包含神经保护膳食寡糖的营养组合物的制作方法
【专利说明】包含神经保护膳食寡糖的营养组合物
[0001] 相关申请的交叉引用 本申请要求2012年12月18日提交的第61/738, 492号美国临时申请的优先权和任何 权益，其整体内容以它的整体通过引用并入。
[0002] 领域 本公开涉及用于向需要其的个体提供神经保护作用的营养组合物。更特别地，营养组 合物包含至少一种选自乳酰-N-新四糖和2' -岩藻糖基乳糖的人乳寡糖。
[0003] 背景 缺氧缺血性脑损伤（HI-BI)是起因于缺氧、缺血和/或细胞毒的大脑的功能和分子损 伤。尽管该疾病状态是婴儿死亡和残疾的最常见原因之一，但它影响所有年龄组。在婴儿 中，HI-BI常与严重早产、严重肺或心脏疾病、严重感染（特别是脑膜炎或败血症）、大脑或 颅骨外伤、大脑的先天畸形或低血压有关。幸存者常面临严重的沟通和喂养障碍以及全面 运动问题。缺氧缺血性脑损伤还是成人发病和死亡的重要原因，并且常与其他致病因素如： 心搏停止、呼吸停止、溺水、上吊（near-hanging)和其他形式的不完全窒息有关。此外，来 自HI-BI的脑损伤可能由于非出血性中风发生，尽管作用可能更局部化。
[0004] 简述 营养组合物用于向需要其的个体提供神经保护作用，其中营养组合物包含至少一种选 自乳酰-N-新四糖和2' -岩藻糖基乳糖的人乳寡糖。
[0005] 详述 定义 术语"蒸煮包装"和"蒸煮灭菌"在本文可交换地使用，并且除非另外规定，是指如下常 用操作：使用营养液体填充容器，最通常地金属罐或其他类似包装，然后使液体填充的包装 进行必要的热灭菌步骤以形成经灭菌、蒸煮包装的营养液产品。
[0006] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"无菌包装"是指不依靠上述蒸煮包装步骤 来制造包装产品，其中营养液和包装在填充之前分别进行灭菌，然后在灭菌或无菌处理条 件下组合以形成经灭菌、无菌包装的营养液产品。
[0007] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"脂肪"和"油"可互换用于指来源于植物或 动物或由植物或动物加工的脂质物质。这些术语也包括合成脂质物质，只要这些合成物质 适于口服给予人类。
[0008] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"人乳寡糖"或"HM0" 一般是指存在于人母 乳中的许多复杂碳水化合物，其可呈酸性或中性形式，以及是指其前体。示例性非限制性 人乳寡糖包括3' -唾液酸乳糖（3SL)、6' -唾液酸乳糖（6SL)、乳酰-N-新四糖（LNnT)、乳 酰-N-四糖（LNT)、二唾液酸化乳酰-N-四糖（DSLNT)、3' -岩藻糖基乳糖（3FL)和3' -唾液 酸乳糖（3SL)以及2' -岩藻糖基乳糖（2FL)。
[0009] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"贮存稳定"是指营养产品，其经包装然后在 18-24°C下储存至少3个月（包括约6个月至约24个月，并且也包括约12个月至约18个 月）后保持商业稳定。
[0010] 如本文中所使用，术语"营养制剂"或"营养组合物"可互换使用且除非另外规定， 是指合成配方产品，包括营养液、营养粉、营养固体、营养半固体、营养半液体、营养补充剂 和如本领域中已知的任何其他营养食品。营养粉可重构形成营养液，其均适于人类口服食 用。术语"营养制剂"或"营养组合物"不包括人母乳。
[0011] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"营养液"是指呈即饮型液体形式、浓缩形式 的营养产品，和通过在使用之前重构本文所述的营养粉所制得的营养液。
[0012] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"营养粉"是指呈可流动或可圉取形式的营 养产品，其可在食用之前用水或另一水性液体重构且包括喷雾干燥和干混/干掺的粉末。
[0013] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"营养半固体"是指性质（如刚性）介于固 体与液体之间的营养产品。一些半固体实例包括布丁、明胶和面团。
[0014] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"营养半液体"是指性质（如流动性质）介 于液体与固体之间的营养产品。一些半液体实例包括奶昔（thickshakes)和液体凝胶。
[0015] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"婴儿"或"足月儿"是指12个月或12个月 以下的人。如本文中所使用，术语"早产儿"是指在妊娠36周前出生的人。
[0016]除非另外规定，如本文中所使用，术语"幼儿"是指大于一岁至高至三岁的人。
[0017] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"儿童"是指大于三岁至高至十二岁的人。
[0018] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"新生儿"是指自出生至高至四周龄的人。
[0019] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"婴儿配方产品"或"合成婴儿配方产品"可 互换使用且是指适于婴儿食用的液体、固体、半固体和半液体人乳替代物或取代物。合成配 方产品包括具有半纯化或纯化来源的组分。除非另外规定，如本文中所使用，术语"半纯化" 或"纯化"是指已通过纯化天然材料或通过合成制备的物质。术语"婴儿配方产品"或"合 成婴儿配方产品"不包括人母乳。
[0020] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"合成小儿配方产品"是指适于至多36个月 龄（3岁）的婴儿或幼儿食用的液体、固体、半固体和半液体人乳替代物或取代物。合成配 方产品包括具有半纯化或纯化来源的组分。除非另外规定，如本文中所使用，术语"半纯化" 或"纯化"是指已通过纯化天然材料或通过合成制备的物质。术语"合成小儿营养配方产 品"不包括人母乳。
[0021] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"合成儿童配方产品"是指适合至多12岁的 儿童食用的液体、固体、半固体和半液体人乳替代物或取代物。合成配方产品包括具有半纯 化或纯化来源的组分。除非另外规定，如本文中所使用，术语"半纯化"或"纯化"是指已通 过纯化天然材料或通过合成制备的物质。术语"合成儿童营养配方产品"不包括人母乳。
[0022] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"早产儿配方产品"是指适于早产儿食用的 液体和固体营养产品。
[0023] 除非另外规定，如本文中所使用，术语"人乳强化剂"是指适于与母乳或早产儿配 方产品或婴儿配方产品混合以供早产儿或足月儿食用的液体和固体营养产品。
[0024] 除非另外规定，如本文中所使用，所有百分数、份数和比例均以总组合物的重量 计。除非另外规定，所有此类重量在其关于所列成分时是指基于活性物水平且因此不包括 可包括于市售物质中的溶剂或副产物。
[0025] 如本文中所使用，数值范围意图包括该范围内的每一数目和数目的子集，无论是 否特定地公开。此外，这些数值范围应视为对针对该范围内的任何数目或数目的子集的主 张提供支持。例如，1至10的公开应视为支持2至8、3至7、5至6、1至9、3. 6至4. 6、3. 5 至9. 9等范围。
[0026] 除非另外规定或所提及的上下文相反地清楚暗示，所有对本公开单数特征或限制 的提及均应包括相应复数特征或限制，反之亦然。
[0027] 除非另外规定或提及组合的上下文相反地清楚暗示，如本文中所使用，方法或过 程步骤的所有组合均可以任何顺序进行。
[0028] 认为一氧化氮（N0)和兴奋性氨基酸有助于HI-BI，因此一氧化氮合酶（N0S)抑制 剂和N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA)谷氨酸受体拮抗剂可提供保护对抗形成该疾病状态。已 证实对HI-BI提供神经保护的化合物的一个实例为精氨酸分解代谢物胍基丁胺。胍基丁胺 由于它对大脑受体的亲合力已被确认为潜在的神经递质或神经调节物，并且已证实对谷氨 酸受体的NMDA子类具有适当亲合力。此外，已证实该化合物抑制一氧化氮产生并且抑制 N0S的所有亚型。
[0029] 尽管支持胍基丁胺的神经保护作用的大多数证据涉及直接灌注胍基丁胺进入 大脑中，但其他研宄表明在肠中产生的胍基丁胺还可在大脑中给予神经保护作用。例 如，当Piletz(AnnNYAcad.Sci. 2003; 1009:64-74)检测小鼠和非人灵长类中的 大脑胍基丁胺浓度时，他们发现大脑胍基丁胺浓度的明显增加，与在50和300mg/kg 下的外周注射浓度一致，结果表明胍基丁胺穿过血-脑屏障。此外，Haenisch(Am.J. Physiol.Gastrointest.LiverPhysiol. 2008; 295(5) :G1104_10)发现属于拟杆菌 门（Bacteroidetes)、厚壁菌门（Firmicutes)、放线菌门（Actinobacteria)和变形菌门 (Proteobacteriaphyla)的细菌在大肠中产生大量的胍基丁胺。Molderings(AnnNY Acad.Sci. 2003; 1009:75-81)注意到在几种肠肿瘤细胞系中存在能量依赖性胍基丁 胺-运输机制，该观察导致Molderings(AnnNYAcad.Sci. 2003; 1009:44-51)推断大 肠中的胍基丁胺可能表示使用它的组织的胍基丁胺的重要来源。
[0030] 已经发现，可通过供给特定的人乳寡糖（HM0)使用已经存在的肠道菌群在人肠 道中产生胍基丁胺。如在表1和2中显示的并且如实施例51中的描述进行的，从母乳喂 养的婴儿（BF)或配方产品喂养的婴儿（FF)采集的排泄物样本的厌氧发酵培养基，其用乳 酰-N-新四糖（LNnT)或者2'-岩藻糖基乳糖（2'FL)HMOs孵育，显示相对于空白，胍基丁 胺的显著增加。该体外研宄显示食用选择的HM〇s通过人自身的肠道菌群在体内产生胍基 丁胺。
[0031] 表1:母乳喂养的婴儿中的胍基丁胺增加
ap彡0.05且q〈 0.10,与空白相比。
[0032] 表2 :配方产品喂养的婴儿中的胍基丁胺增加
ap彡0.05且q〈 0.10,与空白相比。
[0033] 营养组合物用于向需要其的个体提供神经保护作用，其中营养组合物包含至少一 种选自乳酰-N-新四糖和2' _岩藻糖基乳糖的人乳寡糖。不受特殊理论束缚，认为供给个 体包含至少一种选自乳酰-N-新四糖和2' -岩藻糖基乳糖的人乳寡糖的营养组合物导致肠 道菌群消耗这些化合物并且产生胍基丁胺的大量增加。胍基丁胺通过个体的肠道吸收进入 他们的血流，然后穿过血_脑屏障。然后，胍基丁胺抑制一氧化氮产生并且抑制N0S的所有 亚型，这将降低HI-BI的可能性。或者，可能不需要胍基丁胺穿过血-脑屏障以具有期望作 用。
[0034] 需要神经保护作用的个体是处于HI-BI风险的个体。因此，需要神经保护作用 的个体可为严重早产的婴儿，或患有严重肺或心脏疾病、严重感染（特别是脑膜炎或败血 症）、大脑或颅骨外伤、大脑的先天畸形或低血压。个体还可为经历心搏停止、呼吸停止、溺 水、上吊（near-hanging)、其他形式的不完全窒息或非出血性中风的成人。
[0035] 可另外单独地或以组合形式包含在用于方法的营养组合物中的膳食寡糖的具体 非限制性实例包括：半乳寡