本发明属于食用菌培养基领域，特别涉及一种含藕粉的蛹虫草摇瓶菌种培养基及其制备方法。
背景技术：
蛹虫草，又名北虫草，学名北冬虫夏草，因其化学成分和药理作用与冬虫夏草相似，在临床上常代替冬虫夏草入药。目前已实现规模化人工培养和深层发酵，规模化人工培养为人们提供了大量的虫草子实体，又可为提取有效的活性物质提供原材料，而人们又可以通过深层发酵直接从发酵液中提取有效成分。在栽培实践中，制作菌种的过程为：试管菌种→摇瓶菌种→发酵罐，发酵罐的菌种经过稀释后就可以直接用于栽培，整个菌种生产逐级扩繁，可以看出高质量、高标准的摇瓶菌种是生产中重要的一个环节。所谓的摇瓶菌种就是液体菌种，生产中常称为二级菌种。摇瓶菌种性能的好坏对后期菌种扩繁，以及能否栽培出草有着直接的影响。本发明就是要增加适宜的摇瓶菌种的培养基配方来提高菌种的质量，保证蛹虫草摇瓶菌种生产的需要。
所用藕粉的加工过程：新鲜的莲藕—清洗—粉碎—过滤—除沙净化—浓缩精制—脱水—干燥。藕粉的营养价值很高，富含铁、钙等微量元素，植物蛋白质、维生素、葡萄糖以及淀粉含量也很丰富。经过查阅大量的文献资料，未发现将藕粉用于蛹虫草摇瓶菌种培养基中的报道。
技术实现要素：
本发明提供一种含藕粉的蛹虫草摇瓶菌种培养基及其制备方法，此配方就是在常规的液体配方中加入了藕粉，配制方便，成本低廉，实际应用操作简单。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。
一种含藕粉的蛹虫草摇瓶菌种培养基，配方包括以下组分：葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、蛋白胨、藕粉、马铃薯、水。
所述的含藕粉的蛹虫草摇瓶菌种培养基，其原料按重量配比如下：葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、蛋白胨3g、藕粉1-7.5g、马铃薯200g、水1000ml。
所述的含藕粉的蛹虫草摇瓶菌种培养基，其原料按重量配比如下：葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、藕粉1-7.5g、马铃薯200g、水1000ml。
所述的含藕粉的蛹虫草摇瓶液体菌种培养基的制备方法，包括以下步骤。
（1）先将马铃薯去皮后，切成小块放入1000ml水中煮熟，煮到熟而不烂，四层纱布过滤取汁。
（2）将葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、蛋白胨、按比例称好后，放入（1）中过滤好的马铃薯汁中，搅拌均匀使药品全部融化，待定容到900ml。
（3）将藕粉用100ml30℃以下凉水搅拌后，加入（2）中定容的液体中充分搅匀，分别装入250ml的三角瓶中，每瓶100ml，盖上封口膜或胶塞，121℃～126℃高压灭菌，灭菌30min。
与现有技术比，本发明的有益效果。
本发明中的蛹虫草摇瓶菌种培养基中的藕粉包含植物蛋白质、维生素、葡萄糖和淀粉，富含铁、钙等微量元素。碳源是能够提供蛹虫草菌丝体构成细胞和代谢产物中碳架来源的营养物质；藕粉中的葡萄糖和淀粉可以作为蛹虫草菌丝生长的碳源。氮源是蛹虫草菌丝体生长所需的核酸和蛋白质合成的原料；藕粉中的植物蛋白质可以作为蛹虫草菌丝生长的氮源。蛹虫草菌丝体在生长发育中还需要维生素和微量元素，藕粉中的营养成分也能够满足；所以藕粉既可以充当碳源，又可充当氮源，以及维生素和微量元素，它直接可以影响蛹虫草菌丝体的生物量。
采用含有藕粉的蛹虫草摇瓶培养基的菌种颗粒小，菌种量大，菌丝生长速度快，生长周期短。从试验中观察菌丝生长情况和满瓶时间，同时测定菌球大小、菌球密度、菌丝体干重等指标，总体上效果明显，提高了菌种质量。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。
实施例1。
一种含藕粉的蛹虫草摇瓶菌种培养基，其原料按重量配比如下：葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、蛋白胨3g、藕粉1g、马铃薯200g、水1000ml。
蛹虫草摇瓶菌种培养基配制方法，包括以下步骤。
（1）先将马铃薯去皮后，切成小块放入1000ml水中煮熟，煮到熟而不烂，四层纱布过滤取汁。
（2）将葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、蛋白胨、按比例称好后，放入上述过滤好的马铃薯汁中，搅拌均匀使药品全部融化，定容到900ml。
（3）将藕粉用100ml30℃以下凉水搅拌后，加入上述定容的液体中充分搅匀，分别装入250ml的三角瓶中，每瓶100ml，盖上封口膜或胶塞，121℃～126℃高压灭菌，灭菌30min，待冷却后接种。
（4）将活化后的菌种用打孔器取φ6mm接种于(3)中已灭菌的摇瓶菌种培养基中，放入20℃培养箱暗光静止培养24h，在暗光培养期间观察菌液是否有浑浊，24h后再放入20℃摇床(150r/min)，在培养期间菌丝迟迟不长或出现异味的即为污染菌瓶，长好的摇瓶菌种进行平板培养和显微镜检查以便及时发现有无细菌和霉菌的污染，保证菌种质量。
实施例2。
一种含藕粉的蛹虫草摇瓶菌种培养基，其原料按重量配比如下：葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、蛋白胨3g、藕粉2.5g、马铃薯200g、水1000ml。
蛹虫草摇瓶菌种培养基配制方法同实施例1。
实施例3。
一种含藕粉的蛹虫草摇瓶菌种培养基，其原料按重量配比如下：葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、蛋白胨3g、藕粉5g、马铃薯200g、水1000ml。
蛹虫草摇瓶菌种培养基配制方法同实施例1。
实施例4。
一种含藕粉的蛹虫草摇瓶菌种培养基，其原料按重量配比如下：葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、蛋白胨3g、藕粉7.5g、马铃薯200g、水1000ml。
蛹虫草摇瓶菌种培养基配制方法同实施例1。
实施例5。
一种含藕粉的蛹虫草摇瓶菌种培养基，其原料按重量配比如下：葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、藕粉1g、马铃薯200g、水1000ml。
蛹虫草摇瓶菌种培养基配制方法同实施例1。
实施例6。
一种含藕粉的蛹虫草摇瓶菌种培养基，其原料按重量配比如下：葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、藕粉2.5g、马铃薯200g、水1000ml。
蛹虫草摇瓶菌种培养基配制方法同实施例1。
实施例7。
一种含藕粉的蛹虫草摇瓶菌种培养基，其原料按重量配比如下：葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、藕粉5g、马铃薯200g、水1000ml。
蛹虫草摇瓶菌种培养基配制方法同实施例1。
实施例8。
一种含藕粉的蛹虫草摇瓶菌种培养基，其原料按重量配比如下：葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、藕粉7.5g、马铃薯200g、水1000ml。
蛹虫草摇瓶菌种培养基配制方法同实施例1。
对照常规配方（ck1）：葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、蛋白胨3g、马铃薯200g、水1000ml。
对照常规配方（ck2）：葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、马铃薯200g、水1000ml。
蛹虫草摇瓶菌种培养基配制方法同实施例1。
结果与分析如下。
从表中可以看出在配方1-4常规配方中加入了不同量的藕粉，配方5-8中用藕粉代替氮源蛋白胨加入了不同量的藕粉，添加了藕粉的培养基，菌球密度，菌球直径，菌丝体干重变化明显。综合比较试验筛选出适合于蛹虫草菌丝体生长的配方为6和7，藕粉添加量分别为2.5g/l和5g/l，这两种配方优于其他培养基配方和对比配方，而且藕粉作为氮源比配方中添加蛋白胨效果好。