专利名称：一种检测血液中钾离子含量的试剂及制备方法及含有该试剂的试剂盒的制作方法
技术领域：
本发明属于检测试剂盒领域，尤其是一种检测血液中钾离子含量的试剂及制备方法及含有该试剂的试剂盒。
背景技术：
钾是人体所必需的微量元素，约占人体重的0. 2%。钾元素在维持人体正常生理功能上起非常重要的作用。钾是调节细胞内外渗透压平衡的重要元素；也是维持人体神经系统功能必不可少的元素；钾离子通过进出钾离子通道，对细胞膜的电位平衡，神经信号的传导和肌肉控制，起到很重要的作用。作为氢离子的取代，钾离子在细胞内外的酸碱平衡中也起到关键的作用。另外，钾离子参与了人体内重要的生物化学过程，例如三磷酸腺苷 (ATP)的合成，糖原的合成，某些盐皮质激素如醛固酮的分泌等。钾离子还能通过对端粒 (telomere)结构的调控从而对细胞凋亡和癌症形成产生重大影响。人体内的钾元素以离子形式存在；绝大部分钾离子存在于细胞液和血液中。在血液中钾的正常浓度范围在3. 5至5mEq/L ；而在细胞液中钾的浓度约为140mEq/L。如果血液中的钾离子浓度(血钾)低于正常范围，就会产生一系列诸如腹泻、呕吐、肌肉无力及其心律失常等症状，长期以往则会对肾功能产生极大损害。如果血钾高于正常范围，则有疲劳、 心律不齐和房颤等症状。血钾水平异常的症状没有特异性，所以临床诊断血钾异常必须测定血钾水平。目前血钾的测量属于常规检测，检测手段主要有原子吸收法、离子选择电极法、酶法、荧光比色法等。检测方法的比较见表1。表1现有血钾检测方法的比较
权利要求
1.一种检测血液中钾离子含量的试剂，其特征在于包括核酸分子、血红素和鲁米诺试剂，所述核酸分子为可形成四链体结构的富于鸟苷的寡核苷酸，序列公式为 R-Gn-Nm-Gn-Nm-Gn-Nm-Gn-R ‘，其中 m、η 为整数。
2.根据权利要求1所述的检测血液中钾离子含量的试剂，其特征在于所述核酸分子和血红素以及鲁米诺试剂的摩尔比是1 10 1000。
3.根据权利要求1所述的检测血液中钾离子含量的试剂，其特征在于所述核酸分子如下
4.一种如权利要求1所述的检测血液中钾离子含量的试剂的制备方法，其特征在于 包括如下步骤(1)将聚乙烯醇-苯基乙烯吡啶的水溶胶、核酸分子、血红素、鲁米诺试剂混合均勻后成溶胶状态；(2)将步骤(1)的混合物被紫外照射，苯基乙烯吡啶产生交联，使混合物固化，核酸分子、血红素、鲁米诺试剂被物理固定在凝胶中，形成检测层；所述聚乙烯醇-苯基乙烯吡啶的水溶胶、核酸分子、血红素、鲁米诺试剂的摩尔比是 1 10 1000。
5.根据权利要求4所述的检测血液中钾离子含量的试剂的制备方法，其特征在于在检测层的下层还有制有水凝胶支持层，成分是聚乙二醇和聚酰胺酯的线性聚合物，在检测层的上层制有炭黑保护层。
6.根据权利要求5所述的检测血液中钾离子含量的试剂的制备方法，其特征在于具体的制备步骤如下(1)在50mM的HEPES缓冲溶液pH7. 0中溶解核酸分子以及血红素，将溶液用水浴加热至80°C并在常温下冷却至室温以使核酸的分子结构均一化，在溶液中加入鲁米诺试剂；(2)在塑料薄膜上，用刮刀涂膜机涂上一层D4水凝胶的薄膜并使之自然风干，厚度为 90-110ym ；(3)在10wt%PVA-Sbq溶液中加入步骤(1)制备的溶液并搅拌均勻，(4)在步骤O)的D4水凝胶的薄膜上涂上一层步骤C3)获得溶液，将紫外灯置于膜层的上方25-35分钟，使苯基吡啶乙烯交联并使膜层变干；(5)最后最上层用刮刀涂膜机涂上一层含有10wt%炭黑的D6水凝胶并使膜层自然风干。
7. 一种含有如权利要求1所述检测血液中钾离子含量的试剂的试剂盒。
全文摘要
本发明涉及一种检测血液中钾离子含量的试剂及制备方法及含有该试剂的试剂盒，包括核酸分子、血红素和鲁米诺试剂，所述核酸分子为可形成四链体结构的富于鸟苷的寡核苷酸，序列公式为R-Gn-Nm-Gn-Nm-Gn-Nm-Gn-R′，步骤为(1)将聚乙烯醇-苯基乙烯吡啶的水溶胶、核酸分子、血红素、鲁米诺试剂混合均匀后成溶胶状态；(2)将步骤(1)的混合物被紫外照射，苯基乙烯吡啶产生交联，使混合物固化，核酸分子、血红素、鲁米诺试剂被物理固定在凝胶中，形成检测层。本申请所发明的方法将集成各现有血钾检测方法的优点，具有高灵敏度和高选择性以及操作简单、使用方便和价格低廉的特点。
文档编号C12Q1/34GK102417925SQ20111026329
公开日2012年4月18日 申请日期2011年9月7日 优先权日2011年9月7日
发明者徐维琛, 朱进清, 程志敬, 高玉兰 申请人:天津希恩思生化科技有限公司