专利名称：一种酶法提取龟板胶中龟板肽的方法
技术领域：
本发明方法涉及龟板深加工技术领域，具体涉及一种酶法提取龟板胶中龟板肽的 方法，是一种以龟板胶为原料，利用生物酶酶解龟板胶，从而提取龟板肽的方法。
背景技术：
龟板是龟科动物乌龟的腹甲，具有滋阴潜阳、益肾强骨、养血补心的功效，是中医 常用的名贵药材之一。其主要的化学成分为氨基酸、蛋白质、动物胶、微量元素等。龟板胶 是我国传统中药中的上品，具有极好的滋补功能，对龟板胶进行酶解可以制得龟板肽，而通 过酶切技术获得的龟板肽不仅具有极好的消化吸收特性，还具有更有效的生理功能，将龟 板肽溶于酒后能改善酒的外观品质，提升酒的品格。龟板肽系列产品具有抑制血压上升、保护胃粘膜、抗溃疡、促进皮肤胶原代谢，美 化皮肤、预防骨质疏松等功效。从龟板胶中提取龟板肽大多采用以下方法龟板胶一碱处理一高温蒸煮一酶解一 过滤一浓缩一喷雾干燥。提取过程中使用大量的碱处理，既对环境造成污染又对人体存在 安全隐患，还破坏了蛋白质的成分；而浓缩操作容易破坏产品的品相，现有技术中没有用到 膜分离技术，影响了产品的质量。
发明内容
针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供了一种酶法提取龟板胶中龟 板肽的方法，无需用碱处理，而是利用复合酶酶解，然后再通过膜分离技术脱盐和浓缩，提 取龟板肽，本方法的生产周期短、操作简便、成本低、安全无毒副作用。为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施—种酶法提取龟板胶中龟板肽的方法，其步骤如下1、以龟板胶(又称龟甲胶)为原料，加入原料重量的5-7倍的蒸馏水搅拌均勻，升 温至100°C蒸煮5-7h ；2、冷却至45_60°C，调pH值为7_8，然后分别按原料龟板胶重量的1_3 %和 0. 5-1. 5%的比例加入碱性蛋白酶和胰蛋白酶，反应过程中用氢氧化钠溶液维持pH在7-8， 恒温搅拌酶解6-10h ；将得到的酶解液升温至90-100°C，保持10-20min灭酶；3、将酶解液离心后过滤，除去蛋白酶，滤液中加入粉末状活性炭进行脱色，然后再 使用膜分离手段进行分离，浓缩，干燥即得到龟板肽干品。本发明方法中使用的碱性蛋白酶和胰蛋白酶的活力分别为25U/mg和35U/mg。与现有技术相比，本发明方法的优点和有益效果如下1、有效避开了化学手段处理所带来的环境污染及对人体伤害的问题；2、采用本发明方法生产出来的龟板肽产品的纯度高，所得产品的总蛋白质中分子 量在500-3000道尔顿的肽含量达到96%以上，分子量大于3000道尔顿的在4%以内；3、采用本发明方法生产出来的龟板肽，分子量小，人体容易吸收，吸收率达90%以
3上；4、本发明采用了活性炭脱色，有效避免了使用过氧化氢脱色时残留于产品中对人 体的伤害，且保证了产品的天然色泽度；5、本发明方法的生产周期短、操作简便、成本低、安全无毒副作用，可广泛用于多 功能保健品、药品等领域。
具体实施例方式下面通过具体的实施例对本发明方法做进一步的详细说明。实施例1 一种酶法提取龟板胶中龟板肽的方法，其步骤如下1、称取龟板胶1kg，然后加入蒸馏水6kg，搅拌均勻后，升温至IOCTC蒸煮5h ；2、冷却至55°C，用0. IM的食品级片状氢氧化钠溶液调pH至7_8，然后加入25g碱 性蛋白酶和IOg胰蛋白酶，在55°C下搅拌酶解10h，酶解过程中用上述0. IM氢氧化钠溶液 保持反应体系的PH值稳定；然后升温至95°C，保温15min灭酶；3、将酶解液过滤，得上清液；上清液中加入25g粉末状活性炭，95°C搅拌吸附Ih脱 色，滤除活性炭；滤液经孔径为Inm的纳滤膜分离系统进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷 雾干燥，得到412g白色(本发明中采用活性炭脱色，所得产品的色泽为白色，优于国家标准 规定的淡黄色)粉末状龟板肽，所得产品的检测报告见表1。表1实施例1所得产品的检测报告
权利要求
一种酶法提取龟板胶中龟板肽的方法，步骤如下A、以龟板胶为原料，加入蒸馏水搅拌均匀后，升温至100℃蒸煮；B、冷却至45 60℃，调pH值为7 8，然后分别按原料龟板胶重量的1 3%和0.5 1.5%的比例加入25U/mg的碱性蛋白酶和35U/mg的胰蛋白酶，恒温搅拌酶解6 10h，酶解过程中用氢氧化钠溶液保持反应体系的pH值稳定；然后将得到的酶解液升温至90 100℃灭酶；C、将酶解液离心后过滤，滤液经粉末状活性炭脱色后，然后再通过膜分离来脱盐和浓缩，所得浓缩液干燥后即得龟板肽。
2.如权利要求1所述的一种酶法提取龟板胶中龟板肽的方法，其特征在于所述的蒸 馏水的加入量为原料重量的5-7倍。
3.如权利要求1或2所述的一种酶法提取龟板胶中龟板肽的方法，其特征在于所述 的蒸煮的时间为5-7h。
4.如权利要求1或2所述的一种酶法提取龟板胶中龟板肽的方法，其特征在于所述 的灭酶的时间为10-20min。
5.如权利要求1或2所述的一种酶法提取龟板胶中龟板肽的方法，其特征在于所述 的粉末状活性炭的加入量为原料龟板胶重量的2-2. 5%。
6.如权利要求1或2所述的一种酶法提取龟板胶中龟板肽的方法，其特征在于所述 的膜分离操作采用的是孔径为Inm的纳滤膜。
7.如权利要求1或2所述的一种酶法提取龟板胶中龟板肽的方法，其特征在于所述 的脱色为95°C下搅拌吸附Ih脱色。
全文摘要
本发明公开了一种酶法提取龟板胶中龟板肽的方法，该方法采用龟板胶为主要原料，经过配水升温蒸煮、复合蛋白酶酶解、灭酶、脱色、膜分离，最后将得到的滤液干燥即得到产品龟板肽。本发明方法生产周期短、成本低、不产生任何有毒有害物质，所得产品安全性高，可广泛用于保健品、药品等领域。
文档编号C12P21/06GK101974594SQ201010540588
公开日2011年2月16日 申请日期2010年11月11日 优先权日2010年11月11日
发明者叶传发, 叶思, 张小东, 胡承四 申请人:湖北远成药业有限公司