专利名称：一种适合儿童服用的益生菌膳食补充剂及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种益生菌膳食补充剂及其制备方法和用途，特别涉及一种适合儿童 服用的、具有增强免疫、助消化、减轻痢疾症状功能的益生菌膳食补充剂及其制备方法和用 途。
背景技术：
益生菌膳食补充剂在美国应用非常广泛，我国由于法律法规的限制，国内这方面 的研究与开发应用不多。尤其是涉及适合儿童服用的、具有增强免疫、助消化、减轻痢疾症 状功能的益生菌补充剂更是无相关报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题之一在于提供一种适合儿童服用的益生菌膳食补充 剂，该适合儿童服用的益生菌膳食补充剂中的益生菌选择符合儿童消化道益生菌群的结构 特点，使适合儿童服用。本发明所要解决的技术问题之二在于提供上述益生菌膳食补充剂的制备方法。本发明所要解决的技术问题之三在于提供上述益生菌膳食补充剂的应用。作为本发明第一方面的适合儿童服用的益生菌膳食补充剂，其特征在于，所述益 生菌膳食补充剂中的益生菌总含量> IO9个/克。所述益生菌为婴儿双歧杆菌(B. infantis)、干酪乳杆菌(L. casei)、嗜热链球菌 (S. thermophilus)、嗜酸乳杆菌(L. acidophilus)、鼠李糖乳杆菌(Lrhamnosus)、植物乳杆 菌(L. plantarum)、两歧双歧杆菌(B. bifidum)、保加利亚乳杆菌(L. bulgaricus)、短双歧 杆菌(B. breve)等中的一种或其两种以上的混合。所述适合儿童服用的益生菌膳食补充剂还包括适合儿童服用的辅料，所述辅料为 麦芽糊精、变性淀粉、多孔淀粉、玉米淀粉、葡萄糖、乳糖、脱脂奶粉、水溶性膳食纤维等中的 一种或其两种以上的混合。所述益生菌膳食补充剂的含水量< 5%。所述益生菌膳食补充剂为益生菌菌粉或益生菌微胶囊与辅料混合而成。所述益生菌膳食补充剂的剂型为胶囊剂。所述益生菌膳食补充剂的剂型为散剂。所述益生菌膳食补充剂的剂型为颗粒剂。所述益生菌膳食补充剂的剂型为片剂。作为本发明第二方面的适合儿童服用的益生菌膳食补充剂的制备方法，包括如下 步骤1、取生产用益生菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1.0°C培养36 48h;将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平板上的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1.0°C培养48-7池，培养好后转接，或放 4°C冰箱冷藏保存备用；挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1. 0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4他，生产用一级益生菌种子；2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级益生菌种子接种于MRS培养基上，经控制pH 5. 2-5. 5并补 料进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数 大于4 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD600nm值1. 5以上；3、采用离心或膜过滤的方法收集菌泥，将冷冻保护剂与收集的菌泥乳化混勻得菌 泥乳化料，菌泥乳化料在_40°C以下抽真空冷却制成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目 的筛网获得益生菌菌粉；所述冻干保护剂包括重量按照菌泥重量百分比计重量为20% 30%的脱脂奶粉、重量为10% 20%的乳糖、重量为0. 01 % 1. 0%的维生素C钠、重量为 10% 20%的淀粉、重量为0. 5% 2%的无机盐。作为本发明第二方面的适合儿童服用的益生菌膳食补充剂的制备方法，包括如下 步骤1、取生产用益生菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1.0°C培养36 48h;将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平板 上的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1.0°C培养48-7池，培养好后转接，或放 4°C冰箱冷藏保存备用；挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1. 0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4 ，得生产用一级益生菌种子；2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级益生菌种子接种于MRS培养基上，经控制pH 5. 2-5. 5并补 料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌 数大于4 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD600nm值1. 5以上；3、采用离心或膜过滤的方法收集菌泥，将冷冻保护剂与收集的菌泥乳化混勻得菌 泥乳化料，菌泥乳化料在_40°C以下抽真空冷却制成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目 的筛网获得益生菌菌粉；所述冻干保护剂包括重量按照菌泥重量百分比计重量为20% 30 %的脱脂奶粉、重量为10 % 20 %的乳糖、重量为0. 01 % 1. 0 %的维生素C钠、重量为 10% 20%的淀粉、重量为0. 5% 2%的无机盐；4、将益生菌菌粉混加微胶囊囊材经过空气悬浮处理制成益生菌微胶囊。所述微胶囊囊材包括重量按照菌泥重量百分比计重量为10% 15%的果胶、重 量为10% 15%的明胶、重量为20% 30%的油脂。在上述制备方法中，所述益生菌为婴儿双歧杆菌(B. infantis)、干酪乳杆菌 (L. casei)、嗜热链球菌(S. thermophilus)、嗜酸乳杆菌(L. acidophilus)、鼠李糖乳杆菌 (L rhamnosus)、植物乳杆菌(L. plantarum)、两歧双歧杆菌(B. bifidum)、保加利亚乳杆菌 (L. bulgaricus)或短双歧杆菌(B. breve)。作为第三方面的适合儿童服用的益生菌膳食补充剂在制备增强免疫功能剂方面 的应用。
作为第三方面的适合儿童服用的益生菌膳食补充剂在制备助消化功能剂方面的应用。作为第三方面的适合儿童服用的益生菌膳食补充剂在制备减轻痢疾症状功能剂 方面的应用。本发明的益生菌膳食补充剂中的益生菌选择符合儿童消化道益生菌群的结构特 点，使适合儿童服用。
具体实施例方式为了使本发明解决的技术问题易于明白了解，下面进一步阐述本发明。本发明的益生菌膳食补充剂，采用的益生菌粉，尤其是益生菌微胶囊颗粒， 按组方进行配伍而成。采用的益生菌为婴儿双歧杆菌(B. infantis)、干酪乳杆菌 (L. case)、嗜热链球菌(S. thermophilus)、嗜酸乳杆菌(L. acidophilus)、鼠李糖乳杆菌 (L. rhamnosus)、植物乳杆菌(L. ρlantarum)、两歧双歧杆菌(B. bifidum)、保加利亚乳杆菌 (L.bulgaricus)、短双歧杆菌(B. breve)中的一种或其两种以上的混合。本发明的益生菌膳食补充剂的制备过程是在室温保持20士5°C、室内相对湿度 (50%、环境洁净度在10万级的条件下进行。室内温度、相对湿度太高都会影响到制剂的 活菌数含量。本发明最终得到的益生菌膳食补充剂中的益生菌总含量> IO9个/克(生产日)。经发明者研究，上述的益生菌膳食补充剂可先加工成益生菌菌粉或益生菌微胶 囊，再加工成胶囊或散剂，或造粒做成颗粒剂，或造粒压片制成片剂配料等剂型。本发明的益生菌膳食补充剂含水量应控制在5%以下。以下实施例仅对本发明进一步地阐述，不构成对本发明的限制。实施例1婴儿双歧杆菌粉的制备1、取生产用婴儿双歧杆菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1.0°C培养 36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平 板上的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放 4°C冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1. 0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4他，得生产用一级婴儿双歧杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级婴儿双歧杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培养 基重量的10%，经控制PH 5. 2-5. 5并补料后手段进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36 小时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm 值1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得婴儿双歧杆菌粉，至于无菌密实袋内充氮气保存。实施例2婴儿双歧杆菌微胶囊的制备1、取生产用婴儿双歧杆菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1.0°C培养 36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平 板上的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放 4°C冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1. 0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4他，得生产用一级婴儿双歧杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级婴儿双歧杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培 养基重量的10%，经控制？!1 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小 时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm值 1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^g，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得婴儿双歧杆菌粉，至于无菌密实袋内 充氮气保存；4、将50g果胶、50g明胶和IOOg牛油熔化后冷却至45°C，加入婴儿双歧杆菌粉，喷 入无菌空气，使物料呈现适当沸腾状态，温度控制在30 32°C。操作环境湿度小于50%， 使得冻干粉被包衣形成婴儿双歧杆菌微胶囊颗粒。实施例3嗜酸乳杆菌粉的制备1、取生产用嗜酸乳杆菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1. 0°C培养36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平板上 的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放4°C 冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1.0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4 ，得生产用一级嗜酸乳杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级嗜酸乳杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培养 基重量的10%，经控制PH 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小 时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm值 1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得嗜酸乳杆菌粉，至于无菌密实袋内充氮气保存。实施例4嗜酸乳杆菌微胶囊的制备1、取生产用嗜酸乳杆菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1. 0°C培养36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平板上 的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放4°C 冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1.0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4 ，得生产用一级嗜酸乳杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级嗜酸乳杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培养 基重量的10%，经控制PH 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小 时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. O5OD600n值 1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得嗜酸乳杆菌粉，至于无菌密实袋内充 氮气保存；4、将50g果胶、50g明胶和IOOg牛油熔化后冷却至45°C，加入嗜酸乳杆菌菌粉，喷 入无菌空气，使物料呈现适当沸腾状态，温度控制在30 32°C。操作环境湿度小于50%， 使得冻干粉被包衣形成嗜酸乳杆菌微胶囊颗粒。实施例5鼠李糖乳杆菌粉的制备1、取生产用鼠李糖乳杆菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1.0°C培养 36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平 板上的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放 4°C冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1. 0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4 ,得生产用一级鼠李糖乳杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级鼠李糖乳杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培 养基重量的10%，经控制PH 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小 时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm值 1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得鼠李糖乳杆菌粉，至于无菌密实袋内充氮气保存。实施例6鼠李糖乳杆菌微胶囊的制备1、取生产用鼠李糖乳杆菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1.0°C培养 36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平 板上的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放 4°C冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1. 0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4 ,得生产用一级鼠李糖乳杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级鼠李糖乳杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培 养基重量的10%，经控制？!1 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小 时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm值 1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得鼠李糖乳杆菌粉，至于无菌密实袋内 充氮气保存；4、将50g果胶、50g明胶和IOOg牛油熔化后冷却至45°C，加入鼠李糖乳杆菌菌粉， 喷入无菌空气，使物料呈现适当沸腾状态，温度控制在30 32°C。操作环境湿度小于50%， 使得冻干粉被包衣形成鼠李糖乳杆菌微胶囊颗粒。实施例7植物乳杆菌粉的制备1、取生产用植物乳杆菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1. 0°C培养36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平板上 的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放4°C 冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1.0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4 ，得生产用一级植物乳杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级植物乳杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培养 基重量的10%，经控制PH 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小 时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm值 1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得植物乳杆菌粉，至于无菌密实袋内充
实施例8植物乳杆菌微胶囊的制备1、取生产用植物乳杆菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1. 0°C培养36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平板上 的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放4°C 冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1.0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4 ，得生产用一级植物乳杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级植物乳杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培养 基重量的10%，经控制PH 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小 时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm值 1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^g，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得植物乳杆菌粉，至于无菌密实袋内充 氮气保存；4、将50g果胶、50g明胶和IOOg牛油熔化后冷却至45°C，加入植物乳杆菌粉，喷入 无菌空气，使物料呈现适当沸腾状态，温度控制在30 32°C。操作环境湿度小于50%，使 得冻干粉被包衣形成植物乳杆菌微胶囊颗粒。实施例9两歧双歧杆菌粉的制备1、取生产用两歧双歧杆菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1.0°C培养 36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平 板上的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放 4°C冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1. 0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4他，得生产用一级两歧双歧杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级两歧双歧杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培 养基重量的10%，经控制PH 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小 时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm值 1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得两歧双歧杆菌粉，至于无菌密实袋内
10充氮气保存。实施例10两歧双歧杆菌微胶囊的制备1、取生产用两歧双歧杆菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1.0°C培养 36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平 板上的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放 4°C冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1. 0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4他，得生产用一级两歧双歧杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级两歧双歧杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培 养基重量的10%，经控制PH 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小 时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm值 1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得两歧双歧杆菌粉，至于无菌密实袋内 充氮气保存；4、将50g果胶、50g明胶和IOOg牛油熔化后冷却至45°C，加入两歧双歧杆菌粉，喷 入无菌空气，使物料呈现适当沸腾状态，温度控制在30 32°C。操作环境湿度小于50%， 使得冻干粉被包衣形成两歧双歧杆菌微胶囊颗粒。实施例11短双歧杆菌粉的制备1、取生产用短双歧杆菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1. 0°C培养36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平板上 的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放4°C 冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1.0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4 ，得生产用一级短双歧杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级短双歧杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培养 基重量的10%，经控制PH 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小 时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm值 1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得短双歧杆菌粉，至于无菌密实袋内充氮气保存。实施例12短双歧杆菌微胶囊的制备1、取生产用短双歧杆菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1. 0°C培养36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平板上 的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放4°C 冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1.0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4 ，得生产用一级短双歧杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级短双歧杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培养 基重量的10%，经控制PH 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小 时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm值 1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得短双歧杆菌粉，至于无菌密实袋内充 氮气保存；4、将50g果胶、50g明胶和IOOg牛油熔化后冷却至45°C，加入短双歧杆菌菌粉，喷 入无菌空气，使物料呈现适当沸腾状态，温度控制在30 32°C。操作环境湿度小于50%， 使得冻干粉被包衣形成短双歧杆菌微胶囊颗粒。实施例13干酪乳杆菌粉的制备1、取生产用干酪乳杆菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1. 0°C培养36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平板上 的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放4°C 冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1.0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4 ，得生产用一级干酪乳杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级干酪乳杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培养 基重量的10%，经控制PH 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小 时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm值 1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得干酪乳杆菌粉，至于无菌密实袋内充氮气保存。实施例14干酪乳杆菌微胶囊的制备1、取生产用干酪乳杆菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1. 0°C培养36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平板上 的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放4°C 冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1.0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4 ，得生产用一级干酪乳杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级干酪乳杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培养 基重量的10%，经控制PH 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小 时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm值 1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得干酪乳杆菌粉，至于无菌密实袋内充 氮气保存；4、将50g果胶、50g明胶和IOOg牛油熔化后冷却至45°C，加入干酪乳杆菌粉，喷入 无菌空气，使物料呈现适当沸腾状态，温度控制在30 32°C。操作环境湿度小于50%，使 得冻干粉被包衣形成干酪乳杆菌微胶囊颗粒。实施例15嗜热链球菌粉的制备1、取生产用嗜热链球菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1. 0°C培养36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平板上 的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放4°C 冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1.0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4 ，得生产用一级嗜热链球菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级嗜热链球菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培养 基重量的10%，经控制PH 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小 时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm值 1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得嗜热链球菌粉，至于无菌密实袋内充氮气保存。实施例16嗜热链球菌微胶囊的制备1、取生产用嗜热链球菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1. 0°C培养36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平板上 的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放4°C 冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1.0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4 ，得生产用一级嗜热链球菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级嗜热链球菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS培养 基重量的10%，经控制PH 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36小 时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm值 1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得嗜热链球菌粉，至于无菌密实袋内充 氮气保存；4、将50g果胶、50g明胶和IOOg牛油熔化后冷却至45°C，加入嗜热链球菌粉，喷入 无菌空气，使物料呈现适当沸腾状态，温度控制在30 32°C。操作环境湿度小于50%，使 得冻干粉被包衣形成嗜热链球菌微胶囊颗粒。实施例17保加利亚乳杆菌粉的制备1、取生产用保加利亚乳杆菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1. 0°C培养 36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平 板上的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放 4°C冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1. 0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4 ，得生产用一级保加利亚乳杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级保加利亚乳杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS 培养基重量的10%，经控制PH 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36 小时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm 值1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得保加利亚乳杆菌粉，至于无菌密实袋内充氮气保存。
实施例18 保加利亚乳杆菌微胶囊的制备1、取生产用嗜热链球菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C 士 1. 0°C培养36 48h ；将活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平板上 的单菌落用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放4°C 冰箱冷藏保存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1.0°C培养 36-48h ；按2%的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C 培养36-4 ,获得生产用一级保加利亚乳杆菌种子。2、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度 36 40°C，将步骤1制备的一级保加利亚乳杆菌种子接种于MRS培养基上，接种量为MRS 培养基重量的10%，经控制pH 5. 2-5. 5并补料后进行高密度恒温37°C 士 1. 0°C培养12-36 小时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于5 X IO8个，发酵液的pH值< 5. 0，OD6tltlnm 值1. 5以上。3、在离心机上以12000转/分钟的转速提取菌泥^ig，将500g脱脂奶粉、300g乳 糖、IOg维生素C钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速 搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟得菌泥乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制 成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目的筛网获得保加利亚乳杆菌粉，至于无菌密实袋 内充氮气保存；4、将50g果胶、50g明胶和IOOg牛油熔化后冷却至45°C，加入保加利亚乳杆菌粉， 喷入无菌空气，使物料呈现适当沸腾状态，温度控制在30 32°C。操作环境湿度小于50%， 使得冻干粉被包衣形成保加利亚乳杆菌微胶囊颗粒。实施例19益生菌膳食补充剂胶囊的制备配方婴儿双歧杆菌粉(B. infantisUwt 嗜酸乳杆菌粉 (L. acidophilus) Iwt 鼠李糖乳杆菌粉(L. rhamnosus) Iwt %、植物乳杆菌粉 (L. ρlantarum) lwt%、两歧双歧杆菌粉(B. bifidum) lwt%、短双歧杆菌粉(B. breve) Iwt
麦芽糊精Mwt %。经检测，成品中含益生菌总数达1. 5X 101°个/克。4 8°C存放18个月，含益生 菌活菌总数为3. IX IO8个/克。实施例20益生菌膳食补充剂胶囊的制备配方婴儿双歧杆菌微胶囊(B. infantis) Iwt %、干酪乳杆菌微胶囊 (L. casei) Iwt %、嗜热链球菌(S. thermophilus) Iwt %、两歧双歧杆菌(B. bifidum) Iwt
保加利亚乳杆菌(L. bulgaricus) Iwt%、变性淀粉95wt%。经检测，成品中含益生菌总数达1. 2X 101°个/克。4 8°C存放18个月，含益生 菌活菌总数为1.9X109个/克。实施例21益生菌膳食补充剂散剂的制备
配方婴儿双歧杆菌粉(B. infantis)lwt%、干酪乳杆菌粉(L. casei)lwt%, 嗜热链球菌粉(S. thermophilus) Iwt %、嗜酸乳杆菌粉(L. acidophilus) Iwt %、植物乳 杆菌粉(L. ρlantarum) Iwt %、两歧双歧杆菌粉(B. bifidum) Iwt %、保加利亚乳杆菌粉 (L. bulgaricus) Iwt%、短双歧杆菌粉(B. breve) Iwt%、多孔淀粉 92wt%。经检测，成品中含益生菌总数达1. 3X 101°个/克。4 8°C存放18个月，含益生 菌活菌总数为8. IX IO8个/克。实施例22益生菌膳食补充剂散剂的制备配料干酪乳杆菌微胶囊(L. casei) Iwt %、嗜热链球菌微胶囊 (S. thermophilus) Iwt %、嗜酸乳杆菌微胶囊(L. acidophilus) Iwt %、鼠李糖乳杆菌微胶 囊(L. rhamnosus) Iwt %、两歧双歧杆菌微胶囊(B. bifidum) Iwt%、保加利亚乳杆菌微胶囊 (L. bulgaricus) Iwt%、短双歧杆菌微胶囊(B. breve) Iwt%、玉米淀粉 93wt%。经检测，成品中含益生菌总数达1. 3X IO10个/克。4 8°C存放18个月，含益生 菌活菌总数为3. 5X IO9个/克。实施例23益生菌膳食补充剂颗粒剂的制备配方婴儿双歧杆菌粉(B. infantis) Iwt %、干酪乳杆菌粉(L. casei) Iwt%、嗜热 链球菌粉(S. thermophilus) Iwt%、两歧双歧杆菌粉(B. bifidum) Iwt%、保加利亚乳杆菌 粉(L. bulgaricus) lwt%、短双歧杆菌粉(B. breve) lwt%、葡萄糖 94wt%。经检测，成品中含益生菌总数达2. 3X 101°个/克。4 8°C存放18个月，含益生 菌活菌总数为7. 6X IO8个/克。制作时，先将上述配方中的辅料造粒，再将婴儿双歧杆菌粉(B. infantis)、干酪乳 杆菌粉(L. casei)、嗜热链球菌粉(S. thermophilus)、两歧双歧杆菌粉(B. bifidum)、保加 利亚乳杆菌粉(L. bulgaricus)、短双歧杆菌粉(B. breve)混入，并混和均勻，备用；最后经 检验后包装成成品。实施例M益生菌膳食补充剂颗粒剂的制备配料婴儿双歧杆菌微胶囊(B. infantis) Iwt %、嗜热链球菌微胶囊 (S. thermophilus) Iwt %、嗜酸乳杆菌微胶囊(L. acidophilus) Iwt %、鼠李糖乳杆菌微 胶囊(L. rhamnosus) Iwt %、植物乳杆菌微胶囊(L. plantarum) Iwt %、短双歧杆菌微胶囊 (B. breve) Iwt %、乳糖 94wt %。经检测，成品中含益生菌总数达2. OX IOltl个/克。4 8°C存放18个月，含益生 菌活菌总数为4. 3X IO9个/克。制作时，先将上述配方中的辅料造粒，再将婴儿双歧杆菌微胶囊(B. infantis)、嗜 热链球菌微胶囊(S. thermophilus)、嗜酸乳杆菌微胶囊(L. acidophilus)、鼠李糖乳杆菌 微胶囊(L. rhamnosus)、植物乳杆菌微胶囊(L. plantarum)、短双歧杆菌微胶囊(B. breve) 混入，并混和均勻，备用；最后经检验后包装成成品。实施例25益生菌膳食补充剂片剂的制备
配方婴儿双歧杆菌粉(B. infantis)lwt%、干酪乳杆菌粉(L. casei)lwt%, 嗜热链球菌粉(S. thermophilus) Iwt %、嗜酸乳杆菌粉(L. acidophilus) Iwt %、鼠 李糖乳杆菌粉(L. rhamnosus) Iwt %、植物乳杆菌粉(L. ρlantarum) Iwt %、两歧双歧 杆菌粉(B. bifidum) Iwt %、保加利亚乳杆菌粉(L. bulgaricus) Iwt %、短双歧杆菌粉 (B. breve) Iwt %、脱脂奶粉 9 Iwt %。经检测，成品中含益生菌总数达2. 4X1010个/克。4 8°C存放18个月，含益生 菌活菌总数为5. 6X IO8个/克。制作时，先将上述配方中的辅料造粒，再将婴儿双歧杆菌粉(B. infantis)、干酪 乳杆菌粉(L. casei)、嗜热链球菌粉(S. thermophilus)、嗜酸乳杆菌粉(L. acidophilus)、 鼠李糖乳杆菌粉(L. rhamnosus)、植物乳杆菌粉(L. plantarum)、两歧双歧杆菌粉 (B. bifidum)、保加利亚乳杆菌粉(L. bulgaricus)、短双歧杆菌粉(B. breve)混入，并混和 均勻，备用；最后经检验后压片，包装成成品。实施例沈益生菌膳食补充剂片剂的制备配料婴儿双歧杆菌微胶囊(B. infantis) Iwt %、干酪乳杆菌微胶囊 (L. casei) Iwt %、嗜热链球菌微胶囊(S. thermophilus) Iwt %、嗜酸乳杆菌微胶囊 (L. acidophilus) Iwt %、植物乳杆菌微胶囊(L. plantarum) Iwt %、两歧双歧杆菌微胶囊 (B. bifidum) Iwt %、保加利亚乳杆菌微胶囊(L. bulgaricus) Iwt %、短双歧杆菌微胶囊 (B. breve) Iwt %、水溶性膳食纤维92wt%。经检测，成品中含益生菌总数达1. 9XlOltl个/克。4 8°C存放18个月，含益生 菌活菌总数为2. IX IO9个/克。制作时，先将上述配方中的辅料造粒，再将婴儿双歧杆菌微胶囊(B. infantis), 干酪乳杆菌微胶囊(L. casei)、嗜热链球菌微胶囊(S. thermophilus)、嗜酸乳杆菌微胶囊 (L. acidophilus)、植物乳杆菌微胶囊(L. plantarum)、两歧双歧杆菌微胶囊(B. bifidum)、 保加利亚乳杆菌微胶囊(L. bulgaricus)、短双歧杆菌微胶囊(B. breve)混入，并混和均勻， 备用；最后经检验后压片，包装成成品。
权利要求
1.适合儿童服用的益生菌膳食补充剂，其特征在于，所述益生菌膳食补充剂中的益生 菌总含量彡IO9个/克。
2.如权利要求1所述的益生菌膳食补充剂，其特征在于，所述益生菌为婴儿双歧杆 菌(B. infantis)、干酪乳杆菌(L. casei)、嗜热链球菌(S. thermophilus)、嗜酸乳杆菌 (L. acidophilus)、鼠李糖乳杆菌(Lrhamnosus)、植物乳杆菌(L. ρlantarum)、两歧双歧杆 菌(B. bifidum)、保加利亚乳杆菌(L. bulgaricus)、短双歧杆菌(B. breve)等中的一种或其 两种以上的混合。
3.如权利要求1所述的益生菌膳食补充剂，其特征在于，所述适合儿童服用的益生菌 膳食补充剂还包括适合儿童服用的辅料，所述辅料为麦芽糊精、变性淀粉、多孔淀粉、玉米 淀粉、葡萄糖、乳糖、脱脂奶粉、水溶性膳食纤维等中的一种或其两种以上的混合。
4.如权利要求1所述的益生菌膳食补充剂，其特征在于，所述益生菌膳食补充剂的含 水量< 5%。
5.如权利要求1所述的益生菌膳食补充剂，其特征在于，所述益生菌膳食补充剂为益 生菌菌粉或益生菌微胶囊与辅料混合而成。
6.如权利要求1所述的益生菌膳食补充剂，其特征在于，所述益生菌膳食补充剂的剂 型为胶囊剂。
7.如权利要求1所述的益生菌膳食补充剂，其特征在于，所述益生菌膳食补充剂的剂 型为散剂。
8.如权利要求1所述的益生菌膳食补充剂，其特征在于，所述益生菌膳食补充剂的剂 型为颗粒剂。
9.如权利要求1所述的益生菌膳食补充剂，其特征在于，所述益生菌膳食补充剂的剂 型为片剂。
10.一种权利要求1所述的适合儿童服用的益生菌膳食补充剂的制备方法，其特征在 于，包括如下步骤1)、取生产用益生菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C士 1.0°C培养36 48h ；将 活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平板上的单菌落 用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放4°C冰箱冷藏保 存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1.0°C培养36-4 ;按2% 的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C培养36-4 ，得 生产用一级益生菌种子。2)、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度36 40°C，将步骤1)制备的一级益生菌种子接种于MRS培养基上，经控制pH 5. 2-5. 5并补料进 行高密度恒温培养12-36小时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于4X IO8个，发 酵液的PH值< 5. 0，OD600nm值1. 5以上。3)、采用离心或膜过滤的方法收集菌泥，将冷冻保护剂与收集的菌泥乳化混勻得菌泥 乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目 的筛网获得益生菌菌粉；所述冻干保护剂包括重量按照菌泥重量百分比计重量为20% 30%的脱脂奶粉、重量为10% 20%的乳糖、重量为0. 01 % 1. 0%的维生素C钠、重量为 10% 20%的淀粉、重量为0. 5% 2%的无机盐。
11.如权利要求10所述的适合儿童服用的益生菌膳食补充剂的制备方法，其特征 在于，所述益生菌为婴儿双歧杆菌(B. infantis)、干酪乳杆菌(L. casei)、嗜热链球菌 (S. thermophilus)、嗜酸乳杆菌(L. acidophilus)、鼠李糖乳杆菌(Lrhamnosus)、植物乳杆 菌(L. ρlantarum)、两歧双歧杆菌(B. bifidum)、保加利亚乳杆菌(L. bulgaricus)或短双歧 杆菌(B. breve)。
12.—种权利要求1所述的适合儿童服用的益生菌膳食补充剂的制备方法，其特征在 于，包括如下步骤1)、取生产用益生菌菌种，用液体MRS培养基进行活化，37°C士 1.0°C培养36 48h ；将 活化好的菌液用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7 ；挑选平板上的单菌落 用固体MRS培养基进行划线，37°C 士 1. 0°C培养48-7池，培养好后转接，或放4°C冰箱冷藏保 存备用。挑选斜面菌种1环接入液体MRS培养基试管中37°C 士 1.0°C培养36-4 ;按2% 的接种量将上述液体培养物接种至500ml液体MRS培养基中37°C 士 1. 0°C培养36-4 ，得 生产用一级益生菌种子。2)、配制MRS培养基，在121°C 132°C灭菌10 15分钟，然后降温至接种温度36 40°C，将步骤1制备的一级益生菌种子接种于MRS培养基上，经控制pH 5. 2-5. 5并补料后 进行高密度恒温培养12-36小时，获得发酵液，每毫升发酵液中含有活菌数大于4X IO8个， 发酵液的PH值< 5. 0，OD600nm值1. 5以上。3)、采用离心或膜过滤的方法收集菌泥，将冷冻保护剂与收集的菌泥乳化混勻得菌泥 乳化料，菌泥乳化料在-40°C以下抽真空冷却制成冻干菌饼，经过粉碎处理、过20 60目 的筛网获得益生菌菌粉；所述冻干保护剂包括重量按照菌泥重量百分比计重量为20% 30%的脱脂奶粉、重量为10% 20%的乳糖、重量为0. 01% 1. 0%的维生素C钠、重量为 10% 20%的淀粉、重量为0. 5% 2%的无机盐；4)、将益生菌菌粉混加微胶囊囊材经过空气悬浮处理制成益生菌微胶囊。
13.如权利要求12所述的适合儿童服用的益生菌膳食补充剂的制备方法，其特征在 于，所述微胶囊囊材包括重量按照菌泥重量百分比计重量为10% 15%的果胶、重量为 10% 15%的明胶、重量为20% 30%的油脂。
14.如权利要求12所述的适合儿童服用的益生菌膳食补充剂的制备方法，其特征 在于，所述益生菌为婴儿双歧杆菌(B. infantis)、干酪乳杆菌(L. casei)、嗜热链球菌 (S. thermophilus)、嗜酸乳杆菌(L. acidophilus)、鼠李糖乳杆菌(Lrhamnosus)、植物乳杆 菌(L. ρ lantarum)、两歧双歧杆菌(B. bifidum)、保加利亚乳杆菌(L. bulgaricus)或短双歧 杆菌(B. breve)。
15.权利要求1所述的适合儿童服用的益生菌膳食补充剂在制备增强免疫功能剂方面 的应用。
16.权利要求1所述的适合儿童服用的益生菌膳食补充剂在制备助消化功能剂方面的应用。
17.权利要求1所述的适合儿童服用的益生菌膳食补充剂在制备减轻痢疾症状功能剂 方面的应用。
全文摘要
本发明公开了一种益生菌膳食补充剂，该补充剂中的益生菌总含量≥109个/克(生产日)。本发明还公开了该补充剂的制备方法，制备成益生菌菌粉或益生菌微胶囊颗粒。本发明益生菌菌粉或益生菌微胶囊颗粒在混合器内混合均匀，再灌装成胶囊或散剂，或造粒做成颗粒剂，或造粒压片制成片剂使用。本发明的益生菌膳食补充剂可以用来制备增强免疫功能剂、助消化功能剂、减轻痢疾症状功能剂。
文档编号A23L1/30GK102132883SQ20111005034
公开日2011年7月27日 申请日期2011年3月2日 优先权日2011年3月2日
发明者刘帅, 宋士良, 宋锦安, 闫屹泓 申请人:润盈生物工程(上海)有限公司