专利名称：超低IgG新生牛血清生产工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及超低IgG新生牛血清生产工艺。
背景技术：
牛血清是人用生物制品疫苗、动物疫苗产品中重要的原材料之一，关系到人和动物的健康和社会的和谐，所以牛血清产品一直受各国政策的扶持。牛血清主要用于科研院所的中心实验室、人用生物制品疫苗及动物疫苗的生产和研究等领域。随着生物技术的快速发展，牛血清的需求量与日俱增。超低IgG胎牛血清和新生牛血清的生产单位国内没有，所以，该产品不仅市场前景十分广阔，而且填补一项空白，并对国际学术界的影响具有推动作用，其成功必然会带来巨大的经济效益和社会效益。
发明内容
本发明的目的在于提供一种超低IgG新生牛血清生产工艺，主要是利用金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)与亲和层析技术相结合的生产工艺进行分离IgG或其亚型及片段(如Fe,Fab)等。SPA能与人及多种哺乳动物血清IgG分子中的Fe片段结合。SPA除与IgG结合外，还能与血清中少量的IgM和IgA结合。SPA菌对各类免疫球蛋白的吸附率=IgGS90% 98%、IgM为2% 30%、IgA为I. 5% 20%。SPA-S印harose4B亲和层析去除牛血清中r-IgG生产工艺是技术关键。而超低IgG胎牛和新生牛血清的生产工艺(r-IgG<5 10ug/ml)为本发明的创新点。本发明的超低IgG胎牛血清和新生牛血清，是利用亲和层析工艺去除胎牛和新生牛血清中的Y球蛋白，使FBS y球蛋白含量减到IgG ( 5ug/ml水平，而保持生物学活性不变。随着基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术的不断发展，特别是生物医药领域疫苗的快速发展，都是通过细胞培养来实现的。而且细胞是病毒、蛋白的表达载体，细胞质量直接影响蛋白的表达量或病毒的滴度，故筛选、驯化优质细胞是关键。细胞培养的发展，培养基的质量又是关键，而培养基的主要成份中动物血清对细胞的生长繁殖发挥着重要，甚至是难以替代的作用。在动物血清的应用中牛血清又是最为广泛的，而牛血清中IgG含量的高低对于细胞的表达和提高抗体的滴度非常重要，所以超低IgG牛血清生产工艺的研究迫在眉睫。本发明主要技术是利用SPA_Sepharose4B的亲和层析法去除牛血清中r球蛋白。主要技术指标是牛血清中免疫球蛋白(r-IgG)含量达到彡5 10ug/ml，而生物活性不变。主要技术经济指标本发明的超低IgG新生牛特别是的生产单位国内没有。所以，其成功必然会带来巨大的经济效益和社会效益。本发明是在比较现有成熟技术基础上，进行优化组合并融合国际先进技术而完善建立的。其适用于规模化生产，填补了国内空白。本发明的超低IgG新生牛血清生产工艺，是通过亲和层析工艺去除胎牛和新生牛血清中的Y球蛋白，使FBS y球蛋白含量减到IgG ( 5ug/ml水平，而保持生物学活性不变；通过金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)与亲和层析技术相结合的生产工艺进行分离IgG或其亚型及片段(如Fe、Fab) ；SPA能与人及多种哺乳动物血清IgG分子中的Fe片段结合；SPA除与IgG结合外，还能与血清中少量的IgM和IgA结合；SPA菌对各类免疫球蛋白的吸附率IgG*90% 98%、IgM* 2% 30%、IgA 为 I. 5% 20% ;SPA_S印harose4B 亲和层析去除牛血清中r-IgG,超低IgG胎牛和新生牛血清的r-IgG彡5 10ug/ml。本发明的社会效益(I)填补国内的空白，打破国外市场的垄断地位该项目国内刚刚起步，创业项目的完成必将填补国内的空白，打破国外同类产品对国内牛血清市场的垄断地位。(2)促进生物制药业的健康发展全面完成后公司生产的牛血清可以广泛应用于国内各生物尖端领域，保证生物制药业和试验的科学性，促进生物制品事业的健康发展和社会的和谐稳定。
(3)促进就业项目完成后，可吸纳生产、研发和销售人员。本发明用的主要原材料是犊牛血和成牛血的下游副产品，废牛血的综合利用将极大促进畜牧业的健康发展，既提高农民的收入，同时又治理环境。
具体实施例方式本发明的超低IgG新生牛血清生产エ艺，是通过亲和层析エ艺去除胎牛和新生牛血清中的Y球蛋白，使FBS y球蛋白含量减到IgG ^ 5ug/ml水平，而保持生物学活性不变；通过金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)与亲和层析技术相结合的生产エ艺进行分离IgG或其亚型及片段(如Fe、Fab) ；SPA能与人及多种哺乳动物血清IgG分子中的Fe片段结合；SPA除与IgG结合外，还能与血清中少量的IgM和IgA结合；SPA菌对各类免疫球蛋白的吸附率IgG 为 90% 98%、IgM 为 2% 30%、IgA 为 I. 5% 20% ；SPA-Sepharose4B 亲和层析去除牛血清中r-IgG,超低IgG胎牛和新生牛血清的r-IgG彡5 10ug/ml。
权利要求
1.一种超低IgG新生牛血清生产エ艺，其特征在于通过亲和层析エ艺去除胎牛和新生牛血清中的Y球蛋白，使FBS y球蛋白含量减到IgG <5ug/ml水平，而保持生物学活性不变；通过金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)与亲和层析技术相结合的生产エ艺进行分离IgG或其亚型及片段(如Fc、Fab) ；SPA能与人及多种哺乳动物血清IgG分子中的Fe片段结合；SPA除与IgG结合外，还能与血清中少量的IgM和IgA结合；SPA菌对各类免疫球蛋白的吸附率IgG 为 90% 98%、IgM 为 2% 30%、IgA 为 I. 5% 20% ；SPA-Sepharose4B 亲和层析去除牛血清中r-IgG,超低IgG胎牛和新生牛血清的r-IgG≤5 10ug/ml。
全文摘要
本发明涉及一种超低IgG新生牛血清生产工艺。通过亲和层析工艺去除胎牛和新生牛血清中的γ球蛋白，使FBS γ球蛋白含量减到IgG≤5ug/ml水平，而保持生物学活性不变；通过金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)与亲和层析技术相结合的生产工艺进行分离IgG或其亚型及片段(如Fc、Fab)；SPA能与人及多种哺乳动物血清IgG分子中的Fc片段结合；SPA除与IgG结合外，还能与血清中少量的IgM和IgA结合；SPA菌对各类免疫球蛋白的吸附率IgG为90％～98％、IgM为2％～30％、IgA为1.5％～20％；SPA-Sepharose4B亲和层析去除牛血清中r-IgG，超低IgG胎牛和新生牛血清的r-IgG≤5～10ug/ml。
文档编号C12N5/00GK102757930SQ201110105789
公开日2012年10月31日 申请日期2011年4月27日 优先权日2011年4月27日
发明者李卓 申请人:长春安贝生物科技有限公司