荠菜在防治烟草青枯病菌中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物源农药技术领域，具体涉及一种荠菜在抑制、防治烟草青枯病菌 中的应用。
【背景技术】
[0002] 养菜（Capsella bursa-pastoris)，俗称护生草、净肠草，属十字花科养菜属草本 植物，同时，荠菜全草均可入药，又是药食同源植物。荠菜主要分布于亚热带和温带地区，其 中我国各地均见其生长，特别在田野、路边、庭院等处较为常见。
[0003] 荠菜富含有机酸、麦角克碱、延胡索酸、类黄酮、生物碱、氨基酸、多肽、丹宁等多种 活性成分，具有明目、强筋健骨、降压、消炎、镇痛、解痉、抗菌、抗癌、抗心律失常、清除自由 基、抗脂质过氧化、抗病毒、防衰老等预防疾病和治疗疾病的功效。
[0004] 尽管荠菜医用方面的研宄较多，但利用荠菜在防治植物病害方面的研宄报道较 少，尤其是防治烟草青枯病菌的研宄鲜见。因此，本发明以荠菜提取物对植物病原菌是否具 有抑制作用这一科学问题，首次进行室内抑菌试验，探索了提取方法，比较了不同部位抑菌 活性大小，测定了 MIC值等，初步明确了荠菜的开发潜力，旨在为今后研制植物源农药提供 理论依据和实践基础。
【发明内容】
[0005] 本发明所要解决的技术问题是：针对荠菜防治植物病害技术上的空白，提供了一 种荠菜在抑制、防治烟草青枯病中的应用。
[0006] 为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：一种荠菜在抑制烟草青枯 病菌中的应用。
[0007] 本发明同时提供一种荠菜在防治烟草青枯病菌中的应用。
[0008] 上述所指的应用实质上是指荠菜提取物在抑制/防治烟草青枯病菌中的应用。
[0009] 上述荠菜提取物为荠菜水提取物，是取荠菜洗净，晒干至含水量为0. 5-3. 5%后 粉碎，用无菌水对荠菜粉进行提取，所得滤液转入旋转蒸发仪浓缩至膏状得到。其中，粉碎 是以8000-10000r/min的转速，用粉碎机粉碎成100-120目干粉。用无菌水对荠菜粉进 行提取是指按Ig荠菜粉加20-25mL无菌水的比例，于荠菜粉中加入无菌水，于25-26°C以 80-120r/min震荡24-48h，过滤，收集滤液，滤渣重复提取1次，合并两次滤液，所得滤液经 双层纱布和滤纸过滤，再经〇. 22 y m细菌过滤器过滤，即得。
[0010] 上述荠菜提取物，可以采用荠菜全株作为原料，亦可采用荠菜根、荠菜茎或荠菜籽 中的一种或几种混合作为原料。本文中的荠菜全株包括根、茎、叶和籽，以便于区分单独的 荠菜根、荠菜茎和荠菜籽。
[0011] 本发明的荠菜的水提取物对烟草青枯病菌具有抑制作用；表明荠菜具有防治植物 病害尤其是烟草青枯病菌的功能；同时本发明的实现，为开发利用荠菜天然活性物质以及 研宄与开发新生物农药如烟草青枯病菌杀菌剂提供了科学依据。
【附图说明】
[0012] 图1是荠菜提取物对烟草青枯病菌的抑制作用。
[0013] 其中：A代表荠菜水提取物；B代表无菌水。
【具体实施方式】
[0014] 供试植物和菌株
[0015] 新鲜荠菜来自湖南农业大学浏阳科研基地；烟草青枯病菌（Ralstonia solannacearum)由湖南农业大学植物保护学院植物病理学实验室提供。
[0016] 烟草青枯病菌菌种的活化：采用接种环刮取3环菌种接入牛肉膏蛋白胨斜面培养 基（嫩)，26-28°〇下连续培养24-4811，待菌落长出后，制成浓度1.1\10 !^^/1^菌悬液（以 下均称为菌悬液），备用。
[0017] 供试培养基
[0018] 牛肉膏蛋白胨培养基（NA):牛肉膏5g、蛋白胨8g、氯化钠5g、琼脂20g、蒸馏水 1000 mL, pH 7. 0-7. 2 ；
[0019] 实施例1荠菜的水提取物对烟草青枯病菌的抑制作用
[0020] 取荠菜（全株，包括根、茎、叶及籽）洗净，晒干至含水量为0.5-3. 5%，以9000r/ min的转速，用粉碎机粉碎成100-120目干粉。
[0021] 称取20g荠菜干粉，加入400mL无菌水，25°C条件下，120r/min震荡24h，过滤，收 集滤液；滤渣重复提取1次，合并两次滤液，滤液经双层纱布和滤纸过滤，再经0. 22 y m细菌 过滤器过滤，所得滤液置于压力为0. 09-0.1 Mpa，水浴温度为60°C，冷凝温度为6°C，转速为 80r/min (旋转蒸发条件，下同），旋转至膏状物，无菌水定容为荠菜的水提取物，4°C保存备 用。
[0022] 采用抑菌圈法测定荠菜的水提取物对烟草青枯病菌的抑菌效果，灭菌的NA培养 基倒入培养皿中待其冷却，移液枪移取200 y L菌悬液，涂布均匀，打孔器（7_)在培养基上 打孔，注入100 y L提取物，无菌水做对照，每处理重复3次，将平皿置于分别置于26-28°C细 菌培养箱培养，观察结果，以出现最大抑菌圈的抑菌效果最佳，并用十字交叉法测量抑菌圈 直径，计算抑制率。
[0023]
【主权项】
1. 一种荠菜在抑制烟草青枯病菌中的应用。
2. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，是指荠菜提取物在抑制烟草青枯病菌中的 应用。
3. -种荠菜在防治烟草青枯病菌中的应用。
4. 如权利要求3所述的应用，其特征在于，是指荠菜提取物在防治烟草青枯病菌中的 应用。
5. -种荠菜在制备烟草青枯病菌杀菌剂的应用。
6. 如权利要求5所述的应用，其特征在于，是指荠菜提取物在制备烟草青枯病菌杀菌 剂中的应用。
7. 如权利要求2或4或6所述的应用，其特征在于，所述荠菜提取物为荠菜水提取物。
8. 如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述荠菜水提取物是取荠菜洗净，晒干至含 水量为0. 5-3. 5%后粉碎，用无菌水对荠菜粉进行提取，所得滤液入旋转蒸发仪浓缩至膏状 得到。
9. 如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述用无菌水对荠菜粉进行提取是指按Ig 荠菜粉加20-25mL无菌水的比例，于荠菜粉中加入无菌水，于25-26°C以80-120r/min震荡 24-48h，过滤，收集滤液，滤渣重复提取1次，合并两次滤液，所得滤液经双层纱布和滤纸过 滤，再经0. 22ym细菌过滤器过滤，即可。
10. 如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述荠菜粉为荠菜全株粉、荠菜根粉、荠菜 茎粉和荠菜籽粉中的一种或几种。
【专利摘要】本发明属于植物源农药技术领域，具体提供了一种荠菜在防治烟草青枯病菌中的应用。本发明探索荠菜提取物对烟草青枯病菌的抑制作用，结果发现荠菜提取物对烟草青枯病菌具有抑制作用，其抑制率为27.2％，其中根、茎、籽提取物抑菌效果最强，叶的抑菌效果为零。进一步研究结果显示荠菜根、茎、籽提取物对烟草青枯病菌的MIC值均为80mg/mL，为开发利用荠菜天然活性物质以及研究与开发新的生物农药提供了科学依据。
【IPC分类】A01P1-00, A01N65-08
【公开号】CN104770401
【申请号】CN201510209580
【发明人】廖晓兰, 刘双清, 谢燕, 张亚
【申请人】湖南农业大学
【公开日】2015年7月15日
【申请日】2015年4月29日