专利名称：一种蹄甲肽的提取方法
技术领域：
本发明方法涉及猪蹄甲深加工技术领域，具体涉及一种蹄甲肽的提取方法，是一种以猪蹄甲为原料，通过生物工程技术提取蹄甲肽的方法。
背景技术：
猪蹄甲味咸、平，可以治疗咳嗽喘息、痔疮、白秃、冻疮。猪蹄甲主要含角蛋白、肽类、氨基酸类、酯类、糖类、留体化合物及无机盐等化学成分，一些成分具有明显的药理活性。对猪蹄甲的止血成分分析表明，其无机成分所含9种元素一钙、镁、磷、硼、铁、铜、锰和硅，均无止血作用；非蛋白质有机成分中的留体类、酚类、糖类和氨基酸类物质亦无止血作用；蛋白质成分含胶原蛋白、弹性蛋白和角蛋白，除胶原蛋白外，均与止血作用有关。对猪蹄甲粉酸水解后进行氨基酸及酸性多糖分析证实，猪蹄甲含17种氨基酸，总量为93. 9% ；其中必需氨基酸7种，占总量27. 9% ；非必需氨基酸10种，占总量的66% ；酸性多糖含量以氨基己糖计为0.85%。而蹄甲肽是猪蹄甲提取物，是角蛋白部分水解生成的多肽。猪蹄甲肽有直接兴奋心肌的作用，使血压先略升而后明显下降。以蹄甲肽为原料的产品妇血宁具有促凝血和抗纤溶双重作用，并且可能对凝血和纤溶系统的平衡有调节作用。通过猪蹄甲对溴醋酸抑制巯基酶的影响，以及对巯基封闭剂溶血作用和对冷藏血液中红细胞的影响实验证明，猪蹄甲对红细胞巯基酶、膜巯基蛋白和红细胞本身都有保护作用。研究比较猪蹄甲和穿山甲消痈作用，证明猪蹄甲和穿山甲消痈作用机制与增强白细胞吞噬功能，提高血清S0D(超氧化物岐化酶)活性、消除自由基、降低MDA (丙二醛)含量有关，在消痈作用方面猪蹄甲对穿山甲似有可替代性。且蹄甲肽具有双向调节细胞免疫的作用，其作用显著而持久。蹄甲肽可兴奋子宫，增加子宫收缩的频率和幅度，节律性地兴奋子宫肌影响内膜的血管，使血管呈扩张和收缩的双相变化，从而改善“功血”的子宫内膜血管血流障碍；本品还可调节内分泌，通过促进肾上腺束状带分泌糖皮质激素，抑制纤维蛋白溶解，减少血管通透性，稳定溶酶体膜等作用，从而改善或制止“功血”时出血。同蹄甲多肽相比，蹄甲肽具有更好的疗效，具有更加广阔的市场前景。传统蹄甲多肽的生产方法主要是猪蹄甲清洗、烘干、粉碎、配水、碱提取(两次)、 浓缩、烘干、粉碎。此工艺生产时间长，碱溶液使用量过大，容易破坏药效成分，环境污染严重，所生产的产品分子量大，人体吸收利用率低。总之，目前提取蹄甲多肽的传统工艺存在的问题有碱用量大、环境污染严重、和收率偏低，属于初加工，不能直接利用。
发明内容
本发明要解决的技术问题是针对现有技术中存在的不足，提供一种产品收率高、 便于于工业化生产的蹄甲肽的提取方法。为了为解决上述技术问题，本发明采取如下技术方案1)取健康猪蹄甲用40-45°C水清洗洗净，加蹄甲重量5-8倍水升温至90-95°C蒸煮 1. 5-2h，烘干；
2 )将烘干的猪蹄甲用粉碎机粉碎，过80目筛得蹄甲粉；
3)按蹄甲粉重量的12-16倍配水，升温至90-95°C，蒸煮1.5_2h，再降温至50_55°C，调节pH值至7. 5-8，按蹄甲粉重量的1-2%加入复合蛋白酶，恒温搅拌酶解4-5h，酶解过程中保持体系PH值稳定；
4)将得到的酶解液升温至90-95°C，恒温灭酶10-15min；
5)将酶解液趁热过滤，得上清液；
6)将上清液冷却至50-55°C，按蹄甲粉重量的3-5%加入活性炭脱色、除腥，搅拌 1-1. 5h，过滤除去活性炭，得滤液；
7)将滤液用膜分离装置进行分离，脱盐并浓缩；
8)浓缩液经干燥后，得到产品蹄甲肽。所述的粉碎先用粗碎机粉碎，筛孔径为5mm，再用超微粉碎机粉碎，粉碎后过80目筛。所述的蹄甲肽分子量小于2000道尔顿。所述的干燥为喷雾干燥。与现有技术相比，本发明方法的优点和有益效果如下
1、采用本发明工艺生产出来的蹄甲肽的分子量1000道尔顿以下肽的含量可达到90% 以上，人体吸收率达99%以上，改善了人体吸收难的问题；
2、采用本发明的两次蒸煮工艺，第一次蒸煮即去掉了产品中的异味，又软化了产品中的角质层；第二次蒸煮提高了液体物料的乳化型，有利于与酶的反应，可以缩短酶解时间、 提高产品收率，收率达45%以上；
3、本发明方法不产生任何有毒有害物质，安全，无毒副作用，可广泛用于食品、药品、保健品和生物合成等领域；
4、本发明采用先粗碎后超微粉碎的方法，即改善了猪蹄甲粉碎难的问题，又可以为酶解提供了条件。
具体实施例方式下面通过具体的实施例对本发明方法做进一步的详细说明。实施例1
称取健康猪蹄甲1kg，用41°C水清洗两次、洗净，加5kg水升温至90°C蒸煮2h，用电热烘箱烘干；烘干的猪蹄甲先用粗碎机粉碎，筛孔径为5mm，再用超微粉碎机粉碎，粉碎后过80目筛得蹄甲粉；向蹄甲粉中加入12kg水，升温至90°C，蒸煮2h，再降温至55°C，用食品级氢氧化钠调节PH值至8，加入IOg复合蛋白酶，恒温搅拌酶解5h，酶解过程中用氢氧化钠保持体系PH值稳定；将得到的酶解液升温至90°C，恒温灭酶15min ；将酶解液趁热过滤，得上清液；上清液冷却至55°C，加入30g活性炭脱色、除腥，搅拌lh，过滤除去活性炭，得滤液； 将滤液用膜分离装置进行分离，脱盐并浓缩；浓缩液经喷雾干燥后，得到产品蹄甲肽，蹄甲肽分子量小于2000道尔顿。表1实施例1所得产品的检测报告
权利要求
1.一种蹄甲肽的提取方法，其特征是包括以下步骤1)取健康猪蹄甲用40-45°C水清洗洗净，加蹄甲重量5-8倍水升温至90-95°C蒸煮 1. 5-2h，烘干；2 )将烘干的猪蹄甲用粉碎机粉碎，过80目筛得蹄甲粉；3)按蹄甲粉重量的12-16倍配水，升温至90-95°C，蒸煮1.5_2h，再降温至50_55°C，调节pH值至7. 5-8，按蹄甲粉重量的1-2%加入复合蛋白酶，恒温搅拌酶解4-5h，酶解过程中保持体系PH值稳定；4)将得到的酶解液升温至90-95°C，恒温灭酶10-15min；5)将酶解液趁热过滤，得上清液；6)将上清液冷却至50-55°C，按蹄甲粉重量的3-5%加入活性炭脱色、除腥，搅拌 1-1. 5h，过滤除去活性炭，得滤液；7)将滤液用膜分离装置进行分离，脱盐并浓缩；8)浓缩液经干燥后，得到产品蹄甲肽。
2.如权利要求1所述的蹄甲肽的提取方法，其特征是所述的粉碎先用粗碎机粉碎，筛孔径为5mm，再用超微粉碎机粉碎，粉碎后过80目筛。
3.如权利要求1所述的蹄甲肽的提取方法，其特征是所述的蹄甲肽分子量小于2000道尔顿。
4.如权利要求1所述的蹄甲肽的提取方法，其特征是所述的干燥为喷雾干燥。
全文摘要
本发明公开了一种蹄甲肽的提取方法，该方法采用健康猪蹄甲为原料，经过升温蒸煮、烘干、粉碎机粉碎、蹄甲粉配水、升温蒸煮、酶解、灭酶、活性炭脱色、膜分离，将得到的滤液经干燥后即获蹄甲肽。本发明方法生产成本低、收率高、不产生任何有毒有害物质，而且所得产品安全性高，可广泛用于药品、保健品等领域。
文档编号C12P21/06GK102367466SQ20111031545
公开日2012年3月7日 申请日期2011年10月18日 优先权日2011年10月18日
发明者张晓东, 郑和平 申请人:得利斯集团有限公司