专利名称：一种提取活性多糖的工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种提取活性多糖的工艺，尤其是一种从蓝莓中提取多糖的方法。
背景技术：
80年代以来，科学家们对植物多糖，特别是对中药中的多糖研究产生了浓厚的兴 趣，至今已相继报道了 100多种具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗感染、降血糖等多种生理 活性的中药多糖，有的已在临床用于肿瘤、肝炎、心血管等疾病的辅助治疗和康复，其中最 重要的药理作用当推免疫促进作用。已有的大量药理和临床应用表明，这些功能确切的多 糖，其原生药大多属于补益类中药。近来的药理研究和临床应用均表明其具有显著的免疫 增强作用，而其有效成分为多糖或糖缀合物glycoconjugates，包括糖肽蛋白多糖等不同的 糖肽其免疫活性的表现形式也不相同，有的表现为细胞免疫功能强，有的表现为体液免疫 功能强，而有的还具有显著的抗脂质过氧化作用，抑制LDL的氧化这些糖肽类化合物的结 构分析表明，它们的共同特点是多糖含量高，有的可高达90%糖结构有其共性，即均以Ara 为末端，但也各具个性，有的主链是1-6连结，有的是1-4连结，有的还结合色素。药理研究 结果还表明这些糖肽类化合物中不但整体分子具有免疫活性，而且分子中的多糖链也具有 免疫活性，有的比整体分子的作用还要强。抗肿瘤药将多糖作为抗肿瘤药是由于人们对当 前癌症化疗药物不满意。虽然化学家们合成了无数个对癌细胞有相当强杀伤作用的化合 物，但在杀死癌细胞的同时也同样损伤正常细胞，临床上表现出很多副作用，特别是化疗药 物对患者免疫系统造成损害，因此多糖类免疫调节剂在肿瘤的治疗上很有吸引力。蓝莓(Blueberry)学名越桔，别名有笃斯、嘟嗜、都柿、甸果等，属于杜鹃花科越桔 属植物。果实呈蓝色，并披一层白色果粉，果肉细腻，果味酸甜，风味独特，具有清爽宜人的 香气，可鲜食，亦可加工成果汁饮料和果酒。蓝莓具有丰富的多糖含量，其中低聚多糖约6g/100g鲜重，而纤维素含量约 4. 6g/100g鲜重，可作为植物多糖的一个重要来源。
发明内容
本发明的目的是为了提供一种产品收率高，能源消耗少，成本低，产量大，多糖纯 度达97%以上，保持原有风味，易于实现工业化的多糖提取工艺。本发明所提出的制备方法如下1)酶解取蓝莓鲜果，加入其重量0. 5倍量的的去离子水，加纤维素酶和盐酸，升 温酶解10 12h，使其酶解，过滤得酶解液；2)大孔树脂吸附酶解液经过非极性大孔树脂除杂，透过液用极性大孔树脂吸 附，再用乙醇洗脱；3)膜浓缩用纳滤膜将洗脱液膜浓缩，得截留浓缩液；4)干燥将浓缩液冷冻干燥，即得。上述提取工艺，其特征是所述的酶解工艺中，纤维素酶在去离子水中的含量为0. 5 3. 0%，用盐酸调节PH为4，温度控制在40 45°C。上述提取工艺，其特征是所述非极性大孔树脂柱可用D101、PSD、HZ802大孔树脂。上述提取工艺，其特征是所述极性大孔树脂可用LSA-5B，D4020, D201大孔树脂。上述提取工艺，其特征是所述极性大孔树脂吸附后用3 4倍量柱体积的50 60%乙醇洗脱。上述提取工艺，其特征是所述纳滤膜采用ESNA系列纳滤膜或HNF-4040系列纳滤膜。综上所述，本发明存在以下优点酶解步骤使得提取率比一般的溶剂提取更高，提 高了产品的收率和同一原料成本下的产量；大孔树脂和膜分离都使得处理条件更温和，多 糖被完好保留，同时再生容易，节省大量能耗和成本；冷冻干燥步骤提高了成品的纯度。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限 于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1 取IOOg蓝莓鲜果(总糖含量10.3% )，溶于50L去离子水中，加2. 5g纤维素酶， 加盐酸调节PH至4，在40°C温度下提取IOh后，酶解液过柱体积5L的D-101型大孔树脂柱 除杂，得透过液，然后通过LSA-5B型大孔树脂柱吸附多糖分子，接着用15L 50%乙醇洗脱 多糖，用ESNA2纳滤膜浓缩洗脱液，浓缩液冷冻干燥，最终得到8. 06g含量为98. 9%的多糖 成品。实施例2 取IOOg蓝莓鲜果(总糖含量9.9%)，溶于50L去离子水中，加4. Ig纤维素酶，力口 盐酸调节PH至4，在42°C温度下提取Ilh后，酶解液过柱体积5L的PSD大孔树脂柱进行除 杂，得透过液，然后通过D4020型大孔树脂柱吸附出多糖分子，接着用15L 55%乙醇洗脱多 糖，用HNF40-4040纳滤膜浓缩洗脱液，浓缩液冷冻干燥，最终得到8. 25g含量为99. 的多 糖成品。实施例3 取IOOg蓝莓鲜果(总糖含量10.4% )，溶于50L去离子水中，加9. 3g纤维素酶， 加盐酸调节PH至4，在45°C温度下提取Ih后，酶解液过柱体积5L的HZ802大孔树脂柱进 行除杂，得透过液，然后通过D201型大孔树脂柱吸附出多糖分子，接着用15L 60%乙醇洗 脱多糖，用HNF70-4040纳滤膜浓缩洗脱液，浓缩液冷冻干燥，最终得到8. 27g含量为98. 6% 的多糖成品。
权利要求
一种提取活性多糖的工艺，其特征在于由以下步骤组成1)酶解取蓝莓鲜果，加入其重量0.5倍量的的去离子水，加纤维素酶和盐酸，升温酶解10～12h，使其酶解，过滤得酶解液；2)大孔树脂吸附酶解液经过非极性大孔树脂除杂，透过液用极性大孔树脂吸附，再用乙醇洗脱；3)膜浓缩用纳滤膜将洗脱液膜浓缩，得截留浓缩液；4)干燥将浓缩液冷冻干燥，即得。
2.根据权利要求1所述提取工艺，其特征是所述的酶解工艺中，纤维素酶在去离子水中的含量为0. 5 3. 0%，用盐酸调节pH为4，温度控制在40 45°C。
3.根据权利要求1所述提取工艺，其特征是所述非极性大孔树脂柱可用HZ802、DlOU PSD大孔树脂。
4.根据权利要求1所述提取工艺，其特征是所述极性大孔树脂可用LSA-5B，D4020, D201大孔树脂。
5.根据权利要求1所述提取工艺，其特征是所述极性大孔树脂吸附后用3 4倍量柱 体积的50 60%乙醇洗脱。
6.根据权利要求1所述提取工艺，其特征是所述纳滤膜采用ESNA系列纳滤膜或 HNF-4040系列纳滤膜。
全文摘要
本发明涉及一种提取活性多糖的工艺，以蓝莓鲜果为原料，经过纤维素酶酶解、大孔树脂分离、膜浓缩、冷冻干燥得成品。采用本发明生产活性多糖，收率高，能源消耗少，成本低，产量大，纯度高，同时保留了多糖的风味。
文档编号C12P19/04GK101805766SQ201010166449
公开日2010年8月18日 申请日期2010年4月5日 优先权日2010年4月5日
发明者孙世芳, 赵玲 申请人:苏州瑞蓝博中药技术开发有限公司