本发明属于鱼类生态学领域，具体涉及一种通过耳石日轮估算黄唇鱼生长期的方法。
背景技术：
研究对象黄唇鱼bahabaflavolabiata,属石首鱼科、黄唇鱼属,俗称大鸥、白花、排口白花、尖头白花,分布于东海闽南渔场和南海北部珠江口渔场,其中珠江口曾是盛产区。黄唇鱼为国家二级保护水生野生动物,由于海区水环境的急剧恶化和过度捕捞,导致其资源迅速减少,濒临灭绝。由于资源极其缺乏,开展相关的调查和研究非常困难,一直以来我国对于黄唇鱼生物学的研究报道甚少,对其繁殖生物学、产卵期或产卵季节、生活史内容等均了解不多。
在以往的鱼类繁殖生物学研究中,产卵期一般是通过长期野外调查来完成的,并且依据仔稚幼鱼的发育时期来大致推断采集的野生仔鱼的年龄。现在由于耳石日轮的应用,可以大大缩短工作时间,同时采样时间也不必局限于鱼类繁殖季节,而可以根据日轮计数在鱼类生活史的不同阶段进行采样研究,这也可以克服由于特殊原因在鱼类繁殖季节无法完成野外采样造成的数据缺失,在日龄鉴定、孵化期和产卵期调查以及早期生长研究中具有其它研究方法无法比拟的优势。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种通过耳石日轮估算黄唇鱼生长期的方法。
为达到上述目的，本发明采用以下技术方案。
一种通过耳石日轮估算黄唇鱼生长期的方法，包括以下步骤：
s1、收集样本鱼，测量体长、体重生长指标；
s2、解剖样本鱼，取出耳石，清洗晾干后备用；
s3、将耳石进行打磨，直至耳石中心显现，得到耳石薄片；
s4、将耳石薄片进行蚀刻，直至能清晰分辨出日轮；
s5、清洗蚀刻后的耳石薄片，风干；
s6、观察耳石薄片，测记耳石生长轮纹数量；
s7、推算日龄、孵化期和产卵期。
进一步地，所述步骤s2中清洗剂为无水酒精。
进一步地，所述步骤s3中打磨先用磨刀石打磨，磨至耳石中心时再用砂纸打磨。
进一步地，所述步骤s4中蚀刻溶液为蛋白酶溶液，作为优选蛋白酶溶液浓度为1mg·ml-1。
进一步地，所述步骤s5中清洗剂为酒精。
进一步地，所述步骤s7中日龄、孵化期和产卵期计算公式如下：
样品鱼的推定日龄为耳石生长轮数目加上1之值；孵化期为采样日期减去日龄(生长轮数+1)逆算得出；样品鱼的产卵期为采样日期减去生长轮数之值。
本发明具有以下有益效果：
(1)本发明通过耳石日轮估算黄唇鱼的生长期，可以大大缩短原本需要通过长期野外调查来完成该项工作的时间；
(2)本发明的方法，采样时间不必局限于黄唇鱼繁殖季节，可以根据日轮计数在鱼类生活史的不同阶段进行采样，克服在该鱼类繁殖季节无法完成野外采样造成的数据缺失；
(3)本发明的方法，估算黄唇鱼生长期的精确性高。
附图说明
图1是本发明所述黄唇鱼幼鱼耳石的日轮
附图标记如下：c-中心核；d-日轮。
具体实施方式
下面结合具体实例对本发明的技术方案做进一步的详细说明。
本实施例通过耳石日轮估算黄唇鱼生长期的方法，包括以下步骤：
s1、所采用的样品鱼为在海域分批采集，体长16.40-26.30cm,对其规格没有限制；样本鱼收集后即测量体长、体重生长指标，长度精确到0.1mm，重量精确到0.01g；
s2、解剖取出耳石,经无水酒精清洗晾干后备用；
s3、将耳石先用磨刀石打磨，磨至接近中心时换用1500#的砂纸，细细打磨，直至耳石中心显现，得到耳石薄片。
s4、将耳石薄片用浓度为1mg·ml-1的蛋白酶k溶液进行蚀刻，直至能清晰分辨出日轮；
s5、用酒精清洗耳石薄片表面，风干；
s6、用中性树胶将耳石薄片固定于载玻片上，用显微镜观察，测记耳石生长轮纹数量，从中心向后端计数；
s7、推算日龄、孵化期和产卵期
日龄、孵化期和产卵期推算依据：假定黄唇鱼耳石生长轮具有日沉积规律；假定第一个生长轮是在孵化后第二天出现的；假定受精卵在自然条件下孵化时间约需3日；
日龄、孵化期和产卵期推算方法：样品鱼的推定日龄为耳石生长轮数目加上1之值；孵化期为采样日期减去日龄(生长轮数+1)逆算得出；样品鱼的产卵期为采样日期减去生长轮数之值。
为了保证样本具有代表性，同一样本经过2次到3次的重复判读、计数，当几次计数间的差异在10％以内时，取其平均值作为耳石的最终生长轮数，差异大于10％的样品则摒弃，每次判读间隔至少1个月且随机取样。
用execel和spss软件对黄唇鱼的体长、体重与日龄的回归关系，以及体长与体重的相关关系进行分析。
估算黄唇鱼日龄、孵化期、产卵期及生长结果如下：
(1)黄唇鱼幼鱼耳石中心核外为近同心圆排列的日轮，每一个完整的日轮各由一条暗带和一条明带组成，中心核到后端的日轮排列较紧密、清晰，在不同的生长阶段，日轮的宽度也不相同。根据耳石生长轮数鉴定出幼鱼的日龄，最大日龄为344天，最小为184天，平均日龄为292.44±44.03天。
(2)产卵时间最早的为2月8日，最晚是5月17日。按时间段统计孵化日期可知，4月份是黄唇鱼的产卵高峰期，属于3月、4月和5月产卵的黄唇鱼占样本数的92.86％，2月产卵占7.14％。由此可以判断黄唇鱼产卵期主要集中在3月、4月和5月
(3)黄唇鱼的体长(l，mm)与体重(w，g)呈显著的幂函数关系(p<0.00001)，相关关系式为：w＝2.36×10-5l2.97，r2＝0.9278。式中的b值接近3，即体长16.40—26.30cm幼鱼的生长属于均匀生长型。
(4)黄唇鱼的体长(l，mm)与日龄(d)间存在着显著的幂函数关系：l＝4.15d0.71(r2＝0.6929)。
(5)黄唇鱼的体重(w，g)与日龄(d)间存在着显著的幂函数关系：w＝1.03×10-3d2.17(r2＝0.6920)。
(6)黄唇鱼的体长和体重平均生长率分别为0.55mm·d-1和1.60g·d-1，特定生长率分别为0.27％·d-1和0.82％·d-1。
以上所述仅为本发明的具体实施方式，但不能作为对本发明的保护范围并限制，任何属于本技术领域的技术人员在本发明构思基础上，做出的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。