专利名称：一种玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法
技术领域：
本发明涉及一种共轭亚油酸的富集方法。
背景技术：
玉米胚芽油中含有丰富的营养物质，除富含多不饱和脂肪酸外，还含有被
称为维生素源的胡萝卜素、VA、 VD等。玉米胚芽油的脂肪酸组成大部分(80%) 是不饱和脂肪酸，以油酸(30y。)和亚油酸(LA)为代表。近年来研究发现，玉米 胚芽油中还存在的共轭亚油酸(Conjugatedlinoleicacid,以下简称CLA)，是亚 油酸的同分异构体，具有清除自由基、增强人体的抗氧化能力和免疫能力、促 进生长发育、调节血液胆固醇和甘油三酸脂水平、防止动脉粥样硬化、促进脂 肪氧化分解、促进人体蛋白合成、对人体进行全面的良性调节的用作，是目前 国际上最为流行的第三代功能食品材料。但是，现有方法制备的玉米胚芽油中 共轭亚油酸的含量低，为每克玉米胚芽油中仅含0.15 0.42mg，不能满足人体 所需。
发明内容
本发明为了解决现有方法制备的玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量低的问 题，而提供一种玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法。
玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法按以下步骤实现 一、以磁性壳聚糖 微球作为载体固定微生物脂肪酶，固定化温度为30 4(TC， pH值为6 9，微 生物脂肪酶浓度800 1200U/ml，固定10 20h后得固定化微生物脂肪酶；二、 将300g玉米胚芽油和20ml甲醇加入到500ml三口瓶中，然后置于的恒温水浴 锅中加热，并以180 220r/min的速度搅拌，当温度升高到52。C时再加入10g 固定化微生物脂肪酶，开始计时反应，反应进行到10h和20h分别加入10ml 甲醇，进行到26h时停止；三、反应停止后用蠕动泵出料，然后将料液放入 1000ml分液漏斗中静置沉淀3 5h后取上层清液；四、将上层清液转入到500ml 蒸馏烧瓶中，然后置于旋转蒸发器上，在温度为65。C、压强为200mmHg的条 件下蒸馏5min，弃去馏头，然后换新的接收装置，继续升温，在温度为72'C、压强为50mmHg的条件下蒸馏并收集馏分，即完成玉米胚芽油中共轭亚油酸 的富集。
本发明采用高密度的磁性微球固定化微生物脂肪酶，催化玉米胚芽油与甲 醇之间进行酯交换，催化反应完成后经蒸馏、脱水处理，制得高共轭亚油酸含 量的玉米胚芽油；因采用了固定化酶技术，从而减少了甲醇对酶的抑制作用。 而且催化反应后分离工艺操作简单、回收率高，而且回收的固定化微生物脂肪 酶可以重复利用，降低生产成本，简化生产工艺。
本发明玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法简单，成本低；本发明中富集 后所得玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量高，为每克玉米胚芽油中含 8.10 10.51mg，能够满足人体所需，即通过食用玉米胚芽油即可摄取丰富的共 轭亚油酸，长期食用有益健康。
具体实施例方式
具体实施方式
一本实施方式玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法按以下 步骤实现 一、以磁性壳聚糖微球作为载体固定微生物脂肪酶，固定化温度为 30 40°C， pH值为6 9，微生物脂肪酶浓度800 1200U/ml，固定10 20h 后得固定化微生物脂肪酶；二、将300g玉米胚芽油和20ml甲醇加入到500ml 三口瓶中，然后置于的恒温水浴锅中加热，并以180 220r/min的速度搅拌， 当温度升高到52"C时再加入10g固定化微生物脂肪酶，开始计时反应，反应 进行到10h和20h分别加入10ml甲醇，进行到26h时停止；三、反应停止后 用蠕动泵出料，然后将料液放入1000ml分液漏斗中静置沉淀3 5h后取上层 清液；四、将上层清液转入到500ml蒸馏烧瓶中，然后置于旋转蒸发器上，在 温度为65'C、压强为200mmHg的条件下蒸馏5min，弃去馏头，然后换新的 接收装置，继续升温，在温度为72'C、压强为50mmHg的条件下蒸馏并收集 馏分，即完成玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集。
本实施方式步骤一中磁性壳聚糖微球的制备采用化学共沉淀法制备磁流 体-Fe304水合物，然后采用反相悬浮聚合法合成磁性壳聚糖微球，壳聚糖的体 积浓度1.0% 5.0%，磁流体的含铁量为40wt°/o 70wt%，戊二醛的体积浓度 为10% 25%。
本实施方式玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集完成后，固定化微生物脂肪酶可以留在三口瓶中，直接加入料液，进行下一批反应；也可取出固定化微生物 脂肪酶，洗涤后回收，洗涤液为乙醇和乙醚按l : l体积比混合所得溶液。
具体实施方式
二本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中固定化 温度为32 38。C， pH值为6.5 8.5，微生物脂肪酶浓度850 1150U/ml，固 定12 18h。其它步骤及参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
三本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中固定化 温度为3(TC， pH值为6，微生物脂肪酶浓度800U/ml，固定10h。其它步骤及 参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
四本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中固定化 温度为4(TC, pH值为9，微生物脂肪酶浓度1200U/ml，固定20h。其它步骤 及参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
五本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中固定化 温度为35-C， pH值为7，微生物脂肪酶浓度900U/ml，固定12h。其它步骤及 参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
六本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中固定化 温度为38。C， pH值为8，微生物脂肪酶浓度1100U/ml，固定16h。其它步骤 及参数与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
七本实施方式与具体实施方式
二、三、四、五或六不同的 是步骤二中以190 210r/min的速度搅拌。其它步骤及参数与具体实施方式
二、 三、四、五或六相同。
具体实施方式
八本实施方式与具体实施方式
七不同的是步骤二中以 180r/min的速度搅拌。其它步骤及参数与具体实施方式
七相同。
具体实施方式
九本实施方式与具体实施方式
七不同的是步骤二中以 220r/min的速度搅拌。其它步骤及参数与具体实施方式
七相同。
具体实施方式
十本实施方式与具体实施方式
七不同的是步骤二中以 190r/min的速度搅拌。其它步骤及参数与具体实施方式
七相同。
具体实施方式
十一本实施方式与具体实施方式
七不同的是步骤二中以 200r/min的速度搅拌。其它步骤及参数与具体实施方式
七相同。
具体实施方式
十二本实施方式与具体实施方式
八、九、十或十一不同的是步骤二中甲醇均为化学纯。其它步骤及参数与具体实施方式
八、九、十或十 一相同。
具体实施方式
十三本实施方式玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法按以 下步骤实现 一、以磁性壳聚糖微球作为载体固定微生物脂肪酶，固定化温度
为35。C， pH值为7，微生物脂肪酶浓度1000U/ml，固定15h后得固定化微生 物脂肪酶；二、将300g玉米胚芽油和20ml甲醇加入到500ml三口瓶中，然后 置于的恒温水浴锅中加热，并以180r/min的速度搅拌，当温度升高到52"C时 再加入10g固定化微生物脂肪酶，开始计时反应，反应进行到10h和20h分别 加入10ml甲醇，进行到26h时停止；三、反应停止后用蠕动泵出料，然后将 料液放入1000ml分液漏斗中静置沉淀3h后取上层清液；四、将上层清液转入 到500ml蒸馏烧瓶中，然后置于旋转蒸发器上，在温度为65°C、压强为 200mmHg的条件下蒸馏5min，弃去馏头，然后换新的接收装置，继续升温， 在温度为72。C、压强为50mmHg的条件下蒸馏并收集馏分，即完成玉米胚芽 油中共轭亚油酸的富集。
本实施方式中富集后所得玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量高，为每克玉米 胚芽油中含8.10mg，能够满足人体所需。
具体实施方式
十四本实施方式玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法按以 下步骤实现 一、以磁性壳聚糖微球作为载体固定微生物脂肪酶，固定化温度 为3(TC， pH值为6，微生物脂肪酶浓度800U/ml，固定10h后得固定化微生. 物脂肪酶；二、将300g玉米胚芽油和20ml甲醇加入到500ml三口瓶中，然后 置于的恒温水浴锅中加热，并以190r/min的速度搅拌，当温度升高到52"C时 再加入10g固定化微生物脂肪酶，开始计时反应，反应进行到10h和20h分别 加入10ml甲醇，进行到26h时停止；三、反应停止后用蠕动泵出料，然后将 料液放入1000ml分液漏斗中静置沉淀4h后取上层清液；四、将上层清液转入 到500ml蒸馏烧瓶中，然后置于旋转蒸发器上，在温度为65°C、压强为 200mmHg的条件下蒸馏5min，弃去馏头，然后换新的接收装置，继续升温， 在温度为72。C、压强为50mmHg的条件下蒸馏并收集馏分，即完成玉米胚芽 油中共轭亚油酸的富集。
本实施方式中富集后所得玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量高，为每克玉米胚芽油中含8.56mg，能够满足人体所需。
具体实施方式
十五本实施方式玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法按以
下步骤实现 一、以磁性壳聚糖微球作为载体固定微生物脂肪酶，固定化温度
为4(TC， pH值为8，微生物脂肪酶浓度1200U/ml，固定10h后得固定化微生 物脂肪酶；二、将300g玉米胚芽油和20ml甲醇加入到500ml三口瓶中，然后 置于的恒温水浴锅中加热，并以200r/min的速度搅拌，当温度升高到52匸时 再加入10g固定化微生物脂肪酶，开始计时反应，反应进行到10h和20h分别 加入10ml甲醇，进行到26h时停止；三、反应停止后用蠕动泵出料，然后将 料液放入1000ml分液漏斗中静置沉淀4h后取上层清液；四、将上层清液转入 到500ml蒸馏烧瓶中，然后置于旋转蒸发器上，在温度为65°C、压强为 200mmHg的条件下蒸馏5min，弃去馏头，然后换新的接收装置，继续升温， 在温度为72-C、压强为50mmHg的条件下蒸馏并收集馏分，即完成玉米胚芽 油中共轭亚油酸的富集。
本实施方式中富集后所得玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量高，为每克玉米 胚芽油中含9.28mg，能够满足人体所需。
具体实施方式
十六本实施方式玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法按以 下步骤实现 一、以磁性壳聚糖微球作为载体固定微生物脂肪酶，固定化温度 为35°C， pH值为9，微生物脂肪酶浓度800U/ml，固定20h后得固定化微生 物脂肪酶；二、将300g玉米胚芽油和20ml甲醇加入到500ml三口瓶中，然后 置于的恒温水浴锅中加热，并以210r/min的速度搅拌，当温度升高到52"C时 再加入10g固定化微生物脂肪酶，开始计时反应，反应进行到10h和20h分别 加入10ml甲醇，进行到26h时停止；三、反应停止后用蠕动泵出料，然后将 料液放入1000ml分液漏斗中静置沉淀4h后取上层清液；四、将上层清液转入 到500ml蒸馏烧瓶中，然后置于旋转蒸发器上，在温度为65°C、压强为 200mmHg的条件下蒸馏5min，弃去馏头，然后换新的接收装置，继续升温， 在温度为72'C、压强为50mmHg的条件下蒸馏并收集馏分，即完成玉米胚芽 油中共轭亚油酸的富集。
本实施方式中富集后所得玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量高，为每克玉米 胚芽油中含9.83mg，能够满足人体所需。
具体实施方式
十七本实施方式玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法按以 下步骤实现 一、以磁性壳聚糖微球作为载体固定微生物脂肪酶，固定化温度 为38。C， pH值为7，微生物脂肪酶浓度1100U/ml，固定18h后得固定化微生 物脂肪酶；二、将300g玉米胚芽油和20ml甲醇加入到500ml三口瓶中，然后 置于的恒温水浴锅中加热，并以200r/min的速度搅拌，当温度升高到52'C时 再加入10g固定化微生物脂肪酶，开始计时反应，反应进行到10h和20h分别 加入10ml甲醇，进行到26h时停止；三、反应停止后用蠕动泵出料，然后将 料液放入1000ml分液漏斗中静置沉淀5h后取上层清液；四、将上层清液转入 到500ml蒸馏烧瓶中，然后置于旋转蒸发器上，在温度为65°C、压强为 200mmHg的条件下蒸馏5min，弃去馏头，然后换新的接收装置，继续升温， 在温度为72'C、压强为50mmHg的条件下蒸馏并收集馏分，即完成玉米胚芽 油中共轭亚油酸的富集。
本实施方式中富集后所得玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量高，为每克玉米 胚芽油中含10.51mg，能够满足人体所需。
权利要求
1、一种玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法，其特征在于玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法按以下步骤实现一、以磁性壳聚糖微球作为载体固定微生物脂肪酶，固定化温度为30～40℃，pH值为6～9，微生物脂肪酶浓度800～1200U/ml，固定10～20h后得固定化微生物脂肪酶；二、将300g玉米胚芽油和20ml甲醇加入到500ml三口瓶中，然后置于的恒温水浴锅中加热，并以180～220r/min的速度搅拌，当温度升高到52℃时再加入10g固定化微生物脂肪酶，开始计时反应，反应进行到10h和20h分别加入10ml甲醇，进行到26h时停止；三、反应停止后用蠕动泵出料，然后将料液放入1000ml分液漏斗中静置沉淀3～5h后取上层清液；四、将上层清液转入到500ml蒸馏烧瓶中，然后置于旋转蒸发器上，在温度为65℃、压强为200mmHg的条件下蒸馏5min，弃去馏头，然后换新的接收装置，继续升温，在温度为72℃、压强为50mmHg的条件下蒸馏并收集馏分，即完成玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集。
2、 根据权利要求1所述的玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法，其特征 在于步骤一中固定化温度为32 38匸，pH值为6.5 8.5，微生物脂肪酶浓度 850 1150U/ml，固定12 18h。
3、 根据权利要求1所述的玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法，其特征 在于步骤一中固定化温度为35°C， pH值为7，微生物脂肪酶浓度900U/ml， 固定12h。
4、 根据权利要求1所述的玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法，其特征 在于步骤一中固定化温度为38X:， pH值为8，微生物脂肪酶浓度1100U/ml， 固定16h。
5、 根据权利要求2、 3或4所述的玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法， 其特征在于步骤二中以190 210r/min的速度搅拌。
6、 根据权利要求5所述的玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法，其特征 在于步骤二中以190r/min的速度搅拌。
7、 根据权利要求5所述的玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法，其特征 在于步骤二中以200r/min的速度搅拌。
8、 根据权利要求6或7所述的玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法，其 特征在于步骤二中甲醇均为化学纯。
全文摘要
一种玉米胚芽油中共轭亚油酸的富集方法，它涉及一种共轭亚油酸的富集方法。本发明解决了现有方法制备的玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量低的问题。方法一、以磁性壳聚糖微球作为载体固定微生物脂肪酶；二、玉米胚芽油和甲醇加到三口瓶中，加热并搅拌，温度升到52℃时加固定化微生物脂肪酶，开始计时反应，反应进行到10h和20h分别加入甲醇，进行到26h时停止；三、反应停止后用蠕动泵出料，然后将料液放入分液漏斗中静置沉淀后取上层清液；四、将上层清液转入到蒸馏烧瓶中经蒸馏、脱水处理后即完成。本发明富集方法简单，富集后所得玉米胚芽油中共轭亚油酸的含量高，为每克玉米胚芽油中含8.10～10.51mg，能够满足人体所需。
文档编号C12P7/64GK101603061SQ20091007254
公开日2009年12月16日 申请日期2009年7月20日 优先权日2009年7月20日
发明者韩春然, 马永强 申请人:哈尔滨商业大学