本发明涉及农药技术领域，尤其涉及一种玫烟色拟青霉油悬浮剂及其制备方法。
背景技术：
我国是农业大国，农业是国民经济的基础，是人类的衣食之源、生存之本，因此农业的发展状况直接影响着国民经济的全局发展。但是在农业生产过程中，虫害往往会严重影响农作物正常的生长，使农作物大量减产，给种植者带来巨大的经济损失。因此，对农作物虫害必须要进行有效地防治，保证粮食安全和种植者的经济利益。
现今侵害农作物的害虫有很多种，最主要的是昆虫、鳞翅目害虫、膜翅目害虫、半翅目害虫和鞘翅目害虫，常见的害虫有烟粉虱、小菜蛾、棉铃虫、玉米螟、菜青虫、金龟子、桃蚜、白粉虱等等，严重导致农作物大量减产或质量下降。现有技术中，常常选用抗病品种或化学杀虫剂来防治害虫病害，但是采用化学杀虫剂进行防治时，防治效果虽然理想，但是化学杀虫剂具有难降解，容易破坏生态系统的平衡，对人畜危害较大的缺点。因此，急需一种防治高效的生物杀虫剂来防治害虫。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明的目的在于针对现有技术的不足，而提供一种玫烟色拟青霉油悬浮剂。
本发明提供了一种玫烟色拟青霉油悬浮剂，包括以下重量份数的组分：
药物活性组分3～10份，所述药物活性组分为玫烟色拟青霉；
助剂9～35份；
矿物油60～85份。
优选的，所述的玫烟色拟青霉选自生物保藏编号为CGMCC No.7993的菌种。
优选的，所述的玫烟色拟青霉油悬浮剂的有效孢子量为4.85～5.15×109cfu/g。
优选的，所述的玫烟色拟青霉油悬浮剂的杂菌率≤0.1％。
优选的，所述玫烟色拟青霉油悬浮剂的悬浮率≥95％。
优选的，所述玫烟色拟青霉油悬浮剂的玫烟色拟青霉的活孢率≥90％。
优选的，所述助剂包括硅酸铝镁、脂肪醇聚氧乙烯醚和聚醚磷酸酯类表面活性剂。
优选的，所述矿物油包括十四烷烃。
优选的，以助剂的重量份数为基准，所述助剂包括硅酸铝镁1～6份、脂肪醇聚氧乙烯醚5～18份、聚醚磷酸酯类表面活性剂3～11份。
本发明提供了上述技术方案的玫烟色拟青霉油悬浮剂的制备方法，包括以下步骤：
a)将矿物油、玫烟色拟青霉和助剂混合、剪切，得到剪切料；
b)将所述步骤a)得到的剪切料进行砂磨，得到砂磨料；
c)将所述步骤b)得到的砂磨料搅拌，得到玫烟色拟青霉油悬浮剂。
本发明提供了一种玫烟色拟青霉油悬浮剂，包括以下重量份数的组分：药物活性组分3～10份，所述的药物活性组分为玫烟色拟青霉；助剂9～35份；矿物油60～85份。在本发明中，玫烟色拟青霉油悬浮剂高效、低毒，杀虫效果稳定，且对人畜和作物安全，安全性高。实验结果表明，玫烟色拟青霉防治虫害的效果最高可达79％以上。
生物保藏说明
玫烟色拟青霉(Paecilomyces fumosa-roseus)，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，生物保藏编号为CGMCC No.7993。
具体实施方式
本发明提供了一种玫烟色拟青霉油悬浮剂，包括以下重量份数的组分：药物活性组分3～10份，所述药物活性组分为玫烟色拟青霉；助剂9～35份；矿物油60～85份。
本发明提供的玫烟色拟青霉油悬浮剂优选包括3～10份的玫烟色拟青霉，更优选为4～6份，最优选为5份。
在本发明中，所述玫烟色拟青霉优选为选自生物保藏编号为CGMCCNo.7993的菌种活化培养得到。
在本发明中，所述的玫烟色拟青霉的制备方法包括以下步骤：
1)将玫烟色拟青霉菌种活化；
2)将所述活化后的玫烟色拟青霉接种于玫烟色拟青霉液体培养基中进行液体发酵，得到玫烟色拟青霉发酵液；
3)将所述步骤2)得到的玫烟色拟青霉发酵液接种于玫烟色拟青霉固体培养基中，进行固体发酵，得到玫烟色拟青霉。
本发明中玫烟色拟青霉菌种的活化是将保藏的玫烟色拟青霉菌种接种于装有营养琼脂培养基的茄型瓶中，25～28℃培养8～12h进行活化培养。
在本发明中，所述活化后的玫烟色拟青霉接种于液体培养基的接种量优选为5～15％，更优选为7～12％，最优选为10％；所述玫烟色拟青霉发酵液接种于固体培养基的接种量优选为5～15％，更优选为7～12％，最优选为10％。
在本发明中，所述玫烟色拟青霉液体培养基优选包括以下组分：马铃薯粉27～39g/L，白砂糖15～25g/L，蛋白胨0.5～1.5g/L，硝酸钠0.05～0.15g/L，氯化钾0.20～0.30g/L，硫酸镁0.01～0.10g/L，硫酸锰0.01～0.10g/L，磷酸氢二钾0.1～1.0g/L，硫酸铁0.01～0.10g/L；更优选为马铃薯粉30～35g/L，白砂糖17～23g/L，蛋白胨0.8～1.2g/L，硝酸钠0.08～0.12g/L，氯化钾0.23～0.27g/L，硫酸镁0.03～0.07g/L，硫酸锰0.03～0.07g/L，磷酸氢二钾0.3～0.7g/L，硫酸铁0.03～0.07g/L；最优选为马铃薯粉32g/L，白砂糖20g/L，蛋白胨1.0g/L，硝酸钠0.10g/L，氯化钾0.25g/L，硫酸镁0.05g/L，硫酸锰0.05g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，硫酸铁0.05g/L。
在本发明中，所述玫烟色拟青霉液体发酵所接种的液体培养基优选经120～130℃灭菌30～45min后使用。本发明对培养基的灭菌设备没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的灭菌设备即可，比如高压蒸汽灭菌锅。本发明对所述发酵的设备没有特殊的限定，采用本技术领域熟知的发酵设备即可，如发酵罐。
在本发明中，所述玫烟色拟青霉液体发酵的温度优选为25～30℃，更优选的为26～29℃，最优选为28℃；所述玫烟色拟青霉液体发酵的pH值优选为6.6～7.2，更优选的为6.8～7.0，最优选为6.9；罐内压力优选为0.05～0.1MPa，更优选的为0.07～0.08MpPa；所述液体发酵的通气量优选为0.8～1.2V/V·min，更优选的为1V/V·min；所述玫烟色拟青霉液体发酵的时间优选为30～50h，更优选为35～45h，更优选为40h。
完成所述玫烟色拟青霉液体发酵后，本发明将得到的玫烟色拟青霉发酵液接种于固体培养基中，进行固体发酵，得到玫烟色拟青霉。在本发明中，所述玫烟色拟青霉固体培养基优选包括以下重量份的组分：麦麸60～100份，玉米粉5～15份，谷壳5～15份；更优选为麦麸70～90份，玉米粉7～12份，谷壳7～12份；最优选为麦麸80份，玉米粉10份，谷壳10份。本发明优选在所述玫烟色拟青霉固体培养基中添加蒸馏水，使固体培养基含水量优选为45～55％，更优选为47～52％，最优选为50％，然后进行固体发酵。本发明对所述添加的蒸馏水没有特殊的限定，采用本领域技术人员常规使用的蒸馏水即可。
在本发明中，所述玫烟色拟青霉固体发酵的温度优选为24～30℃，更优选的为26～29℃，最优选为28℃；所述玫烟色拟青霉固体发酵的湿度优选为40～95％，更优选为55～75％，最优选为65％；所述玫烟色拟青霉固体发酵的时间优选为48～96h，更优选为60～84h，最优选为72h。
在本发明中，所述玫烟色拟青霉固体培养基的厚度优选为1～7cm，更优选为2～5cm，最优选为3cm。
完成所述玫烟色拟青霉固体发酵后，本发明优选将得到固体发酵培养基烘干、粉碎和过筛，得到固体粉状玫烟色拟青霉。在本发明中，所述烘干的温度优选为30～50℃，干燥的时间优选为20～45h，更优选为35～45℃，30～40h，最优选为40℃，35h；本发明将固体发酵培养基烘干至水分含量优选在25～35％之间，更优选为27～32％，最优选为30％。本发明对所述固体发酵培养基粉碎的方法没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的粉碎方法即可。在本发明中，所述固体粉状玫烟色拟青霉过筛优选采用80～100目，更优选为85～95目，最优选为90目。
本发明提供的玫烟色拟青霉油悬浮剂优选包括9～35份助剂，更优选为14～26份，最优选为18份。本发明对所述助剂的种类和来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的农药油悬浮剂的助剂的市售商品即可。以助剂的重量份数为基准，具体的可优选为硅酸铝镁1～6份、脂肪醇聚氧乙烯醚5～18份和聚醚磷酸酯类表面活性剂3～11份，更优选为硅酸铝镁2～4份、脂肪醇聚氧乙烯醚8～14份、聚醚磷酸酯类表面活性剂4～8份，最优选为硅酸铝镁3份、脂肪醇聚氧乙烯醚10份、聚醚磷酸酯类表面活性剂5份。在本发明中，所述的助剂使药物性状稳定，提高药效。
本发明提供的玫烟色拟青霉油悬浮剂优选包括60～85份矿物油，更优选为72～80份，最优选为77份。本发明对所述矿物油的种类和来源没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的农药油悬浮剂的矿物油的市售商品即可。具体的矿物油可优选为十四烷烃。本发明所述的矿物油具有良好的药物稳定性，亦可提高药物的药效。
本发明提供了上述技术方案所述玫烟色拟青霉油悬浮剂的制备方法，包括以下步骤：
a)将矿物油、玫烟色拟青霉和助剂混合、剪切，得到剪切料；
b)将所述步骤a)得到的剪切料进行砂磨，得到砂磨料；
c)将所述步骤b)得到的砂磨料搅拌，得到玫烟色拟青霉油悬浮剂。
在本发明中，所述矿物油、玫烟色拟青霉和助剂的混合、剪切优选为将矿物油平均分成2份，将第1份矿物油进行剪切，然后与玫烟色拟青霉混合、剪切，再与助剂混合、剪切，再与第2份矿物油混合、剪切，添加完所有原料后，再继续剪切20～40min，更优选为25～35min，最优选为30min。本发明对混合、剪切的设备没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的混合、剪切设备即可，如剪切釜。
在本发明中，所述砂磨的粒度优选为2～8μm，更优选为3～7μm，最优选为4～6μm。本发明对所述砂磨的设备没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的砂磨设备即可，如砂磨机。
在本发明中，所述砂磨料的搅拌时间优选为10～30min，更优选为15～25min，最优选为20min。本发明对所述搅拌的设备没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的搅拌设备即可，如搅拌机。
在本发明中，所述玫烟色拟青霉油悬浮剂的玫烟色拟青霉有效孢子量优选为4.85～5.15×109cfu/g，更优选为5.0×109cfu/g。在本发明中，所述玫烟色拟青霉油悬浮剂的活孢率≥90％；所述玫烟色拟青霉油悬浮剂的杂菌率≤0.1％；所述玫烟色拟青霉油悬浮剂的悬浮率≥95％。
本发明所述玫烟色拟青霉油悬浮剂可应用于农作物防治虫害的方面，提供了一种所述玫烟色拟青霉油悬浮剂在防治农作物虫害方面的应用。具体的，可应用的农作物种类包括粮食作物、经济作物、蔬菜作物、果类作物、饲料作物等。本发明所述玫烟色拟青霉油悬浮剂可防治各类害虫和害螨，包括菜青虫、小菜蛾、棉铃虫、玉米螟、金龟子、红蜘蛛、松毛虫、广腹螳螂、蚜虫以及地下害虫蛴螬、蝼蛄等。
本发明对所述的玫烟色拟青霉油悬浮剂的施药方法没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的施药方法即可。
下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
玫烟色拟青霉的制备:将保藏的玫烟色拟青霉菌种接种于装有营养琼脂培养基的茄型瓶中，28℃培养12h进行活化培养；活化培养后的玫烟色拟青霉以10％的接种量接种于121℃灭菌35min后的液体培养基中，在发酵罐中进行液体发酵，具体的发酵条件为：温度为28℃；pH值为6.5；罐内压力为0.08MPa，发酵通气量为1V/V·min；发酵40h后停止发酵，得到玫烟色拟青霉发酵液；将得到的玫烟色拟青霉发酵液以10％的接种量接种于固体培养基中，在固体培养基中加入蒸馏水，使固体培养基含水量为50％，然后进行固体发酵，发酵条件为：发酵温度为28℃，发酵湿度为60％，发酵时间为72h；固体发酵结束后将得到的固体发酵的玫烟色拟青霉在40℃条件下烘干35h，烘干至固体发酵的玫烟色拟青霉的水分含量为30％，粉碎过100目筛，得到玫烟色拟青霉。
实施例2
玫烟色拟青霉油悬浮剂的制备：以重量份数计，将77份的十四烷烃平均分成2堆，将第1堆的十四烷烃进行剪切，再与5份实施例1制备的玫烟色拟青霉混合、剪切，再与3份硅酸铝镁混合、剪切，再与10份脂肪醇聚氧乙烯醚混合、剪切，再与5份聚醚磷酸酯类表面活性剂混合、剪切，再与第2堆十四烷烃混合、剪切，待所有原料全部混合、剪切完，再继续剪切30min，得到剪切料；将剪切料进行砂磨，得到5μm的砂磨料，将砂磨料搅拌20min后，得到玫烟色拟青霉油悬浮剂。
表1实施例2制备的玫烟色拟青霉油悬浮剂的质量控制指标
实施例3
玫烟色拟青霉油悬浮剂的制备：以重量份数计，将80份的十四烷烃平均分成2堆，将第1堆的十四烷烃进行剪切，再与8份实施例1制备的玫烟色拟青霉混合、剪切，再与4份硅酸铝镁混合、剪切，再与5份脂肪醇聚氧乙烯醚混合、剪切，再与3份聚醚磷酸酯类表面活性剂混合、剪切，再与第2堆十四烷烃混合、剪切，待所有原料全部混合、剪切完，再继续剪切30min，得到剪切料；将剪切料进行砂磨，得到4μm的砂磨料，将砂磨料搅拌15min后，得到玫烟色拟青霉油悬浮剂。
实施例4
玫烟色拟青霉油悬浮剂的制备：以重量份数计，将74份的十四烷烃平均分成2堆，将第1堆的十四烷烃进行剪切，再与6份实施例1制备的玫烟色拟青霉混合、剪切，再与6份硅酸铝镁混合、剪切，再与8份脂肪醇聚氧乙烯醚混合、剪切，再与6份聚醚磷酸酯类表面活性剂混合、剪切，再与第2堆十四烷烃混合、剪切，待所有原料全部混合、剪切完，再继续剪切30min，得到剪切料；将剪切料进行砂磨，得到6μm的砂磨料，将砂磨料搅拌20min后，得到玫烟色拟青霉油悬浮剂。
实施例5
玫烟色拟青霉油悬浮剂的制备：以重量份数计，将75份的十四烷烃平均分成2堆，将第1堆的十四烷烃进行剪切，再与3份实施例1制备的玫烟色拟青霉混合、剪切，再与6份硅酸铝镁混合、剪切，再与9份脂肪醇聚氧乙烯醚混合、剪切，再与7份聚醚磷酸酯类表面活性剂混合、剪切，再与第2堆十四烷烃混合、剪切，待所有原料全部混合、剪切完，再继续剪切30min，得到剪切料；将剪切料进行砂磨，得到7μm的砂磨料，将砂磨料搅拌20min后，得到玫烟色拟青霉油悬浮剂。
实施例6
药效试验：本次试验在江西省进行，防治品种为棉花，管理良好，棉铃虫发生中等偏重。本次试验将实验田均分为四个区域，区域1为对照组，只喷施清水；区域2喷施实施例2中制备的玫烟色拟青霉油悬浮剂2000倍稀释液；区域3喷施15％“安打”2000倍稀释液，药物活性组分的浓度与区域2相同；区域4喷施35％赛丹2000倍稀释液，药物活性组分的浓度与区域2和3相同；四个区域的用药量相同，施药后1天，3天，7天各调查一次活虫数，计算虫口减退率。具体结果如表2所示，由表2的数据可以得出，区域2的虫口减退率最高，表明本发明制备的玫烟色拟青霉油悬浮剂的杀虫效果最好。
表2玫烟色拟青霉油悬浮剂的杀虫(棉铃虫)效果
从表2的试验数据可以得出，本发明制备的玫烟色拟青霉油悬浮剂7天的虫口减退率可高达79.2％，其杀虫效果要高于安打和赛丹。
由以上实施例可知，本发明制备的玫烟色拟青霉油悬浮剂，对棉铃虫的防治率可高达79％以上，杀虫效果要高于安打和赛丹。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。