本发明涉及马氏珠母贝珍珠培育方法，具体说涉及一种提高马氏珠母贝微粒珍珠产量培育方法，属于马氏珠母贝的养殖技术领域。
背景技术：
我国用于生产海水珍珠的贝类包括马氏珠母贝、大珠母贝、珠母贝与企鹅珍珠贝。目前马氏珠母贝是我国生产海水珍珠的主要贝类之一，用于生产6.0-8.0mm中小规格的有核珍珠，上世纪90年代达到产业高峰，年珍珠产量达20吨左右。有核珍珠生产是一个复杂的过程，需要进行植核手术。植核手术的基本过程是要将外套膜小片(供体贝)与珠核一起移植到受体贝的内脏团结缔组织中。移植小片与受体组织相互作用，逐渐形成包围珠核的珍珠囊，珍珠囊细胞不断地分泌珍珠质，紧贴珠核形成珍珠。
珍珠是传统的药材，《本草纲目》中记载：“(珍珠)定惊，清肝除翳，收敛生肌”，即可以清热解毒，愈合创伤，助长皮肉，消炎明目。珍珠的药用功能，在历代医药古籍及现代药典上都有记载，现代医学发现珍珠中富含氨基酸和多种人体必备的微量元素，促进人体新陈代谢，美容养颜，以及治疗口腔溃疡、神经衰弱和癔症等。目前，用珍珠制成的中成药很多，如珍珠粉、珍珠层粉、珍珠散、六神丸、六应丸、行军散、牛黄丸、鸡骨草丸、眼药水、眼膏、消炎片、镇安丹等几十种。微粒珍珠经济价值较高，市场价格250-300元/g。微粒珍珠主要为天然珍珠，产量较低，难以满足市场需求。本方案提供一个提高微粒珍珠产量的培育方法，通过实施后能提高微粒珍珠的产量，产生良好的经济效益与社会效益。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种提高马氏珠母贝微粒珍珠产量培育方法，采用该方法能够提高微粒珍珠的产量，产生良好的经济效益与社会效益。
为了实现本发明目的，本发明采用的技术方案是：
一种提高马氏珠母贝微粒珍珠产量培育方法，包括如下步骤：
制备珍珠层粉、制备外套膜小片、获取细胞悬浮液、配制含有珍珠层粉的悬浮液、植核育珠、第二次植核育珠，具体如下：
(1)珍珠层粉制备：挑选马氏珠母贝珍珠层颜色鲜亮的贝壳，壳高6.0cm以上，去除贝壳的角质层与棱柱层，粉碎，过筛，获得粒径50-100微米的珍珠层粉；
(2)外套膜小片制备：选用1.0-1.5龄的马氏珠母贝作为受体贝制作外套膜小片，沿外套膜色线上下各1mm位置剪取外套膜小条，利用解剖刀将外套膜小条切成0.5-1.0mm的组织小片；
(3)细胞悬浮液制备：在25-28℃条件下，利用浓度100-150单位/ml胰蛋白酶消化组织小片，消化时间1-2小时，1500转/min离心5分钟，去沉淀保留上清液，3000转/min离心10分钟，利用灭菌海水悬浮细胞；
(4)珍珠层粉与细胞混合液制备：将珍珠层粉加入细胞悬浮液，珍珠层粉浓度0.1-0.2mg/ml；
(5)植核育珠：选用1.0-1.5龄的马氏珠母贝作为受体贝，壳高4.5cm以上，利用注射器将步骤4)制备的悬浮液通过外套膜腔注射到靠近壳顶的结缔组织，注射量为0.3-0.5ml/贝，将育珠贝转移到海区养殖；
(6)二次植核育珠：经过6个月养殖后，进行第二次注射，操作同步骤2-5，注射量为0.1-0.2ml/贝；将育珠贝转移到海区养殖，经过1年养殖后，可以收获珍珠。
本发明的有益效果是：采用该方法能够提高微粒珍珠的产量，产生良好的经济效益与社会效益。
具体实施方式
实施例1
一种提高马氏珠母贝微粒珍珠产量的培育方法，包括如下步骤：
(1)珍珠层粉制备：挑选马氏珠母贝珍珠层颜色鲜亮的贝壳，去除贝壳的角质层与棱柱层，粉碎，过筛，获得粒径50微米的珍珠层粉；
(2)外套膜小片制备：选用1.0龄的马氏珠母贝作为供体贝制作外套膜小片，沿外套膜色线上下各1mm位置剪取外套膜小条，将外套膜小条切成0.5mm的组织小片；
(3)细胞悬浮液制备：在25℃条件下，利用浓度100单位/ml胰蛋白酶消化组织小片，消化时间1小时，1500转/min离心5分钟，保留上清液；3000转/min离心10分钟，利用灭菌海水悬浮细胞得细胞悬浮液；
(4)珍珠层粉与细胞悬浮液制备混合液：将珍珠层粉加入细胞悬浮液，制得混合液，珍珠层粉的浓度0.1mg/ml；
(5)植核育珠：选用1.0龄的马氏珠母贝作为受体贝，壳高4.5cm以上，利用注射器将步骤(4)制备的混合液通过外套膜腔注射到靠近壳顶的结缔组织，注射量为0.3ml/贝，将育珠贝转移到海区养殖；
(6)二次植核育珠：经过6个月养殖后，进行第二次注射，操作同步骤(2)-(5)，注射量为0.1ml/贝；将育珠贝转移到海区养殖，经过1年养殖后，可以收获珍珠。
实施例2
一种提高马氏珠母贝微粒珍珠产量的培育方法，包括如下步骤：
(1)珍珠层粉制备：挑选马氏珠母贝珍珠层颜色鲜亮的贝壳，去除贝壳的角质层与棱柱层，粉碎，过筛，获得粒径100微米的珍珠层粉；
(2)外套膜小片制备：选用1.5龄的马氏珠母贝作为供体贝制作外套膜小片，沿外套膜色线上下各1mm位置剪取外套膜小条，将外套膜小条切成1.0mm的组织小片；
(3)细胞悬浮液制备：在28℃条件下，利用浓度150单位/ml胰蛋白酶消化组织小片，消化时间2小时，1500转/min离心5分钟，保留上清液；3000转/min离心10分钟，利用灭菌海水悬浮细胞得细胞悬浮液；
(4)珍珠层粉与细胞悬浮液制备混合液：将珍珠层粉加入细胞悬浮液，制得混合液，珍珠层粉的浓度0.2mg/ml；
(5)植核育珠：选用1.5龄的马氏珠母贝作为受体贝，壳高4.5cm以上，利用注射器将步骤(4)制备的混合液通过外套膜腔注射到靠近壳顶的结缔组织，注射量为0.5ml/贝，将育珠贝转移到海区养殖；
(6)二次植核育珠：经过6个月养殖后，进行第二次注射，操作同步骤(2)-(5)，注射量为0.2ml/贝；将育珠贝转移到海区养殖，经过1年养殖后，可以收获珍珠。
实施例3
2016年12月，在湛江徐闻银辉珍珠养殖农民专业合作社进行马氏珠母贝微粒珍珠。选用珍珠层光亮，无损伤的贝壳，打磨去除角质层与棱柱层，将贝壳珍珠层粉碎，过筛，制备成50-100微米的珍珠层粉。从养殖群体中选选择500只健康的个体进行植核育珠，壳高>5.0cm。从1.0龄的养殖群体选择10个健康个体作为供体贝，制作外套膜小片，沿着色线位置剪取外套膜小条，利用解剖刀将外套膜小条切成0.5mm×0.5mm的组织块；室温条件下，利用100u/ml的胰蛋白酶液消化组织块，时间为2小时；利用离心机进行离心，转速1500转/min离心5分钟，将上清液转移到另外离心管进行第二次离心，转速3000转/min离心10分钟，利用100ml灭菌海水悬浮细胞，配成细胞悬浮液；在悬浮液中加入珍珠层粉，浓度为0.5mg/ml；将含有珍珠层粉的细胞悬浮液通过外套膜腔注射到壳顶的结缔组织，每个母贝注射量为0.2ml，然后将育珠贝转移到自然海区养殖。经过6个月后，进行第二次注射，含有珍珠层粉的悬浮液的浓度0.1mg/ml，每个母贝注射量为0.1ml。将育珠贝转移到自然海区养殖，经过12个月养殖后，解剖检查，每个育珠贝能收获10-20粒微粒珍珠。