专利名称：α1-酸性糖蛋白的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及α 1-酸性糖蛋白的应用。
背景技术：
α 1-酸性糖蛋白，分子量41-43KD，含糖约45%，等电点为2. 8-3. 8，包括等分子的己糖，己糖胺和唾液酸。其氨基酸序列如SEQ ID No. 1所示(数据来源于NCBI.蛋白编号 gi116757980)。fe现有又献:f艮退(Thierry Fournier, Najet Medjoubi—N, Dominique Porquet. Alpha-トacid glycoprotein. BBA. 2000 ； 1482. 157)，肝脏是al_酸性糖蛋白最主要的合成器官，在炎症，肿瘤或者损伤的情况下，该蛋白会被肝脏大量合成释放入血。该蛋白在体内主要发挥免疫调节以及运载脂溶性小分子的作用。但目前，尚未有文献报道α 1-酸性糖蛋白在抗疲劳领域的应用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供α 1-酸性糖蛋白的新应用，从而拓展其应用范围。本发明涉及α -酸性糖蛋白在制备抗疲劳的保健食品中的应用。其中，所述的 α 1-酸性糖蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No. 1所示。所述的抗疲劳的保健食品中，α 1-酸性糖蛋白的含量为抗疲劳有效量以上，具体可根据情况选择。一般小鼠剂量为7mg/kg以上，人剂量可按本领域常规方法換算，一般为 46mg以上(按人体重为60kg折算)。所述的抗疲劳的保健食品可以仅含α -酸性糖蛋白作为唯一活性成分，也可以还含有除α 1-酸性糖蛋白以外的其它活性成分。所述的其它活性成分为对α 1-酸性糖蛋白的抗疲劳作用没有不良影响可联合使用的其他活性成分，如其他抗疲劳活性成分。所述的抗疲劳的保健食品可为食品领域常规的适用于α 1-酸性糖蛋白的各种剂型。根据所选择的剂型，可按本领域常规知识，选择合适的辅料，按常规方法制得所需剂型的保健食品。本发明所用试剂和原料均市售可得。本发明的积极进步效果在于本发明公开了 α 1-酸性糖蛋白在制备抗疲劳的保健食品中的新应用，从而拓展了其应用范围，也为抗疲劳领域提供了新途径。
具体实施例方式下面通过实施例的方式进ー步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。实施例α 1-酸性糖蛋白的抗疲劳作用1、材料
动物KM小鼠，观只，雄性，体重18_22g，第二军医大学实验动物中心提供。α -酸性糖蛋白纯品(orosomucoid 1,0RM 1)由上海开阳生物公司提供。该纯品获得的基本エ艺流程如下(1)分子克隆a、抽提KM小鼠肝组织的RNA，RT-PCR钓出目的基因ORM ；b、构建真核质粒载体(Pichia)构建ppICh-ORM(xhol+Notl插入)质粒；c、表达筛选。(2)中试发酵(3)蛋白纯化发酵上清液层析；条件为20mMHAc-NaAc，pH4. 5/SP-Sepharose FF层折。将洗脱液进行蛋白电泳，在相应分子量的位置上出现条帯。将该条带切取，并进行质谱分析，以确保所合成的蛋白是α 1-酸性糖蛋白。所获得ORM 1溶液中，ORM 1浓度为0. 78mg/ml，分子量41-43KD，含糖约45%，等电点为2. 8-3. 8，包括等分子的己糖，己糖胺和唾液酸。生理盐水(赂)称取4. 5g氯化钠粉末溶于500ml双蒸水中充分溶解，再用高压灭菌锅在120度进行灭菌处理。2、实验方法小鼠自由进食饮水，自然光照，普通饲料适应性喂养3天，随后进行适应性游泳以让其适应之后的游泳测试，方法为每只小鼠自由游泳15分钟，再放回笼中饲养恢复一天进行后续实验。随机分为对照组(n = 7只)和给药组(n = 21只，7只/每个剂量组)，分别对各组给药按表1所示的剂量对给药组(0RM 1低剂量組、ORM 1中剂量组和ORM 1高剂量组) 进行尾静脉注射，对照组给予同样剂量的生理盐水0. 2mL·连续三天，在第四天进行游泳实验，在所有小鼠均负重8%的情况下测得其游泳时间。小鼠游泳实验方法參考文献(RongSheng, Xianxiang Xu, Qin Tang, et al.Polysaccnaride of Radix Pseudostellariae improves しnronic Fatigue Syndrome Induced by Poly I :C in Mice Evid. Based Complement. Altern. Med. , 2009 ； 10. 1093.) 报道的方法将小鼠置入ー个48X36X^厘米的不锈钢圆筒内，水深20cm，水温约22度， 将相当于其自身体重8%的别针用细绳穿起固定在其尾根部，遂开始记录游泳时间，以小鼠下沉水面超过8秒不能自由浮起为疲劳标准，停止实验。3、实验结果各实验组实验结果如表1所示表1 α 1-酸性糖蛋白给药组和对照组游泳实验测试结果
权利要求
1. α -酸性糖蛋白在制备抗疲劳的保健食品中的应用。
全文摘要
本发明公开了α1-酸性糖蛋白在制备抗疲劳的保健食品中的新应用，从而拓展了其应用范围，也为抗疲劳领域提供了新途径。
文档编号A23L1/305GK102578590SQ201110002009
公开日2012年7月18日 申请日期2011年1月6日 优先权日2011年1月6日
发明者苏定冯, 雷虹 申请人:中国人民解放军第二军医大学