本发明涉及中药材栽培技术领域，具体涉及一种提高博落回种子萌发率的方法。
背景技术：
博落回(macleayacordata)是一种多年生直立草本植物，属于罂粟科植物，全柱有大毒，全草均可入药，但不可内服，常用于治疗风湿骨病、跌打肿胀、蚊虫叮咬、皮肤瘙痒和痤疮等，疗效显著。目前在临床医学治疗上和农药生产中，对博落回的需要较大。博落回主要生长在150～830米的丘陵、山林草丛及灌木丛中，喜欢温暖湿润的生长环境，耐寒耐旱，对土壤没有较高的要求，但以肥沃土壤种植效果较好。博落回主要的繁殖方式为种子繁殖，但种子繁殖存在的最大问题是自然条件下博落回种子萌发率不高，在20～35％之间，难以进行大规模的人工栽培。近年发现博落回果荚与叶片中所含血根碱是抗生素类医药的天然替代品，使得博落回价值倍增，供不应求，博落回正在加快形成药材种植的新兴产业。因此，提供一种提高博落回种子萌发率的方法，对解决博落回野生资源短缺具有重要意义。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种提高博落回种子萌发率的方法，能够显著提高博落回种子的萌发率，便于其进行大规模的人工栽培。
为解决上述技术问题，本发明提供了以下技术方案：
一种提高博落回种子萌发率的方法，包括以下步骤：将博落回种子用外源试剂处理，沙藏层积后于栽培基质上进行栽培萌发；所述外源试剂依次为浓盐酸、细胞分裂素以及赤霉素和聚乙二醇的混合液。
优选的，所述浓盐酸处理时间为15～25min。
优选的，所述的细胞分裂素为浓度2.0mg/l的6-ba，浸泡时间1.5～3h。
优选的，所述赤霉素和聚乙二醇的混合液具体为300～500mg/l赤霉素和40～50mg/l聚乙二醇混合的水溶液，浸泡时间24～36h。
优选的，所述沙藏层积的时间为20～30d。
优选的，所述的栽培基质为河沙、营养土、椰糠和蛭石的混合物。
更优选的，所述河沙、营养土、椰糠和蛭石混合物的体积比为河沙：营养土：椰糠：蛭石＝1～1.5：1.8～3.2：0.5～1：0.5～1。
优选的，所述栽培萌发的温度为18-30℃，湿度为60-90％。
优选的，所述博落回种子栽培萌发后的种子进行播种，所述播种前还需施足腐熟农家肥，所述腐熟农家肥与河沙按4:1的比例混匀，施加腐熟农家肥量为1200～1500kg/667m2。
本发明的有益效果：
本发明所述方法采用外源试剂处理博落回种子，利用外源试剂促进种子的萌发，可有效打破种子休眠，提高种子的萌发率，同时采用沙藏层积处理20-30d，在选择最佳栽培条件和最佳基质的情况下，博落回种子的萌发率提高到75-80％，相较于现有博落回种子的萌发率提高近3倍，有利于实现博落回大规模的人工栽培。
具体实施方式
本发明提供了一种提高博落回种子萌发率的方法，包括以下步骤：将博落回种子用外源试剂处理，沙藏层积后于栽培基质上进行栽培萌发；所述外源试剂依次为浓盐酸、细胞分裂素以及赤霉素和聚乙二醇的混合液。
本发明所采用的博落回种子优选为采集的新鲜博落回种子。本发明在所述博落回种子用外源试剂处理前，优选的还包括博落回种子的清洗；所述清洗具体的将采集的博落回种子用温水清洗，挑选颗粒饱满的成熟种子；所述温水的温度优选为35～40℃，更优选为37～39℃。
本发明的博落回种子用外源试剂处理。在本发明中，先将博落回种子用浓盐酸进行处理；所述浓盐酸处理时间为15～25min，更优选的为18～22min。在本发明中，所述浓盐酸能够通过软化博落回种子的种皮，增强种子的透水性和透气性，从而促进博落回种子的萌发。在本发明中，对浓盐酸的质量分数并没有特殊要求，采用本领域常规质量分数的浓盐酸即可。
在本发明中，将经过浓盐酸处理后的种子使用细胞分裂素进行浸泡。本发明中所述细胞分裂素优选为6-ba；所述6-ba的浓度优选为0.5～2.5mg/l，更优选为1.5～2.3mg/l，最优选为2.0mg/l；所述的浸泡时间优选为1.5～3h，更优选为2.0～2.5h。本发明中所述细胞分裂素通过促进博落回种子细胞分裂、伸长，从而促进博落回种子的萌发。
在本发明中，博落回种子再用赤霉素和聚乙二醇的混合液进行浸种。本发明中所述赤霉素和聚乙二醇的混合液优选为300～500mg/l赤霉素和40～50mg/l聚乙二醇混合的水溶液，更优选为350～450mg/l赤霉素和43～46mg/l聚乙二醇混合的水溶液；所述的浸种时间优选为24～36h，更优选为28～30h。本发明所述的赤霉素和聚乙二醇混合液通过合理配比，能够促进细胞的生长，从而提高博落回种子的萌发率。
本发明所述博落回种子经外源试剂处理后，优选的需要将所述种子与河沙按1：(3.5～4)的比例混合，然后覆河沙进行沙藏层积处理；其中所述的覆河沙深度优选为2.5～4.5cm，更优选为3～4cm；所述的沙藏层积时间优选为20～30d，更优选为25～28d。
在本发明中，经沙藏层积处理后的种子优选的于栽培基质中进行萌发。本发明所述的栽培基质优选为河沙、营养土、椰糠和蛭石组成的混合基质；所述的混合基质体积比优选为河沙：营养土：椰糠：蛭石＝1～1.5：1.8～3.2：0.5～1：0.5～1，更优选为河沙：营养土：椰糠：蛭石＝1:2:1:1。
为了确定最佳的栽培基质，将外源试剂和沙藏层积处理过的博落回种子分别播在a：营养土；b：蛭石：营养土：泥炭：园土＝1:2:1:1；c：河沙：营养土：椰糠：蛭石＝1:2:1:1；d：蛭石：园土＝1:1四种栽培基质上，通过测定博落回种子的萌发率进行最佳栽培基质筛选可得到下表：
表1不同基质配比对博落回种子萌发率的影响
从表1可以看出，不同的基质配比对博落回种子萌发率具有不同的影响，其中以河沙：营养土：椰糠：蛭石＝1:2:1:1作为栽培基质时，博落回种子的萌发率最高，即河沙：营养土：椰糠：蛭石＝1:2:1:1为博落回的最佳栽培基质。
在本发明中，博落回种子的萌发条件优选为温度18～30℃，湿度60～90％。
为了确定博落回种子的最佳萌发条件，在筛选出最佳栽培基质(河沙：营养土：椰糠：蛭石＝1:2:1:1)的基础上，设置不同温度18℃，24℃和30℃；不同湿度：60％，75％，90％的条件下，通过测定博落回种子的萌发率可得到下表：
表2不同温度、湿度对博落回种子萌发率的影响
从表2可以看出，不同温度和湿度条件对博落回种子萌发率具有不同的影响，温度为24℃，湿度为60％时的栽培萌发条件下，博落回种子的萌发率最高，达到93.5％。
在本发明中，优选的，将经栽培萌发后的博落回种子进行播种，优选的播种前还需要施足腐熟农家肥。本发明优选将腐熟农家肥与河沙混合进行施肥。本发明中农家肥与河沙混匀的目的是增加土壤透气性，从而促进种子的萌发。所述的腐熟农家肥与河沙优选的按(3.5-4.5)：1的比例混匀，更优选的以4:1的比例进行混匀；所述施加腐熟农家肥量优选为1200～1500kg/667m2。
实验结果表明，本发明将采用外源试剂处理后博落回种子，沙藏层积后播种于最佳栽培基质上进行栽培，博落回种子的萌发率提高到75-80％，相较于现有博落回种子的萌发率提高近3倍。
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例对本发明进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
(1)将采集的博落回种子用温水清洗，挑选颗粒饱满的成熟种子用浓盐酸处理25min后用清水漂洗；
(2)将步骤(1)处理完毕的博落回种子用2.0mg/l细胞分裂素6-ba浸泡3h；
(3)将步骤(2)处理完毕的博落回种子水冲洗30min，用500mg/l赤霉素和50mg/l聚乙二醇混合液浸种24h后取出晾干种子表面上的水分；然后将博落回种子与河沙按1：4的比例混合均匀后装入网袋中，将网袋覆河沙4.5cm进行沙藏处理20d；
(4)在第二年3月中旬，将沙藏处理后的博落回种子于光照培养箱(温度24℃，湿度60％)中进行培养萌发，观察培养1-8周博落回种子的萌发情况。
实施例2
(1)将采集的博落回种子用温水清洗，挑选颗粒饱满的成熟种子用浓盐酸处理15min后用清水漂洗；
(2)将步骤(1)处理完毕的博落回种子用2.0mg/l细胞分裂素6-ba浸泡1.5h；
(3)将步骤(2)处理完毕的博落回种子水冲洗20min，用300mg/l赤霉素和40mg/l聚乙二醇混合液浸种36h后取出晾干种子表面上的水分；然后将博落回种子与河沙按1：4的比例混合均匀后装入网袋中，将网袋覆河沙2.5cm进行沙藏处理30d；
(4)在第二年3月中旬，将沙藏处理后的博落回种子于光照培养箱(温度24℃，湿度60％)中进行培养萌发，观察培养1-8周博落回种子的萌发情况。
实施例3
(1)将采集的博落回种子用温水清洗，挑选颗粒饱满的成熟种子用浓盐酸处理22min后用清水漂洗；
(2)将步骤(1)处理完毕的博落回种子用2.0mg/l细胞分裂素6-ba浸泡2.5h；
(3)将步骤(2)处理完毕的博落回种子水冲洗30min，用400mg/l赤霉素和45mg/l聚乙二醇混合液浸种30h后取出晾干种子表面上的水分；然后将博落回种子与河沙按1：4的比例混合均匀后装入网袋中，将网袋覆河沙3.5cm进行沙藏处理28d；
(4)在第二年3月中旬，将沙藏处理后的博落回种子于光照培养箱(温度24℃，湿度60％)中进行培养萌发，观察并记录培养1-8周博落回种子的萌发情况。
实施例4
操作步骤与实施例3相似，唯一不同的是步骤(4)中将沙藏处理后的博落回种子播种于温室大棚(温度18～25℃之间，湿度60～90％之间)中进行培养萌发，观察并记录培养1-8周博落回种子的萌发情况。
实施例5
操作步骤与实施例3相似，唯一不同的是步骤(4)中将沙藏处理后的博落回种子于室外大田进行培养萌发，观察并记录培养1-8周博落回种子的萌发情况。
通过测定实施例3-5不同栽培方式下博落回的萌发率可以得到下表：
表3不同栽培方式下博落回种子的萌发率
可以看出，采用本发明所述外源试剂处理过后的博落回种子，经沙藏层积处理后于最佳栽培基质中进行栽培，无论是在光照培养箱、温室大棚，还是在环境较复杂的室外大田下进行栽培萌发，都能显著提高博落回种子的萌发率。
对比例1
操作步骤与实施例3相同，唯一不同的是步骤(1)中博落回种子不经过浓盐酸处理，观察并记录博落回种子七周的萌发情况。
对比例2
操作步骤与实施例3相同，唯一不同的是步骤(2)中博落回种子不用细胞分裂素6-ba浸泡，观察并记录博落回种子七周的萌发情况。
对比例3
操作步骤与实施例3相同，唯一不同的是步骤(3)中博落回种子不用赤霉素和聚乙二醇混合液浸种，观察并记录博落回种子七周的萌发情况。
对比例4
操作步骤与实施例3相同，唯一不同的是先利用赤霉素和聚乙二醇混合液浸种，然后利用细胞分裂素6-ba浸泡，观察并记录博落回种子七周的萌发情况。
通过测定实施例3和对比例1-4博落回的萌发率可以得到下表：
表4不同外源试剂对博落回种子萌发率的影响
由表4可以看出，不同的外源试剂对于博落回种子的萌发率具有不同的影响，外源试剂的种类和使用顺序都会影响博落回种子的萌发率。其中，采用本发明所述的外源试剂种类及顺序能够显著提高博落回种子的萌发率，达到88.56％。
由上述实施例可知，本发明所述方法能够促进博落回种子萌发，可有效打破种子休眠，相较于自然条件下博落回种子的萌发率提高了近3倍，室外大田条件下的萌发率提高到了75-80％，便于其进行人工栽培，大大降低了博落回的繁殖成本。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。