专利名称：一种富含高活性肠道益生菌营养果冻的制作方法
技术领域：
本发明涉及的是一种营养果冻的制作方法，具体涉及一种富含高活性肠道益生菌 营养果冻的制作方法。
背景技术：
益生菌(Probiotics)是一类改善人类肠道微生态平衡，对人体健康具有调理作 用的有益的微生物，它们主要是通过维护肠道的微生态平衡而起到促进人体健康的作用， 它的生理学功能得到全世界科技界普遍认同。全世界每年发表关于研究益生菌的论文极其 丰富，概括起来益生菌具有以下几方面的作用(1)提高免疫力双歧杆菌和嗜酸乳杆菌可 产生大量的免疫球蛋白。从而激活机体的免疫细胞，使得外在菌难以留存体内，达到免疫调 节作用。(2)改善胃肠道功能双歧杆菌和嗜酸乳杆菌在肠道粘膜表面形成保护屏障，抵御 有害菌对肠道粘膜的侵袭破坏，能产生乳酸和醋酸等酸性物质，造成不利于有害菌生长的 环境，抑制有害菌的生长、繁殖，起到调节肠道菌群的作用。(3)营养作用双歧杆菌和嗜酸 乳杆菌在人体肠道内发酵后可产生乳酸和醋酸，能提高钙、磷、铁的利用率，促进铁和维生 素D的吸收，产生维生素K及维生素B，产生乳糖酶帮助消化乳糖。(4)通肠润便双歧杆菌 和嗜酸乳杆菌在肠内可产生大量的短链脂肪酸等酸性物质，能刺激肠道蠕动，增加粪便湿 度，起到通便的效果。( 恢复因使用抗生素后而被破坏的肠道正常微生物菌群抗生素是 引起肠道菌群失调的重要因素。抗生素在杀灭有害菌的同时，也杀灭了很多的有益菌，及时 补充双岐杆菌和嗜酸乳杆菌，对帮助肠道恢复菌群平衡、提高营养吸收能力是非常必要的。 (6)降低胆固醇、防止动脉硬化。(7)抑制内毒素的产生，延缓衰老。(8)抑制肠道中致癌 因子的产生，预防肿瘤的发生。(9)抗辐射等。因此，肠道微生态制剂的研究已成为当前世 界微生物学领域一个研究重点。目前，虽然市场上益生菌产品极其丰富，但是，益生菌产品 只有液体益生菌和益生菌冻干粉两种形式。而采用营养果冻培养肠道益生菌，培养成熟，经 包装后作为活性较高、且易于长期保存的营养果冻益生菌则具有极大的创新性。这项技术 的研究和开发会给人类的健康带来积极的促进意义，同时也具有重要的经济价值和社会效果。
发明内容
为了本发明的目的在于提供一种富含高活性肠道益生菌营养果冻的制作方法，本 方法生产的营养果冻益生菌不需要分离冻干，可直接作为益生菌服用，常温下可长期保存， 活力不但不降低且有所升高。本发明的目的是这样实现的(1)首先培养肠道益生菌试管斜面菌种，培养16-72小时，然后将试管斜面菌种接 入三角瓶液体培养基中进行培养，20°C _45°C培养8-72小时，再逐级进行扩大培养，然后进 行100L发酵罐培养，使发酵液中益生菌总数达到1.0 X IO4-L OX IOltVmL,此培养液作为种 子，
其中，三角瓶液体培养基和发酵罐培养基制作方法为将蛋白胨0. 1-100. 0克、乳 清粉1. 0-5. 0克、葡萄糖1. 0-15. 0克、牛肉膏0. 1-10. 0克、酵母膏0. 1-10. 0克、柠檬酸钠 0. 1-10. 0克、醋酸钠0. 1-5. 5克、磷酸氢二钾0. 1-2. 5克、硫酸镁0. 01-0. 75克和大枣汁 1000毫升混合后，pH5. 0-7. 0，105°C灭菌15分钟；其中大枣汁制作方法为将200克大枣加 1500毫升水，加热煮沸，然后熬制成1000毫升汁液，过滤澄清为大枣汁；(2)营养果冻的制备营养果冻制作方法将琼脂0. 1-100. 0克、果胶0. 1-100. 0克、黄原胶0. 1-100. 0 克、白砂糖1. 0-200. 0克、蛋白胨0. 1-10. 0克、葡萄糖1. 0-15. 0克、牛肉膏0. 1-10. 0克、酵 母粉0. 1-10. 0克、磷酸氢二钾0. 1-2. 5克、硫酸镁0. 01-0. 75克和大枣汁IOOOmL混合后， 再加入蛋白糖重量比为0. 1-5%和食用香精重量比为0. 001-2%,pH5. 0-7. 0，105°C灭菌15 分钟，冷却至38 °C _55°C备用，(3)将培养成熟的种子按重量比0. 01-25. 0%接入制备好的营养果冻中，彻底混 合均勻，然后将接种的营养果冻在38°C _55°C注入到密闭的无菌培养容器中，然后冷却至 38°C以下凝固，再置于20°C -45°C下培养10-120小时；(4)观察待长出肉眼可见的菌落，进行检验分析，包装成产品；所述的肠道益生菌 是两歧双歧杆菌 Bifidobacterium bifidum、嗜酸乳杆菌 Lactobacillus acidlophilus、 嗜热链球菌Streptococcus thermophilus、德氏乳杆菌保加利亚亚种Lactobacillus delbrueckii subsp bulgaricus、青春双歧 If 菌 Bifidobacterium adolescentis> jk 双歧杆菌B. longum、短双歧杆菌B. braeve、婴儿双歧杆菌B. infantis、鼠李糖乳杆菌 L. rhamnosus、干酪乳杆菌L. casei或植物乳杆菌L. plantarum中的一种。本发明还具有如下特征所述的黄原胶0. 1-100. 0克或是果冻粉0. 1-100. 0克。本发明将液体益生菌菌种接种到经过灭菌的营养丰富的果冻中，在适宜的培养条 件下培养，让大量益生菌在果冻中生长繁殖并存活下来，制成含有大量活性益生菌的果冻。 不需要分离冻干，可直接作为益生菌食用，在常温下可长期保存，活力不会降低。完全不同 于目前市场上所有的益生菌产品，比液态培养益生菌的产品及益生菌冻干粉有诸多优点和 较高的活力，其货架寿命显著的延长。
具体实施例方式实施例一首先培养嗜酸乳杆菌试管斜面菌种，培养48小时，然后将试管斜面菌种接入三角 瓶液体培养基中进行培养，37°C培养M小时，再逐级进行扩大培养，进行100L发酵罐培养。液体三角瓶及大罐培养基配方将蛋白胨5. 0克、乳清粉1. 5克、葡萄糖2. 0克、牛 肉膏2. 0克、酵母膏2. 0克、柠檬酸钠1. 5克、醋酸钠1. 5克、磷酸氢二钾0. 5克、硫酸镁0. 1 克和大枣汁1000毫升混合，pH6. 5，105°C灭菌15分钟。接入嗜酸乳杆菌菌种，接种后37°C 培养M小时，作为种子备用。营养果冻的制备营养果冻配方将果胶8. 0克、黄原胶5. 0克、白砂糖60. 0克、蛋白胨5. 0克、乳清 粉1. 5克、葡萄糖2. 0克、牛肉膏2. 0克、酵母膏2. 0克、柠檬酸钠1. 5克、醋酸钠1. 5克、磷酸氢二钾0.5克、硫酸镁0. 1克和大枣汁1000毫升混合后，再加入蛋白糖重量比为0. 和 食用香精重量比为0. 001%, pH6. 5，105°C灭菌15分钟。冷却至44°C，置于44°C恒温水浴中备用。将培养成熟的种子接入制备好的营养果冻(按营养果冻量的5%接种)中，彻底混 合均勻。然后将接种的营养果冻在44°C注入到50mL的聚乙烯塑料小盒中，密封，然后冷却 至37°C凝固，再置于37°C培养室中，培养48小时。观察待长出肉眼可见的菌落，进行检验 分析，包装成产品。实验数据试验方法在无菌操作条件下，称取l.Og培养成熟的样品，置入灭菌的250mL三角 瓶中，瓶内装99mL无菌生理盐水和100粒玻璃珠，彻底振摇10分钟，稀释度为10_2。然后取 lmL，置入9mL无菌生理盐水试管中，振摇均勻，稀释度为10_3。依次进行稀释，直至稀释到 10Λ然后分别从稀释度10-6、10_7、10-8样品中各取0. lmL，置入培养皿中，再倒入15mLMRS 培养基摇勻，每个稀释度做3个重复，室温下静止20分钟凝固。37°C培养箱倒置培养，48小 时后，计数肉眼可见的菌落，根据菌落总数和稀释倍数计算每克样品中的活菌数。试验结果
权利要求
1.一种富含高活性肠道益生菌营养果冻的制作方法，其特征在于(1)首先培养肠道益生菌试管斜面菌种，培养16-72小时，然后将试管斜面菌种接入 三角瓶液体培养基中进行培养，20°C _45°C培养8-72小时，再逐级进行扩大培养，然后进行 100L发酵罐培养，使发酵液中益生菌总数达到1. 0 X IO4-L 0 X IOltVmL,此培养液作为种子，其中，三角瓶液体培养基和发酵罐培养基制作方法为将蛋白胨0.1-100.0克、乳清 粉1. 0-5. 0克、葡萄糖1. 0-15. 0克、牛肉膏0. 1-10. 0克、酵母膏0. 1-10. 0克、柠檬酸钠 0. 1-10. 0克、醋酸钠0. 1-5. 5克、磷酸氢二钾0. 1-2. 5克、硫酸镁0. 01-0. 75克和大枣汁 1000毫升混合后，ρΗ5· 0-7. 0，105°C灭菌15分钟；其中，大枣汁制作方法将200克大枣加1500毫升水，加热煮沸，然后熬制成1000毫升 汁液，过滤澄清为大枣汁；(2)营养果冻的制备营养果冻制作方法将琼脂0.1-100.0克、果胶0. 1-100.0克、黄原胶0. 1-100.0克、白 砂糖1.0-200.0克、蛋白胨0. 1-10. 0克、葡萄糖1.0-15.0克、牛肉膏0. 1-10. 0克、酵母粉 0. 1-10. 0克、磷酸氢二钾0. 1-2. 5克、硫酸镁0. 01-0. 75克和大枣汁IOOOmL混合后，再加入 蛋白糖重量比为0. 1-5%和食用香精重量比为0. 001-2%, ρΗ5· 0-7. 0，105°C灭菌15分钟， 冷却至38°C _55°C备用，(3)将培养成熟的种子按重量比0.01-25. 0%接入制备好的营养果冻中，彻底混合均 勻，然后将接种的营养果冻在38°C _55°C注入到密闭的无菌培养容器中，然后冷却至38°C 以下凝固，再置于20°C -45°C下培养10-120小时；(4)观察待长出肉眼可见的菌落，进行检验分析，包装成产品；所述的肠道益生菌是两歧双歧杆菌Bifidobacterium bifidum、嗜酸乳杆菌 Lactobacillus acidlophilus、嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus、德氏乳 杆菌保力口利亚亚种Lactobacillus delbrueckii subsp bulgaricus、青春双歧杆菌 Bifidobacterium adolescentis、长双歧杆菌 B. longum、短双歧杆菌 B. braeve、婴儿双 歧杆菌B. infantis、鼠李糖乳杆菌L. rhamnosus、干酪乳杆菌L. casei或植物乳杆菌 L. ρ Iantarum巾白勺一禾中。
2.根据权利要求1所述的一种富含高活性肠道益生菌营养果冻的制作方法，其特征在 于所述的黄原胶0. 1-100. 0克或是果冻粉0. 1-100. 0克。
3.根据权利要求1或2所述的一种富含高活性肠道益生菌营养果冻的制作方法制得的 一种富含高活性肠道益生菌营养果冻。
全文摘要
一种富含高活性肠道益生菌营养果冻的制作方法首先培养嗜酸乳杆菌试管斜面菌种，然后将试管斜面菌种接入三角瓶液体培养基中进行培养，再逐级进行扩大培养，进行100L发酵罐培养，作为种子备用，将培养成熟的种子接入制备好的营养果冻彻底混合均匀，然后将接种的营养果冻在38℃-55℃注入到密闭的无菌培养容器中，然后冷却至38℃以下凝固，再置于20℃-45℃下培养10-120小时，观察待长出肉眼可见的菌落，进行检验分析，包装成产品。本发明具有不需要分离冻干，可直接作为益生菌食用，在常温下可长期保存，活力不会降低，比液态培养益生菌的产品及益生菌冻干粉有诸多优点和较高的活力，其货架寿命显著的延长。
文档编号A23L1/29GK102077932SQ20101056250
公开日2011年6月1日 申请日期2010年11月29日 优先权日2010年11月29日
发明者梁金钟 申请人:哈尔滨美华生物技术股份有限公司