一种毛囊单位保存培养液的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种毛囊单位保存培养液，由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、DMEM培养液、人血清白蛋白和表皮生长因子组成；所述保存培养液中胰岛素的浓度为5μg/mL～15μg/mL，氢化可的松的浓度为0.2μg/mL～0.6μg/mL，庆大霉素的浓度为30U/mL～50U/mL，人血清白蛋白的浓度为5μg/mL～15μg/mL，表皮生长因子的浓度为0.1μg/mL～0.3μg/mL。本发明的保存培养液提高了毛囊单位的成活率，有利于毛囊的持续、稳定生长延长，并对局部受损毛囊的增值再生具有促进作用，效果良好，明显优于传统培养液。
【专利说明】一种毛囊单位保存培养液
【技术领域】
[0001] 本发明属于人体毛发移植【技术领域】，具体涉及一种毛囊单位保存培养液。
【背景技术】
[0002] 毛发移植术中毛囊单位移植术被临床广泛应用治疗各种原因的秃发。相对于其他 方法，该技术可以获得最佳的美学效果。目前毛发移植术过程中存在毛囊分离浪费、因毛囊 分离而对手术时间的限制等技术瓶颈。面对秃发较多的患者时，需要在最短的手术时间内 显微分离大量的毛囊单位，且分离出的毛囊单位也会因有时间限制而加大损伤。由此导致 手术时间延长，后期局麻效果也越来越差，患者常因无法忍受而放弃手术。
【发明内容】
[0003] 本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供一种毛囊单位保 存培养液。该保存培养液提高了毛囊单位的成活率，有利于毛囊的持续、稳定生长延长，并 对局部受损毛囊的增值再生具有促进作用，效果良好，明显优于传统培养液。
[0004] 为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种毛囊单位保存培养液，其特 征在于，由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、DMHM培养液、人血清白蛋白和表皮生长因子组 成；所述保存培养液中胰岛素的浓度为5 μ g/mL?15 μ g/mL，氢化可的松的浓度为0. 2 μ g/ mL?0. 6μ g/mL，庆大霉素的浓度为30U/mL?50U/mL，人血清白蛋白的浓度为5μ g/mL? 15 μ g/mL，表皮生长因子的浓度为0. 1 μ g/mL?0. 3 μ g/mL。
[0005] 上述的一种毛囊单位保存培养液，其特征在于，所述保存培养液中胰岛素的浓度 为8 μ g/mL?12 μ g/mL,氢化可的松的浓度为0. 3 μ g/mL?0. 5 μ g/mL,庆大霉素的浓度 为35U/mL?45U/mL，人血清白蛋白的浓度为8 μ g/mL?12 μ g/mL，表皮生长因子的浓度为 0· 15 μ g/mL ?25 μ g/mL。
[0006] 上述的一种毛囊单位保存培养液，其特征在于，所述保存培养液中胰岛素的浓度 为10μ g/mL，氢化可的松的浓度为0. 4μ g/mL，庆大霉素的浓度为40U/mL，人血清白蛋白的 浓度为10 μ g/mL，表皮生长因子的浓度为0. 2 μ g/mL。
[0007] 上述的一种毛囊单位保存培养液，其特征在于，所述DMEM培养液为高糖型DMEM培 养液。
[0008] 本发明与现有技术相比具有以下优点：
[0009] 1、本发明的保存培养液能够很好的保存培养毛囊单位，提高了毛囊单位的成活 率，有利于毛囊的持续、稳定生长延长，并对局部受损毛囊的增值再生具有促进作用，效果 良好，明显优于传统培养液。
[0010] 2、采用本发明的保存培养液保存培养毛囊单位，毛囊单位的生长速度明显加快， 平均生长天数延长至14天以上，最终生长长度可达2. 339±0. 224mm以上，减小了由于保存 带来的毛囊单位的损伤，避免了由此导致的手术时间延长，大大减轻了患者的痛苦。
[0011] 下面通过实施例对本发明的技术方案作进一步的详细描述。
【具体实施方式】
[0012] 实施例1
[0013] 本实施例的毛囊单位保存培养液，由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、DMEM培养液、 人血清白蛋白和表皮生长因子组成；所述保存培养液中胰岛素的浓度为5yg/mL，氢化可 的松的浓度为〇. 2μ g/mL，庆大霉素的浓度为50U/mL，人血清白蛋白的浓度为15μ g/mL，表 皮生长因子的浓度为0. 1 μ g/mL。
[0014] 本实施例的毛囊单位保存培养液的制备方法为：在无菌操作台上，将胰岛素、氢化 可的松、庆大霉素、人血清白蛋白和表皮生长因子加入DMHM培养液中，混合均匀后置于4°C 下储存备用。
[0015] 实施例2
[0016] 本实施例的毛囊单位保存培养液，由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、高糖型DMEM 培养液、人血清白蛋白和表皮生长因子组成；所述保存培养液中胰岛素的浓度为15yg/ mL，氢化可的松的浓度为0. 6 μ g/mL，庆大霉素的浓度为30U/mL，人血清白蛋白的浓度为 5 μ g/mL，表皮生长因子的浓度为0. 3 μ g/mL。
[0017] 本实施例的毛囊单位保存培养液的制备方法与实施例1相同。
[0018] 实施例3
[0019] 本实施例的毛囊单位保存培养液，由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、高糖型DMEM 培养液、人血清白蛋白和表皮生长因子组成；所述保存培养液中胰岛素的浓度为i〇yg/ mL，氢化可的松的浓度为0. 4 μ g/mL，庆大霉素的浓度为40U/mL，人血清白蛋白的浓度为 10 μ g/mL，表皮生长因子的浓度为0. 2 μ g/mL。
[0020] 本实施例的毛囊单位保存培养液的制备方法与实施例1相同。
[0021] 实施例4
[0022] 本实施例的毛囊单位保存培养液，由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、DMEM培养液、 人血清白蛋白和表皮生长因子组成；所述保存培养液中胰岛素的浓度为12μ g/mL，氢化可 的松的浓度为〇. 5μ g/mL，庆大霉素的浓度为45U/mL，人血清白蛋白的浓度为12μ g/mL，表 皮生长因子的浓度为0. 25 μ g/mL。
[0023] 本实施例的毛囊单位保存培养液的制备方法与实施例1相同。
[0024] 实施例5
[0025] 本实施例的毛囊单位保存培养液，由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、高糖型DMEM 培养液、人血清白蛋白和表皮生长因子组成；所述保存培养液中胰岛素的浓度为8 μ g/mL， 氢化可的松的浓度为〇. 3μ g/mL，庆大霉素的浓度为35U/mL，人血清白蛋白的浓度为8μ g/ mL，表皮生长因子的浓度为0. 15 μ g/mL。
[0026] 本实施例的毛囊单位保存培养液的制备方法与实施例1相同。
[0027] 对比例1
[0028] 本对比例的毛囊单位保存培养液由胰岛素、氢化可的松和高糖型DMEM培养液组 成；所述保存培养液中胰岛素的浓度为10 μ g/mL，氢化可的松的浓度为0. 4 μ g/mL ;制备方 法与实施例1相同。
[0029] 对比例2
[0030] 本对比例的毛囊单位保存培养液由胰岛素、氢化可的松、人血清白蛋白和高糖 型DMEM培养液组成；所述保存培养液中胰岛素的浓度为10 μ g/mL，氢化可的松的浓度为 0. 4 μ g/mL，人血清白蛋白的浓度为10 μ g/mL ;制备方法与实施例1相同。
[0031] 对比例3
[0032] 本对比例的毛囊单位保存培养液为传统的Williams E培养基，WilliamsE 培养基（Gibco)加谷氨酰胺2mmol/L，Hepes2mmol/L，氢化可的松10ng/mL，牛胰岛素 (Sigma)lOy g/mL,转铁蛋白（Sigma)lOy g/mL,亚硒酸钠 10ng/mL,青霉素 100U/mL,链霉素 100 μ g/mL ;制备方法与实施例1相同。
[0033] 分别采用本发明实施例1?5以及对比例1?3的毛囊单位保存培养液保存毛囊 单位，方法为：毛囊单位来源于8?36岁不同年龄的男女患者，无菌环境下，在倒置显微镜 下选取结构完整的生长期毛囊单位，将毛囊单位小心转移至72孔板内，每孔1根，然后向每 孔加储存备用的保存培养液〇. 25mL，置于37°C，5% C02培养箱中悬浮培养，每3d换液1次， 每次换液50 %左右。
[0034] 观测指标：毛囊的生长速度及可生长天数：每天在装有目镜测微尺的倒置显微镜 下测量毛囊的长度直至毛囊不再延长，记录下毛囊的可生长天数和最终生长长度，并计算 出前5天的生长速度。
[0035] 生长速度只统计第1天即有明显生长（彡0. 1_)的毛囊单位，其它均视为非生长 期毛囊或有严重损伤的毛囊。结果见表1。
[0036] 表1不同保存培养液中毛囊单位的生长情况
[0037]
【权利要求】
1. 一种毛囊单位保存培养液，其特征在于，由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、DMEM培 养液、人血清白蛋白和表皮生长因子组成；所述保存培养液中胰岛素的浓度为5 μ g/mL? 15 μ g/mL，氢化可的松的浓度为0. 2 μ g/mL?0. 6 μ g/mL，庆大霉素的浓度为30U/mL? 50U/mL，人血清白蛋白的浓度为5 μ g/mL?15 μ g/mL，表皮生长因子的浓度为0. 1 μ g/mL? 0·3 μ g/mL。
2. 根据权利要求1所述的一种毛囊单位保存培养液，其特征在于，所述保存培养液中 胰岛素的浓度为8 μ g/mL?12 μ g/mL，氢化可的松的浓度为0. 3 μ g/mL?0. 5 μ g/mL，庆大 霉素的浓度为35U/mL?45U/mL，人血清白蛋白的浓度为8 μ g/mL?12 μ g/mL，表皮生长因 子的浓度为 〇. 15 μ g/mL ?0. 25 μ g/mL。
3. 根据权利要求2所述的一种毛囊单位保存培养液，其特征在于，所述保存培养液中 胰岛素的浓度为10 μ g/mL，氢化可的松的浓度为0. 4 μ g/mL，庆大霉素的浓度为40U/mL，人 血清白蛋白的浓度为10 μ g/mL，表皮生长因子的浓度为0. 2 μ g/mL。
4. 根据权利要求1、2或3所述的一种毛囊单位保存培养液，其特征在于，所述DMEM培 养液为高糖型DMEM培养液。
【文档编号】A01N1/02GK104195101SQ201410455208
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年9月9日 优先权日:2014年9月9日
【发明者】武斌, 杨喜明, 冯登超, 高东东, 李明, 薛宏斌 申请人:武斌, 杨喜明, 冯登超