本发明涉及一种撒瓦那柏继代培养方法，属于苗木繁殖技术领域。
背景技术：
撒瓦那柏(Chamaecyparis pisifera cv.aurea)又称为金色海岸线、金叶日本花柏、金叶撒瓦那扁柏。柏科扁柏属植物，属于常绿彩化针叶树中的黄化品种。树皮呈薄片为红褐色。鳞叶紧贴，小枝下垂，细长。3月开花，雌球花单生枝顶，雄球花椭圆形，雌雄同株，球果11月成熟，种子有棱角微扁卵圆形，种鳞盾形木质。温带及亚热带树种，性喜温暖湿润气候，喜光，抗寒耐旱耐半阴，喜深厚沙壤土，能适应平原环境。幼苗期每年的生长量较小，到郁闭后才会进入旺盛生长阶段，耐修剪。生长高度和蓬径均可达1.2m。原产日本，我国北京、南京、青岛、庐山、上海、杭州等地均有栽培，上海市绿化管理局推荐的新优植物品种名录中就有该种植物。观赏价值良好，可用于多种场合，是很稀少的色彩稳定的柏科植物。由于其繁殖速度缓慢，市场上还没有销售。
撒瓦那柏为新引进彩叶树种，这种植物可以进行播种、扦插和压条繁殖，但是都存在一定的不足：用种子繁殖容易变异，不利于遗传性状的保持；扦插繁殖寿命短、根系弱浅，生长势弱，且易发生偏冠现象，穗条来源少也是制约撒瓦那柏发展的一个因素；压条繁殖因一次性繁殖数量少不能进行规模化生产。
目前，已经有撒瓦纳柏初代组织培养方法的研究，但是仍存在一些缺陷，如诱导率低，更为严重的是增殖倍数和增殖代数差，无法满足要求。
技术实现要素：
发明目的：为了解决上述技术问题，本发明提供一种撒瓦那柏继代培养方法。
技术方案：为了实现上述发明目的，本发明公开了一种撒瓦那柏继代培养方法，包括以下步骤：
(1)培养基的配制：选择基础培养基，加入蔗糖和琼脂，再加入6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸，调节pH值，灭菌，即得；
(2)外植体处理：将启动培养中的撒瓦纳柏茎段枯黄部分剪去，清洗；
(3)接种培养：将步骤(2)所得外植体旧伤口剪去，插入步骤(1)所得培养基中，置于培养室内培养。
作为优选，所述步骤(1)中基础培养基为MS、1/2MS、B5或者WPM培养基。
作为另一种优选，所述步骤(1)中蔗糖和琼脂的浓度分别为30g/L和7g/L。
作为另一种优选，所述步骤(1)中6-苄氨基腺嘌呤的浓度为0.4-0.6mg/L，所述萘乙酸的浓度为0.04-0.06mg/L。
作为另一种优选，所述步骤(1)中pH值为5.8～6.0，灭菌条件为：121℃高压下灭菌25min。
作为另一种优选，所述步骤(2)中清洗方法为：先用洗衣粉浸泡干净后，再用纯水冲洗2小时。
作为另一种优选，所述步骤(3)中培养室的培养条件为：光照16h/d，光照度为2000lx，温度控制在(25±2)℃
技术效果：相对于现有技术，本发明方法不仅具有现有技术中组培繁殖的优势，还通过特定的培养基、激素种类和浓度，与其它处理方法相结合，能够(1)显著提高继代培养的增殖倍数达2倍以上；(2)增加继代培养的增殖代数，使原本可以增殖代的可达到10代以上，提高约100％以上；(3)使撒瓦纳柏的规模化、工厂化生产成为可能。
具体实施方式
实施例1
(1)培养基的配制：选择MS培养基作为基础培养基，加入蔗糖和琼脂，浓度分别为30g/L和7g/L，再加入6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸，其浓度分别为0.4mg/L和0.04mg/L，调节pH值为5.8～6.0，121℃高压下灭菌25min，即得；
(2)外植体处理：将启动培养中的撒瓦纳柏茎段枯黄部分剪去，先用洗衣粉浸泡干净后，再用纯水冲洗2小时；
(3)接种培养：将步骤(2)所得外植体旧伤口剪去，插入步骤(1)所得培养基中，置于培养室内培养，培养条件为：光照16h/d，光照度为2000lx，温度控制在(25±2)℃。
实施例2：
(1)培养基的配制：选择B5培养基作为基础培养基，加入蔗糖和琼脂，浓度分别为30g/L和7g/L，再加入6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸，其浓度分别为0.6mg/L和0.06mg/L，调节pH值为5.8～6.0，121℃高压下灭菌25min，即得；
(2)外植体处理：将启动培养中的撒瓦纳柏茎段枯黄部分剪去，先用洗衣粉浸泡 干净后，再用纯水冲洗2小时；
(3)接种培养：将步骤(2)所得外植体旧伤口剪去，插入步骤(1)所得培养基中，置于培养室内培养，培养条件为：光照16h/d，光照度为2000lx，温度控制在(25±2)℃。
实施例3：
(1)培养基的配制：选择1/2MS培养基作为基础培养基，加入蔗糖和琼脂，浓度分别为30g/L和7g/L，再加6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸，其浓度分别为0.5mg/L和0.05mg/L，调节pH值为5.8～6.0，121℃高压下灭菌25min，即得；
(2)外植体处理：将启动培养中的撒瓦纳柏茎段枯黄部分剪去，先用洗衣粉浸泡干净后，再用纯水冲洗2小时；
(3)接种培养：将步骤(2)所得外植体旧伤口剪去，插入步骤(1)所得培养基中，置于培养室内培养，培养条件为：光照16h/d，光照度为2000lx，温度控制在(25±2)℃。
实施例4：
(1)培养基的配制：选择1/2MS培养基作为基础培养基，加入蔗糖和琼脂，浓度分别为30g/L和7g/L，再加入6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸，其浓度分别为0.4mg/L和0.05mg/L，调节pH值为5.8～6.0，121℃高压下灭菌25min，即得；
(2)外植体处理：将启动培养中的撒瓦纳柏茎段枯黄部分剪去，先用洗衣粉浸泡干净后，再用纯水冲洗2小时；
(3)接种培养：将步骤(2)所得外植体旧伤口剪去，插入步骤(1)所得培养基中，置于培养室内培养，培养条件为：光照16h/d，光照度为2000lx，温度控制在(25±2)℃。
实施例5：
(1)培养基的配制：选择1/2MS培养基作为基础培养基，加入蔗糖和琼脂，浓度分别为30g/L和7g/L，再加入6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸，其浓度分别为0.5mg/L和0.06mg/L，调节pH值为5.8～6.0，121℃高压下灭菌25min，即得；
(2)外植体处理：将启动培养中的撒瓦纳柏茎段枯黄部分剪去，先用洗衣粉浸泡干净后，再用纯水冲洗2小时；
(3)接种培养：将步骤(2)所得外植体旧伤口剪去，插入步骤(1)所得培养基 中，置于培养室内培养，培养条件为：光照16h/d，光照度为2000lx，温度控制在(25±2)℃。
实验例
取同一批撒瓦那柏进行继代培养，分别设为对照1组、对照2组、实施例3、4和5组；
对照1组，为按照本发明实施例3方法，去掉6-苄氨基腺嘌呤所得方法进行培养；
对照2组，为按照本发明实施例3方法，去掉萘乙酸所得方法进行培养；
实施例3、4和5组分别按照本发明实施例3、4和5方法进行培养；
各组培养时间为1个月，考察最终诱导率、增殖倍数和增值代数，见下表1
表1各组培养结果考察
由上表1结果可得，相比较对照1组和对照2组，本发明继代培养方法，能够显著(1)提高继代培养的增殖倍数达2倍以上；(2)增加继代培养的增殖代数，使原本可以增殖代的可达到10代以上，提高约100％以上；(3)使撒瓦纳柏的规模化、工厂化生产成为可能。