专利名称：一种益生菌片的制备方法
技术领域：
本发明属于保健食品/药品技术领域，涉及益生菌保健产品，特别涉及一种益生 菌片的制备方法。
背景技术：
益生菌在工业、农业、医药、食品、饲料等与人类生活密切相关的重要领域中应用 价值很高。我国对益生菌用于保健食品和保健药品的研究起步较晚，20世纪90年代起才 开始将双歧杆菌用于各种保健食品中。目前市场上出现的益生菌保健产品剂型大多为胶囊 齐U，比如整肠生、丽珠肠乐、美常安、聚克、贝飞达、源首胶囊、佳士康等；其次为颗粒剂和散 齐U，比如妈咪爱、培菲康等、乐托尔、常乐康等；第三是片剂，如促菌生、乳酸菌素、金双歧、思 连康、普乐拜尔等。这些益生菌产品的制备工艺是首先培养益生菌，再离心获取菌体，再通过冻干或 喷雾干燥获得菌粉，最后用此菌粉制备各种剂型产品。此类方法设备复杂昂贵、要求高、成 本高、规模化应用受限。
发明内容
本发明解决的技术问题在于提供一种益生菌片的制备方法，该方法简便易行、设 备要求低、成本低，易规模化应用，而且制成的益生菌片当中活菌数高、菌体存活时间长。本发明是通过以下技术方案来实现一种益生菌片的制备方法，包括以下步骤1)将活化后的益生菌菌种包埋形成益生菌载体颗粒，然后在培养基中扩大培养， 使得益生菌在载体颗粒中生长繁殖，再将益生菌从载体颗粒中释放，获得密度达IO11CfuAil 以上的益生菌悬液；2)以质量份数计，将菊芋原粉150 300份、甘露醇20 40份、羟丙基甲基纤维 素邻苯二甲酸酯50 200份和羟丙基甲基纤维素20 30份充分混合；再按照1. 5 6g 菊芋原粉加入Iml益生菌悬液的比例，加入益生菌悬液混合，然后制粒，在40°C 55°C下干 燥，得到中间颗粒；3)以质量份数计，将滑石粉0. 5 2份、硬脂酸镁4. 5 8份与中间颗粒混勻，经 过压片得到益生菌片。所述的益生菌为乳酸菌或双歧杆菌。所述的益生菌悬液的制备为1)菌种活化将益生菌以lml/lOOml的接种量接入到乳清粉液体培养基中，35°C 45°C培养 12 24h后，得到活化的益生菌菌种；2)菌体包埋将浓度为Ig 4g/100ml的海藻酸钠溶液，经118°C 121°C灭菌15 25min后与活化的益生菌菌种溶液以1 1体积比混合，然后滴加到足量的已灭菌的0. lmol/L CaCl2溶液中，固化0. 5 Ih后，将形成包埋的益生菌载体颗粒滤出；3)扩大培养以6 20g/100ml的接种量，将益生菌载体颗粒接入到含有0. 5 5g/100ml CaCO3 的乳清粉液体培养基中，35°C 45°C培养12 24h后滤出益生菌载体颗粒，并用无菌水冲 洗；4)菌体释放将益生菌载体颗粒置于浓度为1 4g/100ml的柠檬酸钠溶液中，35°C 45°C放置 0. 5 2h后，获得益生菌悬液，其中益生菌密度达IollCfuAil以上。所述的乳清粉液体培养基是在IOOml牛乳中加入3 7g乳清粉，加热使其溶解而 得到。与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果本发明通过将益生菌包埋在海藻酸钙载体中(由海藻酸钠与CaCl2反应而得)，让 益生菌在益生菌载体颗粒中生长繁殖(载体中益生菌数量可达lO^cfu/g)，在柠檬酸钠溶 液中释放获得高密度益生菌菌悬液，然后再将制得的高密度菌悬液直接作为粘合剂与主、 辅料混合、造粒、压片。本发明无需采用益生菌培养，离心获取菌体，制备菌粉，最后再用菌粉制备各种剂 型的方法，此法简便易行、设备要求低、成本低，易规模化应用。本发明在片剂中加入了菊芋粉作为益生菌的增菌剂和活性保护剂，保证了贮存期 间菌的活性。制成的益生菌片剂中在0 3个月益生菌活菌数在101(lCfU/g以上，第4 5 个月益生菌活菌数在109cfu/g以上，在6 9个月益生菌活菌数在108cfu/g以上，在10 12个月益生菌活菌数在107cfu/g以上。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明做进一步详细描述，所述是对本发明的解释而不是 限定。益生菌具体选择卫生部办公厅公布的《可用于食品的菌种名单》中的菌种，包括乳 酸菌和双歧杆菌。益生菌所用的培养基为乳清粉液体培养基在IOOml牛乳中加入3 7g乳清粉， 加热使其溶解即得。压片制剂用主、辅料菊芋原粉将菊芋干粉碎，过80目筛，制成得到菊芋原粉；其他所用原料均为压片 制剂常规用料。实施例1一种益生菌片的制备方法，具体包括以下步骤1)益生菌悬液的制备菌种活化将乳酸菌以lml/lOOml的接种量接入乳清粉液体培养基中，35°C培养 24h后，得到活化的益生菌菌种；菌体包埋将lg/100ml的海藻酸钠溶液，经118°C 121°C灭菌15min后与活化的益生菌菌种溶液以1 1体积比混合，然后滴加到足量的已灭菌的0. lmol/L &(12溶液中， 固化0. 5h后，将形成包埋的益生菌载体颗粒(含乳酸菌)滤出；扩大培养以6g/100ml的接种量，将益生菌载体颗粒接入到含有0. 5g/100ml CaCO3的乳清粉液体培养基中，35°C培养24h后滤出益生菌载体颗粒，并用无菌水冲洗； 菌体释放将益生菌载体颗粒置于1 4g/100ml的柠檬酸钠溶液中，35°C放置2h 后，获得益生菌悬液，其中益生菌密度达IO11CfuAil以上。2)以质量份数计，按将菊芋原粉150g、甘露醇20g、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸 酯50g和羟丙基甲基纤维素20g的比例充分混合；再按照1. 5g菊芋原粉加入Iml益生菌悬 液的比例，加入IOOml益生菌悬液混合，然后制粒，在40°C 55°C下干燥，得到中间颗粒；3)以质量份数计，将滑石粉0. 5g、硬脂酸镁4. 5g与干燥后所得的中间颗粒混勻， 经过压片得到益生菌片。实施例2一种益生菌片的制备方法，具体包括以下步骤1)益生菌悬液的制备菌种活化将双歧杆菌以lml/lOOml的接种量接入乳清粉液体培养基中，45°C厌 氧培养12h后，得到活化的益生菌菌种；菌体包埋将4g/100ml的海藻酸钠溶液，经120°C灭菌25min后与活化的益生菌 菌种溶液以1 1体积比混合，然后滴加到足量的已灭菌的0. lmol/LCaCl2溶液中，固化Ih 后，将形成包埋的益生菌载体颗粒(含双歧杆菌)滤出；扩大培养以20g/100ml的接种量，将益生菌载体颗粒接入到含有5g/100ml CaCO3 的乳清粉液体培养基中，45°C培养12h后滤出益生菌载体颗粒，并用无菌水冲洗；菌体释放将益生菌载体颗粒置于4g/100ml的柠檬酸钠溶液中，45°C放置0. 5h 后，获得益生菌悬液，其中益生菌密度达IO11CfuAil以上。2)以质量份数计，按将菊芋原粉300g、甘露醇40g、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸 酯200g和羟丙基甲基纤维素30g的比例充分混合；再按照6g菊芋原粉加入Iml益生菌悬 液的比例，加入50ml益生菌悬液混合，然后制粒，在40°C 55°C下干燥，得到中间颗粒；3)以质量份数计，将滑石粉2g、硬脂酸镁8g与干燥后所得的中间颗粒混勻，经过 压片得到益生菌片。实施例3一种益生菌片的制备方法，具体包括以下步骤1)益生菌悬液的制备菌种活化将乳酸菌以lml/lOOml的接种量接入乳清粉液体培养基中，40°C培养 20h后，得到活化的益生菌菌种；菌体包埋将3g/100ml的海藻酸钠溶液，经118°C灭菌20min后与活化的益生菌 菌种溶液以1 1体积比混合，然后滴加到足量的已灭菌的0. lmol/LCaCl2溶液中，固化 0. 8h后，将形成包埋的益生菌载体颗粒滤出；扩大培养以10g/100ml的接种量，将益生菌载体颗粒接入到含有3g/100ml CaCO3 的乳清粉液体培养基中，40°C培养20h后滤出益生菌载体颗粒，并用无菌水冲洗；菌体释放将益生菌载体颗粒置于3g/100ml的柠檬酸钠溶液中，40°C放置Ih后，获得益生菌悬液，其中益生菌密度达IO11CfuAil以上。2)以质量份数计，按将菊芋原粉200g、甘露醇30g、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸 酯IOOg和羟丙基甲基纤维素25g的比例充分混合；再按照4g菊芋原粉加入Iml益生菌悬 液(活化的益生菌菌种)的比例，加入50ml益生菌悬液混合，然后制粒，在40°C 55°C下 干燥，得到中间颗粒；3)以质量份数计，将滑石粉lg、硬脂酸镁6g与干燥后所得的中间颗粒混勻，经过 压片得到益生菌片。实施例4一种益生菌片的制备方法，具体包括以下步骤 1)益生菌悬液的制备菌种活化将双歧杆菌以lml/lOOml的接种量接入乳清粉液体培养基中，38°C厌 氧培养16h后，得到活化的益生菌菌种；菌体包埋将2. 5g/100ml的海藻酸钠溶液，经120°C灭菌15min后与活化的益生 菌菌种溶液以1 1体积比混合，然后滴加到足量的已灭菌的0. lmol/L CaCl2溶液中，固 化0. 8h后，将形成包埋的益生菌载体颗粒滤出；扩大培养以15g/100ml的接种量，将益生菌载体颗粒接入到含有3. 5g/100ml CaCO3的乳清粉液体培养基中，38°C培养16h后滤出益生菌载体颗粒，并用无菌水冲洗；菌体释放将益生菌载体颗粒置于2. 5g/100ml的柠檬酸钠溶液中，36°C放置1. 5h 后，获得益生菌悬液，其中益生菌密度达IO11CfuAil以上。2)以质量份数计，按将菊芋原粉250g、甘露醇36g、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸 酯150g和羟丙基甲基纤维素24g的比例充分混合；再按照2. 5g菊芋原粉加入Iml益生菌 悬液的比例，加入IOOml益生菌悬液混合，然后制粒，在50°C下干燥，得到中间颗粒；3)以质量份数计，将滑石粉1. Sg、硬脂酸镁6. 6g与干燥后所得的中间颗粒混勻， 经过压片得到益生菌片。实施例5一种益生菌片的制备方法，具体包括以下步骤1)益生菌悬液的制备菌种活化将乳酸菌以lml/lOOml的接种量接入乳清粉液体培养基中，42°C培养 18h后，得到活化的益生菌菌种；菌体包埋将2g/100ml的海藻酸钠溶液，经120°C灭菌25min后与活化的益生菌 菌种溶液以1 1体积比混合，然后滴加到足量的已灭菌的0. lmol/LCaCl2溶液中，固化 0. 6h后，将形成包埋的益生菌载体颗粒滤出；扩大培养以12g/100ml的接种量，将益生菌载体颗粒接入到含有2g/100ml CaCO3 的乳清粉液体培养基中，42°C培养18h后滤出益生菌载体颗粒，并用无菌水冲洗；菌体释放将益生菌载体颗粒置于2g/100ml的柠檬酸钠溶液中，40°C放置0. 8h 后，获得益生菌悬液，其中益生菌密度达IO11CfuAil以上。2)以质量份数计，按将菊芋原粉200g、甘露醇35g、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸 酯160g和羟丙基甲基纤维素28g的比例充分混合；再按照5g菊芋原粉加入Iml益生菌悬 液的比例，加入40ml益生菌悬液混合，然后制粒，在45°C下干燥，得到中间颗粒；
3)以质量份数计，将滑石粉1. Sg、硬脂酸镁7.5g与干燥后所得的中间颗粒混勻， 经过压片得到益生菌片。对于制备的益生菌片剂在0 12个月内检测其包含益生菌活菌数的变化，具体 如表1所示在0 3个月益生菌活菌数在101(lCfU/g以上，第4 5个月益生菌活菌数在 109cfu/g以上，在6 9个月益生菌活菌数在108cfu/g以上，在10 12个月益生菌活菌 数在107cfu/g以上。可以看出随着时间的延长，活菌数逐渐减少，在相当长的时间内仍能 够保持较高的活菌数。表1益生菌片剂存储期间活菌数变化表
权利要求
一种益生菌片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤1)将活化后的益生菌菌种包埋形成益生菌载体颗粒，然后在培养基中扩大培养，使得益生菌在载体颗粒中生长繁殖，再将益生菌从载体颗粒中释放，获得密度达1011cfu/ml以上的益生菌悬液；2)以质量份数计，将菊芋原粉150～300份、甘露醇20～40份、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯50～200份和羟丙基甲基纤维素20～30份充分混合；再按照1.5～6g菊芋原粉加入1ml益生菌悬液的比例，加入益生菌悬液混合，然后制粒，在40℃～55℃下干燥，得到中间颗粒；3)以质量份数计，将滑石粉0.5～2份、硬脂酸镁4.5～8份与中间颗粒混匀，经过压片得到益生菌片。
2.如权利要求1所述的益生菌片的制备方法，其特征在于，所述的益生菌为乳酸菌或 双歧杆菌。
3.如权利要求1所述的益生菌片的制备方法，其特征在于，所述的益生菌悬液的制备为1)菌种活化将益生菌以lml/lOOml的接种量接入到乳清粉液体培养基中，35°C 45°C培养12 24h后，得到活化的益生菌菌种；2)菌体包埋将浓度为Ig 4g/100ml的海藻酸钠溶液，经118°C 121°C灭菌15 25min后与活 化的益生菌菌种溶液以1 1的体积比混合，然后滴加到足量的已灭菌的0. lmol/L CaCl2 溶液中，固化0. 5 Ih后，将形成包埋的益生菌载体颗粒滤出；3)扩大培养以6 20g/100ml的接种量，将益生菌载体颗粒接入到含有0. 5 5g/100ml CaCO3的乳 清粉液体培养基中，35°C 45°C培养12 24h后滤出益生菌载体颗粒，并用无菌水冲洗；4)菌体释放将益生菌载体颗粒置于浓度为1 4g/100ml的柠檬酸钠溶液中，35°C 45°C放置 0. 5 2h后，获得益生菌悬液，其中益生菌密度达IollCfuAil以上。
4.如权利要求3所述的益生菌片的制备方法，其特征在于，所述的乳清粉液体培养基 是在IOOml牛乳中加入3 7g乳清粉，加热使其溶解而得到。
全文摘要
本发明公开了一种益生菌片的制备方法，通过将益生菌包埋在海藻酸钙载体中，让益生菌在益生菌载体颗粒中生长繁殖(载体中益生菌数量可达1011cfu/g)，在柠檬酸钠溶液中释放获得高密度益生菌菌悬液，然后再将制得的高密度菌悬液直接作为粘合剂与主、辅料混合、造粒、压片。本发明无需采用益生菌培养，离心获取菌体，制备菌粉，最后用此菌粉制备各种剂型的方法，此法简便易行、设备要求低、成本低，易规模化应用。
文档编号A23L1/29GK101843337SQ20101019365
公开日2010年9月29日 申请日期2010年6月7日 优先权日2010年6月7日
发明者吕嘉枥, 袁秀丽, 马强 申请人:陕西科技大学