0g/L 蔗糖 +3.5g/L 琼脂，pH 为 5.4。
[0019](5)炼苗移栽:当组培苗具备发达健壮的根后，即可移栽。移栽在遮阴棚中进行。将生长健壮的试管苗在自然条件下炼苗5天，再开盖炼苗3天.在试管苗移栽前，基质先用0.5%的KMnSO4溶液消毒，后装入营养袋。用小勺轻轻取出带根小苗(带少许培养基)移到营养小钵中。移栽完用自动喷水装置将移栽苗浇透。以后每2h喷一次，每次喷50s，移栽20天后成活率达到90%以上。
[0020]实施例2
(I)外植体采集及消毒:选择连续3天以上的晴天，并在中午太阳暴晒后进行外植体采集。采取半木质化的侧芽作为外植体保湿并带回实验室。用自来水冲洗15min，在加有1%洗洁精的洗涤液中浸泡lOmin，用毛笔刷轻刷枝条，再用自来水冲洗40min，移至超净工作台。在超净工作台中，用75%的酒精浸泡30s后，用0.1% HgCl溶液消毒20min，并用无菌水冲洗5次后备用。
[0021](2)诱导培养:将步骤(I)处理好的白刺茎段切成1.5?2.0cm左右的带节茎段并接种于诱导培养基中进行不定芽诱导。接种后置于每天光照13小时，光照强度为20001x，置于培养温度为26°C，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后诱导率达到81.8%。所述的诱导培养基为:N6+4.0mg/L 6-BA+0.5mg/L 6-BA+0.8mg/L AC+20g/L 蔗糖 +5.5g/L 琼脂，pH 为 5.4。
[0022](3)增殖培养:以步骤(2)诱导得到不定芽作为材料，将老化的和生长不良的不定芽去掉，并将生长状态良好的不定芽切成单芽并转入增殖培养基进行扩繁。接种后置于每天光照14小时，光照强度为30001χ，置于培养温度为26°C，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后增殖系数为3.41。所述的增殖培养基为！Ne+!.5mg/L 6 - BA+0.3mg/LIBA+30g/L蔗糖+4.5g/L琼脂，pH为5.4。
[0023](4)生根培养:将经步骤(3)后得到的生长较一致且健壮的未生根的无菌苗单株切下转入生根培养基诱导。接种后置于每天光照13小时，光照强度为30001χ，置于培养温度为26°C，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后生根率达到92.6%。所述的生根培养基为:l/2MS+0.5mg/LNAA+25g/L 蔗糖 +5.5g/L 琼脂，pH 为 5.4。
[0024](5)炼苗移栽:当组培苗具备发达健壮的根后，即可移栽。移栽在遮阴棚中进行。将生长健壮的试管苗在自然条件下炼苗5天，再开盖炼苗3天.在试管苗移栽前，基质先用0.5%的KMnSO4溶液消毒，后装入营养袋。用小勺轻轻取出带根小苗(带少许培养基)移到营养小钵中。移栽完用自动喷水装置将移栽苗浇透。以后每2h喷一次，每次喷50s，移栽20天后成活率达到95%以上。
【主权项】
1.一种白刺组培快繁技术，其特征在于包括以下步骤: (1)外植体采集及消毒:选择连续3天以上的晴天，并在中午太阳暴晒后进行外植体采集，采取半木质化的侧芽作为外植体保湿并带回实验室，用自来水冲洗10?20min，在加有1%洗洁精的洗涤液中浸泡5?lOmin，用毛笔刷轻刷枝条，再用自来水冲洗30?50min，移至超净工作台，在超净工作台中，用70%?80%的酒精浸泡20?30s后，用0.1% HgCl溶液消毒15?30min,并用无菌水冲洗4?6次后备用； (2)诱导培养:将步骤(I)处理好的白刺茎段切成1.5?2.0cm左右的带节茎段并接种于诱导培养基中进行不定芽诱导，接种后置于每天光照12?14小时，光照强度为1000?20001x，置于培养温度为25?28°C，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计诱导率; (3)增殖培养:以步骤(2)诱导得到不定芽作为材料，将老化的和生长不良的不定芽去掉，并将生长状态良好的不定芽切成单芽并转入增殖培养基进行扩繁，接种后置于每天光照12?14小时，光照强度为2000?30001x，置于培养温度为25?28°C，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计增殖情况； (4)生根培养:将经步骤(3)后得到的生长较一致且健壮的未生根的无菌苗单株切下转入生根培养基诱导，接种后置于每天光照12?14小时，光照强度为2000?30001χ，置于培养温度为25?28°C，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计生根情况； (5)炼苗移栽:当组培苗具备发达健壮的根后，即可移栽，移栽在遮阴棚中进行，将生长健壮的试管苗在自然条件下炼苗5?7天，再开盖炼苗3?5天.在试管苗移栽前，基质先用0.5%的KMnSO4S液消毒，后装入营养袋，用小勺轻轻取出带根小苗(带少许培养基)移到营养小钵中，移栽完用自动喷水装置将移栽苗浇透，以后每2h喷一次，每次喷50s。
2.根据权利要求1所述的一种白刺组培快繁技术，其特征在于步骤(2)所述的诱导培养基为:N6+1.0 ?5.0mg/L 6-BA+0.1 ?1.0mg/L 6-BA+0.5 ?lmg/L AC+25 ?30g/L 鹿糖+3.5 ?6.0g/L 琼脂，pH 为 5.4 ?5.8。
3.根据权利要求1所述的一种白刺组培快繁技术，其特征在于步骤(3)所述的增殖培养基为:N6+1.0 ?2.0mg/L 6 — ΒΑ+0.1 ?0.5mg/LIBA+25 ?30g/L 蔗糖 +3.5 ?6.0g/L 琼脂，pH 为 5.4 ?5.8。
4.根据权利要求1所述的一种白刺组培快繁技术，其特征在于步骤(4)所述的生根培养基为:1/2MS+0.1 ?0.5mg/LNAA+20 ?30g/L 蔗糖 +3.5 ?6.0g/L 琼脂，pH 为 5.4 ?5.8。
【专利摘要】本发明公开了一种白刺组培快繁技术，白刺属（NitrariaL.)是蒺藜科（Zygophyllaceae）的1个古老小属，属地中海线-中亚荒漠植物区的灌木层中的建群种或优势种之一，具有极强的耐旱性、耐盐碱性和耐寒性,它可以防风固沙、改善土壤,是盐碱地生态植被恢复的优良树种。本发明以白刺半木质化的侧芽为外植体，通过外植体消毒、不定芽诱导、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程获得了白刺离体再植株，建立了有效的白刺组培快繁殖技术体系，短时期内即可生产大量种苗，提高繁殖效率，降低生产成本，有利加快其繁育及推广。
【IPC分类】A01H4-00
【公开号】CN104782489
【申请号】CN201510216174
【发明人】冯文杰
【申请人】冯文杰
【公开日】2015年7月22日
【申请日】2015年5月2日