本发明涉及植物育种领域中，一种富营养松散型花椰菜的培育方法。
背景技术：
花椰菜又名菜花、花菜、椰菜花等，是十字花科芸薹属甘蓝种中能形成花球的一个变种，在我国南北各地均有大面积种植和广泛消费。其食用器官为花球，多呈乳白色，也有紫色、橙色、浅绿色等多种变异类型。由于口感和消费习惯的原因，我国生产和消费的花椰菜几乎都是白色花球，而且基本都是紧实花球类型。
随着生活水平的提高，人们越来越追求蔬菜的风味、口感和营养品质。花椰菜的消费需求也在发生变化，近些年口感、品质更优良的松散型花椰菜更加受欢迎。松散型花椰菜的花梗长，口感脆嫩，品质好，非常受消费者青睐，其种植收益比传统的紧实型花椰菜高，因此也深受种植户的喜爱，在短短几年时间已经由福建、浙江一带迅速发展到全国南北方都有大面积松散型花椰菜生产基地。近几年，紫色花椰菜也有少量种植，但由于口感紧硬，种植规模比较受限。
技术实现要素：
本发明的目的是如何培育富营养的松散型花椰菜。
本发明首先提供了富营养松散型花椰菜的培育方法，所述方法包括：
a1)将名称分别为白色花椰菜1与白色花椰菜2的白色花椰菜杂交，得到杂交一代；
所述白色花椰菜2为白色花椰菜细胞质雄性不育材料；
a2)将a1)所述杂交一代作为母本，将所述白色花椰菜1作为轮回亲本，与所述杂交一代进行回交，筛选得到细胞质雄性不育的回交后代；
a3)将所述回交后代作为母本，紫色花椰菜作为父本进行杂交，筛选得到富营养松散型花椰菜；
所述富营养松散型花椰菜与所述白色花椰菜1相比营养价值增加。
所述白色花椰菜1在a1)中作为父本，所述白色花椰菜2在a1)中作为母本。
上述方法中，所述营养价值增加可体现在下述1)和/或2)上：
1)与所述白色花椰菜1相比，所述富营养松散型花椰菜花青素、维生素c、可滴定酸、可溶性固形物、粗纤维、蛋白质、矿物质和/或对人体有益硫代葡萄糖苷成分含量增加；
2)与所述白色花椰菜1相比，所述富营养松散型花椰菜对人体无益硫代葡萄糖苷成分含量降低。
上述方法中，所述矿物质可为钙、钾、镁、钠、磷、铜、铁、锰和/或锌。
所述对人体有益硫代葡萄糖苷成分可为raa、nap、4oh、gbc、4me和/或neo。
所述对人体无益硫代葡萄糖苷成分可为pro。
上述方法中，所述白色花椰菜1可为松散型花椰菜，所述白色花椰菜2提供细胞质雄性不育源，可为松散型或紧实型花椰菜。
所述紫色花椰菜具体可为紫色紧实型花椰菜。
上述方法中，a2)中所述回交可为连续5-7代回交。a2)中所述回交具体可为连续5代回交。
所述回交后代可为松散型花椰菜。
上述方法中，所述白色花椰菜1可具有以下性状：生长势强、株型中等、抗病性好、花球松散、洁白和/或花梗长。
上述方法中，所述白色花椰菜2可具有以下性状：细胞质雄性不育，生长势强、株型中等、抗病性好和/或洁白。
上述方法中，所述紫色花椰菜可具有以下性状：生长势强、株型中等、抗病性好和/或花球紫色。
上述方法中，所述白色花椰菜1可为松散型花椰菜品种庆农90或其纯合后代。
所述白色花椰菜2可为京研50或其后代。京研50具体可为京研益农(北京)种业科技有限公司品种。
所述紫色花椰菜可为紫晶或其纯合后代。所述紫晶具体可为河南新乡牧野良种研究所紫晶。
上述方法中，所述白色花椰菜1可为通过将松散型花椰菜品种庆农90进行游离小孢子培养获得的纯合植株。
上述方法中，所述紫色花椰菜可为通过将紫晶进行游离小孢子培养获得的纯合植株。
本发明利用本发明的富营养松散型花椰菜的培育方法创制了富含硫苷、花青素、vc和矿物质的高营养紫色松散型花椰菜，为我国的“菜篮子”增添一个高营养保健价值的优质花椰菜品种。本发明的富营养松散型花椰菜具有以下突出优点：
(1)所获得的富营养松散型花椰菜不仅具有普通白色松散型花椰菜的基本特性，即花梗长而脆、花球松散，而且其商品器官(花球，亦即食用器官)呈紫色，富含vc、蛋白质、矿物营养、花青素、硫代葡萄糖苷(raa、nap、4oh、gbc、4me和neo)等主要营养保健成分，并降低了不利于人体健康的硫代葡萄糖苷pro的含量，pro已被证实是致甲状腺肿素5-乙烯唑烷-2-硫酮的前体，含量高不利于人体健康；
(2)与普通白色松散型花椰菜相比，该松散型花椰菜的营养品质得到显著改善，主要营养成分显著提高，特别是增加了一种可以清除人体自由基的具有强抗氧化功能的花青素；
(3)与普通紫色花椰菜相比，该松散型花椰菜的花梗较长、脆嫩、花球松散，食用品质得到显著改善，具有白色松散型花椰菜的口感，花梗脆嫩微甜，更受消费者喜爱；
(4)该松散型花椰菜是利用细胞质雄性不育系途径配制而成，其不育系幼苗在低温下不黄化，花器官正常，蜜腺发达，花蜜多，不育株率和不育株的不育度均达100％，杂交率可达100％，种子质量高。
本发明提供的选育方法简便，选育出的松散型花椰菜不仅品质优良，而且营养保健价值高，市场前景广阔。
附图说明
图1为一种富营养松散型花椰菜的培育过程。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂、仪器等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。
实施例1、一种富营养松散型花椰菜的培育
一、选育经过
选育过程如图1所示。
1、市场购买白色松散型花椰菜品种庆农90(市场有售)，利用游离小孢子培养技术获得大量再生纯合植株，经田间综合性状调查、鉴定，筛选出10个生长势强、株型中等、抗病性好、花球松散、洁白、花梗较长的优良单株，分别单株自交，获得10个优良松散型花椰菜纯合株系。经配合力测定与营养品质分析，筛选出1个普通配合力强并且营养成分含量较高的松散型花椰菜纯合株系(s5，白色花椰菜1)。
s5的主要特征特性：植株半直立，株高50cm，开展度55×60cm,外叶15片，长卵形，浅绿色，叶面蜡粉中等，花球扁圆球形、松散、白色，花梗长14cm，单球重0.7kg，球高13cm，球横径17cm，中熟，定植到收获约80天左右。
抗病性是在田间自然发病条件下，对花椰菜的两种主要病害：花椰菜病毒病和花椰菜黑腐病的发病率进行调查统计。
营养品质分析主要包括花球的水分、维生素c(vc)、可溶性糖、可滴定酸、可溶性固型物、粗纤维、蛋白质、矿物质、花青素以及硫代葡萄糖苷的含量，测定方法如下：
水分测定采用国标方法gb/t5009.3-2010；vc测定采用国标方法gb6195-1986；可溶性糖测定采用国标方法gb6194-1986；可滴定酸测定采用国标方法gb/t12456-2008；可溶性固型物测定采用折光仪法；粗纤维测定采用国标方法gb/t5009.10-2010；蛋白质测定采用国标方法gb/t5009.5-2010；矿物质测定采用等离子发射光谱icp方法；花青素测定采用示差比色法；硫代葡萄糖苷测定采用hplc分析法。
配合力测定方法：参考《蔬菜育种学》(第二版)(1990)所述普通配合力测定方法，即用该亲本与其它亲本配成的f1，计算其平均产量(或其它性状值)与该试验全部f1的总平均相比的差值，即为该亲本的普通配合力。
2、以上述松散型花椰菜纯合株系s5为父本，与白色花椰菜细胞质雄性不育品种京研50(京研益农(北京)种业科技有限公司)进行杂交，获得杂交一代f1。该杂交一代花粉败育，将作为母本用于进一步的回交转育。
3、以上述杂交一代f1为母本，以s5为轮回亲本，进行回交转育，经五代回交之后，获得松散型花椰菜细胞质雄性不育系cmss5(白色花椰菜2)。cmss5植株与花球的主要形态特性同s5，只是育性与s5不同。
回交过程中的筛选标准为：每一代回交过程中，选择植株和花球形态与轮回亲本s5相近的单株作为当代的母本株，与轮回亲本s5进行回交授粉。
松散型花椰菜细胞质雄性不育系cmss5的主要特征特性：不育性稳定，不育株率和不育株的不育度均为100％，蜜腺发达，花蜜多，柱头正常，开花结实性状良好，幼苗在低温条件下不黄化。植株半直立，株高50cm，开展度55×60cm，外叶15片，长卵形，浅绿色，叶面蜡粉中等，花球扁圆球形、松散、白色，花梗长14cm，单球重0.7kg，球高13cm，球横径17cm，中熟，定植到收获约80天左右。
4、将紫色紧实型花椰菜品种紫晶(河南新乡牧野良种研究所)，利用游离小孢子培养技术获得多个不同性状的再生纯合植株，经田间观察、鉴定，筛选出4个生长势强、株型中等、抗病性好、花球紫色的优良单株，分别单株自交，获得4个紫色花椰菜纯合株系(1301、1309、1330、1341)。其中1301植株直立，株高65cm，开展度58×60cm,外叶18片，长卵形，深绿色，叶面蜡粉多，花球紧实，紫色，花梗长5cm，单球重0.4kg，晚熟，定植到收获约100天左右；1309植株直立，株高65cm，开展度50×52cm,外叶17片，长椭形，深绿色，叶面蜡粉多，花球紧实，紫色，花梗长6cm，单球重0.6kg，晚熟，定植到收获约90天左右；1330植株半直立，株高62cm，开展度60×68cm,外叶16片，长卵形，深绿色，叶面蜡粉中，花球紧实，紫色，花梗长6cm，单球重0.5kg，中熟，定植到收获约80天左右；1341植株较平展，株高55cm，开展度65×68cm,外叶17片，长卵形，深绿色，叶面蜡粉多，花球紧实，紫色，花梗长6cm，单球重0.4kg，中早熟，定植到收获约70天左右。
抗病性鉴定和营养品质分析方法同步骤1。
5、以上述松散型花椰菜细胞质雄性不育系cmss5为母本，4个紫色花椰菜纯合株系(1301、1309、1330、1341)分别为父本进行杂交，获得f1。
6、将步骤5的f1进行田间品比试验，以生产上大面积栽培的松散型花椰菜庆农80和庆农90为对照品种。经主要农艺性状、产量、品质、抗病性、营养成分测定与评价，筛选出一个综合性状优良的紫色松散型花椰菜杂交组合cmss5×1309，编号为zs1，即本发明所创制的富营养的目标松散型花椰菜。
二、主要特征特性
1、主要农艺学性状
zs1：以不育系cmss5为母本、自交系1309为父本配制而成的紫色松散型花椰菜一代杂种，表现为中晚熟，定植后90天左右收获；株型直立，株高65cm，开展度55×55cm,外叶17片，灰绿色，叶面蜡粉多；花球扁圆球形、松，紫色，花梗长13厘米左右，单球重1.2kg，球高13cm，球横径21cm，中晚熟，定植到收获约90天左右。
2、主要营养成分及含量
本发明的紫色松散型花椰菜zs1在营养保健价值方面的突出特点是：具有普通白色松散型花椰菜所不具备的花青素，测定结果zs1的花青素平均含量为42.30mg/100gfw，而对照品种庆农90的花球无花青素检出。
zs1的主要营养成分及含量测定的结果如表1-表3所示,以熟性一致的生产主栽白色松散型花椰菜品种庆农90为对照(ck)。
表1、富营养松散型花椰菜zs1的主要营养成分测定
表1中，“zs1”和“庆农90(ck)”行中的“％”均表示质量百分比，“比对照ck±％”表示zs1各营养成分与对照相比的变化百分比，“/”表示不含花青素。
表2、富营养松散型花椰菜zs1的主要矿物营养成分测定
单位：mg/100gfw
表2中，“比对照ck±％”表示zs1各矿物营养成分与对照相比的变化百分比。
表3、富营养松散型花椰菜zs1的主要硫代葡萄糖苷成分测定
单位：μmol/gfw
表3中，“比对照ck±％”表示zs1各硫代葡萄糖苷成分与对照相比的变化百分比。
与普通松散型花椰菜庆农90相比，本发明的富营养松散型花椰菜zs1中的vc、可滴定酸、可溶性固形物、粗纤维和蛋白质均显著提高，分别提高了39.03％、56.25％、7.02％、2.94％和24.43％；主要矿物营养成分也均有显著提高，钙、钾、镁、钠、磷、铜、铁、锰和锌分别提高了22.55％、15.53％、13.63％、22.61％、13.86％、16.47％、54.12％、5.71％和12.14％；主要硫代葡萄糖苷成分也均有极显著提高，ibe、sin、raa、nap、4oh、gbc、4me和neo分别提高了148.15％、185.71％、50.00％、5.26％、40.00％、92.29％、
12.86％和1450.00％，只有pro含量比对照低61.29％，而已有科学研究证明pro是致甲状腺肿素5-乙烯唑烷-2-硫酮的前体(heaney&fenwick，1995)，其含量低时更有益于人体健康。
三、繁殖、制种技术要点
1、亲本繁殖：采用日光温室或改良阳畦采种。在母本繁殖棚(室)，不育系与相应的保持系以2：1比例栽植。开花期用纱网隔离，在棚(室)内释放蜜蜂授粉，花期结束后拔除保持系。从不育系植株采种得到母本种子。父本采种棚(室)在开花期通过蜜蜂授粉，采收得到父本种子。
2、杂种一代制种技术：
(1)严格隔离：在制种基地一定要采取严格隔离措施，最好是自然屏障隔离和时间隔离，如果用空间隔离，隔离距离应在方圆2000米以上。
(2)调整播期：以本发明选育的白色花椰菜不育系cmss5为母本，紫色花椰菜优良自交系1309为父本进行杂交制种。由于父母本的花期不一致，在制种时为了能保证父母本花期相遇，提高采种产量，在播种时需要根据制种地气候条件调整两者的播种期。
(3)定植比例：父本：母本按照1：2或1：3的比例进行定植。
(4)田间管理：父母本定植缓苗后适当蹲苗，控制水肥管理。花球12-13公分后十字形割球，促进抽薹开花。开花后释放蜜蜂授粉，及时检查、拔除杂株。加强田间的病虫害管理。
(5)收种：花期结束后拔除父本株，从母本株收种。