本发明涉及紫薯脱毒领域，尤其涉及一种浙紫一号紫薯的脱毒快繁方法。
背景技术：
浙紫一号紫薯不同于普通甘薯，它不仅含有丰富的维生素、花色苷和硒等功能成分，更具有抗癌、抗菌、抗氧化、抗高血糖、抗突变体、增强记忆和改善肝功能等作用，是一种集药用、保健、食用为一体的天然食品。浙紫一号紫薯因其高效的健康价值，便捷的来源途径和低廉的成本受到广大消费者及研究人员的追捧与关注，是拥有极强应用价值及开发前景的经济作物。浙紫一号紫薯以薯块和茎蔓等营养器官进行无性繁殖，在引种、繁殖和生产过程中易造成紫薯病毒病的积累和蔓延，从而导致产量降低、品质下降、种性退化等问题。紫薯病毒病是世界性的病害，目前尚无特别有效的化学防治方法。浙紫一号紫薯在我国种质资源稀少，利用脱毒技术培育脱毒紫色甘薯，仍是防止或减少因病毒病感染造成损失的有效途径。现今一般的浙紫一号紫薯的脱毒快繁方法都是采用茎尖分生组织培养或者热处理脱毒快繁的方法，具有一定的效果，但是二者结合对浙紫一号紫薯脱毒快繁的处理方法很少见。
技术实现要素：
本发明旨在解决现有技术的不足，而提供一种浙紫一号紫薯的脱毒快繁方法。
本发明为实现上述目的，采用以下技术方案：
一种浙紫一号紫薯的脱毒快繁方法，具体步骤为：
(1)浙紫一号紫薯苗茎尖的剥离：
无菌条件下切取长为0.6-1cm的紫薯苗顶芽，去掉肉眼可见的叶片，然后在实体显微镜的观察下剥取长为0.5-0.9mm的茎尖分生组织圆锥体，接种到茎尖诱导培养基上，培养基装在100mm培养皿中，每皿容量为25ml，每个培养皿接种3个茎尖；
(2)浙紫一号紫薯苗茎尖的脱毒培养：
在人工气候箱中，对接种在培养基上的茎尖进行变温热处理培养，处理时间为31-32d；变温热处理培养包括温度较高的黑暗处理和温度较低的光照处理，温度较高的黑暗处理的条件为：温度为41-42℃，黑暗处理时间为17-20h/d；温度较低的光照处理的条件为：温度为23-24℃，光照处理时间为4-7h/d，光照强度为2500-2600lx；之后转入正常环境内培养，培养时间为60-65天；
(3)浙紫一号紫薯脱毒苗的快繁：
挑选茁壮的紫薯无菌苗，在无菌超净工作台上剪去试管苗上较大的叶片，切取大小一致、带有腋芽的无根节间为茎段，接种于扩繁培养基中；将接种好的培养基置于人工气候箱中培养至茎段基部冒出白根，培养的温度为25℃，光照处理时间为17-20h/d，光照强度为2600lx，黑暗处理时间为4-7h/d；选取生根的紫薯苗，在温室中炼苗5-7d，洗净根部培养基，移栽至砂质壤土中生长。
所述茎尖诱导培养基的组成为MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L，培养基的PH为5.7-5.75，需要在120℃高压蒸汽灭菌20min。
所述扩繁培养基的组成为MS+6-BA1.5mg/L+IAA0.2mg/L，培养基需要在120℃高压蒸汽灭菌20min。
本发明的有益效果是：本发明在浙紫一号紫薯脱毒中将茎尖培养与变温热处理结合起来，消除了长时间热处理对植物寄主的不良反应，缩短了脱毒培养时间，提高了脱毒效率，优化了紫色甘薯脱毒技术，建立了一套稳定、高效的浙紫一号紫薯苗脱毒快繁的技术体系。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明：
实施例1：
一种浙紫一号紫薯的脱毒快繁方法，具体步骤为：
(1)浙紫一号紫薯苗茎尖的剥离：
无菌条件下切取长为0.6cm的紫薯苗顶芽，去掉肉眼可见的叶片，然后在实体显微镜的观察下剥取长为0.5mm的茎尖分生组织圆锥体，接种到茎尖诱导培养基上，培养基装在100mm培养皿中，每皿容量为25ml，每个培养皿接种3个茎尖；
(2)浙紫一号紫薯苗茎尖的脱毒培养：
在人工气候箱中，对接种在培养基上的茎尖进行变温热处理培养，处理时间为31d；变温热处理培养包括温度较高的黑暗处理和温度较低的光照处理，温度较高的黑暗处理的条件为：温度为41℃，黑暗处理时间为17h/d；温度较低的光照处理的条件为：温度为23℃，光照处理时间为7h/d，光照强度为2500lx；之后转入正常环境内培养，培养时间为60天；
(3)浙紫一号紫薯脱毒苗的快繁：
挑选茁壮的紫薯无菌苗，在无菌超净工作台上剪去试管苗上较大的叶片，切取大小一致、带有腋芽的无根节间为茎段，接种于扩繁培养基中；将接种好的培养基置于人工气候箱中培养至茎段基部冒出白根，培养的温度为25℃，光照处理时间为17h/d，光照强度为2600lx，黑暗处理时间为7h/d；选取生根的紫薯苗，在温室中炼苗5d，洗净根部培养基，移栽至砂质壤土中生长。
所述茎尖诱导培养基的组成为MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L，培养基的PH为5.7，需要在120℃高压蒸汽灭菌20min。
所述扩繁培养基的组成为MS+6-BA1.5mg/L+IAA0.2mg/L，培养基需要在120℃高压蒸汽灭菌20min。
本发明在浙紫一号紫薯脱毒中将茎尖培养与变温热处理结合起来，消除了长时间热处理对植物寄主的不良反应，缩短了脱毒培养时间，提高了脱毒效率，优化了紫色甘薯脱毒技术，建立了一套稳定、高效的浙紫一号紫薯苗脱毒快繁的技术体系。
实施例2：
一种浙紫一号紫薯的脱毒快繁方法，具体步骤为：
(1)浙紫一号紫薯苗茎尖的剥离：
无菌条件下切取长为1cm的紫薯苗顶芽，去掉肉眼可见的叶片，然后在实体显微镜的观察下剥取长为0.9mm的茎尖分生组织圆锥体，接种到茎尖诱导培养基上，培养基装在100mm培养皿中，每皿容量为25ml，每个培养皿接种3个茎尖；
(2)浙紫一号紫薯苗茎尖的脱毒培养：
在人工气候箱中，对接种在培养基上的茎尖进行变温热处理培养，处理时间为32d；变温热处理培养包括温度较高的黑暗处理和温度较低的光照处理，温度较高的黑暗处理的条件为：温度为42℃，黑暗处理时间为20h/d；温度较低的光照处理的条件为：温度为24℃，光照处理时间为4h/d，光照强度为2600lx；之后转入正常环境内培养，培养时间为65天；
(3)浙紫一号紫薯脱毒苗的快繁：
挑选茁壮的紫薯无菌苗，在无菌超净工作台上剪去试管苗上较大的叶片，切取大小一致、带有腋芽的无根节间为茎段，接种于扩繁培养基中；将接种好的培养基置于人工气候箱中培养至茎段基部冒出白根，培养的温度为25℃，光照处理时间为20h/d，光照强度为2600lx，黑暗处理时间为4h/d；选取生根的紫薯苗，在温室中炼苗7d，洗净根部培养基，移栽至砂质壤土中生长。
所述茎尖诱导培养基的组成为MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L，培养基的PH为5.75，需要在120℃高压蒸汽灭菌20min。
所述扩繁培养基的组成为MS+6-BA1.5mg/L+IAA0.2mg/L，培养基需要在120℃高压蒸汽灭菌20min。
本发明在浙紫一号紫薯脱毒中将茎尖培养与变温热处理结合起来，消除了长时间热处理对植物寄主的不良反应，缩短了脱毒培养时间，提高了脱毒效率，优化了紫色甘薯脱毒技术，建立了一套稳定、高效的浙紫一号紫薯苗脱毒快繁的技术体系。
实施例3：
一种浙紫一号紫薯的脱毒快繁方法，具体步骤为：
(1)浙紫一号紫薯苗茎尖的剥离：
无菌条件下切取长为0.8cm的紫薯苗顶芽，去掉肉眼可见的叶片，然后在实体显微镜的观察下剥取长为0.7mm的茎尖分生组织圆锥体，接种到茎尖诱导培养基上，培养基装在100mm培养皿中，每皿容量为25ml，每个培养皿接种3个茎尖；
(2)浙紫一号紫薯苗茎尖的脱毒培养：
在人工气候箱中，对接种在培养基上的茎尖进行变温热处理培养，处理时间为31d；变温热处理培养包括温度较高的黑暗处理和温度较低的光照处理，温度较高的黑暗处理的条件为：温度为42℃，黑暗处理时间为18h/d；温度较低的光照处理的条件为：温度为23℃，光照处理时间为6h/d，光照强度为2500lx；之后转入正常环境内培养，培养时间为63天；
(3)浙紫一号紫薯脱毒苗的快繁：
挑选茁壮的紫薯无菌苗，在无菌超净工作台上剪去试管苗上较大的叶片，切取大小一致、带有腋芽的无根节间为茎段，接种于扩繁培养基中；将接种好的培养基置于人工气候箱中培养至茎段基部冒出白根，培养的温度为25℃，光照处理时间为18h/d，光照强度为2600lx，黑暗处理时间为6h/d；选取生根的紫薯苗，在温室中炼苗6d，洗净根部培养基，移栽至砂质壤土中生长。
所述茎尖诱导培养基的组成为MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L，培养基的PH为5.75，需要在120℃高压蒸汽灭菌20min。
所述扩繁培养基的组成为MS+6-BA1.5mg/L+IAA0.2mg/L，培养基需要在120℃高压蒸汽灭菌20min。
本发明在浙紫一号紫薯脱毒中将茎尖培养与变温热处理结合起来，消除了长时间热处理对植物寄主的不良反应，缩短了脱毒培养时间，提高了脱毒效率，优化了紫色甘薯脱毒技术，建立了一套稳定、高效的浙紫一号紫薯苗脱毒快繁的技术体系。
上面对本发明进行了示例性描述，显然本发明具体实现并不受上述方式的限制，只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种改进，或未经改进直接应用于其它场合的，均在本发明的保护范围之内。