOOl到Lh009的草盲蝽新颖靶的死亡率分析,以在10天的时间段内的死亡率%表示。对照是以虚线表示。阳性对照:Lh423dsRNA(RpL19)。阴性对照:GFPdsRNA和仅饲料(对照)。
[0170]图4:来自板LhOlO到Lh020的草盲蝽新颖靶的死亡率分析,以在10天的时间段内的死亡率%表示。对照是以虚线表示。阳性对照:Lh423(RpL19)。阴性对照:GFP和仅饲料(对照)。
[0171]图5到9豆荚草盲蝽新颖靶-在从0.4到0.025 μ g/μ I范围内的纯化的合成dsRNA浓度下的剂量反应曲线(在该图中,单位“yg/μ I”未示出)。使用GFP dsRNA和millQ水作为阴性对照。靶的dsRNA是使用如实例部分1.1中所描述的引物产生。
[0172]图10在从0.05到0.001 μ g/ μ I范围内的dsRNA浓度下的Lh594剂量反应曲线。使用GFP dsRNA和millQ水作为阴性对照。
[0173]图1lA在不存在tRNA的情况下在豆荚草盲蝽生物测定中的dsRNA活性:不存在tRNA Lh594(5y g/μ I);阳性对照:Lh423 (5 μ g/μ I);阴性对照:GFP dsRNA (5 μ g/μ I)和millQ水;B使用递减浓度的dsRNA(从5 μ g到0.25 μ g)的Lh594活性极限的鉴定。阴性对照:GFP dsRNA (5 μ g/μ I)和 mi IIQ 水。
[0174]图12第二次筛选靶的板LhOlO到Lh020的第二次确认测定。暗条:在第4天到第8天的死亡率;亮条:在第4天到第6天的死亡率。使用“ygxxx”筛选代码和“hxxx”靶命名代码将候选克隆命名。
[0175]图13在固定的0.5μ g/μ I下测试的草盲蝽肌钙蛋白途径靶的测定结果。
[0176]图14Α-Β来自肌钙蛋白途径的豆荚草盲蝽新颖靶-在从0.4到0.025 μ g/ μ I范围内的纯化的合成dsRNA浓度下的剂量反应曲线(在该图中,单位使用GFP dsRNA和mi IIQ水作为阴性对照。 [0177]图15A-D第二次筛选靶的豆荚草盲蝽新颖靶-在从0.5到0.0Syg/μ I范围内的纯化的合成dsRNA浓度下的剂量反应曲线。使用GFP dsRNA和millQ水作为阴性对照。
[0178]图16用I μ g的dsRNA Ld594、Ld619以及Ld620处理的CPB幼虫的存活率分析。阳性对照包括基准靶Ld513和Ld049的I μ g dsRNA。阴性对照包括millQ水和FP。
[0179]图17与未处理的对照(UTC)相比,Ld594、Ld619以及Ld620dsRNA对CPB4龄幼虫化蛹的影响。向虫子喂以分配在马铃薯叶盘中的I μ g的dsRNA,然后喂以未处理的马铃薯叶(A)持续4天,然后放在蛭石上。为了评估dsRNA的作用,从蛭石中挖出死昆虫(因为Ld594dsRNA所诱导的强烈作用,不能从蛭石中回收到蛹,并且因此,没有获得此靶dsRNA的图像)⑶。
[0180]图18CPB Ld594、619以及620dsRNA对CPB成虫的存活率和健康的作用。在第4、6、7、8、11以及13天进行评估。对照MQ:millQ水。
[0181]图19来自N1594途径的dsRNA在褐色飞虱中的活性。在0.1 %的CHAPSO存在下测试 0.5 μ g/ μ I 的 DsRNA。阳性对照:N1537dsRNA (0.5 μ g/ μ I);阴性对照:GFPdsRNA (0.5 μ g/ μ I)和仅饲料。
[0182]图20来自Αρ594、Αρ423、Αρ537以及Αρ560的dsRNA对豌豆蚜的活性。在5 μ g/μ I 的 tRNA 存在下测试 0.5 μ g/ μ I 的 DsRNA。阴性对照=GFPdsRNA (0.5 μ g/ μ I)。
[0183]图21马铃薯叶甲幼虫关于用dsRNA处理的人工饲料的死亡率百分比。Ld583、Ld584、Ld586以及Ld588表示靶克隆。阳性对照:Ld513 ;阴性对照=FP0
[0184]发明详细说明
[0185]诸位发明人已经发现,通过RNAi下调昆虫害虫物种中特定靶基因的表达可以用于有效地预防和/或控制所述昆虫害虫侵扰。
[0186]如在此所使用,术语“控制”害虫侵扰是指对害虫产生的用来限制和/或减少害虫生物体的数目和/或由害虫引起的损害的任何作用。因此,优选的靶基因是控制或调控昆虫害虫内的一种或多种必需生物功能的必需基因,这些必需生物功能为例如细胞分裂、生殖、能量代谢、消化、神经功能等。通过RNAi技术下调这些必需基因可以导致昆虫的死亡,或者以另外的方式显著地延缓生长和发育或者削弱害虫在环境中定殖或侵扰宿主生物体的能力。
[0187]诸位发明人现已鉴定出属于草盲蝽属、马铃薯叶甲属、褐飞虱属以及豌豆蚜属的昆虫害虫物种的优良靶基因,这些靶被设想单独地或组合用作RNAi介导性控制例如农艺学上重要作物的昆虫侵扰的一种有效手段。这些新鉴定的靶基因的直向同源物可以用于其他昆虫物种中以控制相应的相关作物的害虫侵扰。[0188]更具体来说,诸位发明人在此描述了编码肌钙蛋白/肌丝复合物的蛋白质的基因形成了供通过RNA抑制机构进行抑制的极佳靶基因。这些靶基因中的一种编码昆虫肌钙蛋白I蛋白(wings up A),它是果蝇CG7178蛋白的一种直向同源物。此蛋白质涉及于肌肉收缩中并且属于一种生理途径,该生理途径并未针对通过RNA抑制进行(昆虫)害虫控制而加以完全地探索。此外,因为这种蛋白质复合物具有动物特异性,并无已知的植物基因同源物或直向同源物,所以在植物中表达革G dsRNA时,降低了异型株(off-type plant)表型的风险。另外,在果蝇中,在果蝇中,肌钙蛋白I被描述为一种单倍不足的基因,在杂合子状态中呈现一种突变体表型。这类基因对mRNA表达水平的降低特别敏感并且因此可以被视为理想的RNAi靶。
[0189]以下列出了此肌钙蛋白/肌丝复合物中其他感兴趣的靶基因。
【权利要求】
1.一种干扰核糖核酸(RNA),该干扰核糖核酸在被一种昆虫害虫物种摄入后起到下调所述昆虫害虫中的一种靶基因的表达的作用, 其中该RNA包含至少一个沉默元件,其中该沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域,其中一条链包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成,并且 其中该靶基因 (i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID N01、174、404、180、188、2、.175、.181、189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、.5、6、35 到 38、140、7、8、.39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、.205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、.26、75 到 78、.143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、.144、178、.131、179、210到213、290到293、123、132、214到217、124、133、218到221、146、125、.134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、.185、234 到.237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 .249、.154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、./164、266 到269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、.278 到 281、200、201、314到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 /285,294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、.10、.43 到 46、141、.11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、..59 到 62、19、.20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、.176、182、130、.177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 .213,290 到.293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、.126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、.129、138、.238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、.157、254 到.257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、..167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、.202、187、.203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个至少75%—致,或 (ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID N01、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、.7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、.16、205、55 到 58、.322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、.25、26、75 到.78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、.122、144、.178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 .221、146、125、.134,222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、.149、184、137、185、.234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 .249、154、.155,250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 .265、163、162、.164,266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、.172、.173、278 到 281、.200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、.189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237、302 至Ij 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个至少75%—致,或(iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、.14,51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、.67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、.286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到.217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、.230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、.242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到.261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、.274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到.321、386、387、388、389中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到.297,310到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、.11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、.20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、.177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到.293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、.238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到.257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、.203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%—致,或 (iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID N01、174、404、.180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、.6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、.16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到.74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286 到 289、298 到 301、.145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到.221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、.184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、.246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到.265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、.278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、.389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与由SEQ IDN01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、.31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、.51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到.70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到.289,298到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、.124、133、218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、.136、.230到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到.245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、.160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、.386、387、388、389所表示的序列中的任一个至少75%—致,或 (v)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID N01、174、404、180、188、2、.175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 .38、.140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、.16、.205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、.25、.26、.75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、.144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、.125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、.137、.185,234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、.154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、.162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到.281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%—致。
2.如权利要求1所述的干扰RNA,其中该沉默元件包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列互补或至少部分地互补的一个至少21个连续核苷酸的序列或由其组成。
3.如权利要求1或权利要求2所述的干扰RNA,其中该RNA包含至少两个沉默元件,其中每一个沉默元件包含与一种靶基因内的一个靶核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成。
4.如权利要求3所述的干扰RNA,其中这些沉默元件各自包含与一个不同的靶核苷酸序列互补的一个不同的核苷酸序列或由其组成。
5.如权利要求4所述的干扰RNA,其中这些不同的靶核苷酸序列来源于单一靶基因或来源于不同的靶基因。
6.如权利要求5所述的干扰RNA,其中这些不同的靶基因来源于相同的昆虫害虫物种或不同的昆虫害虫物种。
7.如权利要求1到6中任一项所述的干扰RNA,其中该昆虫害虫物种是一种植物害虫。
8.如权利要求7所述的干扰RNA,其中该植物害虫是选自属于以下目的昆虫物种的一种昆虫害虫物种:鞘翅目、半翅目、鳞翅目、双翅目、网翅目、直翅目以及蚤目。
9.如权利要求8所述的干扰RNA,其中该昆虫植物害虫选自下组,该组由以下各项组成:马铃薯叶甲属(例如马铃薯叶甲(科罗拉多马铃薯甲虫)、伪马铃薯叶甲(伪马铃薯甲虫)或胡颓子叶茄叶甲(德克萨斯伪马铃薯甲虫));褐飞虱属(例如褐飞虱(褐色飞虱));草盲蝽属(例如牧草盲蝽(无泽盲蝽)或豆荚草盲蝽(西方无泽盲蝽));瘤蚜属(例如桃蚜(绿桃蚜));根萤叶甲属(例如西方玉米根萤叶甲(西方玉米根虫)、巴氏根萤叶甲(北方玉米根虫)、黄瓜十一星叶甲食根亚种(南方玉米根虫)、墨西哥玉米根萤叶甲(墨西哥玉米根虫)。
10.如权利要求1-9中任一项所述的干扰RNA,其中该靶基因编码选自下组的一种昆虫蛋白质,该组包括(i)来自肌钙蛋白/肌丝复合物的一种蛋白质,该复合物选自下组,该组包括肌钙蛋白1(例如CG7178Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、支持蛋白(例如CG7107Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、原肌球蛋白I蛋白(例如CG4898Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、原肌球蛋白2蛋白(例如CG4843Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、肌球蛋白重链(例如CG17927Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、肌球蛋白轻链细胞质蛋白(例如CG3201Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、鱼翅瓜蛋白(例如CG3595Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、拉链蛋白(例如CG15792Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、肌钙蛋白C(例如CG2981、CG7930、CG9073、CG6514、CG12408、CG9073、CG7930、CG2981、CG12408 或 CG6514Dm 蛋白的一种昆虫直向同源物);(ii)选自下组的一种昆虫核糖体蛋白,该组包括核糖体蛋白S3A(例如CG2168Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白LPl (例如CG4087Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S3 (例如CG6779Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白LlOAb (例如CG7283Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S18(例如CG8900Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L4(例如CG5502Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S27 (例如CG10423Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L6 (例如CGl 1522Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S13 (例如CG13389Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)以及核糖体蛋白L12 (例如CG3195Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L26(例如CG6846Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L21(例如CG12775Dm蛋白的一种昆虫直 向同源物)、核糖体蛋白S12(例如CG11271Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S28b (例如CG2998Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白LI3 (例如CG4651Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白LlO (例如CG17521Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L5(例如CG17489Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白S15Aa (例如CG2033Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L19 (例如CG2746Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)、核糖体蛋白L27(例如CG4759Dm蛋白的一种昆虫直向同源物);(iii)线粒体细胞色素c氧化酶亚单位II蛋白(例如CG34069Dm蛋白的一种昆虫直向同源物);(iv)ATP合酶-餉链(例如CG7610Dm蛋白的一种昆虫直向同源物);(V)泛素-5E(例如CG32744Dm蛋白的一种昆虫直向同源物);(vi)蛋白酶体钙型亚单位(例如CG17331Dm蛋白的一种昆虫直向同源物);(vii)作为CG13704Dm蛋白的一种昆虫直向同源物的蛋白质;以及(viii) Rpnl2蛋白(例如CG4157Dm蛋白的一种昆虫直向同源物)。
11.如权利要求1到10中任一项所述的干扰RNA,其中如与暴露于一种靶向非必需基因的干扰核糖核酸或一种不下调该害虫物种内的任何基因的干扰核糖核酸的害虫物种相t匕,下调该靶基因的表达引起该害虫的生长、发育、生殖或存活下降。
12.—种多核苷酸,包含编码如权利要求1到11中任一项所述的干扰RNA的一种核苷酸序列。
13.如权利要求12所述的多核苷酸,该多核苷酸被包含在一个DNA构建体中。
14.如权利要求13所述的DNA构建体,该DNA构建体是一种表达构建体,其中编码该干扰RNA的该多核苷酸序列被可操作地连接到至少一个能够驱动该多核苷酸序列的表达的调控序列。
15.一种宿主细胞,包含如权利要求1到11中任一项所述的干扰RNA、如权利要求12所述的多核苷酸或如权利要求13或14所述的DNA构建体。
16.如权利要求15所述的宿主细胞,其中该宿主细胞是一种原核细胞或一种真核细胞。
17.如权利要求16所述的宿主细胞,其中该宿主细胞是一种细菌细胞。
18.一种用于预防和/或控制昆虫害虫侵扰的组合物,该组合物包含至少一种干扰核糖核酸(RNA)和至少一种合适的载体、赋形剂或稀释剂,其中该干扰RNA在被该害虫摄入后起到下调所述害虫内的一种靶基因的表达的作用,其中该RNA包含至少一个沉默元件,其中该沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域,其中一条链包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成,并且 其中该靶基因 (i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID N01、174、404、180、188、2、175、181、`189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、`39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、`143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、`131、179、210到213、290到293、123、132、214到217、124、133、218到221、146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到`237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到`269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、`11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、`20,63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、`177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到`293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、`238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到`257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、`203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个至少75%—致,或 (ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID N01、174、404、180、188、2、175、`181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、`7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到`78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、.178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、.134,222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、.234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、.155,250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、.164,266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、.200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、.189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、.39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、.143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、.131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、.222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237、302 至Ij 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、.250 到 253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、.314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到.30,282到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、.9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、.17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、.142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、.210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、.147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、.156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、.165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到.317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个至少75%—致,或 (iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、.7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、.322 到 325、17、18、59到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71到74、25、26、75到78、.143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、.131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、.222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、.250 到 253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14,51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到321、386、387、388、389中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到297,310到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%—致,或(iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262到265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与由SEQ IDN01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、.31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、.13、14、51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到.70、23、24、71 到 74、25、26、75 至Ij 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 .209,286 到.289,298到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 .217、.124、133、218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 ..229、.、.148、.136、.230到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到.245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、.160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、.386、387、388、389所表示的序列中的任一个至少75%—致,或 (v)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID N01、174、404、180、188、2、.175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 .38、.140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 .54、.15、.204、.16、.205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 ..74、.25、.26、.75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、.144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、.125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 .233、.128、.149、.184、.137、.185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、.154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、.162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到.281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%—致。
19.如权利要求18所述的组合物,其中该干扰RNA是如权利要求1到11中任一项中所定义。
20.如权利要求18或权利要求19所述的组合物,其中该干扰RNA是由如权利要求13或权利要求14所述的DNA构建体所编码的。
21.如权利要求18到20中任一项所述的组合物,该组合物包含一种表达或能够表达该干扰RNA的宿主细胞。
22.如权利要求21所述的组合物,其中该宿主细胞是一种细菌细胞。
23.如权利要求18到22中任一项所述的组合物,其中该组合物是呈一种适合于被一种昆虫摄取的形式。
24.如权利要求18到23中任一项所述的组合物,其中该组合物是呈固体、液体或凝胶形式。
25.如权利要求18到24中任一项所述的组合物,其中该组合物被配制为一种杀昆虫喷雾剂。
26.如权利要求25所述的组合物,其中该喷雾剂是一种加压/雾化喷雾剂或一种泵式喷雾剂。
27.如权利要求18到26中任一项所述的组合物,其中该组合物另外包含至少一种杀虫剂,该杀虫剂选自下组,该组由以下各项组成:一种化学杀昆虫剂、一种马铃薯块茎特异蛋白、一种苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白、一种致病杆菌杀虫蛋白、一种光杆状菌杀虫蛋白、一种侧孢芽孢杆菌杀虫蛋白以及一种球形芽孢杆菌杀虫蛋白。
28.如权利要求27所述的组合物,其中所述苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白选自下组,该组由以下各项组成:CryK Cry3, TIC851、CryET170、Cry22、TIC901、TIC201、TIC407、TIC417、二元杀虫蛋白CryET80和CryET76、二元杀虫蛋白TIClOO和TIClOl、杀虫蛋白ET29或ET37与杀虫蛋白TIC810或TIC812的组合、以及二元杀虫蛋白PS149B1。
29.一种用于昆虫害虫的壳体或捕获器,该壳体或捕获器包含如在权利要求18到28中任一项所述的组合物。
30.一种根据权利要求18到28中任一项所述的组合物的用途,该组合物用于预防和/或控制害虫侵扰。
31.一种根据权利要求18到28中任一项所述的组合物的用途,该组合物被用作针对一种植物或针对一种植物的生殖材料的繁殖的一种杀虫剂。
32.一种用于预防和/或控制害虫侵扰的组合,该组合包含如权利要求18到28中任一项所述的组合物和至少一种其他活性剂。
33.如权利要求32所述的组合,其中该组合是用于预防和/或控制一种植物的害虫侵扰并且该其他活性剂是一种农艺学试剂。
34.如权利要求33所述的组合,其中该农艺学试剂包括一种除草剂。
35.如权利要求34所述的组合,其中该除草剂选自一种草甘膦不敏感型式的5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS);能够分解麦草畏的一种分解代谢酶,如麦草畏单加氧酶;或能够使草铵膦分解代谢的一种草丁膦乙酰转移酶基因。
36.如权利要求33所述的组合,其中该农艺学试剂包含一种第二杀虫剂。
37.如权利要求36所述的组合,其中该第二杀虫剂选自下组,该组由以下各项组成:一种化学杀昆虫剂、一种马铃薯块茎特异蛋白、一种苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白、一种致病杆菌杀虫蛋白、一种光杆状菌杀虫蛋白、一种侧孢芽孢杆菌杀虫蛋白以及一种球形芽孢杆菌杀虫蛋白。
38.如权利要求37所述的组合,其中所述苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白选自下组,该组由以下各项组成:CryK Cry3, TIC851、CryET170、Cry22、TIC901、TIC201、TIC407、TIC417、二元杀虫蛋白CryET80和CryET76、二元杀虫蛋白TIC100和TIC101、杀虫蛋白ET29或ET37与杀虫蛋白TIC810或TIC812的组合、以及二元杀虫蛋白PS149B1。
39.一种用于下调昆虫害虫物种中的靶基因的表达以便预防和/或控制害虫侵扰的方法,该方法包括使所述害虫物种与一种有效量的至少一种干扰核糖核酸(RNA)接触,其中该干扰RNA在被该害虫摄入后起到下调所述害虫内一种靶基因的表达的作用, 其中该RNA包含至少一个沉默元件,其中该沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域,其中一条链包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成, 并且其中该靶基因 (i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、.189.27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、.39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 .58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 .78、.143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、.131、179、210到213、290到293、123、132、214到217、124、133、218到221、146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到.237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到.269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、.20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、.177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到.293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、.238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到.257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、.203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个至少75%—致,或 (ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、.7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、.322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到.78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、.178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、.134,222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、.234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、.155,250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、.164,266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 .281、.200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、.189.27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、.39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 .58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 .78、.143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、.131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、.222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237、302 至Ij 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30,282到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个至少75%—致,或 (iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、.7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、.322 到 325、17、18、59到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71到74、25、26、75到78、.143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、.250 到 253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、.314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、.4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、4到 50、13、14,51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、.274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 .309,318 到.321、386、387、388、389中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 .285,294 到.297,310到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 .42、.9、.10、43 到 46、141、.11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 .325、.17、.18、.59 到 62、19、.20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 .7.8、.143、.121、.142、.176、182、130、.177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 .213,290 到.293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 .225、.147、.126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 .305、.129、138、.238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 .253、.156、.157、254 到.257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 .269、.165、.167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 .317、.186、.202、187、.203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%—致,或(iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQID N01、174、404、.180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 .34、139、5、.6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 .50、.13、.14、.51 到 54、15、204、.16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 .70、.23、24、71 到.74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286 到 .289、.298 到 301、.1.45、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 .217、.124、.133、218 到 .221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 .233、128、149、.184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 .245、.152、153、.246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 .261、.160、.161、262 到.265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 .277、172、173、.278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 .321、.386、.387、388、.389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与由SEQ IDN01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 .313、3、4、.31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 .46、.141、.11、.12、.47 到 50、13、14、.51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 .66、.21、22、67 到.70、23、24、71 到 74、25、26、75 至Ij .78、.143、.121、.142、.176、.182、.130、.177、.183、.206 到 209,286 到.289,298到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 .2.93、.123、.132、214 到 217、.124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 .229、.127、.148、136、230到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 .241、.150、.151、242 到.245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 .257、.158、.159、.258 到 261、.160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 .273、.168、.170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 .309,318 到 321、.386、387、388、389所表示的序列中的任一个至少75%—致,或(v)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID N01、174、404、180、188、2、.175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、.140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、.75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、.144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、.125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、.185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、.154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、.162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到.281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%—致。
40.如权利要求39所述的方法,其中该干扰RNA是如权利要求1到11中任一项中所定义。
41.如权利要求39或权利要求40所述的方法,其中如与一种靶向非必需害虫基因的干扰核糖核酸(RNA)或一种不在所述害虫中表达的靶基因接触的对照昆虫害虫相比,在一种昆虫害虫物种中的一种靶基因的表达的下调被用来获得至少20%的害虫控制或至少20%的害虫死亡率。
42.如权利要求39到41中任一项所述的方法,其中该方法被用来预防和/或控制一种植物的害虫侵扰。
43.如权利要求42所述的方法,其中该植物选自下组,该组包括棉花、马铃薯、水稻、卡诺拉、向日葵、高粱、珍珠粟、玉米、草莓、黄豆、苜蓿、番茄、茄子、胡椒以及烟草。
44.一种如权利要求1到11中任一项所述的干扰核糖核酸(RNA)、如权利要求13或权利要求14所述的DNA构建体、或如权利要求18到28中任一项所述的组合物的用途,用于预防和/或控制昆虫害虫侵扰。
45.一种用于预防和/或控制昆虫害虫侵扰的试剂盒,该试剂盒包含如权利要求1到.11中任一项所述的干扰核糖核酸(RNA)、如权利要求13或权利要求14所述的DNA构建体、或如权利要求18到28中任一项所述的组合物。
46.一种分离的多核苷酸,选自下组,该组由以下各项组成:
(i)包含如由 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、.11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、.20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、.177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到.293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、.238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到.257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、.203、306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个所表示的一种核苷酸序列的至少21个连续核苷酸的一种多核苷酸,或(ii)包含如在SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、.20.63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个中所表示的一种核苷酸序列的至少21个连续核苷酸的一种多核苷酸,由此当最佳地比对并且比较两种序列时,所述多核苷酸与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285、294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138,238到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166,270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个至少 75%一致,或
(iii)包含如SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20.63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203,306到309,318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个中所表示的一种核苷酸序列的至少21个连续核苷酸的片段的一种多核苷酸,并且其中所述片段或所述互补序列具有一种核苷酸序列,当将所述片段与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、.189.27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、.39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、.143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、.131、179、210到213、290到293、123、132、214到217、124、133、218到221、146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到.237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到.269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、.189.27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、.39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、.143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、.131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、.222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242到 245、152、153、246到 249、154、155、.250 到 253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、.314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%—致,或 (iv)编码一种氨基酸序列的一种多核苷酸,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、.294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、.141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、.19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、.130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、.226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、.138,238到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 .257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、.166,270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 .317、.186、.202、.187、203、306到309、318到321、386、387、388、389中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%—致,并且其中所述多核苷酸不长于10000个核苷酸。
47.根据权利要求1到10中任一项所述的干扰RNA,如权利要求12或权利要求13所述的多核苷酸,如权利要求14所述的DNA构建体,如权利要求15到17中任一项所述的宿主细胞,如权利要求18到28中任一项所述的组合物,如权利要求29所述的壳体或捕获器,如权利要求30、31或44中任一项所述的用途,如权利要求32到38中任一项所述的组合,如权利要求39到43中任一项所述的方法,如权利要求45所述的试剂盒或如权利要求46所述的分离的多核苷酸,其中该靶基因(i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID N01、174、404、180、188、2、175、181、.189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到.209.286到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210到213、290 到 293、123、132、214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、.136,230到233或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、.175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、.206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、.132,214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、.127、148、136、230到233或其互补序列中的任一个至少75%—致,或 (ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID N01、174、404、180、188、2、175、.181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、121、142、176、182、130、177、183、206到.209.286IlJ 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、132、214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、.136,230到233或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID N01、174、404、.180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、.130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、.226到229、127、148、136、230到233中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID 勵1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、.121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、.179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到.225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233 或其互补序列中的任一个至少 75 %一致,或(iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID N01、174、404、180、188、2、175、.181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、121、142、176、182、130、177、183、206到.209.286IlJ 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、132、214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、.136,230到233或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、.218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233 中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与SEQ ID NOU.174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、.176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、.126、135、226到229、127、148、136、230到233或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%—致,或(iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQID N01、174、404、.180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、.130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、.226到229、127、148、136、230到233或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与由 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到.285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到.301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233 所表示的序列中的任一个至少75%—致,或 (v)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID N01、174、404、180、188、2、.175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、121、142、176、182、130、177、183、.206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、.132,214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 .229、.127、148、136、230到233中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%—致。
48.根据权利要求1到10中任一项所述的干扰RNA,如权利要求12或权利要求13所述的多核苷酸,如权利要求14所述的DNA构建体,如权利要求15到17中任一项所述的宿主细胞,如权利要求18到28中任一项所述的组合物,如权利要求29所述的壳体或捕获器,如权利要求30、31或44中任一项所述的用途,如权利要求32到38中任一项所述的组合,如权利要求39到43中任一项所述的方法,如权利要求45所述的试剂盒或如权利要求46所述的分离的多核苷酸,其中该靶基因 (i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID N03、4、31到34、139、5、6、35到38、.140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、.152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、.161,262到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与 SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到.46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到.62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到.269、165、167、166、270到273或其互补序列中的任一个至少75%—致,或 (ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID N03、4、31到34、139、5、6、35到.38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、.55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、.152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、.161.262到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35到38、140、7、8、39到.42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到.325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到.249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、.163、162、164、266到269、165、167、166、270到273中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与 SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到.46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到.62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到.269、165、167、166、270到273或其互补序列中的任一个至少75%—致,或 (iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID N03、4、31到34、139、5、6、35至Ij.38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、.55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、.152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、.161.262到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQ IDN03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、.13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、.22,67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、.270到273中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与 SEQ ID N03、4、31到 34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到42、9、10、43 到 46、141、11、12、.47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、.157,254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、.167、166、270到273或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%—致,或 (iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQID N03、4、31到.34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到.54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、.150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、.159,258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与由SEQ ID N03、.4、31 到 34、139、5、6、35到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、.51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到.70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159,258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 所表示的序列中的任一个至少75%—致,或 (v)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205,55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%—致。
49.根据权利要求1到10中任一项所述的干扰RNA,如权利要求12或权利要求13所述的多核苷酸,如权利要求14所述的DNA构建体,如权利要求15到17中任一项所述的宿主细胞,如权利要求18到28中任一项所述的组合物,如权利要求29所述的壳体或捕获器,如权利要求30、31或44中任一项所述的用途,如权利要求32到38中任一项所述的组合,如权利要求39到43中任一项所述的方法,如权利要求45所述的试剂盒或如权利要求46所述的分离的多核苷酸,其中该靶基因 (i)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID N01、174、404、180、188、2、175、181、189,27到30、282到285、294到297、310到313或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时,该核苷酸序列与SEQID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285、294 到 297,310 到 313 或其互补序列中的任一个至少75%—致,或 (ii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30,282到285,294到297,310到313或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,或具有一种核苷酸序列以使得当将包含所述片段的所述基因与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到297、310到313中的任一个最佳地比对并且比较时,所述核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313 或其互补序列中的任一个至少75%—致,或 (iii)选自以下基因的组,这些基因具有包含SEQID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30,282到285,294到297,310到313或其互补序列中任一个的一个至少21个连续核苷酸的片段的一种核苷酸序列,并且其中当将所述片段与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313中的任一个中的相应片段最佳地比对并且比较时,所述片段的所述核苷酸序列与SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30,282到285,294到297,310到313或其互补序列中的任一个的所述相应片段至少75%—致,或 (iv)为一种基因的一种昆虫害虫直向同源物,该基因具有包含SEQID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列,其中两种直向同源基因在序列方面的相似程度使得当最佳地比对并且比较这两种基因时,该直向同源物所具有的序列与由SEQ ID N01、174、404、180、188、`2、175、181、189、27到30,282到285,294到297,310到313所表示的序列中的任一个至少75%—致,或 (v)选自以下基因的组,这些基因具有编码一种氨基酸序列的一种核苷酸序列,当最佳地比对并且比较两种氨基酸序列时,该氨基酸序列与由SEQ ID N01、174、404、180、188、2、`175、181、189、27到30,282到285,294到297,310到313中的任一个所编码的氨基酸序列至少85%—致。
【文档编号】A01H5/00GK103687952SQ201280035329
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2012年5月2日 优先权日:2011年7月18日
【发明者】米里昂·贝吉恩, 蒂埃里·博盖尔特, 帕斯卡莱·费尔德曼, 罗曼·雷马克斯 申请人:德福根有限公司
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