具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂，该桑叶贮藏保鲜剂由试剂A和试剂B按照1:1的体积比混合而得；每L试剂A由以下质量的成分组成：维生素C40～60g、NaCl5g、盐酸诺氟沙星1000mg、壳聚糖10～30g、乙酸30～50g、柠檬酸20～40g、蔗糖40～60g，余量为水；试剂B为抗辐射菌D.radiodurans?R1（保藏号为ATCC13939）培育物的水溶液；水溶液中抗辐射菌D.radiodurans?R1培育物的质量含量为0.6%～1%。
【专利说明】具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂
【技术领域】
[0001]本发明属于贮藏保鲜【技术领域】，涉及一种具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]中国是世界养蚕业的发源地，具有五千年的悠久历史。栽桑养蚕曾经是广大农村经济发展的支柱和农民脱贫致富的重要手段；但随着农村经济的快速发展、第二、三产业的迅猛崛起，大量农村劳动力涌入工商企业，传统的劳动密集型产业-养蚕业也受到巨大冲击，迫切需要一种少回育省力化养蚕技术。但少回育养蚕技术引起桑叶长时间暴露在外界，使桑叶的失水率增加，从而影响家蚕对萎凋桑叶的食用和营养的消化吸收。所以在少回育、工厂化养蚕过程中减少桑叶失水率、保持桑叶长久新鲜就成了一个亟待解决的问题。虽通过薄膜覆盖可以一定程度上减少桑叶的水分蒸发，但减少的程度有限，而且每次给桑除沙等作业都要去掉和覆盖薄膜，费时费力；也有添加化学药剂进行桑叶保鲜的(专利号为CN1158939)，它主要由苹果酸、柠檬酸、山梨酸、盐酸、植酸、脱水醋酸、Na2S03、NaH2P04、K2S2O4, NaCl、丙二醇、琼脂、卡拉胶、明胶、畜用抗菌素等化学物质组成，该方法虽某种程度上可减少桑叶水分的蒸发，但对环境有一定的污染、对家蚕的生长发育也有一定的副作用，而且功能单一。
[0003]保藏号为ATCC N0.13939的抗福射菌D.radiodurans Rl由美国国家菌种保藏中心提供，该菌株在申请号为200910098256.X的发明《一种耐辐射球菌抗逆相关基因及其应用》中有明确告知；即，为来源于耐辐射球菌菌株(DEINOCOCXUSRADIODURANS Rl, ATCCN0.13939，购自美国菌种保藏中心)。
【发明内容】
[0004]本发明要解决的技术问题是提供一种具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂。
[0005]为了解决上述技术问题，本发明提供一种具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂，该桑叶贮藏保鲜剂由试剂A和试剂B按照1:1的体积比混合而得；
[0006]每L试剂A由以下质量的成分组成:
[0007]维生素C40?60g、NaC15g、盐酸诺氟沙星lOOOmg、壳聚糖10?30g、乙酸30?50g、朽1檬酸20?40g、鹿糖40?60g,余量为水(例如为蒸懼水)；
[0008]所述试剂B为抗福射菌D.radiodurans Rl培育物的水溶液；所述水溶液中抗福射菌D.radiodurans Rl培育物的质量含量为0.6%?1%。
[0009]作为本发明的具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂的改进:抗辐射菌
D.radiodurans Rl培育物的制备方法为包括以下步骤:
[0010]I)、将保藏号为ATCC N0.13939的抗辐射菌D.radiodurans Rl (由美国国家菌种保藏中心提供)菌液按5% (体积比)的接种量接入脱脂大豆培养基中进行发酵培养，于29.5?30.5°C培养58?62h (较佳为30°C培养60h)；[0011]2)、将步骤I)所得的发酵培养产物于5000?6000rpm离心4.5?5.5min(较佳为于5500rpm离心5min),去掉上清液,将所得的抗福射菌湿菌体均勻地铺成0.25?0.35cm(较佳为0.3cm)的厚度，在频率600MHz，电场强度8000V / m的条件下处理38?42秒(较佳为40秒)，使细胞破碎，从而得到经破碎的抗辐射菌；
[0012]3)、将所述经破碎的抗辐射菌置于物料盘中，放进冷风干燥机内进行冷风干燥，冷却温度控制在20?25°C，风速1.5?2.0m / S，相对湿度10?15%，干燥至含水量6?8%,得到抗福射菌D.radiodurans Rl培育物。
[0013]作为本发明的具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂的进一步改进:
[0014]脱脂大豆培养基由以下成分组成:细度为60-80目的脱脂大豆粉20g，葡萄糖2g，硝酸钠2g，酵母膏lg，加蒸馏水至lOOOmL。使用前进行常规的灭菌处理(于1.1个大气压，121°C下灭菌 20min)。
[0015]备注说明:
[0016]本发明中所使用的抗福射菌D.radiodurans Rl (由美国国家菌种保藏中心提供，保藏号为ATCC N0.13939)即为来源于耐辐射球菌菌株(DEINOCOCCUSRADIODURANS Rl, ATCCN0.13939，购自美国菌种保藏中心)，该菌株在申请号为200910098256.X的发明《一种耐辐射球菌抗逆相关基因及其应用》中有明确告知。
[0017]本发明与现有技术相比，具有以下优点和效果:
[0018](I)原料易得，制作方法简单，方便操作，价格低廉；
[0019](2)利用壳聚糖等有机物质制成的桑叶贮藏保鲜剂，喷洒在桑叶表面形成一层保护膜，能防止或减少桑叶水分的蒸发，从而保持桑叶长久新鲜，在常温条件下比未处理的新鲜桑叶可减少桑叶水分的蒸发47.01?55.93%，有效延长了桑叶保鲜时间，解决了家蚕一天一回育或一天二回育的省力化及工厂化养蚕技术过程中桑叶失水更多的技术难题；
[0020](3)改变了现有的保鲜剂只能使桑叶保鲜的单一效果，通过喷洒桑叶贮藏保鲜剂在保持桑叶长久新鲜的同时，还可显著提高蚕茧量及茧层量，全茧量提高6.9%?13.1%,茧层量提高5.2%?12.4% ；
[0021](4)对桑蚕无毒害,对环境无污染。
[0022]综上所述，本发明的具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂，既可以减少桑叶的失水率、保持桑叶的长时间新鲜；同时使家蚕食用喷洒该贮藏保鲜剂的桑叶后，具有增加蚕茧的产质量的作用。使用本发明的保鲜剂能使家蚕一天一回育或一天二回育的省力化养蚕技术变得可能，具有较显著的经济效益和社会效益，市场前景广阔。
[0023]本发明的具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂实际使用时，用喷雾器均匀喷洒在桑叶的叶面叶背两面，以喷湿而不滴为宜。
【具体实施方式】
[0024]下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此。
[0025]实施例1、一种蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂的制备方法，包括以下步骤:
[0026]I)、配制试剂A:
[0027]每L试剂A由以下质量的成分组成:[0028]维生素C40g、NaC15g、盐酸诺氟沙星lOOOmg、壳聚糖10g、乙酸30g、柠檬酸20g、蔗糖40g，余量为水(蒸馏水)。
[0029]上述试剂A的制备方法为:取IOg的壳聚糖，溶于含30g乙酸的500ml蒸馏水中，磁力搅拌至壳聚糖完全溶解，得到壳聚糖一乙酸溶液；然后在上述壳聚糖一乙酸溶液中添加朽1檬酸20g、盐酸诺氟沙星lOOOmg、维生素C40g、NaC15g、鹿糖40g,蒸懼水定容至1000ml。
[0030]2)、配制试剂B:
[0031]先制备抗福射菌D.radiodurans Rl培育物,制备方法为依次进行以下步骤:
[0032]①、将活化的抗福射菌D.radiodurans Rl (由美国国家菌种保藏中心提供,保藏号为ATCC N0.13939)菌液按5% (体积比)的接种量接入脱脂大豆配培养基(脱脂大豆培养基配制:每IOOOmL培养基中组成为:细度为60-80目的脱脂大豆粉20g，葡萄糖2g，硝酸钠2g，酵母膏lg，加蒸馏水至IOOOmL,于1.1个大气压，121°C下灭菌20min)中进行发酵培养，30°C 培养 60h ；
[0033]②、将步骤I)所得的发酵培养产物于5500rpm离心5min，去掉上清液，将所得的抗辐射菌湿菌体均匀地铺成约0.3cm的厚度，在频率600MHz，电场强度8000V / m的条件下处理40秒，使细胞破碎，从而得到经破碎的抗辐射菌；
[0034]③、将上述经破碎的抗辐射菌置于物料盘中，放进冷风干燥机内进行冷风干燥，冷却温度控制在20-25°C，风速1.5-2.0m / S，相对湿度10-15%，干燥至含水量6?8%，得到抗福射菌D.radiodurans Rl培育物。
[0035]然后,取上述福射菌D.radiodurans Rl培育物6g溶于994g蒸懼水中，搅拌至福射菌D.radiodurans Rl培育物溶解，得到辐射菌D.radiodurans Rl培育物质量含量为0.6%的试剂B。
[0036]3)、将试剂A和试剂B按照1:1的体积比均匀混合，即得本发明的具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂。
[0037]实施例2、一种蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂的制备方法，
[0038]I)、每L试剂A由以下质量的成分组成:
[0039]维生素C50g、NaC15g、盐酸诺氟沙星lOOOmg、壳聚糖20g、乙酸40g、柠檬酸30g、蔗糖50g，余量为水。
[0040]2)、取福射菌D.radiodurans Rl培育物8g溶于992g蒸懼水中，搅拌至福射菌
D.radiodurans Rl培育物溶解，得到福射菌D.radiodurans Rl培育物质量含量为0.8%的试剂B。
[0041]福射菌D.radiodurans Rl培育物的制备方法同实施例1。
[0042]3)、将试剂A和试剂B按照1:1的体积比均匀混合，即得本发明的具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂。
[0043]实施例3、一种蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂的制备方法，
[0044]I)、每L试剂A由以下质量的成分组成:
[0045]维生素C60g、NaC15g、盐酸诺氟沙星lOOOmg、壳聚糖30g、乙酸50g、朽1檬酸40g、鹿糖60g，余量为水。
[0046]2)、取福射菌D.radiodurans Rl培育物IOg溶于990g蒸懼水中，搅拌至福射菌
D.radiodurans Rl培育物溶解,得到福射菌D.radiodurans Rl培育物质量含量为1.0%的试剂B。
[0047]福射菌D.radiodurans Rl培育物的制备方法同实施例1。
[0048]3)、将试剂A和试剂B按照1:1的体积比均匀混合，即得本发明的具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂。
[0049]实验1、桑叶失水率及饲养效果:
[0050]利用上述实施例1~3得到的桑叶贮藏保鲜剂用喷雾器均匀喷洒在桑叶的叶面叶背两面，以喷湿而不滴为宜，所得的桑叶作为实验组I~3 ;
[0051]以蒸馏水喷洒(用喷雾器均匀喷洒在桑叶的叶面叶背两面，以喷湿而不滴为宜)桑叶作为对照(水)组；
[0052]以未喷洒的桑叶作为对照(空白)组；
[0053]以新鲜桑叶作为参照物；
[0054]喷洒6、12、18及24小时后，实验组I~3、对照(水)组、对照(空白)组的桑叶失水率如下表1所示；
[0055]表1、本发明桑叶贮藏保鲜剂对桑叶失水率的影响
【权利要求】
1.具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂，其特征是:所述桑叶贮藏保鲜剂由试剂A和试剂B按照1:1的体积比混合而得； 每L试剂A由以下质量的成分组成: 维生素C40?60g、NaC15g、盐酸诺氟沙星lOOOmg、壳聚糖10?30g、乙酸30?50g、朽1檬酸20?40g、鹿糖40?60g,余量为水； 所述试剂B为抗辐射菌D.radiodurans Rl培育物的水溶液；所述水溶液中抗辐射菌D.radiodurans Rl培育物的质量含量为0.6%?1%。
2.根据权利要求1所述的具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂，其特征是:所述抗辐射菌D.radiodurans Rl培育物的制备方法为包括以下步骤: 1)、将保藏号为ATCCN0.13939的抗辐射菌D.radiodurans Rl菌液按5%的接种量接入脱脂大豆培养基中进行发酵培养，于29.5?30.5°C培养58?62h ； 2)、将步骤I)所得的发酵培养产物于5000?6000rpm离心4.5?5.5min,去掉上清液，将所得的抗辐射菌湿菌体均匀地铺成0.25?0.35cm的厚度，在频率600MHz，电场强度8000V / m的条件下处理38?42秒，使细胞破碎，从而得到经破碎的抗辐射菌； 3)、将所述经破碎的抗辐射菌置于物料盘中，放进冷风干燥机内进行冷风干燥，冷却温度控制在20?25°C，风速1.5?2.0m / S，相对湿度10?15%，干燥至含水量6?8%，得到抗福射菌D.radiodurans Rl培育物。
3.根据权利要求1所述的具有蚕茧增产作用的桑叶贮藏保鲜剂，其特征是: 所述脱脂大豆培养基由以下成分组成:细度为60-80目的脱脂大豆粉20g，葡萄糖2g，硝酸钠2g,酵母膏Ig,加蒸懼水至lOOOmL。
【文档编号】A23K3/03GK103719642SQ201310732797
【公开日】2014年4月16日 申请日期:2013年12月26日 优先权日:2013年12月26日
【发明者】屠振力 申请人:浙江大学