专利名称：一种eb病毒相关胃癌临床病理特征分析方法
技术领域：
本发明涉及一种病理特征分析方法，具体而言，涉及EB病毒相关胃癌临床病理特征分析方法。
背景技术：
胃癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，其死亡率占所有恶性肿瘤的第二位， 每年有876000例新发病例，多数文献认为EB病毒感染胃癌的构成比约为10%，这部分胃癌禾尔为 EB 病毒相关胃癌(Epstein-Barr virus-associated gastric cancinoma, EBVaGC)。 明确EB病毒在胃癌发生、发展中的作用及其临床病理特征。
发明内容
本发明的目的是提供用原位杂交法检测胃癌组织芯片中EB病毒编码的小RNA (EBERs)，分析EB病毒相关胃癌病理形态及患者年龄、性别、淋巴结转移状况等临床特征。为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明通过以下技术方案实现 一种EB病毒相关胃癌临床病理特征分析方法
步骤1、临床资料，收集医院手术切除胃癌标本若干例，标本中位年龄58 68岁，所有标本均经两位病理专家进行组织病理证实，患者术前均未进行放疗和化疗；
步骤2、组织芯片的构建，组织标本经1 7%的甲醛固定、常规石蜡包埋制片，HE染色后，在显微镜下定位、对应找出蜡块上相应部位并做标记，选取无坏死的肿瘤组织，自制 10 X 2 10 X 32的组织阵列，每例组织块取1 3个组织芯，其直径为0. 6 2. 6毫米的蜡块，有定位用的空位；
步骤3、试剂，EBERs即EB病毒编码的小RNA ；
步骤4、原位杂交染色结果判断标准，仅为细胞核着棕褐色为阳性，细胞浆和细胞膜在核分裂时可以有阳性着色，但视为阴性；
步骤5、统计学方法，所有实验均采用统计软件分析，组间差异采用X2检验，以P小于等于0. 1被认为差异有显著性。进一步的，所述步骤1标本中位年龄63岁。进一步的，所述步骤2标本经4%的甲醛固定。进一步的，所述步骤2自制10X 16和10X9的组织阵列。进一步的，所述步骤2的组织阵列为6个蜡块每个蜡块75例X 2点和1个蜡块每个蜡块40例X 2点的组织阵列。进一步的，所述步骤2每例组织块取2个组织芯，其直径为1. 6毫米的蜡块。进一步的，所述步骤5分化程度P小于等于0. 05被认为差异有显著性。进一步的，所述步骤5采用SPSSl 1. 0统计软件分析。本发明的有益效果是
EB病毒独立存在于胃癌及其淋巴结转移癌细胞核中，提示EB病毒和肿瘤细胞同时复制；与非EB病毒感染胃癌相比，EB病毒相关胃癌具有独特的临床病理特征。
具体实施例方式一种EB病毒相关胃癌临床病理特征分析方法
步骤1、临床资料，收集医院手术切除胃癌标本若干例，标本中位年龄58 68岁，所有标本均经两位病理专家进行组织病理证实，患者术前均未进行放疗和化疗；
步骤2、组织芯片的构建，组织标本经1 7%的甲醛固定、常规石蜡包埋制片，HE染色后，在显微镜下定位、对应找出蜡块上相应部位并做标记，选取无坏死的肿瘤组织，自制 10 X 2 10 X 32的组织阵列，每例组织块取1 3个组织芯，其直径为0. 6 2. 6毫米的蜡块，有定位用的空位；
步骤3、试剂，EBERs即EB病毒编码的小RNA ；
步骤4、原位杂交染色结果判断标准，仅为细胞核着棕褐色为阳性，细胞浆和细胞膜在核分裂时可以有阳性着色，但视为阴性；
步骤5、统计学方法，所有实验均采用统计软件分析，组间差异采用X2检验，以P小于等于0. 1被认为差异有显著性。进一步的，所述步骤1标本中位年龄63岁。进一步的，所述步骤2标本经4%的甲醛固定。进一步的，所述步骤2自制IOX 16和10X9的组织阵列。进一步的，所述步骤2的组织阵列为6个蜡块每个蜡块75例X2点和1个蜡块每个蜡块40例X 2点的组织阵列。进一步的，所述步骤2每例组织块取2个组织芯，其直径为1. 6毫米的蜡块。进一步的，所述步骤5分化程度P小于等于0. 05被认为差异有显著性。进一步的，所述步骤5采用SPSSl 1. 0统计软件分析。以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
权利要求
1.一种EB病毒相关胃癌临床病理特征分析方法，其特征在于步骤1、临床资料，收集医院手术切除胃癌标本若干例，标本中位年龄58 68岁，所有标本均经两位病理专家进行组织病理证实，患者术前均未进行放疗和化疗；步骤2、组织芯片的构建，组织标本经1 7%的甲醛固定、常规石蜡包埋制片，HE染色后，在显微镜下定位、对应找出蜡块上相应部位并做标记，选取无坏死的肿瘤组织，自制 10 X 2 10 X 32的组织阵列，每例组织块取1 3个组织芯，其直径为0. 6 2. 6毫米的蜡块，有定位用的空位；步骤3、试剂，EBERs即EB病毒编码的小RNA ；步骤4、原位杂交染色结果判断标准，仅为细胞核着棕褐色为阳性，细胞浆和细胞膜在核分裂时可以有阳性着色，但视为阴性；步骤5、统计学方法，所有实验均采用统计软件分析，组间差异采用X2检验，以P小于等于0. 1被认为差异有显著性。
2.根据权利要求1所述的EB病毒相关胃癌临床病理特征分析方法，其特征在于所述步骤1标本中位年龄63岁。
3.根据权利要求1所述的EB病毒相关胃癌临床病理特征分析方法，其特征在于所述步骤2标本经4%的甲醛固定。
4.根据权利要求1所述的EB病毒相关胃癌临床病理特征分析方法，其特征在于所述步骤2自制IOX 16禾口 10X9的组织阵列。
5.根据权利要求1、4所述的EB病毒相关胃癌临床病理特征分析方法，其特征在于所述步骤2的组织阵列为6个蜡块每个蜡块75例X2点和1个蜡块每个蜡块40例X2点的组织阵列。
6.根据权利要求1所述的EB病毒相关胃癌临床病理特征分析方法，其特征在于所述步骤2每例组织块取2个组织芯，其直径为1. 6毫米的蜡块。
7.根据权利要求1所述的EB病毒相关胃癌临床病理特征分析方法，其特征在于所述步骤5分化程度P小于等于0. 05被认为差异有显著性。
8.根据权利要求1所述的EB病毒相关胃癌临床病理特征分析方法，其特征在于所述步骤5采用SPSSl 1. 0统计软件分析。
全文摘要
本发明公开了一种EB病毒相关胃癌临床病理特征分析方法，临床资料，收集医院手术切除胃癌标本若干例；组织芯片的构建，组织标本经甲醛固定、常规石蜡包埋制片，HE染色后，在显微镜下定位、对应找出蜡块上相应部位并做标记，选取无坏死的肿瘤组织，自制组织阵列；试剂，EBERs即EB病毒编码的小RNA；原位杂交染色结果判断标准，仅为细胞核着棕褐色为阳性，细胞浆和细胞膜在核分裂时可以有阳性着色，但视为阴性；统计学方法，所有实验均采用统计软件分析，组间差异采用χ2检验。本发明提供了用原位杂交法检测胃癌组织芯片中EB病毒编码的小RNA，分析EB病毒相关胃癌病理形态及患者年龄、性别、淋巴结转移状况等临床特征。
文档编号C12Q1/70GK102505046SQ201110321390
公开日2012年6月20日 申请日期2011年10月21日 优先权日2011年10月21日
发明者郭云娣 申请人:苏州卫生职业技术学院