专利名称：：一种用于pku的产前快速诊断的复合芯片的制作方法
技术领域：
：本实用新型涉及一种用于遗传病的产前快速诊断的复合芯片，更具体地说，涉及一种用于PKU的产前快速诊断的复合芯片。
背景技术：
：经典型的苯丙酮尿(Phenyketonuria，简称为PKU)是由苯丙氨酸羟化酶(PAH)的遗传性缺陷引起的一种先天性代谢病。PKU患儿在刚出生时，由于无苯丙氨酸的摄入，因此无临场表现，但是，随着患儿的退食而连续出现智力进行性下降，皮肤色素浅，肌张力高，惊厥发生，汗和尿中有特殊的臭味，患者生活不能自理，智力严重障碍，同时，给患者家庭造成严重的身心负担和经济压力。因此，对此病行产前诊断是非常必要的。PKU是一种常染色体隐性遗传病，患儿的父母为致病基因的携带者而患儿为纯合子。引起PKU的基因的PAH，该基因位于12q22-24.2全长约90kb，包括13个外显子和12个内含子。迄今已经发现PKU有440多种致病突变(http://www.mcgill.ca/pahdb)，国内仅发现30余种突变。PAH基因的突变大部分位于编码区的小的遗传学变化，在苯丙氨酸羟化酶基因中仅仅影响一个或多个氨基酸，其对酶活性的影响强烈依赖于突变的形式和位置。根据对苯丙氨酸羟化酶酶活性有无影响，突变又可分为致病突变和沉默突变。致病突变大多位于外显子或内外显子的交接区，严重影响苯丙氨酸羟化酶基因转录和翻译及蛋白质的异常折叠、聚合，以及加速降解，从而影响苯丙氨酸羟化酶的催化活性。沉默突变对苯丙氨酸羟化酶活性无影响。产前诊断是指直接或间接地对孕期胎儿情况进行检测，为了提高人口素质而采取一些必要的措施防止严重遗传病，先天性畸形和智力障碍患儿的出生。90年代初，用基因芯片进行的表达水平检测可自动、快速地检测出成千上万个基因的表达情况。从正常人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出标准图谱。从病人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出病变图谱。通过比较、分析这两种图谱，就可以得出病变的DNA信息。这种基因芯片诊断技术以其高效、敏感、经济、高阵列、自动化等特点，已成为一项现代化诊断新技术，它减少了PCR错配所造成的假阳性和假阴性，同时克服了PCR技术无法一次性多位点扩增的问题。尽管拥有如此多优点，但该技术中的DNA杂交时间需要耗时12小时以上，使快速诊断受到限制。微流控芯片技术(又称微全分析系统，y-TAS或芯片实验室labonachip)指把生物和化学等领域中所涉及的样品制备、生物与化学反应、分离检测等基本操作单元集成或基本集成到一块几平方厘米的芯片上，用以完成不同的生物或化学反应过程，并对其产物进行分析的一种技术。微流控芯片已被公认为是21世纪最为重要的前沿技术之一，目前，对微流控芯片技术的完善也有待提高。
实用新型内容本实用新型所要解决的技术问题是提供一种用于PKU的产前快速诊断的复合芯片，采用该复合芯片，能够实现PKU的产前快速诊断。为了解决上述技术问题，本实用新型采用了以下技术方案-一种用于PKU的产前快速诊断的复合芯片，包括DNA芯片、微流控芯片，所述DNA芯片由若干种不同的点突变P認特异性诊断基因探针固定在玻璃芯片上形成，所述的若干种不同的点突变PKU特异性诊断基因探针形成基因探针区，所述微流控芯片包括冲洗液池、洗涤液池、样品池、反应区、废液池，反应区分别通过液体通道与冲洗液池、洗涤液池、样品池、废液池连通；所述的点突变PKU特异性诊断基因探针都固定在玻璃芯片的一面上，微流控芯片带有通道的一面与玻璃芯片带有点突变PKU特异性诊断基因探针的一面以反应区与基因探针区为对接点对接并自动吸附粘牢。所述点突变PKU特异性诊断基因探针为五种不同的点突变PKU特异性诊断基因探针。本实用新型由于采用了上述结构，将多种常见的点突变PKU特异性诊断基因探针固定在玻璃芯片上，并且，微流控芯片带有通道的一面与玻璃芯片带有点突变PKU特异性诊断基因探针的一面以反应区与基因探针区为对接点对接并自动吸附粘牢。采用母体血衆中的胎儿DNA作检测样品，利用微流控芯片试剂用量微少和可控等特点，同时通过离心力的作用完成样品和试剂在DNA芯片上的加入和混合等操作步骤，故本实用新型能够将杂交时间縮短至15分钟以内，从而能够克服DNA阵列芯片杂交时间长和假阴性的不利因素，实现P認的产前快速诊断。在结合附图阅读本实用新型的实施方式的详细描述后，本实用新型的特点和优点将变得更加清楚。图1是本实用新型的实施方式的部件的示意图。具体实施方式下面以一个实施方式对本实用新型作进一步详细的说明，但应当说明，本实用新型的保护范围不仅仅限于此。参阅图l。一种用于PKU的产前快速诊断的复合芯片，包括DNA芯片、微流控芯片，所述DNA芯片由若干种不同的点突变PKU特异性诊断基因探针(未图示)固定在玻璃芯片7上形成，例如有5种常见的点突变PKU特异性诊断基因探因探针形成基因探针区。微流控芯片包括冲洗液池l、洗涤液池2、样品池3、反应区5、废液池6，反应区5分别通过液体通道4与冲洗液池1、洗涤液池2、样品池3、废液池6连通；点突变PKU特异性诊断基因探针都固定在玻璃芯片7的一面上，微流控芯片带有通道的一面与玻璃芯片7带有点突变PKU特异性诊断基因探针的一面以反应区与基因探针区为对接点对接并自动吸附粘牢。在本实施方式中，常见的点突变位点如表一所示，其中，5种常见的点突变PKU特异性诊断基因探针是根据下述的点突变位点来制作。.表—-<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>本实施方式使用时，采用母体血浆中的胎儿DNA作检测样品，利用微流控芯片试剂用量微少和可控等特点，同时通过离心力的作用完成样品和试剂在DNA芯片上的加入和混合等操作步骤即可实现PKU的产前快速诊断。虽然结合附图描述了本实用新型的实施方式，但是本领域的技术人员可以在所附权利要求的范围之内作出各种变形或修改，只要不超过本实用新型的权利要求所描述的保护范围，都应当在本实用新型的保护范围之内。权利要求1、一种用于PKU的产前快速诊断的复合芯片，包括DNA芯片、微流控芯片，所述DNA芯片由若干种不同的点突变PKU特异性诊断基因探针固定在玻璃芯片上形成，所述的若干种不同的点突变PKU特异性诊断基因探针形成基因探针区，所述微流控芯片包括冲洗液池、洗涤液池、样品池、反应区、废液池，反应区分别通过液体通道与冲洗液池、洗涤液池、样品池、废液池连通；其特征在于所述的点突变PKU特异性诊断基因探针都固定在玻璃芯片的一面上，微流控芯片带有通道的一面与玻璃芯片带有点突变PKU特异性诊断基因探针的一面以反应区与基因探针区为对接点对接并自动吸附粘牢。2、根据权利要求1所述的用于PKU的产前快速诊断的复合芯片，其特征在于所述点突变PKU特异性诊断基因探针为五种不同的点突变PKU特异性诊断基因探针。专利摘要本实用新型公开了一种用于PKU的产前快速诊断的复合芯片，包括DNA芯片、微流控芯片，所述DNA芯片由若干种不同的点突变PKU特异性诊断基因探针固定在玻璃芯片上形成，所述的若干种不同的点突变PKU特异性诊断基因探针形成基因探针区，所述微流控芯片包括冲洗液池、洗涤液池、样品池、反应区、废液池，反应区分别通过液体通道与冲洗液池、洗涤液池、样品池、废液池连通；所述的点突变PKU特异性诊断基因探针都固定在玻璃芯片的一面上，微流控芯片带有通道的一面与玻璃芯片带有点突变PKU特异性诊断基因探针的一面以反应区与基因探针区为对接点对接并自动吸附粘牢。本实用新型结构简单，能够实现PKU的产前快速诊断。文档编号C12Q1/68GK201376967SQ2009200538公开日2010年1月6日申请日期2009年4月1日优先权日2009年4月1日发明者周小棉,晓邹申请人:广州市第一人民医院