专利名称：一种杀灭腌制食品蝇卵的乳化肉桂油的制备和用法的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于杀灭腌制食品蝇卵的乳化肉桂油制备和使用方法。
背景技术：
腌制食品，包括火腿、咸鲞等，是我国具有悠久历史的传统食品，浙江省金华、衢州一带生产的“金华火腿”，温岭市松门镇生产的“松门白鲞”历来畅销各地，享有盛誉。近年来随着火腿产销量的增大，冬季加工火腿的传统方式已逐渐演变为全年加工，以海鱼为原料的咸鲞加工主要处于盛夏季节，因此火腿、咸鲞腌制和晾晒露天作业不可避免，很容易被蝇类产卵，孳生蝇蛆。由于缺乏有效的控制技术和安全性防虫剂，防蝇一直是影响火腿和咸鲞质量的难题。2003年至2004年，一些不法商贩在加工火腿、咸鲞时违法施用敌百虫、敌敌畏的“毒火腿”(晓谈.浙江金华“毒火腿”案分析.中国牧业通讯，2004年，第18期)、“毒咸鲞”(俞曼华，冯瑛.由毒咸鲞事件引发的思考.中国农村卫生事业管理，2004年，第7期)事件相继被新闻媒体披露，引起了社会的广泛关注，成为两大负面影响较大的典型食品安全案例。因此食品行业非常需要具有食品安全性的腌肉咸鲞防蝇技术和食品添加剂产品。
植物精油是植物体内的次生代谢物质，现已发现不少植物精油对害虫有熏蒸、触杀、驱避等活性，是一类对环境友好的天然杀虫活性物质，目前已发现肉桂(Cinnamomun cassia)油、八角茴香(IIlicum verum)油等精油对储粮害虫黄粉虫(Tenebrio molitor)、麦蛾(Sitotroga cerealella)和赤拟谷盗(Tribolliumcastaneum)有很强的杀卵作用；肉桂油、芸香(Ruta graveolens)油等对螺旋蝇(Cochiliomyia americana)有杀卵作用。肉桂油在0.1-0.2％浓度下处理小麦能有效抑制玉米象(Sitophilus zeamais)的繁殖(徐汉虹.杀虫植物与植物杀虫剂.北京中国农业出版社，2001出版)。江志利等(六种植物精油对家蝇的熏蒸及触杀毒力测定.农药学学报，2002年第1期)曾采用6种植物精油，对家蝇(Muscadomesticac)成虫进行了熏蒸及触杀毒力测定，发现肉桂油具有触杀活性。
韩国学者Kim等曾报道[Insecticidal activities of aromatic plant extracts andessential oils against Sitophilus oryzae and Callosobruchus chinensis.J Stored ProdRes，2003年，第39卷；Contact and fumigant activities of aromatic plant extractsand essential oils against Lasioderma serricorne(ColepteraAnobiidae).J StoredProd Res，2003第39卷]，肉桂油对贮粮害虫米象(Sitophilus orazea)、绿豆象(Callosobruchus chinensis)、烟草甲(Lasioderma serricorne)有熏蒸作用；与肉桂同属的锡兰肉桂(C.zeylanicum)油对人体头虱卵和成虫有很强的毒杀作用[Yang YC，Lee HS，Lee SH，et al.Ovicidial and adultcidal activities of Cinnamomumzeylanicum bark essential oil compounds and related compounds against Pediculushumamus capities(AnopluraPediculicidae).Inter J Parasito.2005，第35卷]。
我国肉桂植物资源丰富，是国际上肉桂油产量最大的国家，作为一种食品添加剂(GB 2970-1996.中华人民共和国国家标准.食品添加剂卫生标准.北京中国标准出版社，1997年出版)，目前肉桂油已在食品保藏领域作为保鲜剂、抗菌防腐剂、抗氧化剂、贮粮害虫防虫剂已广泛应用(Burt S.Essential oiltheirantibacterial properties and potential application in foods-a review.InternationalMicrobiology，2004年，第94卷)。但以往肉桂油的防虫和防霉作用主要在密闭环境中以熏蒸方式发挥，需要采用酒精或丙二醇等有机助剂进行稀释，而腌肉咸鲞在加工和洗晒过程被蝇产卵后，通常需要在开放环境中通过水溶液浸泡进行灭卵。由于肉桂油不溶解于水，不适合直接用水稀释应用；同时，因存在易燃易爆问题和成本过高问题，也不适合用有机助剂稀释，这样在具体使用中受到很大限制，而乳化方法则是解决这一问题的有效途径。
发明内容
本发明的目的是提供一种杀灭腌制食品蝇卵的乳化肉桂油的制备和用法。
用于杀灭腌制食品蝇卵的乳化肉桂油以重量百分比计其组分为含辛癸酸甘油酯0.3～0.9％、肉桂油5～9％、纯胶9～13％、蔗糖酯0.2～0.4％、其余为水。
以重量百分比计其组分为含辛癸酸甘油酯0.6％、肉桂油7％、纯胶9％、蔗糖酯0.4％、其余为水。
用于杀灭腌制品食品蝇卵的乳化肉桂油的制备方法将重量百分比为9～13％的纯胶溶于蒸馏水中，边搅拌边加热至50～60℃保温，充分溶解后加入重量百分比为0.2～0.4％的蔗糖酯，搅拌均匀，然后加入0.3～0.6％的辛癸酸甘油酯与5～7％的肉桂油组成的平衡油，搅拌均匀；用剪切乳化搅拌机5000～8000rpm剪切预乳化5～9min，用高压均质设备在15～25MPa压力下均质2～3次，每次均质3～5min，得乳化肉桂油。
将重量百分比为9％的纯胶溶于蒸馏水中，边搅拌边加热至50～60℃保温，充分溶解后加入重量百分比为0.4％的蔗糖酯，搅拌均匀，然后加入0.6％的辛癸酸甘油酯与7％的肉桂油组成的平衡油，搅拌均匀；用剪切乳化搅拌机8000rpm剪切预乳化5min，用高压均质设备在25MPa压力下均质2次，每次均质5min，得乳化肉桂油。
用于杀灭腌制食品蝇卵的乳化肉桂油的使用方法首先将乳化肉桂油用水稀释50～80倍，然后将带有丝光绿蝇或大头金蝇卵于制食品浸泡到稀释溶液中，浸泡时间为10～30min。
首先将乳化肉桂油用水稀释60倍，然后将带有丝光绿蝇或大头金蝇卵的腌制食品浸泡到稀释溶液中，浸泡时间为20min。
用于杀灭腌制食品蝇卵的乳化肉桂油经理化卫生指标测定，该产品符合国家标准《食品添加剂乳化香精》GB 10355-89规定；经口小鼠急性毒性测定，产品LD50大于20g/kg，符合食品无毒级标准。
将该产品用水稀释50-80倍后浸泡咸鲞腌肉，可有效杀死丝光绿蝇和大头金蝇虫卵。采用HPLC测定，经乳化肉桂油60-80倍液浸泡处理后晒干的咸鲞中未检出肉桂油的主成分肉桂醛残留，显示不影响咸鲞腌肉品质。
图1是用于杀灭腌制食品蝇卯的乳化肉桂油的制备方法流程图；图2是乳化肉桂油不同浸泡浓度和时间处理腌鱼的杀卵效果比较图；图3是显示肉桂醛特征峰的乳化肉桂油HPLC测定结果图；图4是未显示肉桂醛残留特征峰，经乳化桂油60倍稀释液浸泡处理10min的咸鲞干HPLC测定结果图。
具体实施例方式
本发明通过以下实施例进一步详述，但不限于本实施例。
实施例1将重量百分比为9％的纯胶溶于蒸馏水中，边搅拌边加热至50℃保温，充分溶解后加入重量百分比为0.4％的蔗糖酯，搅拌均匀，然后加入0.6％的辛癸酸甘油酯与7％的肉桂油组成的平衡油，搅拌均匀；用剪切乳化搅拌机5000rpm剪切预乳化5min，用高压均质设备在20MPa压力下均质2次，每次均质5min，得乳化肉桂油。
上述乳化肉桂油中主要成分肉桂醛含量可用无吡啶盐酸羟胺肟化法测定即用分析天平准确称取上述乳化肉桂油样品10g左右于250mL磨口烧瓶中，加入溴酚蓝指示剂1mL及95％乙醇50mL，用0.5000mol/L NaOH标准溶液滴定至黄绿色(变色点PH值为4.1)，然后用滴定管准确加入0.5mol/L的盐酸羟胺-95％乙醇液40mL摇匀。置于100℃的恒温水浴中加热回流2h，取出后迅速冷却至室温，以0.5000mol/L NaOH标准溶液滴定至黄绿色。同样条件下作一空白试验，即取与样品配方同样的配料(除肉桂油外)溶于蒸馏水中，在同样条件下进行测定。
桂醛含量采用计算式1计算
计算式1式中X——样品桂醛含量(质量百分含量)；m-为样品质量(g)；M-为桂醛的摩尔质量，132.16g/mol；V-为样品消耗的NaOH标准溶液体积(mL)；V0-V0为空白消耗的NaOH标准溶液体积(mL)；C-NaOH标准溶液浓度，0.5000mol/L经测定样品中乳化肉桂油含桂醛5.0-5.6g/100mL。
取样乳化肉桂油，按GB 10355-89《食品添加剂乳化香精》标准规定方法测定结果，各项理化卫生指标见(附表1)符合此国家标准，即粒度＜2μm，铅(Pb)含量≤0.001％(即10mg/L)，砷(As)含量≤0.0003％(即3mg/L)，菌落总数＜100个/ml、大肠菌群≤30个/ml。
表1乳化肉桂油理化卫生指标检验结果
选用体重在20g左右的小鼠50只，雌雄各半，进行最大耐受量试验。采用10g/kg和20g/kg两种剂量，每种剂量用小鼠20只，雌雄各半，以乳化肉桂油对小鼠进行一次性经口灌胃染毒，对照组用蒸馏水进行灌胃。灌胃后一周内观察小鼠的死亡情况。结果一周内未出现死亡，小鼠急性毒性LD50大于20g/kg，符合食品无毒标准(LD50大于15g/kg)，显示安全性可靠。
实施例2将重量百分比为13％的纯胶溶于蒸馏水中，边搅拌边加热至60℃保温，充分溶解后加入重量百分比为0.2％的蔗糖酯，搅拌均匀，然后加入0.3％的辛癸酸甘油酯与5％的肉桂油组成的平衡油，搅拌均匀；用剪切乳化搅拌机8000rpm剪切预乳化6min，用高压均质设备在25MPa压力下均质2次，每次均质5min，得乳化肉桂油。
上述乳化肉桂油中主成分桂醛按实施例1所述无吡啶盐酸羟胺肟化法测定，含量在3.5-4.0g/100mL。
实施例3将重量百分比为11％的纯胶溶于蒸馏水中，边搅拌边加热至55℃保温，充分溶解后加入重量百分比为0.3％的蔗糖酯，搅拌均匀，然后加入0.9％的辛癸酸甘油酯与9％的肉桂油组成的平衡油，搅拌均匀；用剪切乳化搅拌机6000rpm剪切预乳化5min，用高压均质设备在25MPa压力下均质2次，每次均质4min，得乳化肉桂油。
上述乳化肉桂油中主要成分桂醛按实施例1所述无吡啶盐酸羟胺肟化法测定，含量在6-7g/100mL。
实施例4取新鲜蝇卵卵块放平皿内，选择饱满的卵粒，将蝇卵用小镊子移到咸鲞肉块表面，每块咸鲞肉上放30粒卵，外包尼龙纱。用上述实施例1配方的乳化肉桂油的60、80倍水溶液浸泡咸鲞20s、10min和20min，对照组用等量水液处理，每个处理设3个重复。随后置26℃温度下，48h后用开水烫漂咸鲞肉块，计数蛆虫数，根据蛆虫数换算出死亡蝇卵数，按下述计算式2、3计算出校正死亡率。结果见图2。
按下述计算式1、2计算出校正死亡率。结果校正死亡率达到80.00％。
计算式2 计算式3
由图2可见，经60倍、80倍肉桂油乳液处理10min和20min，校正未孵化率均可达到100％，而仅浸泡20s的咸鲞还有少量蝇卵能孵化。由此确定用该乳液的60-80倍稀释液浸泡腌鱼10-20min，可达到杀灭蝇卵的良好效果。
取腌制白姑鱼，用乳化肉桂油的60～80倍稀释液的浸泡10min，在太阳下晒成咸鲞干，同时以未经肉桂油乳液处理的咸鲞干为对照。分别准确称取每种处理和对照咸鲞干约0.5g于100mL三角瓶中，准确量取50mL甲醇于三角瓶中，密封，称重。然后超声波提取30min，称重，用甲醇补足失重。取上清液用0.45μm微孔滤膜过滤作HPLC进样，进样量为20μl。色谱条件Kromasil C18色谱柱5μm(4.6mm×250mm)；流动相乙腈-0.1％磷酸溶液(35∶65)，流速1mL·min-1；柱温40℃；检测波长291nm，每个样品20min。同时建立肉桂醛(中国药品生物制品检定所提供)对照品的标准曲线，并进行乳化肉桂油中肉桂醛的含量测定。测定结果，咸鲞干的甲醇提取液色谱图中均未显示乳化肉桂油色谱图中出现的桂醛特征蜂(图3-4)，即咸鲞干中未检出到桂醛残留。此结果表明，经该60倍肉桂油乳液浸泡处理，基本不影响咸鲞干品质。
实施例5取新鲜蝇卵卵块放于平皿内，选择饱满的蝇卵，将卵用小镊子移到载玻片上，每块玻片上放30粒卵，玻片放入垫有湿润滤纸片的培养皿内。取实施例2的乳化肉桂油用水稀释50倍，每个处理设3块带卵玻璃片，稀释液以平均每卵0.5μl的剂量，用移液枪滴加到卵上，对照组用等量水液处理，同时设用清水处理的对照带卵玻璃片3块。随后置26℃温度下，24小时后观察卵的孵化情况，分别计数死亡的蝇卵数，按上述实施例1中计算式1、2计算校正死亡率。结果校正死亡率达到80.00％。
实施例6取新鲜蝇卵卵块放平皿内，选择饱满的卵粒，将卵用小镊子移到载玻片上，每块玻片上放30粒卵，玻片放入放有湿润滤纸片的培养皿内。取上述实施例3的乳化肉桂油，用水稀释80倍，每个处理3块带卵玻璃片，稀释液以平均每卵0.5μl的剂量，用移液枪滴加到卵上，对照组用等量水液处理，同时设用清水处理的对照带卵玻璃片3块。随后置26℃温度下，24小时后观察卵的孵化情况，分别计数死亡的蝇卵数，按上述实施例1中计算式1、2计算出校正死亡率。结果校正死亡率达到95.33％。
权利要求
1.一种用于杀灭腌制食品蝇卵的乳化肉桂油，其特征在于，以重量百分比计其组分为含辛癸酸甘油酯0.3～0.9％、肉桂油5～9％、纯胶9～13％、蔗糖酯0.2～0.4％、其余为水。
2.根据权利要求1所述的一种用于杀灭腌制食品蝇卵的乳化肉桂油，其特征在于，以重量百分比计其组分为含辛癸酸甘油酯0.6％、肉桂油7％、纯胶9％、蔗糖酯0.4％、其余为水。
3.一种如权利要求1所述用于杀灭腌制食品蝇卵的乳化肉桂油的制备方法，其特征在于将重量百分比为9～13％的纯胶溶于蒸馏水中，边搅拌边加热至50～60℃保温，充分溶解后加入重量百分比为0.2～0.4％的蔗糖酯，搅拌均匀，然后加入0.3～0.9％的辛癸酸甘油酯与5～9％的肉桂油组成的平衡油，搅拌均匀；用剪切乳化搅拌机5000～8000rpm剪切预乳化5～9min，用高压均质设备在15～25MPa压力下均质2～3次，每次均质3～5min，得乳化肉桂油。
4.根据权利要求2所述的一种用于杀灭腌制食品蝇卵的乳化肉桂油的制备方法，其特征在于将重量百分比为9％的纯胶溶于蒸馏水中，边搅拌边加热至55℃保温，充分溶解后加入重量百分比为0.4％的蔗糖酯，搅拌均匀，然后加入0.6％的辛癸酸甘油酯与7％的肉桂油组成的平衡油，搅拌均匀；用剪切乳化搅拌机8000rpm剪切预乳化5min，用高压均质设备在25MPa压力下均质2次，每次均质5min，得乳化肉桂油。
5.一种如权利要求1所述用于杀灭腌制食品蝇卵的乳化肉桂油的使用方法，其特征在于首先将乳化肉桂油用水稀释50～80倍，然后将带有丝光绿蝇或大头金蝇卵的腌制食品浸泡到稀释溶液中，浸泡时间为10～30min。
6.根据权利要求5所述的一种用于杀灭腌制食品蝇卵的乳化肉桂油的使用方法，其特征在于首先将乳化肉桂油用水稀释60倍，然后将带有丝光绿蝇或大头金蝇卵于制食品浸泡到稀释溶液中，浸泡时间为20min。
全文摘要
本发明公开了一种杀灭腌制食品蝇卵的乳化肉桂油的制备和用法。乳化肉桂油其组分为含辛癸酸甘油酯0.3～0.9％、肉桂油5～9％、纯胶9～13％、蔗糖酯0.2～0.4％、其余为水。制备方法将重量百分比为9～13％的纯胶溶于蒸馏水中，边搅拌边加热至50～60℃保温，充分溶解后加入重量百分比为0.2～0.4％的蔗糖酯，搅拌均匀，然后加入0.3～0.9％的辛癸酸甘油酯与5～9％的肉桂油组成的平衡油，搅拌均匀；用剪切乳化搅拌机5000～8000rpm预乳化5～9min；再用高压均质设备在15～25MPa压力下均质2～3次，每次均质3～5min，得乳化肉桂油。用乳化肉桂油的50～80倍液浸泡10～20min，蝇卵校正死亡率达80～100％；经处理的咸鲞干中未检出肉桂油主成分肉桂醛残留，显示不影响其食品品质。
文档编号A23B4/14GK101053337SQ20071006848
公开日2007年10月17日 申请日期2007年5月10日 优先权日2007年5月10日
发明者沈立荣, 李红艳, 周彦钢, 顾松 申请人:浙江大学