一种人工诱导砗磲排放配子的方法
【专利摘要】本发明公开了一种人工诱导砗磲配子排放的方法。它包括以下步骤：a、选取成熟亲贝：在砗磲繁殖期内，筛选个头大、健康无损个体作为亲贝；b、配制催产试剂：将5?羟色胺按照0.6?0.8mg/ml浓度溶于生理盐水中，作为催产剂；c、注射亲本催产：根据砗磲重量，按照0.6?1.25ml/kg亲本将催产剂注射到砗磲体内，砗磲排精排卵，得到配子。利用本发明方法可以高效率获得砗磲精卵，配子排放率近乎100％，这为砗磲人工繁育、遗传育种、增殖放流等奠定了坚实基础。
【专利说明】
一种人工诱导砗磲排放配子的方法
技术领域
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[0001]本发明属于海洋农业中贝类繁育技术领域，具体涉及一种人工诱导砗磲排放配子的方法。
【背景技术】
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[0002]砗磲从西太平洋到印度洋非洲东海岸均有分布，栖息于低潮区附近的珊瑚礁间。它们是珊瑚礁生态系统中造礁主要生物物种，对珊瑚骨架具有支撑作用。它们不但具有美丽的外套膜，具有较高的观赏价值;而且肉可食用，具有很好的滋阴壮阳功效，深受国际市场青睐。
[0003]在我国的台湾、海南、西沙群岛及其它南海岛屿也有分布，分别为库氏砗磲、无鳞砗磲、鳞砗磲、长砗磲、番红砗磲、砗蠔等。长期以来，由于渔民过渡采捕，导致砗磲资源锐减。为此，如何快速恢复我国南海砗磲资源，维护珊瑚礁生态系统高多态性，成为关系到国计民生的焦点问题。其中，采用人工繁育增加砗磲数量是最有效的解决办法之一。那么，采用何种催产方式，如何获得砗磲配子成为本发明的主要创新点。
【发明内容】
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[0004]本发明的目的是提供一种人工诱导砗磲排放配子的方法。本发明可以高效获得成熟的砗磲精卵，为砗磲人工繁育、遗传育种、增殖放流奠定了坚实的基础。
[0005]本发明的人工诱导砗磲排放配子的方法，其特征在于，包括以下步骤:
[0006]a、选取成熟亲贝:根据砗磲繁育规律，在砗磲繁殖期内，筛选个头大、健康无损个体作为亲贝；
[0007]b、配制催产试剂:将5-轻色胺按照0.6-0.8mg/ml浓度溶于生理盐水中，作为催产剂；
[0008]c、注射亲本催产:根据砗磲重量，按照0.6-1.25ml/kg砗磲将催产剂注射到砗磲体内，大约10分钟之内开始排精，之后排卵，催产效率100 %。
[0009]优选，所述的选取成熟亲贝中的砗磲繁殖期，由于不同砗磲物种繁殖期存在差异，通常是通过注射器抽取性腺中少量精卵显微镜检查作为标准，成熟的精子在显微镜下不停跳到，成熟的卵子直径在ΙΟΟμπι左右，卵黄积累颜色为深黄色或者黑色。
[0010]优选，所述的配制催产试剂中的催产剂，配制出来为无色透明液体，一般有效试用期在2个月以内，如果发现液体颜色变黄，说明已经变质，不能使用。
[0011]优选，所述的注射亲本催产中，注射部位可以是砗磲足基部、外套膜内层肌肉或性腺。
[0012]利用本发明方法可以100%获得砗磲精卵，配子排放率近乎100 %，这为砗磲人工繁育、遗传育种、增殖放流方奠定了坚实基础。
[0013]李育培、卢传安公开了对比文件，一种砗磲贝的人工诱导产卵方法，专利号为ZL201310184339.7。本发明与对比文件相比，具有以下主要不同点:①方法不同:对比文件是物理诱导方法，而本发明是一种化学诱导方法;②繁琐程度不同:对比文件相对比较麻烦，需要暴晒、性产物诱导等技术手段，反复蒸腾砗磲亲贝，而本发明步骤极其简单，仅需要打入催产剂即可;③效率不同:对比文件诱导催产比率仅为80%相对较低，而本发明产卵排精比率可以达到100%;④排放率不同:对比文件排放配子不完全，而本发明配子排放率近乎100%;⑤时间间隔不同:对比文件诱导时间较长，累计诱导时间4.5-5.0小时，才可以排放配子，而本发明从催产到排放配子时间非常短，在10分钟之内；⑥时效性不同:对比文件时效性较差，仅在大潮期间诱导，亲本产卵排精时间受到严重限制，而本发明全天候可催产亲贝，不受日月大潮限制。由此可见，本发明是一种简单、快速获取砗磲配子的有效方法，为砗磲苗种产业化生产提供了良好的基础，具有很好的应用推广前景。
【具体实施方式】
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[0014]以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
[0015]实施例1:
[0016]a、选取成熟亲贝:2016年4月初，从海南岛琼海购买鳞砗磲25只，平均体重每个个体5kg，利用水车运送至中科院南海海洋研究所海南热带海洋生物实验站，将其放置于水池中，流水暂养3d。在此期间，发现砗磲对光线反应灵敏，非常健康。经注射器经出水孔从性腺中取出少许性腺，在显微镜下观察，发现精子跳动频繁，卵子直径在ΙΟΟμπι，卵黄深黄色，说明性腺已经成熟，处于繁殖期内；
[0017]b、配制催产试剂:将5-羟色胺按照0.8mg/ml浓度溶于生理盐水中，作为催产剂，该试剂无色透明；
[0018]C、注射亲本催产:随机抽取6只砗磲，每只注射3ml催产剂，注射部位为足基部，之后单独放置于盛满30L新鲜海水的红桶中，大约经过5-6分钟，砗磲开始排放精子，排放精子持续了 10分钟左右，之后我们将其放置另外盛满50L新鲜海水的白桶中，大约经过10-12分钟之后开始排放卵子，卵子排放时间大约持续了 1.0-1.5小时。这样，我们成功的获得了砗磲成熟配子。经过检测，6只砗磲全部排放配子，其中4只雌雄同体，排放了精卵，2只均为雌性，仅仅排放了卵子。对其排放后砗磲性腺进行了检测，显微镜下已经没有任何配子，说明排放率接近100 %。
[0019]由此可见，通过本发明，可以100%成功催产砗磲，配子排放率近乎100%。
[0020]实施例2:
[0021]a、选取成熟亲贝:2016年3月末，从海南岛琼海购买长砗磲12只，平均体重每个个体3kg，利用水车运送至中科院南海海洋研究所海南热带海洋生物实验站，将其放置于水池中，流水暂养5d。在此期间，发现砗磲对光线反应灵敏，非常健康。经注射器经出水孔从性腺中取出少许性腺，在显微镜下观察，发现精子跳动频繁，卵子直径在ΙΟΟμπι，卵黄深黄色，说明性腺已经成熟，处于繁殖期内；
[0022]b、配制催产试剂:将5-羟色胺按照0.6mg/ml浓度溶于生理盐水中，作为催产剂，该试剂无色透明；
[0023]c、注射亲本催产:随机抽取7只砗磲，每只注射2ml催产剂，注射部位为外套膜内层肌肉，之后单独放置于盛满30L新鲜海水的红桶中，大约经过7-8分钟，长砗磲开始排放精子，排放精子持续了 10分钟左右，之后我们将其放置另外盛满50L新鲜海水的白桶中，大约经过8-10分钟之后开始排放卵子，卵子排放时间大约持续了 45-60分钟。这样，我们成功的获得了砗磲成熟配子。经过检测，7只砗磲全部排放配子，其中6只雌雄同体，排放了精卵，I只均为雌性，仅仅排放了卵子。对其排放后砗磲性腺进行了检测，显微镜下已经没有任何配子，说明排放率接近100%。
[0024]由此可见，通过本发明，可以100%成功催产砗磲，配子排放率近乎100%。
[0025]实施例3:
[0026]a、选取成熟亲贝:2016年4月初，从海南岛琼海购买番红砗磲109只，平均体重每个个体0.4kg，利用水车运送至中科院南海海洋研究所海南热带海洋生物实验站，将其放置于水池中，流水暂养3d。在此期间，发现砗磲对光线反应灵敏，非常健康。经注射器经出水孔从性腺中取出少许性腺，在显微镜下观察，发现精子跳动频繁，卵子直径在ΙΟΟμπι，卵黄深黄色，说明性腺已经成熟，处于繁殖期内；
[0027]b、配制催产试剂:将5-轻色胺按照0.6mg/ml浓度溶于生理盐水中，作为催产剂，该试剂无色透明；
[0028]C、注射亲本催产:随机抽取15只番红砗磲，每只注射0.5ml催产剂，注射部位为性腺部位，之后单独放置于盛满2L新鲜海水的红桶中，大约经过2-3分钟，番红砗磲开始排放精子，排放精子持续了3分钟左右，之后我们将其放置另外盛满5L新鲜海水的蓝桶中，大约经过3-4分钟之后开始排放卵子，卵子排放时间大约持续了 5-6分钟。这样，我们成功的获得了番红砗磲成熟配子。经过检测，15只砗磲全部排放配子，其中9只雌雄同体，排放了精卵，6只均为雄性，仅仅排放了精子。对其排放后砗磲性腺进行了检测，显微镜下已经没有任何配子，说明排放率接近100%。
[0029 ]由此可见，通过本发明，可以100 %成功催产砗磲，配子排放率近乎100%。
[0030]实施例4:
[0031]a、选取成熟亲贝:2016年4月初，从海南岛琼海购买砗蠔25只，平均体重每个个体5kg，利用水车运送至中科院南海海洋研究所海南热带海洋生物实验站，将其放置于水池中，流水暂养3d。在此期间，发现砗蠔对光线反应灵敏，非常健康。经注射器经出水孔从性腺中取出少许性腺，在显微镜下观察，发现精子跳动频繁，卵子直径在120μπι，卵黄深黄色，说明性腺已经成熟，处于繁殖期内；
[0032]b、配制催产试剂:将5-羟色胺按照0.6mg/ml浓度溶于生理盐水中，作为催产剂，该试剂无色透明；
[0033]c、注射亲本催产:随机抽取9只砗蠔，每只注射3ml催产剂，注射部位为外套膜内层肌肉，之后单独放置于盛满20L新鲜海水的红桶中，大约经过5-6分钟，砗蠔开始排放精子，排放精子持续了 6-7分钟左右，之后我们将其放置另外盛满30L新鲜海水的白桶中，大约经过7-8分钟之后开始排放卵子，卵子排放时间大约持续了 30-40分钟。这样，我们成功的获得了砗蠔配子。经过检测，9只砗磲全部排放配子，其中7只雌雄同体，排放了精卵，2只均为雄性，仅仅排放了精子。对其排放后砗蠔性腺进行了检测，显微镜下已经没有任何配子，说明排放率接近100 %。
[0034]由此可见，通过本发明，可以100%成功催产砗蠔，配子排放率近乎100%。
[0035]实施例5:
[0036]a、选取成熟亲贝:2016年4月初，从海南岛琼海购买瓷口砗蠔17只，平均体重每个个体4kg，利用水车运送至中科院南海海洋研究所海南热带海洋生物实验站，将其放置于水池中，流水暂养3d。在此期间，发现砗蠔对光线反应灵敏，非常健康。经注射器经出水孔从性腺中取出少许性腺，在显微镜下观察，发现精子跳动频繁，卵子直径在120μπι，卵黄深黄色，说明性腺已经成熟，处于繁殖期内；
[0037]b、配制催产试剂:将5-羟色胺按照0.8mg/ml浓度溶于生理盐水中，作为催产剂，该试剂无色透明；
[0038]c、注射亲本催产:随机抽取12只瓷口砗蠔，每只注射3ml催产剂，注射部位为外套膜内层肌肉，之后单独放置于盛满20L新鲜海水的红桶中，大约经过4-6分钟，砗蠔开始排放精子，排放精子持续了 5-8分钟左右，之后我们将其放置另外盛满30L新鲜海水的白桶中，大约经过6-8分钟之后开始排放卵子，卵子排放时间大约持续了 30-40分钟。这样，我们成功的获得了瓷口砗蠔配子。经过检测，12只砗磲全部排放配子，其中1只雌雄同体，排放了精卵，2只均为雄性，仅仅排放了精子。对其排放后砗蠔性腺进行了检测，显微镜下已经没有任何配子，说明排放率接近100%。
[0039 ]由此可见，通过本发明，可以100 %成功催产瓷口砗蠔，配子排放率近乎100%。
【主权项】
1.一种人工诱导砗磲排放配子的方法，其特征在于，包括以下步骤: a、选取成熟亲贝:在砗磲繁殖期内，筛选个头大、健康无损个体作为亲贝；b、配制催产试剂:将5-轻色胺按照0.6-0.8mg/ml浓度溶于生理盐水中，作为催产剂； c、注射亲本催产:根据砗磲重量，按照0.6-1.25ml/kg亲本将催产剂注射到砗磲体内，砗磲排精排卵，得到配子。2.根据权利要求1所述的人工诱导砗磲排放配子的方法，其特征在于，所述的将催产剂注射到砗磲体内，其注射部位是砗磲足基部、外套膜内层肌肉或性腺。
【文档编号】A01K61/00GK105961242SQ201610311636
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年5月11日
【发明人】张跃环, 肖述, 马海涛, 喻子牛
【申请人】中国科学院南海海洋研究所