有毒有害物急性毒性藻红外测试方法

专利名称：：有毒有害物急性毒性藻红外测试方法
技术领域：
：本发明涉及对有机毒物、重金属、农药急性毒性的测试方法，具体涉及一种用敏感藻测试有毒有害物急性毒性的方法。属于环境保护和食品安全监测等
技术领域：
。应用范围本方法适用于有机毒物、重金属、农药；电镀废水，生产甲醛的废水，炼焦废水，污染土壤农，污染饮用源水，污水厂污泥，污水厂出水等；福尔马林泡发的毛肚、猪蹄筋、牛蹄筋、鸭肠、干鱿鱼、干海参、干墨鱼等；施过农药的西红柿、黄瓜、花菜、大白菜、莲花白、豇豆、新疆萄萄、草莓、樱桃等急性毒性检测。
背景技术：
：现有技术中，对电镀废水，生产甲醛的废水，炼焦废水，污染的土壤，污染饮用源水，污水厂污泥，污水厂出水等；福尔马林泡发的毛肚、猪蹄筋、牛蹄筋、鸭肠、干鱿鱼、干海参、干墨鱼等；施过农药的西红柿、黄瓜、花菜、大白菜、莲花白、豇豆、新疆萄萄、草莓、樱桃等物质含有的有机毒物、重金属、农药的急性毒性检测，目前普遍采用发光细菌法进行检测，其测试步骤是a冰箱中取出发光细菌冻干粉称取lg放入100ml蒸馏水中配成发光细菌液，并复苏24小时；b将复苏后的发光细菌液放入培养箱中在25'C进行恢复活力培养8小时取出；c在4个测试皿中分别加入5ml经恢复活力培养的发光细菌液，其中2个测试皿加0.05ml测试样品，另外2个测试皿加0.05ml蒸馏水；d将处理好的4个测试皿放入荧光分析仪中，在2025。C室温下测试发光细菌的荧光变化强度，每lmin测一次，直到荧光不在变化止；e用两测试组荧光强度变化大小比较来确定测试样品毒性大小。发光细菌法的特点是测试灵敏度高，达到0.0150mg*L-1，测试时间快，平均为5min;不足之处是不同发光细菌的发光本质不同，检测时操作较繁琐，测试仪器较重需要交流电源，发光细菌价格贵等。由此可知，发光细菌法存在重现性差、操作不便、不能现场测试、测试成本高等不足。自然水体中的藻类具有采样、分离、培养和保存容易等特点，因而在有关行业中应用越来越广泛。根据不同藻类的特点，其用途各有不同。但是，目前有关运用操作简便、测试迅速、仪器价廉携带方便、藻类取材容易成本低的藻类红外辐射测试有毒有害物急性毒性尚未见国内外报道。不同藻种对有毒有害物急性毒性的藻红外响应不同，只有对急性毒性具有特殊的藻红外辐射响应的敏感藻可作为藻红外测试技术中的测试藻。敏感藻是指对有毒有害毒物急性毒性的藻红外辐射响应具有显著性、灵敏性和专一性的藻类，显著性指对急性毒性的响应温差大、响应时间快，灵敏性指对有毒有害物的响应剂量小，专一性指对某类有毒有害毒物急性毒性的良好响应。但是，目前国内外尚未有关于自然水体藻测试有毒有害物急性毒性的报道，也无用红外测温仪测试微生物红外辐射的报道。因此，经检索未发现与本方法研究有关的最接近的对比文献。
发明内容针对现有技术存在的上述不足，本发明的目的在于提供一种操作方便、可现场测试、测试成本较低的用敏感藻测试有毒有害物急性毒性的方法。敏感藻的准备以羊角月牙藻(5^e朋W/7///7ca/^'co/77"^y/T7)作为有机毒物的敏感藻，短线脆杆藻(Z^a^z7an'aZjrew'Wriata)作为重金属的敏感藻，水华鱼腥藻U/a6ae/a/7os-a<"ae)作为农药的敏感藻；对上述敏感藻的叶绿素a含量进行测定:分别测定上述敏感藻的叶绿素a含量》4.0mg吃一'时，培养藻液可用于毒性测试，即以叶绿素a含量》4.0mg*L—'作为测试藻量标准；测试仪器准备便携式红外测温仪；分辨率《0.1'C;测试样品的处理取待测样品稀释，配制成X5、XIO、X102、乂103的稀释液待用；毒性测试根据待测样品的不同，选择准备相应的敏感藻，在试验组的三个容器中分别加入5ml所述藻液，待藻液温度稳定时用红外测温仪对准藻液面中心测试并记录所测温度一次，然后用移液管取出待测样品的稀释液0.05ml加入上述藻液中，以后每1.5min测温一次，直到温度变化停止测温记录；如果藻液未响应则依次增加0.5ml稀释液进行测试直到产生响应；同时，在对照组的三个容器中分别加入5ml所述藻液，在藻液中加入0.05ml蒸馏水，立即用前面的测试方法对两组藻液进行测温记录，测试顺序从毒物的低浓度向高浓度逐一进行；试验组重复三次，对照组重复三次；测试顺序从毒物的低浓度向高浓度逐一进行；当确定第一次响应浓度后，再将该浓度样品液按X102、X10或X5进行稀释测试，测试顺序从高向低稀释倍数逐一进行；毒性判断毒性响应的平均温差值-(试验组温度之和一对照组温度之和)+3，其绝对值》0.2'C的最大平均温差值来确定供试藻对毒物毒性的显著响应；确定最低剂量用所有测试时间中的最大平均温差值、样品稀释浓度及加入量来确定敏感藻对样品响应剂量；确定最低浓度用所有测试时间中的最大平均温差值来确定敏感藻对测试样品的最低剂量；确定样品毒性大小根据测试得出的最低剂量、最低浓度，以及测试得出的响应时间大小来确定测试样品的毒性大小。相比现有技术，本发明具有如下优点本发明通过指定对有毒有害物急性毒性响应具有专一性的敏感藻，用红外测温仪测试微生物红外辐射对有毒有害物急性毒性进行测试，具有测试效果稳定、可靠的特点；而发光细菌对有毒有害物急性毒性的响应尚未确定专一性，并且发光细菌法的测试效果变动较大。由于敏感藻在自然水体中普遍存在，采样、分离、培养、保存等容易，具有成本低的优点；而发光细菌存在于特定水体或鱼类体表，存在采样困难，分离、培养和保存技术要求高，因此使用成本较高。本发明方法的灵敏度与发光细菌法灵敏度在同一数量级水平，其平均测试时间与发光细菌法的平均测试时间相同，而且有毒有害物急性毒性藻红外测试法的测试效果可以达到发光细菌法的测试效果。本发明采用的便携式红外线测温仪，重量为320g，使用直流电源，因此便于携带适合现场测试；而发光细菌法采用的荧光分析仪，需要交流电源，重约15000g，不能现场测试。图1是有毒有害物急性毒性藻红外测试法的操作流程图。具体实施方式本发明方法，可对已知成分含量的有机毒物、重金属、农药等急性毒性进行定性、定量测试，也可对电镀废水，生产甲醛的废水，炼焦废水，污染土壤农，污染饮用源水，污水厂污泥，污水厂出水等；福尔马林泡发的毛肚、猪蹄筋、牛蹄筋、鸭肠、干鱿鱼、干海参、干墨鱼等；施过农药的西红柿、黄瓜、花菜、大白菜、莲花白、豇豆、新疆萄萄、草莓、樱桃等急性毒性进行定性测试。参见图l，本发明有毒有害物急性毒性藻红外测试方法，具体包括如下步骤1测试前准备l.l敏感藻准备以羊角月牙藻作为有机毒物的敏感藻，短线脆杆藻作为重金属的敏感藻，水华鱼腥藻作为农药的敏感藻；1.2对上述敏感藻的叶绿素a含量进行测定以叶绿素a含量》4.0mg*L_'作为测试藻量标准。2测试仪器准备便携式红外测温仪型号st60，分辨率o.rc;3测试样品的处理3.l有机毒物、重金属、农药，配制成X5、XIO、X102、Xl()3稀释液待用；3.2取有毒水样100ml，配制成X5、XIO、X102、Xl(f稀释液待用；3.3污染蔬果、食物切取蔬果或食物5g，捣碎，然后加入10ml蒸馏水再搅匀、浸泡20min，取出浸泡液配制成X5、XIO、X102、Xl(f倍的稀释液待用；3.4泡发肉类干制品毛肚、猪蹄筋、牛蹄筋、鸭肠、干鱿鱼、干海参、干墨鱼、猪喉、牛喉或兔耳切取15g、捣碎，加入20ml的蒸馏水后再搅匀浸泡30min，取出浸泡液配制成X5、XIO、X102、乂103倍的稀释液待用；4毒性测试测试时每一种敏感藻用试验组的三个容器，然后分别加入该敏感藻液5ml，待藻液温度稳定时用红外测温仪对准藻液面中心测试记录温度，然后用移液管取出X103样品稀释液0.05ml加入上述藻液中，以后每1.5min测温一次，直到温度变化停止测温记录；同时，在对照组的三个容器中分别加入5ml所述藻液，在藻液中加入0.05ml蒸馏水，立即用前面的测试方法对两组藻液进行测温记录，测试顺序从稀释液的低浓度向高浓度逐一进行。4.1确定响应温差根据测试数据分析方法，确定响应温差即每一次测试平均温差值的计算方法是平均温差值=(试验组温度之和一对照组温度之和)+3，其绝对值》0.2'C的最大平均温差值来确定供试藻对毒物毒性的显著响应；4.2确定响应时间用最大平均温差值对应时间作为敏感藻对测试样品的响应时间；4.3确定最低剂量用各不同样品稀释浓度测试时最先出现温度响应的样品稀释浓度及加入量来确定敏感藻对样品的响应剂量；4.4确定最低浓度用各不同样品稀释浓度测试时最先出现温度响应的样品稀释浓度确定敏感藻对样品的响应浓度；4.5确定样品毒性大小根据测试的最低响应剂量、最低响应浓度，以及对应的响应时间大小来确定测试样品的毒性大小不同样品的急性毒性大小用最低剂量或最低浓度、对应的响应时间来进行比较，比较时剂量、浓度优先，时间次之。例甲的最低响应剂量或最低响应浓度小于乙，则甲的毒性大于乙；如果甲的最低响应剂量或最低响应浓度等于乙，则比甲乙的对应的响应时间，要是乙为3min，甲为5min，则乙的毒性大于甲。5有机毒物、重金属、农药中样品毒性大小测试5.1测试种类根据产量多、使用广、对环境危害大的常见化学品来设计试验用有毒有害物的类型。有机毒物(IO种)C6H6、C6H5CH3、C6H5(CH3)2、C6H5C1、CHC13、C6H5OH、CH20、HOCH2CH2OH、NH2C6H4S02NH2、[CH2CHCONH2]n;重金属(IO种)HgS04、Pb(N03)2、CuS04*5H20、K2Cr207、FeCl3*6H20、KMn04、ZnCl2、A1C13'6H20、BaCl2'2H20、CrCl3'6H20;农药(IO种)除草剂类——百草枯(C12H14N2C12)、盖草能(d5H!!ClF3N04)、草甘膦(C3H8NOsP);杀菌剂类——多菌灵(c,4HwN403)、三唑酮((:141116(:^302)、井冈霉素(C20H35O13N)、克菌康(0191134081^)、春雷霉素(d4H25N309);杀虫剂类——杀虫单(C5H12N06S2Na'H20)、灭扫利((^221^3:^03)。测试时稀释浓度10g*I/、lg'L'1、O.lg'L人0.01g'L—1。测试时滴加稀释液量0.05ml。5.2测试藻类有机毒物的敏感藻——羊角月牙藻重金属的敏感藻——短线脆杆藻农药的敏感藻——水华鱼腥藻测试时敏感藻浓度藻叶绿素a》4.0mg'L'1。测试时敏感藻用量5ml。测试环境室内，自然光照，室温1828'C测试容器直径4.5cm、高3cm、厚0.2cm的平底透明绝热塑料容器。5.3测试仪器便携式红外测温仪，型号ST60，分辨率O.rC，重量320g，美国雷泰公司生产。5.4测试过程取上述常见的化学药品lg，配制成10g'I/1、lg'L'1、o.ig'i;1、0.01g"L"稀释液；试验组3重复，对照组3重复；在试验组和对照组的每一容器中加入5ml藻液，其中，有机毒物加入羊角月牙藻，重金属加入短线脆杆藻，农药加入水华鱼腥藻；待藻液温度稳定时用红外测温仪对藻液面中心测温记录，然后用移液管取稀释液0.05ml加入试验组藻液中，对照组加等量蒸馏水，立即测温记录，每1.5min测一次，直到温度变化停时止。测试顺序从毒物的低浓度向高浓度逐一进行。当确定第一次响应浓度后，再将该浓度样品液按X2、X4、X6、X8进行稀释测试，测试顺序从高向低稀释倍数逐一进行。5.5数据分析每一次测试平均温差值的计算方法是平均温差值=(试验组温度之和一对照组温度之和)+3，(绝对平均温差值》0.2'C;用各不同样品稀释浓度测试时最先出现温度响应的样品稀释浓度及加入量来确定敏感藻对样品的响应剂量。分析结果见表l。表l敏感藻响应有机毒物、重金属、农药的最低剂量<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>5.6测试结果根据表1中数据所测试重金属、农药、有机毒物的最低响应剂量，它们的毒性大小顺序为重金属重铬酸钾>氯化铝高〉锰酸钾〉三氯化铬>三氯化铁〉氯化锌>氯化钡〉硫酸铜>硫酸汞。农药盖草能〉杀虫单〉草甘膦〉多菌灵>春雷霉素>井冈霉素〉三唑酮〉百草枯>灭扫利〉克菌康。注多菌灵的平均响应时间为1.5min，春雷霉素的平均响应时间为3.0min。有机毒物二甲苯〉三氯甲烷〉苯>聚丙烯酰胺〉苯酚〉乙二醇>甲苯>甲醛〉氯苯〉磺胺。6电镀废水、甲醛生产废水、炼焦废水、污染土壤、污染饮用水源、污水厂污泥、污水厂出水等毒性大小测试6.1测试种类电镀废水——含铬离子甲醛生产废水——含甲醛炼焦废水——含酚污染土壤——含农药残留污染饮用源水——含多类有毒有害物质污水厂污泥——含多类有毒有害物质污水厂出水——含多类有毒有害物质污染土壤农、污水厂污泥的采样在12(TC下烘干20min，取10g放入试管中，加20ml蒸馏水浸泡30min，取出上清液放入40ml试管中，等待稀释用。测试时稀释倍数X5、XIO、X102、X103测试时滴加稀释液量0.05ml6.2测试藻类有机毒物的敏感藻——羊角月牙藻重金属的敏感藻——短线脆杆藻农药的敏感藻——水华鱼腥藻测试时敏感藻浓度藻叶绿素a》4.0mg'L'1测试时敏感藻用量5ml6.3测试环境室内，自然光照，室温1828'C。6.4测试容器直径4.5cm、高3cm、厚0.2cm的平底透明绝热塑料容器。6.5测试仪器便携式红外测温仪，型号ST60，分辨率O.rC，重量320g，美国雷泰公司生产。6.6测试过程先将各种样品定量配制成X5、XIO、X102、Xl(f稀释液；试验组3重复，对照组3重复；在两组的每一容器中加入5ml藻液，待藻液温度稳定时用红外测温仪对准藻液面中心测温记录，然后用移液管取稀释液0.05ml加入试验组藻液中，对照组藻液加等量蒸馏水，立即测温记录，每1.5min测一次，直到温度变化停时止。测试顺序从高向低稀释倍数逐一进行。6.7数据分析每一次测试平均温差值的计算方法是平均温差值=(试验组温度之和一对照组温度之和)+3，(绝对平均温差值》0.2'C)用各不同样品稀释浓度测试时最先出现温度响应的样品稀释浓度确定敏感藻对样品的响应浓度。分析结果见表2。表2敏感藻响应测试样品的最低稀释浓度<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>6.8测试结果根据表2中数据所测试样品的最大响应稀释，得出以下结果在三种敏感藻对电镀废水急性毒性测试中，短线脆杆藻测试样品的稀释倍数最高，即X103，表明电镀废水生物毒性大。在三种敏感藻对生产甲醛的废水、炼焦废水急性毒性测试中，羊角月牙藻测试样品的稀释倍数最高，即乂102稀释倍数，表明甲醛生产废水、炼焦废水生物毒性较大。在三种敏感藻对污染土壤急性毒性测试中，水华鱼腥藻测试样品的稀释倍数最高，即X103，表明污染土壤含有的农药残留生物毒性大。在污染饮用源水急性毒性测试中，短线脆杆藻对未稀释水样具有响应，水华鱼腥藻对X5稀释水样有响应，而羊角月牙藻对未稀释和稀释水样均无响应，表明饮用源水已受重金属、农药的微污染，污染饮用源水生物毒性较小。在污水厂污泥水急性毒性测试中，短线脆杆藻的最高响应稀释倍数为XIO，水华鱼腥藻、羊角月牙藻的最高响应稀释倍数为X5，表明污泥含有微量重金属，污染污泥生物毒性小。在污水厂出水急性毒性测试中，短线脆杆藻、羊角月牙藻对未稀释水样具有响应，而水华鱼腥藻对未稀释和稀释水样均无响应，表明污水厂出水已受重金属、有机毒物的微污染，污水厂出水生物毒性较小。7福尔马林泡制的毛肚、猪蹄筋、牛蹄筋、鸭肠、干鱿鱼、干海参、干墨鱼等毒性大小测试个别不法商贩常用福尔马林泡发、保鲜干制肉类食品投放市场，为保障消费者健康安全，可用藻红外测试法对其进行检测。7.1测试种类毛肚、猪蹄筋、牛蹄筋、鸭肠、干鱿鱼、干海参、干墨鱼、猪喉、牛喉和兔耳。将上述干制肉类食品切取15g捣碎放入试管中，加入20ml蒸馏水泡30min，用上清液进行稀释。测试时稀释倍数X5、XIO、X102、X103测试时滴加稀释液0.05ml7.2测试藻类有机毒物的敏感藻——羊角月牙藻重金属的敏感藻——短线脆杆藻农药的敏感藻——水华鱼腥藻测试时敏感藻浓度藻叶绿素a为4.0mg'U1测试时敏感藻用量5ml7.3测试环境室内，自然光照，室温1828'C。7.4测试容器直径4.5cm、高3cm、厚0.2cm的平底透明绝热塑料容器。7.5测试仪器便携式红外测温仪，型号ST60，分辨率O.rC，重量320g，美国雷泰公司生产。7.6测试过程先将各种样品定量配制成X5、XIO、X10"、X10"稀释液；试验组3重复，对照组3重复；在两组的每一容器中加入5ml藻液，待藻液温度稳定时用红外测温仪对准藻液面中心测温记录，然后用移液管取稀释液0.05ml加入试验组藻液中，对照组藻液加等量蒸馏水，立即测温记录，每1.5min测一次，直到温度变化停时止。测试顺序从毒物高稀释倍数向低稀释倍数逐一进行。7.7数据分析每一次测试平均温差值的计算方法是平均温差值=(试验组温度之和一对照组温度之和)+3，(绝对平均温差值》0.2'C)用各不同样品稀释浓度测试时最先出现温度响应的样品稀释浓度确定敏感藻对样品的响应浓度。分析结果见表3。表3敏感藻响应测试样品的稀释倍数<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>7.8测试结果根据表3中数据所测试样品的最大响应稀释倍数，得出以下结果a样品发胀度越高，敏感藻响应的稀释倍数高，如各样品的含水率是毛肚53%，猪蹄筋67%，牛蹄筋68%，鸭肠51%，鱿鱼64%，海参72%，墨鱼36%,猪喉55°/。，牛喉49°/。，兔耳45%。b根据羊角月牙藻所响应的浓度排出10中样品的毒性大小顺序是海参、猪蹄筋、牛蹄筋、鱿鱼〉毛肚、鸭肠、猪喉、牛喉、兔耳>墨鱼、海参、猪蹄筋、牛蹄的生物毒性小。8蔬菜、水果农药残留毒性大小测试个别不法商贩常用福尔马林泡发、保鲜干制肉类食品投放市场，为保障消费者健康安全，可用藻红外测试法对其进行检测。8.1测试种类袖珍番茄、新疆萄萄、黄瓜、草莓、花菜、樱桃、大白菜、李子、莲花白或豇豆等。袖珍番茄外部带皮组织、黄瓜皮、花菜端部、大白菜和莲花白外叶，以及豇豆、新疆萄萄、草莓、樱桃、李子的果实，各取5g捣碎放入10ml蒸馏水中泡20min，上清液用于稀释。测试时稀释倍数X5、XIO、X102、X103测试时滴加稀释液量0.05ml。8.2测试藻类有机毒物的敏感藻——羊角月牙藻重金属的敏感藻——短线脆杆藻农药的敏感藻——水华鱼腥藻测试时敏感藻浓度藻叶绿素a为4.0mg'L—1测试时敏感藻用量5ml8.3测试环境室内，自然光照，室温1828'C。8.4测试容器直径4.5cm、高3cm、厚0.2cm的平底透明绝热塑料容器。8.5测试仪器便携式红外测温仪，型号ST60，分辨率O.rC，重量320g，美国雷泰公司生产。8.6测试过程先将各种样品定量配制成X5、XIO、X102、Xl(f稀释液；试验组3重复，对照组3重复；在两组的每一容器中加入5ml藻液，待藻液温度稳定时用红外测温仪对准藻液面中心测试并记录所测温度一次，然后用移液管取出药品稀释液0.05ml加入每一试验组藻液中，每一对照组藻液加入等量蒸馏水，立即用前面的测试方法对两组藻液进行测温记录，以后每1.5min—次，直到温度变化停时止。测试顺序从毒物的高向低稀释倍数逐一进行。8.7数据分析每一次测试平均温差值的计算方法是平均温差值=(试验组温度之和一对照组温度之和)+3，(绝对平均温差值》0.2。C)用各不同样品稀释浓度测试时最先出现温度响应的样品稀释浓度确定敏感藻对样品的响应浓度。分析结果见表4。表4敏感藻响应测试样品的稀释倍数<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>根据表3中数据所测试样品的最大响应稀释倍数，得出以下结果水华鱼腥藻的最大响应稀释倍数高于短线脆杆藻、羊角月牙藻最大响应稀释倍数，表明测试样品带有农药残留。水华鱼腥藻的测试结果反映出10中样品的农药残留毒性大小顺序是草莓〉黄瓜、花菜、大白菜、豇豆、新疆萄萄>袖珍、番茄、莲花白〉樱桃李子。权利要求1、有毒有害物急性毒性藻红外测试方法，具体包括如下步骤敏感藻的准备以羊角月牙藻作为有机毒物的敏感藻，短线脆杆藻作为重金属的敏感藻，水华鱼腥藻作为农药的敏感藻；对上述敏感藻的叶绿素a含量进行测定测定敏感藻的叶绿素a含量≥4.0mg·L-1时，培养藻液可用于毒性测试，即以叶绿素a含量≥4.0mg·L-1作为测试藻量标准；测试仪器准备红外测温仪；分辨率≤0.1℃；测试样品的处理取待测样品稀释，配制成×5、×10、×102、×103的稀释液待用；毒性测试根据待测样品的不同，选择准备的敏感藻，在试验组的三个容器中分别加入5ml所述藻液，待藻液温度稳定时用红外测温仪对准藻液面中心测试并记录所测温度一次，然后用移液管取出待测样品的稀释液0.05ml加入上述藻液中，以后每1.5min测温一次，直到温度变化停止测温记录；如果藻液未响应则依次增加0.5ml稀释液进行测试直到产生响应；同时，在对照组的三个容器中分别加入5ml所述藻液，在藻液中加入0.05ml蒸馏水，立即用前面的测试方法对两组藻液进行测温记录，测试顺序从毒物的低浓度向高浓度逐一进行；试验组重复三次，对照组重复三次；测试顺序从毒物的低浓度向高浓度逐一进行；当确定第一次响应浓度后，再将该浓度样品液按×102、×10或×5进行稀释测试，测试顺序从高向低稀释倍数逐一进行；毒性判断毒性的响应温差的平均温差值＝(试验组温度之和-对照组温度之和)÷3，其绝对值≥0.2℃的最大平均温差值来确定供试藻对毒物毒性的显著响应；用各不同样品稀释浓度测试时最先出现温度响应的样品稀释浓度及加入量来确定敏感藻对样品的响应剂量；确定最低浓度用各不同样品稀释浓度测试时最先出现温度响应的样品稀释浓度确定敏感藻对样品的最低响应浓度；确定样品毒性大小根据测试得出的最低剂量、最低浓度，以及测试得出的响应时间大小来确定测试样品的毒性大小。2、根据权利要求1所述的有毒有害物急性毒性藻红外测试方法，其特征在于所述测试样品的处理的方法包括-取有毒水样100ml，配制成X5、XIO、X102、乂103稀释液待用。3、根据权利要求1所述的有毒有害物急性毒性藻红外测试方法，其特征在于所述测试样品的处理的方法包括污染蔬果、食物切取蔬果或食物5g，捣碎，然后加入10ml蒸馏水再搅匀、浸泡20min，取出浸泡液配制成X5、XIO、X102、X103倍的稀释液待用。4、根据权利要求1所述的有毒有害物急性毒性藻红外测试方法，其特征在于所述测试样品的处理的方法包括泡发肉类干制品毛肚、猪蹄筋、牛蹄筋、鸭肠、干鱿鱼、干海参、干墨鱼、猪喉、牛喉或兔耳切取15g、捣碎，加入20ml的蒸馏水后再搅匀浸泡30min，取出浸泡液配制成X5、XIO、X102、Xl03倍的稀释液待用。全文摘要本发明提供一种有毒有害物急性毒性藻红外测试方法，采用叶绿素a含量≥4.0mg·L^-1的敏感藻液和便携式红外测温仪的毒性测试要素，通过选定测试样品的处理和浓度设计，进行对照毒性测试，通过响应温差、响应时间所用不同样品稀释浓度测试时最先出现温度响应的样品稀释浓度及加入量来确定敏感藻对样品的响应剂量、最低响应浓度，确定样品毒性大小。本发明方法灵敏度达到发光细菌法的灵敏度，其平均测试时间与发光细菌法的平均测试时间相近，有毒有害物急性毒性藻红外测试法的测试效果与发光细菌法的测试效果相同。具有测试方便、成本低、专一性强、可现场测试等特点。文档编号C12Q1/06GK101220388SQ200810069288公开日2008年7月16日申请日期2008年1月23日优先权日2008年1月23日发明者姜文超,智张,曾晓岚,艳林,郭蔚华,春阳申请人:重庆大学