一种促进蓝莓组培苗瓶外生根的育苗方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种促进蓝莓组培苗瓶外生根的育苗方法，属于蓝莓育苗技术领域。
【背景技术】
[0002] 蓝莓又名蓝浆果，属杜鹃花科越橘属植物，多年生落叶或常绿灌木，其果实种子 小，果肉细腻，果味甜酸适口，营养丰富，鲜果中含蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素以及 磷、钙、镁、铁、铜、锌等矿质元素，还含有花色素苷等防止脑神经衰弱、增强心脏功能、明目 及抗癌等独特活性物质，因此，被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一。
[0003] 优良蓝莓品种的常规繁殖速度慢，繁殖规模受插条数量的限制，在短期内不能满 足生产需要，利用组织培养技术可以快速高效地获得大量蓝莓优良品种的无性系组培苗， 是进行优质蓝莓品种种苗繁育的最佳途径。
[0004] 蓝莓组培快繁培养程序多，技术要求高，利用组培苗瓶外生根技术可以减少组培 苗培养环节，缩短育苗周期，降低种苗成本，是一项蓝莓组培快繁工厂化育苗的创新技术。 但是目前仍然存在一些问题，如：（1)组织培养繁殖育苗培养过程复杂、培养时间长；（2)组 培苗驯化成活率低，容易污染死亡；（3)组培苗瓶外生根困难、成活率低等问题。
【发明内容】
[0005] 发明目的：为了克服现有技术中存在的不足，本发明提供了一种促进蓝莓组培苗 瓶外生根的育苗方法。
[0006] 技术方案：为实现上述目的，本发明提供了一种促进蓝莓组培苗瓶外生根的育苗 方法，包括以下步骤：
[0007] (1)蓝莓组织培养方法：选取蓝莓植株的茎尖生长点作为外植体，切段、消毒，接 种在添加有激素的WPM培养基上，诱导丛生芽；经过40-50天的诱导培养，蓝莓外植体在诱 导培养基上长出新芽，然后调整培养基中激素的浓度，降低为原来的1/2,进行继代培养， 48-52天继代一次，进行6-7代继代培养，得初始组培苗；
[0008] (2)壮苗培养：在温度为24-26摄氏度，光照强度为2500-3500勒克斯，光照时间 为每天13-15小时的条件下，对上述初始组培苗进行壮苗培养，当组培苗高度达到5-8厘米 时，即得壮苗；
[0009] (3)组培苗扦插：取上述壮苗，洗掉培养基，修剪，然后放置在生根液中浸蘸1-2分 钟，插入具有培养基质的穴盘内，压紧，每穴1株，插入的深度为2-3厘米；
[0010] (4)插后管理：将上述穴盘放置在小拱棚内，拱棚上面覆盖塑料薄膜，上盖遮阳 网，立即喷水1次，15天内遮荫，保持温度23-28摄氏度，湿度90 %以上，每天叶面喷水2-3 次，待生根和有新叶长出时，逐渐去掉拱棚上的遮阳网和塑料薄膜，并且喷水次数减少为每 天1天，即完成瓶外生根过程。
[0011] 作为优选，所述步骤（1)中的添加有激素的WPM培养基，其中所述激素为玉米素， 其浓度为2-4mg/L。
[0012] 作为另一种优选，所述步骤（2)和（3)之间还包括炼苗驯化过程：将所述壮苗放在 温室移动苗床上，盖上1层遮阳网，放置6-8天，然后打开遮阳网，把瓶盖拧松，再炼苗6-8 天，多次转动瓶身，使之逐步适应温室的温度、光照条件，得炼苗，然后再将炼苗进行步骤 (3)组培苗扦插过程；
[0013] 作为另一种优选，所述步骤⑷中的生根液为萘乙酸水溶液，其浓度为 (900-1100)mg/L。
[0014] 作为另一种优选，所述步骤（4)中的培养基质是由苔藓所制成，所述苔藓选用弱 酸性苔藓，使用前先浸泡11-13小时，然后甩干，塞进穴盘内，即得所述培养基质。
[0015] 所述甩干后苔藓的湿度以稍用力能挤出水滴而又不会连成水线为准；所述穴盘的 大小为3cmX5cm。
[0016] 作为另一种优选，所述步骤（5)中的小拱棚设置在温室内的移动苗床上，其高度 为48-52cm，内部安装喷灌设备，移动苗床上面铺有一层无纺布用于保湿。
[0017] WPM培养基为本领域组织培养常用培养基。
[0018] 有益效果：相对于现有技术，本发明育苗方法具有以下优势；
[0019] (1)与单纯的组织培养繁殖种苗相比，采用组培苗瓶外生根育苗方法，简化了组培 程序，缩短了育苗时间，节约组培育苗成本，平均能节约成本30-40% ;
[0020] (2)采用本发明过渡式组培苗驯化方法，能够降低组培苗污染死亡率；
[0021] (3)采用本发明组培苗扦插专用基质，利用本发明的组培苗扦插技术方法及激素 处理可以提高扦插生根率；
[0022] (4)利用本发明的繁育设施及扦插后综合管理措施，可以提高瓶外生根苗的成活 率。
【具体实施方式】
[0023] 下面结合实施例对本发明作更进一步的说明。
[0024] 实施例1 :
[0025] (1)蓝莓组织培养方法：选择优良蓝莓品种的健壮、无病虫害植株，挑选发育良好 的当年生枝条新梢，取其幼嫩的茎尖生长点作为外植体，切段、消毒，接种在添加有玉米素 的WPM培养基上，玉米素的浓度为2mg/L，诱导丛生芽；经过40天的诱导培养，蓝莓外植体 在诱导培养基上长出新芽，然后调整培养基中玉米素的浓度为原来的1/2,进行继代培养， 48天继代一次，进行6代继代培养，得初始组培苗；
[0026] (2)壮苗培养：在温度为24摄氏度，光照强度为2500勒克斯，光照时间为每天13 小时的条件下，对上述初始组培苗进行壮苗培养，当组培苗高度达到5厘米时，即得壮苗；
[0027] (3)炼苗驯化过程：将所述壮苗放在温室移动苗床上，盖上1层遮阳网，放置6天， 然后打开遮阳网，把瓶盖拧松，再炼苗6天，多次转动瓶身，使之逐步适应温室的温度、光照 条件，得炼苗；
[0028] (4)组培苗扦插：选择生长健壮、木质化程度好的上述炼苗，用镊子轻轻取出，洗 掉培养基，用剪刀剪去插穗苗根部膨大部分，把芽苗下部三分之一部分的叶片去掉，保留中 上部的叶片，然后放置在生根液中浸蘸1分钟，插入具有培养基质的穴盘内，压紧，每穴1 株，插入的深度为2厘米；
[0029] (5)插后管理：将上述穴盘放置在小拱棚内，拱棚上面覆盖塑料薄膜，上盖遮阳 网，立即喷水1次，15天内遮荫，保持温度23摄氏度，湿度90%以上，每天叶面喷水2次， 待生根和有新叶长出时，逐渐去掉拱棚上的遮阳网和塑料薄膜，并且喷水次数减少为每天1 天，即完成瓶外生根过程。
[0030] 所述步骤⑷中的生根液为萘乙酸水溶液，其浓度为900mg/L;培养基质是由苔藓 所制成，所述苔藓选用弱酸性苔藓，使用前先浸泡11小时，然后甩干，塞进穴盘内，即得所 述培养基质。
[0031] 所述甩干后苔藓的湿度以稍用力能挤出水滴而又不会连成水线为准；所述穴盘的 大小为3cmX5cm。
[0032] 所述步骤（5)中的小拱棚设置在温室内的移动苗床上，其高度为48cm，内部安装 喷灌设备，移动苗床上面铺有一层无纺布用于保湿。
[0033] 实施例2 :
[0034] (1)蓝莓组织培养方法：选择优良蓝莓品种的健壮、无病虫害植株，挑选发育良好 的当年生枝条新梢，取其幼嫩的茎尖生长点作为外植体，切段、消毒，接种在添加有玉米素 的WPM培养基上，玉米素的浓度为4mg/L，诱导丛生芽；经过50天的诱导培养，蓝莓外植体 在诱导培养基上长出新芽，然后调整培养基中玉米素的浓度为原来的1/2,进行继代培养， 52天继代一次，进行7代继代培养，得初始组培苗；
[0035] (2)壮苗培养：在温度为26摄氏度，光照强度为3500勒克斯，光照时间为每天15 小时的条件下，对上述初始组培苗进行壮苗培养，当组培苗高度达到8厘米时，即得壮苗；
[0036] (3)组培苗扦插：选择生长健壮、木质化程度好的上述壮苗，用镊子轻轻取出，洗 掉培养基，用剪刀剪去插穗苗根部膨大部分，把芽苗下部三分之一部分的叶片去掉，保留中 上部的叶片，然后放置在生根液中浸蘸2分钟，插入具有培养基质的穴盘内，压紧，每穴1 株，插入的深度为3厘米；
[0037] (4)插后管理：将上述穴盘放置在小拱棚内，拱棚上面覆盖塑料薄膜，上盖遮阳 网，立即喷水1次，15天内遮荫，保持温度28摄氏度，湿度90%以上，每天叶面喷水3次， 待生根和有新叶长出时，逐渐去掉拱棚上的遮阳网和塑料薄膜，并且喷水次数减少为每天1 天，即完成瓶外生根过程。
[0038] 所述步骤（4)