一种农用杀线虫组合物及其应用
【专利摘要】本发明提供了一种农用杀线虫组合物，包括以下重量份数的组分：药物活性组分20～90份，所述药物活性组分包括重量份数比为(30～90):(20～80)的淡紫拟青霉和阿维菌素；药物载体15～60份；辅助剂0.1～15份。本发明中，淡紫拟青霉和阿维菌素的复配，使得到的农用杀线虫组合物高效、低毒，杀虫效果稳定。实验结果表明，淡紫拟青霉和阿维菌素复配的农用杀线虫组合物，防效最高可达86％以上，杀线虫效果要远远高于单独喷施淡紫拟青霉或阿维菌素。CGMCC No.799420130813
【专利说明】
一种农用杀线虫组合物及其应用
技术领域
[0001] 本发明涉及农药技术领域，尤其涉及一种农用杀线虫组合物及防治农作物病害的 应用。
【背景技术】
[0002] 线虫可侵袭和寄生植物，被侵袭和寄生的植物因线虫吸收体内营养而影响正常的 生长发育，而且在线虫代谢过程中的分泌物还会刺激寄主植物的细胞和组织，导致植株畸 形，使农作物减产或质量下降。较为严重的植物线虫病有根结线虫病、大豆胞囊线虫病、小 麦粒线虫病、甘薯茎线虫病、水稻干尖线虫病、粟线虫病、松材线虫病、柑橘半穿刺线虫病 等。现有技术中常常选用药物进行防治，比如采用90%晶体敌百虫800倍溶液处理，防效仅 为45.8%，1.5%阿维菌素颗粒剂2.5kg/667m 2的防效为39.6%，采用阿维菌素与氨基寡糖 素母药的组合物进行防治，其防治效果为73.91%，达到的防治效果都比较低。
[0003] 淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus Samson)属于内寄生性真菌，此菌广泛分 布于世界各地，具有功效高、寄主广、易培养等优点，特别在控制植物病原线虫方面功效卓 著，比如对南方根结线虫、孢囊线虫、白色球孢囊线虫、穿刺线虫、金色线虫、异皮线虫和珍 珠线虫有较强的寄生能力，可侵染线虫的卵，进而达到杀虫的目的，该病原真菌具有致病性 强，有效期较长。阿维菌素是由微生物发酵的抗生素杀虫剂，该杀虫剂以防治鳞翅目害虫、 害螨和木虱为主，兼治蚜虫等同翅目害虫，对其具有胃毒和触杀作用。但是单一采用淡紫拟 青霉或阿维菌素进行防治，其防治效果较低，防治效果不甚理想。
[0004] 为了克服单一类型杀虫剂或复合类型杀虫剂防治效果低的问题，急需提供一种广 谱高效的农用杀线虫组合物。
【发明内容】
[0005] 有鉴于此，本发明的目的在于针对现有技术的不足，而提供一种农用杀线虫组合 物。
[0006] 本发明提供了一种农用杀线虫组合物，包括以下重量份数的组分：
[0007] 药物活性组分20~90份，所述药物活性组分包括重量份数比为（30~90): (20~ 80)的淡紫拟青霉和阿维菌素；
[0008] 药物载体15~60份；
[0009] 辅助剂0.1~15份。
[0010]进一步，所述的淡紫拟青霉选自生物保藏编号为CGMCC No.7994的菌种。
[0011] 进一步，所述的淡紫拟青霉的制备方法包括以下步骤：
[0012] 1)将淡紫拟青霉菌种活化；
[0013] 2)将所述活化后的淡紫拟青霉接种于淡紫拟青霉液体培养基中进行液体发酵，培 养55~75h停止发酵，得到淡紫拟青霉发酵液；
[0014] 3)将所述步骤2)得到的淡紫拟青霉发酵液接种于淡紫拟青霉固体培养基中，铺 盘，进行浅盘发酵，得到淡紫拟青霉。
[0015] 进一步，所述活化后的淡紫拟青霉接种于液体培养基的接种量为10~30%;所述 淡紫拟青霉发酵液接种于固体培养基的接种量为10~30%。
[0016] 进一步，所述淡紫拟青霉的液体培养基包括以下组分:蔗糖20~40g/L，黄豆粉1.0 ~10g/L，硝酸铵1.0~2. Og/L，磷酸氢二钠1.5~3 .Og/L，硫酸镁0.15~0.32g/L，氯化钾0.1 ~1 · Og/L，硫酸铁0 · 01 ~0 · 1 Og/L。
[0017]进一步，所述淡紫拟青霉的固体培养基包括以下重量份数的组分：麦麸60~100 份，玉米粉5~15份，谷壳5~15份。
[0018] 进一步，所述的阿维菌素为90wt%~97wt%固体粉状阿维菌素或10wt%~15wt% 的阿维菌素油膏。
[0019] 进一步，所述淡紫拟青霉在固体发酵结束后还包括干燥步骤，所述干燥的温度为 30~50°C，所述干燥的时间为20~45h。
[0020] 进一步，所述药物载体包括硅藻土、滑石粉、白炭黑、硫酸钠、陶土和高岭土中的一 种或几种。
[0021 ]进一步，所述辅助剂包括葡萄糖和/或玉米淀粉。
[0022] 进一步，所述的农用杀线虫组合物在防治农作物线虫方面的应用。
[0023] 本发明提供了一种农用杀线虫组合物，包括以下重量份数的组分:药物活性组分 20~90份，所述药物活性组分包括重量份数比为（30~90): (20~80)的淡紫拟青霉和阿维 菌素;药物载体15~60份;辅助剂0.1~15份。在本发明中，淡紫拟青霉和阿维菌素的复配， 使得到的农用杀线虫组合物高效、低毒，杀虫效果稳定，安全性高，环保性能好。实验结果表 明，淡紫拟青霉和阿维菌素复配的农用杀线虫组合物，防效最高可达86%以上，杀线虫效果 要远远高于单独喷施淡紫拟青霉或阿维菌素。
[0024]生物保藏说明
[0025] 淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)，于2013年08月13日保藏在中国微生物菌 种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院 微生物研究所，生物保藏编号为CGMCC No. 7994。
【具体实施方式】
[0026] 本发明提供了一种农用杀线虫组合物，包括以下重量份数的组分：
[0027] 药物活性组分20~90份，所述药物活性组分包括重量份数比为（30~90) : (20~ 80)的淡紫拟青霉和阿维菌素;药物载体15~60份;辅助剂0.1~15份。
[0028]本发明提供的农用杀线虫组合物包括20~90份药物活性组分，优选为50~80份， 更优选的为70份。在本发明中，所述的药物活性组分包括重量比为(30~90): (20~80)的淡 紫拟青霉和阿维菌素，所述的药物活性组分中，淡紫拟青霉和阿维菌素的重量份数比优选 的为(40~80): (30~70)，更优选的为(45~60): (40~60)，最优选为50:50。
[0029]在本发明中，所述淡紫拟青霉为选自生物保藏编号为CGMCC No.7994的菌种，在实 施例中，可具体采用经过固体发酵后并烘干粉碎得到的固体粉状淡紫色拟青霉。
[0030] 在本发明中，所述的淡紫拟青霉的制备方法包括以下步骤：
[0031] 1)将淡紫拟青霉菌种活化；
[0032] 2)将所述活化后的淡紫拟青霉接种于淡紫色拟青霉液体培养基中进行液体发酵， 培养55~75h停止发酵，得到淡紫拟青霉发酵液；
[0033] 3)将所述步骤2)得到的淡紫拟青霉发酵液接种于淡紫拟青霉固体培养基中，铺 盘，进行浅盘发酵，得到淡紫拟青霉。
[0034]本发明中淡紫拟青霉菌种的活化是将保藏的淡紫拟青霉菌种接种于装有营养琼 脂培养基的茄型瓶中，25~30°C培养10~14h进行活化培养。
[0035]在本发明中，所述活化后的淡紫拟青霉接种于液体培养基的接种量优选为10~ 30%，更优选为15~25%，最优选为20% ;所述淡紫拟青霉发酵液接种于固体培养基的接种 量优选为10~30%，更优选为15~25%，最优选为20%。
[0036]在本发明中，所述淡紫拟青霉液体培养基优选包括以下组分:蔗糖20~40g/L，黄 豆粉1.0~10g/L，硝酸铵1.0~2. Og/L，磷酸氢二钠1.5~3 .Og/L，硫酸镁0.15~0.32g/L，氯 化钾0.1~1.0g/L，硫酸铁0.01~0.10g/L;更优选为蔗糖25~35g/L，黄豆粉3.0~7g/L，硝 酸铵1 · 3~1 · 7g/L，磷酸氢二钠1 · 8~2 · 4g/L，硫酸镁0 · 20~0 · 28g/L，氯化钾0 · 3~0 · 7g/L， 硫酸铁0.03~0.07g/L;最优选为蔗糖30g/L，黄豆粉5g/L，硝酸铵1.5g/L，磷酸氢二钠 2 · 06g/L，硫酸镁 0 · 24g/L，氯化钾 0 · 5g/L，硫酸铁 0 · 05g/L。
[0037]在本发明中，所述淡紫拟青霉液体发酵所接种的液体培养基优选经120~130°C灭 菌30~45min后使用。本发明对培养基的灭菌设备没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知 的灭菌设备即可，如高压蒸汽灭菌锅。本发明对所述发酵的设备没有特殊的限定，采用本技 术领域熟知的发酵设备即可，如发酵罐。
[0038]在本发明中，所述淡紫拟青霉液体发酵的温度优选为25~30°C，更优选的为26~ 29°C，最优选为28°C ;所述淡紫拟青霉液体发酵的pH值优选为6.6~7.2，更优选的为6.8~ 7.0，最优选为6.9;罐内压力优选为0.05~0.1 MPa，更优选的为0.07~0.08MpPa;所述液体 发酵的通气量优选为0.8~1.2V/V · min，更优选的为1V/V · min;所述淡紫拟青霉液体发酵 的时间优选为55~75h，更优选为60~70h，更优选为65h。
[0039] 完成所述淡紫拟青霉液体发酵后，本发明将得到的淡紫拟青霉发酵液接种于固体 培养基中，进行浅盘发酵，得到固体发酵淡紫拟青霉。在本发明中，所述淡紫拟青霉固体培 养基优选包括以下重量份的组分:麦麸60~100份，玉米粉5~15份，谷壳5~15份;更优选为 麦麸70~90份，玉米粉7~12份，谷壳7~12份;最优选为麦麸80份，玉米粉10份，谷壳10份。 本发明优选在所述淡紫拟青霉固体培养基中添加蒸馏水，使固体培养基含水量优选为45% ~55%，更优选为47%~52%，最优选为50%，然后铺盘，进行浅盘发酵。本发明对所述添加 的蒸馏水没有特殊的限定，采用本领域技术人员常规使用的蒸馏水即可。
[0040] 在本发明中，所述阿维菌素为90wt%~97wt%固体粉状阿维菌素或10wt%~ 15wt%的阿维菌素油膏；更优选为92wt%~95wt%固体粉状阿维菌素或12wt%~14wt%的 阿维菌素油膏；最优选为93wt%固体粉状阿维菌素或13wt%的阿维菌素油膏。本发明对所 述的阿维菌素的来源没有特殊的限定，采用市售商品即可。
[0041] 在本发明中，所述淡紫拟青霉固体发酵的温度优选为24~30°C，更优选的为26~ 29°C，最优选为28°C ;所述淡紫拟青霉固体发酵的时间优选为5~10d，更优选为6~9d，最优 选为7d;所述淡紫拟青霉固体发酵的湿度前三天优选为60%~90%，剩余时间优选为10% ~40 % ;更优选为70 %~85 %，15 %~35 % ;最优选为80 %，30 %。
[0042]完成所述淡紫拟青霉固体发酵后，本发明优选将得到固体发酵培养基烘干、粉碎 和过筛，得到固体粉状淡紫拟青霉。在本发明中，所述烘干的温度优选为30~50°C，干燥的 时间优选为20~45h，更优选为35~45°C，30~40h，最优选为40°C，35h;本发明将固体发酵 培养基烘干至水分含量优选在25~35 %之间，更优选为27~32 %，最优选为30 %。本发明对 所述固体发酵培养基粉碎的方法没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的粉碎方法即 可。在本发明中，所述固体粉状淡紫拟青霉过筛优选采用80~100目，更优选为85~95目，最 优选为90目。
[0043]本发明提供的农用杀线虫组合物优选包括15~60份药物载体，更优选为25~50 份，最优选为35份。在本发明中，对所述的药物载体没有特殊的限定，采用市售商品即可。具 体的可优选轻质硅藻土、滑石粉、白炭黑、硫酸钠、陶土和高岭土中的一种或几种。药物载体 具体的可为上述物质中的任意几种，可任意比例混合。本发明所述的药物载体具有良好的 药物稳定性，亦可提高药物的药效。
[0044] 本发明提供的农用杀线虫组合物优选包括0.1~15份辅助剂，更优选为6~12份， 最优选为10份。在本发明中，对所述的辅助剂没有特殊的限定，采用市售商品即可。具体的 可为葡萄糖或玉米淀粉的一种或两种。辅助剂具体的可为上述物质中的两种，可任意比例 混合。在本发明中，所述的辅助剂可使药物性状稳定，提高药效。
[0045] 本发明对所述的农用杀线虫组合物的制备方法没有特殊的限定，采用本领域技术 人员熟知的组合物的制备方法即可。具体的可将所述的药物活性组分、药物载体和辅助剂 混合后制备得到。
[0046] 本发明所述的农用杀线虫组合物可应用于农作物防治线虫的方面，提供了一种所 述农用杀线虫组合物在防治农作物线虫方面的应用。具体的，可应用的农作物种类包括粮 食作物、经济作物、蔬菜作物、果类作物、饲料作物等。本发明所述的农用杀线虫组合物可防 治各类线虫和害螨，包括南方根结线虫、孢囊线虫、白色球孢囊线虫、穿刺线虫、金线虫、异 皮线虫、珍珠线虫、蚜虫、木虱等。
[0047] 本发明对所述的农用杀线虫组合物的施药方法没有特殊限定，采用本领域技术人 员熟知的施药方法即可。具体可包括以下步骤:将本发明所述的农用杀线虫组合物用水稀 释得到1000~4000倍稀释液后，进行顺垄喷施。
[0048]下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显 然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实 施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属 于本发明保护的范围。
[0049] 实施例1
[0050] 固体粉状淡紫拟青霉的制备:将保藏的淡紫拟青霉菌种接种于装有营养琼脂培养 基的茄型瓶中，28 °C培养12h进行活化培养;活化培养后的淡紫拟青霉以20 %的接种量接种 于121°C灭菌35min后的液体培养基中，在发酵罐中进行液体发酵，具体的发酵条件为:温度 为28°C ;pH值为6.9;罐内压力为0.08MPa，发酵通气量为1V/V · min;发酵65h后停止发酵，得 到淡紫拟青霉发酵液;将得到的淡紫拟青霉发酵液以20%的接种量接种于固体培养基中， 在固体培养基中加入蒸馏水，使固体培养基含水量为50%，然后铺盘，进行浅盘发酵，发酵 条件为：发酵温度为28°C，发酵湿度前三天为80%，后四天发酵湿度为30%，发酵时间为7 天；固体发酵结束后将得到的固体发酵的淡紫拟青霉在40°C条件下烘干35h，烘干至固体发 酵的淡紫拟青霉的水分含量为30 %，粉碎过90目筛，得到固体粉状淡紫拟青霉。
[0051 ] 实施例2
[0052] 农用杀线虫组合物的制备：以重量份数计，将实施例1中制备得到的固体淡紫拟青 霉50份、阿维菌素50份，硅藻土 26.7份，葡萄糖6.7份混合，得到农用杀线虫组合物。
[0053] 实施例3
[0054] 农用杀线虫组合物的制备：以重量份数计，将实施例1中制备得到的固体淡紫拟青 霉40份、阿维菌素25份，娃藻土 10份，白炭黑10份，高岭土5份，葡萄糖5份，玉米粉5份混合， 得到农用杀线虫组合物。
[0055] 实施例4
[0056] 农用杀线虫组合物的制备：以重量份数计，将实施例1中制备得到的固体淡紫拟青 霉45份、阿维菌素20份，硅藻土 50份，滑石粉10份，陶土 8份，硫酸钠7份，玉米粉5份混合，得 到农用杀线虫组合物。
[0057] 实施例5
[0058] 农用杀线虫组合物的制备：以重量份数计，将实施例1中制备得到的固体淡紫拟青 霉32.5份、阿维菌素32.5份，娃藻土 10份，滑石粉10份，白炭黑5份，葡萄糖5份，玉米粉5份混 合，得到农用杀线虫组合物。
[0059] 实施例6
[0060]药效试验:本次试验在江西省进行，防治品种为火龙果，管理良好，根结线虫发生 中等偏重。本次试验将实验田均分为四个区域，区域1为对照组，只顺垄喷施清水；区域2顺 垄喷施实施例2中制备的农药杀线虫组合物2000倍稀释液；区域3顺垄喷施不含淡紫拟青 霉，只含阿维菌素及载体和辅助剂的组合物，药物活性组分的浓度与区域2相同；区域4顺垄 喷施不含阿维菌素，只含淡紫拟青霉及载体和辅助剂的组合物，药物活性组分的浓度与区 域2和3相同；四个区域的用药量相同，施药后1天，3天，5天，7天各调查一次活虫数，计算虫 口减退率。具体结果如表1所示，由表1的数据可以得出，区域2的虫口减退率最高，表明本发 明制备的农药杀线虫组合物的杀虫效果最好，其药效均高于同浓度的单独喷施阿维菌素或 者淡紫拟青霉。
[0061] 表1农用杀线虫组合物的杀虫(根结线虫)效果
[0062]
[0063] 从表1的试验数据可以得出，本发明制备的农用杀线虫组合物7天的虫口减退率可 高达86.2%，其杀虫效果远远高于单独顺垄喷施淡紫拟青霉或阿维菌素。
[0064] 实施例7
[0065] 药效试验:本次试验在江西省进行，防治品种为柑橘，管理良好，穿刺线虫发生中 等偏重。本次试验将实验田均分为四个区域，区域1为对照组，只顺垄喷施清水；区域2顺垄 喷施实施例2中制备的农药杀线虫组合物2000倍稀释液；区域3顺垄喷施不含淡紫拟青霉， 只含阿维菌素及载体和辅助剂的组合物，药物活性组分的浓度与区域2相同；区域4顺垄喷 施不含阿维菌素，只含淡紫拟青霉及载体和辅助剂的组合物，药物活性组分的浓度与区域2 和3相同；四个区域的用药量相同，施药后1天，3天，5天，7天各调查一次活虫数，计算虫口减 退率。具体结果如表2所示，由表2的数据可以得出，区域2的虫口减退率最高，表明本发明制 备的农药杀线虫组合物的杀虫效果最好，其药效均高于同浓度的单独喷施阿维菌素或者淡 紫拟青霉。
[0066] 表2农用杀线虫组合物的杀虫(穿刺线虫)效果
[0067]
[0068] 从表2的试验数据可以得出，本发明制备的农用杀线虫组合物7天的虫口减退率可 高达86.4%，其杀虫效果远远高于单独顺垄喷施淡紫拟青霉或阿维菌素。
[0069] 由以上实施例可知，本发明制备的农用杀线虫组合物，对虫害的防治率可高达 86%以上，杀虫效果要远远高于单独使用淡紫色拟青霉或阿维菌素。
[0070] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种农用杀线虫组合物，包括以下重量份数的组分： 药物活性组分20~90份，所述药物活性组分包括重量份数比为（30~90): (20~80)的 淡紫拟青霉和阿维菌素； 药物载体15~60份； 辅助剂0.1~15份。2. 根据权利要求1所述的农用杀线虫组合物，其特征在于，所述的淡紫拟青霉选自生物 保藏编号为CGMCC No.7994的菌种。3. 根据权利要求1所述的农用杀线虫组合物，其特征在于，所述的淡紫拟青霉的制备方 法包括以下步骤： 1) 将淡紫拟青霉菌种活化； 2) 将所述活化后的淡紫拟青霉接种于淡紫拟青霉液体培养基中进行液体发酵，培养55 ~75h停止发酵，得到淡紫拟青霉发酵液； 3) 将所述步骤2)得到的淡紫拟青霉发酵液接种于淡紫拟青霉固体培养基中，铺盘，进 行浅盘发酵，得到淡紫拟青霉。4. 根据权利要求3所述的农用杀线虫组合物，其特征在于，所述活化后的淡紫拟青霉接 种于液体培养基的接种量为10~30% ; 所述淡紫拟青霉发酵液接种于固体培养基的接种量为10~30%。5. 根据权利要求4所述的农用杀线虫组合物，其特征在于，所述淡紫拟青霉的液体培养 基包括以下组分:蔗糖20~40g/L，黄豆粉1.0~10g/L，硝酸铵1.0~2.0g/L，磷酸氢二钠1.5 ~3 · Og/L，硫酸镁0 · 15~0 · 32g/L，氯化钾0 · 1 ~1 · Og/L，硫酸铁0 · 01 ~0 · 10g/L; 所述淡紫拟青霉的固体培养基包括以下重量份数的组分:麦麸60~100份，玉米粉5~ 15份，谷壳5~15份。6. 根据权利要求1所述的农用杀线虫剂组合物，其特征在于，所述的阿维菌素为90wt% ~97wt %固体粉状阿维菌素或IOwt %~15wt %的阿维菌素油膏。7. 根据权利要求3所述的农用杀线虫组合物，其特征在于，所述淡紫拟青霉在固体发酵 结束后还包括干燥步骤，所述干燥的温度为30~50°C，所述干燥的时间为20~45h。8. 根据权利要求1所述的农用杀线虫组合物，其特征在于，所述药物载体包括硅藻土、 滑石粉、白炭黑、硫酸钠、陶土和高岭土中的一种或几种。9. 根据权利要求1所述的农用杀线虫组合物，其特征在于，所述辅助剂包括葡萄糖和/ 或玉米淀粉。10. 权利要求1~9任意一项所述的农用杀线虫组合物在防治农作物线虫方面的应用。
【文档编号】A01N63/04GK105901017SQ201610349222
【公开日】2016年8月31日
【申请日】2016年5月24日
【发明人】罗双燕, 梁小文, 王根豪, 严艺波, 李肖宇, 吴俊杰, 石峥, 曾升华
【申请人】江西天人生态股份有限公司