一种紫皮石斛壮苗生根的培养基的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种紫皮石斛壮苗生根的培养基，属于植物组织培养【技术领域】。其组分为：KNO3、NH4NO3、KH2PO4、MgSO4·7H2O、CaCl2·2H2O、KI、H3BO3、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、Na2·EDTA、FeSO4·7H2O、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、NAA、蔗糖、琼脂、香蕉泥、活性炭。本发明的有益效果是：利用该培养基培养出的紫皮石斛生根苗，生根壮苗时间短，苗生长至5cm左右，根生长至8cm左右，仅需28-35天。
【专利说明】一种紫皮石斛壮苗生根的培养基
【技术领域】
[0001]本发明属于植物组织培养【技术领域】，具体涉及一种紫皮石斛壮苗生根的培养基。【背景技术】
[0002]紫皮石斛是兰科植物以齿瓣石斛为代表的一类兰科石斛属植物(Dendrobiumdevonianum Paxt)，因其茎呈紫色，故称为紫皮石斛、紫皮兰。《神农本草经》记载:“石斛，一名林兰。味甘，平，无毒。主伤中，除痹，补五脏厚肠胃，轻身延年”。《本草纲目》称石斛有“强阴益精、厚肠胃、补内不足、轻身延年”之功效。
[0003]紫皮石斛的人工栽培始于20世纪90年代，于2006年形成分散的小规模种植，近几年随着其显著的药用保健功效日益得到了广大消费者的青睐，价格不断攀升，种植规模迅猛发展，经济效益可观。
[0004]然而，现有的培养基在培养紫皮石斛分化苗时，生根壮苗时间长，从而影响了紫皮石斛的种植规模，无法保障紫皮石斛的市场供应量。因此，怎样有效缩短紫皮石斛的生根壮苗时间成为了亟需解决的技术问题。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种能大大缩短生根壮苗时间的紫皮石斛壮苗生根的培养基。
[0006]本发明所采取的技术方案是一种紫皮石斛壮苗生根的培养基，其组分及其含量为:KN03950 ~2200mg/L、NH4N03750 ~1850mg/L、KH2P0477 ~195mg/L、MgSO4.7H20150 ~450mg/L、CaCl2.2H20200 ~500mg/L、KI0.45 ~1.25mg/L、H3B033.75 ~9.25mg/L、MnSO4 *4H2013.5 ~32.5mg/L、ZnSO4 *7H205.2 ~12.9mg/L,Na2MoO4 *2H200.15 ~0.35mg/L、CuSO4.5H200.01 ~0.035mg/L、CoCl2.6H200.01 ~0.035mg/L、Na2.EDTA22.5 ~55mg/L、FeSO4.7Η2018 ~38mg/L、肌醇 50 ~300mg/L、甘氨酸 1.2 ~3mg/L、盐酸硫胺素 0.3 ~0.7mg/L、盐酸吡哆醇 0.3 ~0.7mg/L、烟酸 0.3 ~0.7mg/L、ΝΑΑ0.1 ~1.5mg/L、蔗糖 18000 ~55000mg/L、琼脂 2500 ~8000mg/L、香蕉泥 30000 ~150000mg/L、活性炭 500 ~2000mg/L。
[0007]优选的，其组分及其含量为:KN031285~1710mg/L、NH4NO3IlOO ~1485mg/L、KH2PO4115 ~155mg/L、MgSO4.7H20250 ~333mg/L、CaCl2.2H20305 ~385mg/L、KI0.75 ~
1.0mg/L、Η3Β035.8 ~7.5mg/L、MnSO4.4H2020 ~25mg/L、ZnSO4.7H207.5 ~10mg/L、Na2MoO4.2H200.2 ~0.3mg/L、CuSO4.5H200.02 ~0.03mg/L、CoCl2.6H200.02 ~0.03mg/L、Na2 ?EDTA35 ~45mg/L,FeSO4.7Η2025 ~35mg/L、肌醇 90 ~200mg/L、甘氨酸 1.5 ~2.5mg/L、盐酸硫胺素0.4~0.6mg/L、盐酸批卩多醇0.4~0.6mg/L、烟酸0.4~0.6mg/L、NAA0.5~1.0mg/L、蔗糖 20000 ~50000mg/L、琼脂 3000 ~6000mg/L、香蕉泥 50000 ~120000mg/L、活性炭 800 ~1500mg/L。
[0008]特别优选的，其组分及其含量为:KN031370mg/L、NH4NO31235mg/L、KH2PO4120mg/L、MgSO4.7H20300mg/L、CaCl2.2H20310mg/L、KI0.8mg/L、H3B037.0mg/L、MnSO4.4H2024.5mg/L、ZnSO4.7H208.5mg/L、Na2MoO4.2H200.25mg/L、CuSO4.5H200.025mg/L、CoCl2.6H200.025mg/L、Na2.EDTA38mg/L、FeSO4.7H2028mg/L、肌醇 150mg/L、甘氨酸 2mg/L、盐酸硫胺素 0.5mg/L、盐酸批P多醇 0.5mg/L、烟酸 0.5mg/L、NAA0.5mg/L、鹿糖 30000mg/L、琼脂 4500mg/L、香蕉泥90000mg/L、活性炭 1100mg/L。
[0009]本发明还提供一种所述培养基培养紫皮石斛分化苗的方法，将紫皮石斛分化苗接种于所述培养基中，置于光照强度为2000~2500LUX，温度为18~25°C的环境下进行培养，培养28~35天，即得。
[0010]优选的，所述光照的时间为每天12小时~16小时。特别优选的，每天的光照时间为14小时。
[0011]优选的，在所述紫皮石斛分化苗接种前，将所述培养基在121°C的条件下灭菌20分钟。
[0012]本发明的有益效果在于:应用本培养基培养出的紫皮石斛生根苗，叶色绿，茎粗壮，不易倒伏，根数多，具有较强的同步性，其中5cm高的紫皮石斛苗占70%以上。生根壮苗时间短，苗生长至5cm左右，根生长至8cm左右，仅需28-35天，比前人研究的45-50天生根，周期缩短三分之一左右，适合工厂化育苗操作。同时本培养基较其他传统培养基的配方上，用药品量少，节约生产成本。
【具体实施方式】
[0013]为使本领域技术人员详细了解本发明的生产工艺和技术效果，下面以具体的生产实例来进一步介绍本发明的应用和技术效果。
[0014]实施例1:
[0015]称取适量的KN03、NH4N03、KH2PO4、MgSO4.7H20、CaCl2.2H20、K1、H3B03、MnSO4.4Η20、ZnSO4.7Η20、Na2MoO4.2Η20、CuSO4.5Η20、CoCl2.6Η20、Na2.EDTA、FeSO4.7Η20、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、ΝΑΑ、蔗糖、琼脂、香蕉泥和活性炭，混匀，得pH为5的培养基。
[0016]且该培养基中各组分的含量为:KN031370mg/L、NH4NO31235mg/L、KH2PO4120mg/L、MgSO4.7H20300mg/L、CaCl2.2H20310mg/L、KI0.8mg/L、H3B037.0mg/L、MnSO4.4H2024.5mg/L、ZnSO4.7H208.5mg/L、Na2MoO4.2H200.25mg/L、CuSO4.5H200.025mg/L、CoCl2.6H200.025mg/L、Na2.EDTA38mg/L、FeSO4.7H2028mg/L、肌醇 150mg/L、甘氨酸 2mg/L、盐酸硫胺素 0.5mg/L、盐酸批P多醇 0.5mg/L、烟酸 0.5mg/L、NAA0.5mg/L、鹿糖 30000mg/L、琼脂 4500mg/L、香蕉泥90000mg/L、活性炭 1100mg/L。
[0017]实施例2:
[0018]称取适量的KN03、NH4N03、KH2PO4、MgSO4.7H20、CaCl2.2H20、K1、H3B03、MnSO4.4H20、ZnSO4.7H20、Na2MoO4.2H20、CuSO4.5H20、CoCl2.6H20、Na2.EDTA、FeSO4.7H20、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、NAA、蔗糖、琼脂、香蕉泥和活性炭，混匀，得pH为6的培养基。
[0019]且该培养基中各组分的含量为:KN032200mg/L、NH4N031850mg/L、KH2P04195mg/L、MgSO4.7H20150mg/L、CaCl2.2H20200mg/L、KI0.45mg/L、H3B033.75mg/L、MnSO4.4H2032.5mg/L、ZnSO4.7H2012.9mg/L、Na2MoO4.2H200.35mg/L、CuSO4.5H200.035mg/UCoCl2.6H200.035mg/L、Na2.EDTA55mg/L、FeSO4.7H2038mg/L、肌醇 300mg/L、甘氨酸 3mg/L、盐酸硫胺素 0.7mg/L、盐酸批P多醇 0.7mg/L、烟酸 0.7mg/L、NAA1.5mg/L、鹿糖 55000mg/L、琼脂 8000mg/L、香蕉泥 150000mg/L、活性炭 2000mg/L。
[0020]实施例3:
[0021]称取适量的KN03、NH4N03、KH2PO4、MgSO4.7H20、CaCl2.2H20、K1、H3B03、MnSO4.4H20、ZnSO4.7H20、Na2MoO4.2H20、CuSO4.5H20、CoCl2.6H20、Na2.EDTA、FeSO4.7H20、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、NAA、蔗糖、琼脂、香蕉泥和活性炭，混匀，得pH为5.5的
培养基。
[0022]且该培养基中各组分的含量为:KN03950mg/L、NH4N03750mg/L、KH2P0477mg/L、MgSO4.7H20450mg/L、CaCl2.2H20500mg/L、KIl.25mg/L、H3B039.25mg/L、MnSO4.4H2013.5mg/UZnSO4.7H205.2mg/L、Na2MoO4.2H200.15mg/L、CuSO4.5H200.01mg/L、CoCl2.6H200.01mg/L、Na2 ?EDTA22.5mg/L、FeS04.7Η2018π^/1、肌醇 50mg/L、甘氨酸 1.2mg/L、盐酸硫胺素 0.3mg/L、盐酸批P多醇 0.3mg/L、烟酸 0.3mg/L、NAA0.lmg/L、鹿糖 18000mg/L、琼脂 2500mg/L、香蕉泥30000mg/L、活性炭 500mg/L。
[0023]实施例4: [0024]称取适量的KNO3、NH4NO3、KH2PO4、MgSO4.7H20、CaCl2.2H20、K1、H3BO3^MnSO4.4H20、ZnSO4.7H20、Na2MoO4.2H20、CuSO4.5H20、CoCl2.6H20、Na2.EDTA、FeSO4.7H20、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、NAA、蔗糖、琼脂、香蕉泥和活性炭，混匀，得pH为5.2的
培养基。
[0025]且该培养基中各组分的含量为:KN031285mg/L、NH4NO3IIOOmg/L、KH2PO4115mg/L、MgSO4.7H20250mg/L、CaCl2.2H20305mg/L、KI0.75mg/L、Η3Β035.8mg/L、MnSO4.4H2020mg/L、ZnSO4.7H207.5mg/L、Na2MoO4.2H200.2mg/L、CuSO4.5H200.02mg/L、CoCl2.6H200.02mg/L、Na2.EDTA35mg/L、FeSO4.7H2025mg/L、肌醇 90mg/L、甘氨酸 1.5mg/L、盐酸硫胺素 0.4mg/L、盐酸批B多醇 0.4mg/L、烟酸 0.4mg/L、NAA0.5mg/L、鹿糖 20000mg/L、琼脂 3000mg/L、香蕉泥50000mg/L、活性炭 800mg/L。
[0026]实施例5:
[0027]称取适量的KN03、NH4N03、KH2PO4、MgSO4.7H20、CaCl2.2H20、K1、H3B03、MnSO4.4H20、ZnSO4.7H20、Na2MoO4.2H20、CuSO4.5H20、CoCl2.6H20、Na2.EDTA、FeSO4.7H20、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、NAA、蔗糖、琼脂、香蕉泥和活性炭，混匀，得pH为5.8的
培养基。
[0028]且该培养基中各组分的含量为:KN031710mg/L、NH4N031485mg/L、KH2P04155mg/L、MgSO4.7H20333mg/L、CaCl2.2H20385mg/L、KIl.0mg/L、H3B037.5mg/L、MnSO4.4H2025mg/L、ZnSO4.7H2010mg/L、Na2MoO4.2H200.3mg/L、CuSO4.5H200.03mg/L、CoCl2.6H200.03mg/L、Na2.EDTA45mg/L、FeSO4.7H2035mg/L、肌醇 200mg/L、甘氨酸 2.5mg/L、盐酸硫胺素 0.6mg/L、盐酸批P多醇 0.6mg/L、烟酸 0.6mg/L、NAAl.0mg/L、鹿糖 50000mg/L、琼脂 6000mg/L、香蕉泥120000mg/L、活性炭 1500mg/L。
[0029]为验证本发明培养基的技术效果，将上述各实施例所得的培养基在121°C的条件下灭菌20分钟，然后将紫皮石斛分化苗接种于培养基中，置于光照强度为2000~2500LUX，温度为18~25°C的环境下进行培养，培养28~35天，光照的时间为每天12小时~16小时，即可得到苗生长至5cm左右，根生长至8cm左右的紫皮石斛生根苗。
[0030]相比现有的培养基或不在本发明申请所要求保护范围的组分及其含量内的技术方案，应用本发明培养基培养出的紫皮石斛生根苗，叶色绿，茎粗壮，不易倒伏，根数多，具有较强的同步性，其中5cm高的紫皮石斛苗占70%以上。生根壮苗时间短，苗生长至5cm左右，根生长至8cm左右，仅需28-35天，比现有研究的45-50天生根，周期缩短三分之一左右，适合工厂化育苗操作。同时本培养基较其他传统培养基的配方上，用药品量少，节约生产成本。
[0031]最后应说明的是，以上实施例仅用以说明而非限制本发明的技术方案，尽管参照上述实施例对本发明进行了详细说明，本领域技术人员应当理解，依然可以对本发明进行修改或者等同替换，而不脱离本发明的精神和范围的任何修改或局部替换，其均应涵盖在本发明的权利要求范围中。
【权利要求】
1.一种紫皮石斛壮苗生根的培养基，其特征在于:其组分及其含量为:KN039 50~2200mg/L、NH4N03750 ~1850mg/L、KH2P0477 ~195mg/L、MgSO4.7H20150 ~450mg/L、CaCl2.2Η20200 ~500mg/L、K10.45 ~1.25mg/L、H3B033.75 ~9.25mg/L、MnS04.4Η2013.5 ~32.5mg/L、ZnS04.7Η205.2 ~12.9mg/L、Na2MoO4.2Η200.15 ~0.35mg/L、CuSO4.5Η200.01 ~0.035mg/L、CoCl2.6H200.01 ~0.035mg/L、Na2.EDTA22.5 ~55mg/L、FeSO4.7H2018 ~38mg/L、肌醇50~300mg/L、甘氨酸1.2~3mg/L、盐酸硫胺素0.3~0.7mg/L、盐酸批P多醇0.3 ~0.7mg/L、烟酸 0.3 ~0.7mg/L、 NAA0.1 ~1.5mg/L、蔗糖 18000 ~55000mg/L、琼脂2500 ~8000mg/L、香蕉泥 30000 ~150000mg/L、活性炭 500 ~2000mg/L。
2.根据权利要求1所述的一种紫皮石斛壮苗生根的培养基，其特征在于:其组分及其含量为:KN031285 ~1710mg/L、NH4NO3IlOO ~1485mg/L、KH2PO4115 ~155mg/L、MgSO4.7H20250 ~333mg/L、CaCl2.2H20305 ~385mg/L、KI0.75 ~1.0mg/L、Η3Β035.8 ~7.5mg/L、MnSO4.4H2020 ~25mg/L、ZnSO4.7Η207.5 ~I Omg/L、Na2MoO4.2Η200.2 ~0.3mg/L、CuSO4.5H200.02 ~0.03mg/L、CoCl2.6H200.02 ~0.03mg/L、Na2.EDTA35 ~45mg/L、FeSO4.7H2025 ~35mg/L、肌醇 90 ~200mg/L、甘氨酸 1.5 ~2.5mg/L、盐酸硫胺素 0.4 ~0.6mg/L、盐酸批 P多醇 0.4 ~0.6mg/L、烟酸 0.4 ~0.6mg/L、NAA0.5 ~1.0mg/L、鹿糖20000 ~50000mg/L、琼脂 3000 ~6000mg/L、香蕉泥 50000 ~120000mg/L、活性炭 800 ~1500mg/L。
3.根据权利要求2所述的一种紫皮石斛壮苗生根的培养基，其特征在于:其组分及其含量为:KN0313 70mg/L、NH4NO31235mg/L、KH2PO4120mg/L、MgSO4.7H20300mg/L、CaCl2.2H20310mg/L、K10.8mg/L、Η3Β037.0mg/L、MnSO4.4H2024.5mg/L、ZnSO4.7H208.5mg/L、Na2MoO4.2H200.25mg/L、CuSO4.5H200.025mg/L、CoCl2.6H200.025mg/L、Na2.EDTA38mg/L、FeSO4.7H2028mg/L、肌醇 150mg/L、甘氨酸 2mg/L、盐酸硫胺素 0.5mg/L、盐酸批P多醇 0.5mg/L、烟酸 0.5mg/L、NAA0.5mg/L、鹿糖 30000mg/L、琼脂 4500mg/L、香蕉泥 90000mg/L、活性炭1100mg/L。
4.一种利用权利要求1-3任一项所述培养基培养紫皮石斛分化苗的方法，其特征在于:将紫皮石斛分化苗接种于所述培养基中，置于光照强度为2000~2500LUX，温度为18~25°C的环境下进行培养，培养28~35天，即得。
5.根据权利要求4所述培养基培养紫皮石斛分化苗的方法，其特征在于:所述光照的时间为每天12小时~16小时。
6.根据权利要求5所述培养基培养紫皮石斛分化苗的方法，其特征在于:在所述紫皮石斛分化苗接种前，将所述培养基在121°C的条件下灭菌20分钟。
【文档编号】A01H4/00GK103891615SQ201410119250
【公开日】2014年7月2日 申请日期:2014年3月27日 优先权日:2014年3月27日
【发明者】李旦, 陈远书, 王俊, 潘瑶 申请人:西南林业大学