专利名称：微波耦合酶法制备花生短肽的方法
技术领域：
本发明属于花生蛋白加工技术领域，尤其是涉及采用微波耦合酶法制备花生短肽的方法。
背景技术：
我国是世界上最大的花生生产、消费和出口国，55%以上的花生用于榨油，榨油后饼粕并未很好地利用，只能作为廉价的饲料和肥料。花生蛋白是一种很好的植物蛋白资源， 花生蛋白的营养价值较高，其生物价(BV)为58，蛋白质有效价(PER)为1. 7，比面粉和玉米高，它对维护人体健康和幼儿发育具有重要作用。花生蛋白的功能性与大豆蛋白接近，却比大豆蛋白更易吸收。花生蛋白的不消化糖、棉子糖和水苏糖含量只相当于大豆蛋白的1/7，不会产生食用大豆蛋白后常出现的腹胀、嗝气反应，消化系数达90%。在我国动物性蛋白资源严重不足而难以满足人们需要的情况下，开展对花生蛋白的研究，开发和利用这一巨大的蛋白质资源，对于改善人们的膳食结构具有极其重要的意义。但是，花生蛋白溶解性很低，花生蛋白中仅约有10%清蛋白能够溶解入水溶液中。花生蛋白活性肽是有3-6个氨基酸组成的，分子量在130-5000DaltOn，主要在 5002000Dalton间呈正态分布的低聚肽，其呈粉末状，无结块现象，无杂质，无异味，且有花生原有的淡淡的清香气味。具有良好的水溶性，持水性，能在PH值为2-10的条件下完全溶解。花生蛋白活性肽能与其他食品配料完全融合，并保持各自的物化营养特性。花生蛋白活性肽氨基酸组成均衡，全面，含人体必需的8种氨基酸，特别是谷氨酸和天门冬氨酸的含量较高，对促进人体脑细胞发育和增加记忆力都有良好的作用。花生氨基酸与人体氨基酸的组成非常相近，极易被人体吸收利用，而且不含胆固醇，具有易于消化吸收、恢复体力、增强免疫力、降低血压、促进脂肪代谢、保健养生等功效。目前，蛋白水解制备短肽的工艺中，酶解时间一般在360-960min，短肽得率较低， 体系水解度很低。因此，如何短时间获得高水解度高得率的短肽成为生产工艺中需要解决的一大难题。
发明内容
本发明所要解决的问题就是提供一种快速制备短肽的方法，以克服现有条件下， 花生短肽制备成本高，得率低，纯度低等现象。本发明采用以下技术方案来实现微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于制备过程包括以下步骤按花生分离蛋白与蒸馏水质量比1 10溶解，在锥形瓶中搅拌均勻；将锥形瓶置于第一恒温水浴锅中一段时间，冷却至室温；用移液枪，一滴滴的加入NaOH溶液调节PH值；加入7500u/g 木瓜蛋白酶，置于微波萃取器中微波处理；处理结束后，置于第二恒温水浴锅中灭酶一段时间，冷却至室温；利用离心机进行离心处理，取上清液；在旋转蒸发仪中恒温条件下蒸发一段时间，最后利用低温冷冻干燥机在低温条件下冷冻干燥一段时间得到花生短肽制品。
上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述第一恒温水浴锅中的温度为90°C ；水浴时间为20分钟。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述移液枪的容量为 200微升。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述NaOH溶液的浓度为1摩尔/升。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述PH值为 6. 0-8. 0 ；当PH值为7. 2时花生短肽的得率较高。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述微波萃取器中微波处理时的微波功率为400-600W，处理温度40-60°C，处理时间8_10mm。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述二恒温水浴锅的温度为100°c，灭酶时间为5min。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述离心处理的离心机转速为3500r/min，离心时间为lOmin。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述旋转蒸发仪中的温度为50°C，蒸发时间为他。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述低温冷冻干燥机中的温度为-50°C，冷冻干燥时间为12h。本发明具有以下有益效果花生短肽制备成本低，得率高，纯度高，制备方法简单。
具体实施例方式以下结合实施例对本发明作详细描述。实施例1微波耦合酶法制备花生短肽的方法，将10克花生分离蛋白溶解入100克蒸馏水中，在锥形瓶中搅拌均勻，将锥形瓶置于水浴锅中，90°C恒温条件下水浴20分钟，冷却至室温，用200微升的移液枪，一滴滴的加入1摩尔/升的NaOH调节至PH值为7. 2。加入 75000u/g的木瓜蛋白酶，置于微波萃取器中微波处理，微波功率为600W，处理温度50°C，处理时间lOmin。处理结束后，置于100°C的水浴锅中灭酶5min，冷却至室温。利用离心机离心，转速3500r/min，离心lOmin，取上清液。在旋转蒸发仪中50°C条件下蒸发他，最后利用低温冷冻干燥机在_50°C条件下冷冻干燥1 得到花生短肽制品。在此条件下短肽得率为 62. 3%，水解度为 26. 21%。实施例2微波耦合酶法制备花生短肽的方法，将5克花生分离蛋白溶解入50克蒸馏水中， 在锥形瓶中搅拌均勻，将锥形瓶置于水浴锅中，90°C恒温条件下水浴20分钟，冷却至室温， 用200微升的移液枪，一滴滴的加入1摩尔/升的NaOH调节至PH值为6. O。加入75000u/ g的木瓜蛋白酶，置于微波萃取器中微波处理，微波功率为400W，处理温度40°C，处理时间 8min。处理结束后，置于100°C的水浴锅中灭酶5min，冷却至室温。利用离心机离心，转速 3500r/min，离心lOmin，取上清液。在旋转蒸发仪中50°C条件下蒸发他，最后利用低温冷冻干燥机在_50°C条件下冷冻干燥1 得到花生短肽制品。在此条件下短肽得率为58. 7%,水解度为22.3%。实施例3微波耦合酶法制备花生短肽的方法，将5克花生分离蛋白溶解入50克蒸馏水中， 在锥形瓶中搅拌均勻，将锥形瓶置于水浴锅中，90°C恒温条件下水浴20分钟，冷却至室温， 用200微升的移液枪，一滴滴的加入1摩尔/升的NaOH调节至PH值为8. 0。加入75000u/ g的木瓜蛋白酶，置于微波萃取器中微波处理，微波功率为500W，处理温度60°C，处理时间 9min。处理结束后，置于100°C的水浴锅中灭酶5min，冷却至室温。利用离心机离心，转速 3500r/min，离心lOmin，取上清液。在旋转蒸发仪中50°C条件下蒸发他，最后利用低温冷冻干燥机在_50°C条件下冷冻干燥1 得到花生短肽制品。在此条件下短肽得率为60. 5%， 水解度为24. 6% 0经过发明人的反复试验证明，采用以下方案来实施都可以得到本发明所需的花生短肽微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于制备过程包括以下步骤按花生分离蛋白与蒸馏水质量比1 10溶解，在锥形瓶中搅拌均勻；将锥形瓶置于第一恒温水浴锅中一段时间，冷却至室温；用移液枪，一滴滴的加入NaOH溶液调节PH值；加入7500u/g 木瓜蛋白酶，置于微波萃取器中微波处理；处理结束后，置于第二恒温水浴锅中灭酶一段时间，冷却至室温；利用离心机进行离心处理，取上清液；在旋转蒸发仪中恒温条件下蒸发一段时间，最后利用低温冷冻干燥机在低温条件下冷冻干燥一段时间得到花生短肽制品。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述第一恒温水浴锅中的温度为90°C ；水浴时间为20分钟。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述移液枪的容量为 200微升。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述NaOH溶液的浓度为1摩尔/升。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述PH值为 6. 0-8. O ；当PH值为7. 2时花生短肽的得率较高。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述微波萃取器中微波处理时的微波功率为400-600W，处理温度40-60°C，处理时间8_10min。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述二恒温水浴锅的温度为100°c，灭酶时间为5min。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述离心处理中的离心机转速为3500r/min，离心时间为lOmin。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述旋转蒸发仪中的温度为50°C，蒸发时间为他。上述所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述低温冷冻干燥机在低温条件为-50°C，冷冻干燥时间为12h。本发明具有以下有益效果花生短肽制备成本低，得率高，纯度高，制备方法简单。本文具体说明了本发明示例性实施实例和目前的优选实施方式，应当理解，本发明的构思可以按其他种种形式实施运用，它们同样落在本发明的保护范围内。
权利要求
1.微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于制备过程包括以下步骤按花生分离蛋白与蒸馏水质量比1 10溶解，在锥形瓶中搅拌均勻；将锥形瓶置于第一恒温水浴锅中一段时间，冷却至室温；用移液枪，一滴滴的加入NaOH溶液调节PH值；加入7500u/g木瓜蛋白酶，置于微波萃取器中微波处理；处理结束后，置于第二恒温水浴锅中灭酶一段时间， 冷却至室温；利用离心机进行离心处理，取上清液；在旋转蒸发仪中恒温条件下蒸发一段时间，最后利用低温冷冻干燥机在低温条件下冷冻干燥一段时间得到花生短肽制品。
2.如权利要求1所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述第一恒温水浴锅中的温度为90°C ；水浴时间为20分钟。
3.如权利要求1所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述移液枪的容量为200微升。
4.如权利要求1所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述NaOH溶液的浓度为1摩尔/升。
5.如权利要求1所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述PH值为 6. 0-8. O0
6.如权利要求1所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述微波萃取器中微波处理的微波功率为400-600W，处理温度40-60°C，处理时间8_10min。
7.如权利要求1所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述第二恒温水浴锅的温度为100°c，灭酶时间为5min。
8.如权利要求1所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述离心处理中的离心机转速为3500r/min，离心时间为lOmin。
9.如权利要求1所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述旋转蒸发仪中的温度为50°C，蒸发时间为他。
10.如权利要求1所述的微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于所述低温冷冻干燥机中低温条件为-50°C，冷冻干燥时间为12h。
全文摘要
本发明属于花生蛋白加工技术领域，尤其是涉及采用微波耦合酶法制备花生短肽的方法，其特征在于制备过程包括以下步骤按花生分离蛋白与蒸馏水质量比1∶10溶解，在锥形瓶中搅拌均匀；将锥形瓶置于第一恒温水浴锅中一段时间，冷却至室温；用移液枪，一滴滴的加入NaOH溶液调节PH值；加入7500u/g木瓜蛋白酶，置于微波萃取器中微波处理；处理结束后，置于第二恒温水浴锅中灭酶一段时间，冷却至室温；利用离心机进行离心处理，取上清液；在旋转蒸发仪中恒温条件下蒸发一段时间，最后利用低温冷冻干燥机在低温条件下冷冻干燥一段时间得到花生短肽制品。本发明具有以下有益效果花生短肽制备成本低，得率高，纯度高，制备方法简单。
文档编号C12P21/06GK102242174SQ201110105810
公开日2011年11月16日 申请日期2011年4月27日 优先权日2011年4月27日
发明者于丽娜, 唐琳, 孙杰, 张会翠, 张初署, 朱凤, 杨庆利, 毕杰, 高俊安 申请人:山东省花生研究所