一种低成本高效的白木香结香方法与流程

本发明涉及生物工程领域，具体涉及一种低成本高效的白木香结香方法。

背景技术：

白木香(aquilariasinensis(lour.)gilg)为瑞香科沉香属植物，是我国珍稀的植物资源，以其含树脂的木材入药，药材名为沉香，是国产沉香的唯一正品来源。白木香的重要价值是其树干在外部刺激(自然现象或人工)下，可分泌产生和积累树脂类混合物，主要包括倍半萜类、2-(2-苯乙基)色酮类、芳香族等成分，俗称结香。几千年来，沉香的产生一直蒙上神秘的面纱，其树脂在心材的形成与积累，是需外界自然现象或人工刺激后产生的。

自然条件下白木香结香少，山林中的白木香树“有香者百无一二”，由于自然结香周期长，结香机率低，因此多采用人工结香法。目前，有关白木香人工结香的方法研究逐渐增多，效果各异，化学结香是应用较多的方法，有化合物之间的组合配方、有菌液与化合物组合的方法，较复杂、且成本较高。本研究方法以h2o2为结香诱导子，h2o2是植物响应外界刺激的重要信号分子，在植物防御反应中起重要的信号转导作用。白木香结香过程是对外界刺激的一种防御响应的结果，因此，以h2o2作为诱导子进行结香诱导，既有理论依据，又具有实践应用意义。

技术实现要素：

本发明的目的在于一种低成本高效的白木香结香方法。

本发明所采取的技术方案是：

一种白木香结香方法，包含以下步骤：1)在白木香树体钻孔；2)将h2o2注入上述孔中；3)培养结香。

优选的，钻孔孔口向上与树干呈45°夹角。

优选的，钻孔的孔间距为20～30cm。

优选的，钻孔深度达木质部。

优选的，钻孔用胶布封口。

优选的，h2o2的浓度为0.1～0.8mol/l。

优选的，h2o2的输入用量为每孔40～50ml。

优选的，h2o2的输入方式是连续7天注入，每天早9：00，晚5：00各一次。

本发明的有益效果是：该方法操作简便，成本低廉，可以有效提高白木香的结香速度，适合沉香的大规模生产。

附图说明

图1不同浓度h2o2对四年生白木香木质部性状的影响；其中a为浓度0.3mol·l^-1；b为浓度0.5mol·l^-1；c为浓度0.8mol·l^-1；d为浓度0.05mol·l^-1；e为未处理的空白对照。

图2白木香输液法结香的效果简图。

图3不同浓度h2o2处理对四年生白木香木质部薄层色谱的影响；图中a、b、c、d、e、f分别为0.8mol/l、0.5mol/l、0.3mol/lh2o2处理组、0.05mol/lh2o2处理组、未处理组以及对照药材。

具体实施方式

实施例1

在白木香树体钻输液洞孔3个，孔口向上与树干呈45°夹角，深达木质部中央。第一个孔距离地面30cm，第二个孔距离地面50cm，第三个孔距离地面70cm。将输液袋注射器针头插入输液洞孔中，将0.1mol/l浓度的h2o2缓缓输入。当无液体输入时，拔去针头，用胶布封住孔口。每天早9：00，晚5：00各注射一次，每次每孔注射40ml液体，连续注射7天。

实施例2

在白木香树体钻输液洞孔3个，孔口向上与树干呈45°夹角，深达木质部中央。第一个孔距离地面30cm，第二个孔距离地面50cm，第三个孔距离地面70cm。将输液袋注射器针头插入输液洞孔中，将0.3mol/l浓度的h2o2缓缓输入。当无液体输入时，拔去针头，用胶布封住孔口。每天早9：00，晚5：00各注射一次，每次每孔注射45ml液体，连续注射7天。

实施例3

在白木香树体钻输液洞孔3个，孔口向上与树干呈45°夹角，深达木质部中央。第一个孔距离地面30cm，第二个孔距离地面50cm，第三个孔距离地面70cm。将输液袋注射器针头插入输液洞孔中，将0.5mol/l浓度的h2o2缓缓输入。当无液体输入时，拔去针头，用胶布封住孔口。每天早9：00，晚5：00各注射一次，每次每孔注射50ml液体，连续注射7天。

实施例4

在白木香树体钻输液洞孔3个，孔口向上与树干呈45°夹角，深达木质部中央。第一个孔距离地面30cm，第二个孔距离地面50cm，第三个孔距离地面70cm。将输液袋注射器针头插入输液洞孔中，将0.8mol/l浓度的h2o2缓缓输入。当无液体输入时，拔去针头，用胶布封住孔口。每天早9：00，晚5：00各注射一次，每次每孔注射40ml液体，连续注射7天。

对比例1

在白木香树体钻输液洞孔3个，孔口向上与树干呈45°夹角，深达木质部中央。第一个孔距离地面30cm，第二个孔距离地面50cm，第三个孔距离地面70cm。将输液袋注射器针头插入输液洞孔中，将0.05mol/l浓度的h2o2缓缓输入。当无液体输入时，拔去针头，用胶布封住孔口。每天早9：00，晚5：00各注射一次，每次每孔注射50ml液体，连续注射7天。

对比例2

在白木香树体钻输液洞孔3个，孔口向上与树干呈45°夹角，深达木质部中央。第一个孔距离地面30cm，第二个孔距离地面50cm，第三个孔距离地面70cm。将输液袋注射器针头插入输液洞孔中，将1.2mol/l浓度的h2o2缓缓输入。当无液体输入时，拔去针头，用胶布封住孔口。每天早9：00，晚5：00各注射一次，每次每孔注射40ml液体，连续注射7天。

实验例

将实施例1～4和对比例1～2的白木香继续培养6个月，6个月后，计算木质部棕色区域面积(即结香区域)，计算公式是：棕色区域面积比例＝(棕色区域面积/横切面总面积)*100％。每2克棕色部分需要3.14*3.1*3.1*1(30.1cm³)体积的棕色部分树干，0.8mol/l处理扎一针，产生19.6*60cm³的棕色部分树干，相当于产生764％的醇溶性浸出物。结果如表1所示：

表1不同浓度h2o2白木香木质部棕色区域面积的影响

进一步按照2010版《中国药典》，提取醇溶性浸出物。结果如下表所示：

表2化学诱导子h2o2对四年生白木香木质部醇溶性浸出物含量影响

注：表中*表示差异显著性水平(0.05水平)。

结果表明，当h2o2的浓度达到在0.1～0.8mol/l时，可以促进白木香结香。