专利名称：以麻类纤维果胶为底物的纺织专用果胶酶酶活力的测定的制作方法
技术领域：
本发明属于果胶酶酶活力的测定领域，特别涉及一种以麻类纤维果胶为底物的纺织专用果胶酶酶活力的测定方法。
背景技术：
果胶是植物细胞壁的组成成分之一，存在于相邻细胞壁间的中胶层中，起着将细胞粘合在一起的作用。果胶的主要成分是D-半乳糖醛酸，同时还有一些天然中性糖如鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、半乳糖、葡萄糖等的存在。果胶存在3种形态原果胶、果胶、果胶酸。 果胶一般以不溶于水的原果胶形式存在，它提取的基本原理是将不溶性果胶转变为可溶性果胶，并使可溶性果胶向液相转移从而分离出来。目前，果胶的提取技术包括酸提取法、碱萃取法、酶解法、膜分离技术、离子交换法、微波提取法、微生物法、树脂法。果胶酶是指降解果胶物质多种酶的总称。目前已在食品工业、饲料工业、纺织品加工和造纸工业等诸多领域得到应用。酶活力是果胶酶催化果胶降解的一个重要参数。测定果胶酶酶活力的方法有很多，但基本上都是利用酶促反应降解果胶产生的粘度下降或生成的还原性醛基来测定果胶酶酶活。这些方法概括起来主要有脱胶作用时间法、粘度降低法、滴定法、纳尔逊-索模吉法、DNS显色法和紫外法等。粘度降低法用来测定果胶酶的复合酶活力比较准确，但操作过程也相对复杂，且测定灵敏度不高。滴定法设备使用简单，测试重现性好，准确度高，但测定时间长，过程较繁琐，试剂用量较大。而DNS显色法和紫外法等分光光度法测定的灵敏度、准确度均高，重现性好，试剂用量少，尤其是操作省时、简便。实际上，天然纤维中的果胶与水果果胶是不一样的，而且，不同果胶酶催化果胶降解的能力也是不一样的，选择合适的果胶作为底物对果胶酶酶活力准确测定是非常重要的。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种以麻类纤维果胶为底物的纺织专用果胶酶酶活力的测定方法，该方法操作简便，底物原料来源广泛，成本低，提高纺织专业果胶酶酶活力测定的准确性。本发明的一种以麻类纤维果胶为底物的纺织专用果胶酶酶活力的测定方法，包括(1)从麻类植物中提取果胶，得麻类纤维果胶；(2)将上述的麻类纤维果胶溶于缓冲溶液中，制成l_4g/l的果胶溶液；取l_3ml 上述的果胶溶液在30-70°C恒温下预热5-30min，然后加入纺织专用果胶酶，再加入l_5ml 缓冲溶液，在30-70°C恒温下处理10-120min，最后测定纺织专用果胶酶的酶活力。步骤(1)中所述的麻类植物为苎麻、亚麻、黄麻、剑麻、大麻中的一种或几种。步骤(1)中所述的提取果胶的提取方法为酸提取法、酶提取法、微波提取法、膜分离技术或离子交换法。上述的酸提取方法为将麻类植物剪碎后烘干，得到干燥的麻类植物原料，然后将I-IOg干燥的麻类植物原料放入30-70°C中浸泡10-60min，取出烘干，再浸入50_300mL l-10g/L的草酸铵溶液中，在60-95°C下处理20-240min，过滤，将滤液浓缩至1/4-1/6体积后，加入丙酮沉淀，抽滤，将沉淀于40°C真空干燥，得麻类纤维果胶。上述的麻类植物为苎麻。步骤O)中所述的缓冲溶液均为pH值=8的0. 2M的柠檬酸-磷酸氢二钠溶液。步骤O)中所述的纺织专用果胶酶的酶活力的测定方法为滴定法、脱胶作用时间法、粘度下降法、DNS显色法、紫外吸收测定法、纳尔逊-索模吉法和染料释放分析法中的一种。步骤O)中所述的纺织专用果胶酶为kourzyme Np果胶酶(由Novozymes公司提供)。步骤O)中所得到的纺织专用果胶酶的酶活用于测定纺织专用果胶酶的酶活力比，即以麻类纤维果胶为底物测定的酶活力与以苹果果胶为底物测定的酶活力之比；酶活力比> 1的果胶酶适合于纤维加工，其酶活力比< 1的果胶酶适合于食品或饲料加工。经实验证明用不同底物测定的果胶酶酶活力是不同的。以苹果果胶为底物测定果胶酶酶活力为例，发现所测定的酶活力与其在食品、饲料的果胶酶催化效果基本一致， 但与棉织物的酶催化精练效果大相径庭。因此，筛选和提取一种纺织专用果胶酶酶活力的底物，对提高纺织专业果胶酶酶活力测定的准确性有重要意义；纺织专用果胶酶一般用于天然纤维素纤维及其混纺织物的生物脱胶、精练等工序。本发明所指纺织专用果胶酶酶活力测定的结果适用于天然纤维素纤维及其混纺织物的生物脱胶、精练等果胶酶的催化活性的评价。有益效果本发明的纺织专用果胶酶酶活力的测定方法，操作简便，底物原料来源广泛，成本低；采用麻类纤维果胶作为纺织专用果胶酶酶活力测定的底物，能提高纺织专用果胶酶酶活力测定的准确性。
具体实施例方式下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。实施例1将苎麻剪成一定的长度，烘干称取5g左右的苎麻，放入温水中浸泡30min左右，烘干后，放入圆底烧瓶，加入150mL 5g/L的草酸铵溶液，在90°C下处理90min，过滤，将萃取液浓缩至1/5体积后，加入丙酮沉淀，抽滤，将沉淀放在40°C的真空干燥器中进行干燥，得麻类纤维果胶。然后测定麻类纤维果胶中灰分、甲氧基和半乳糖醛酸的含量，如表1所示。表1苎麻果胶主要成分的含量
权利要求
1.一种以麻类纤维果胶为底物的纺织专用果胶酶酶活力的测定方法，包括(1)从麻类植物中提取果胶，得麻类纤维果胶；(2)将上述的麻类纤维果胶溶于缓冲溶液中，制成l_4g/l的果胶溶液；取l_3ml上述的果胶溶液在30-70°C恒温下预热5-30min，然后加入纺织专用果胶酶，再加入l_5ml缓冲溶液，在30-70°C恒温下处理10-120min，最后测定纺织专用果胶酶的酶活力。
2.根据权利要求1所述的一种以麻类纤维果胶为底物的纺织专用果胶酶酶活力的测定方法，其特征在于步骤(1)中所述的麻类植物为苎麻、亚麻、黄麻、剑麻、大麻中的一种或几种。
3.根据权利要求1所述的一种以麻类纤维果胶为底物的纺织专用果胶酶酶活力的测定方法，其特征在于步骤(1)中所述的提取果胶的提取方法为酸提取法、酶提取法、微波提取法、膜分离技术或离子交换法。
4.根据权利要求3所述的一种以麻类纤维果胶为底物的纺织专用果胶酶酶活力的测定方法，其特征在于所述的酸提取方法为将麻类植物剪碎后烘干，得到干燥的麻类植物原料，然后将I-IOg干燥的麻类植物原料放入30-70°C中浸泡10-60min，取出烘干，再浸入50-300mL l-10g/L的草酸铵溶液中，在60_95°C下处理20_240min，过滤，将滤液浓缩至 1/4-1/6体积后，加入丙酮沉淀，抽滤，将沉淀于40°C真空干燥，得麻类纤维果胶。
5.根据权利要求4所述的一种以麻类纤维果胶为底物的纺织专用果胶酶酶活力的测定方法，其特征在于所述的麻类植物为苎麻。
6.根据权利要求1所述的一种以麻类纤维果胶为底物的纺织专用果胶酶酶活力的测定方法，其特征在于步骤⑵中所述的缓冲溶液均为PH值=8的0. 2M的柠檬酸-磷酸氢二钠溶液。
7.根据权利要求1所述的一种以麻类纤维果胶为底物的纺织专用果胶酶酶活力的测定方法，其特征在于步骤O)中所述的纺织专用果胶酶的酶活力的测定方法为滴定法、脱胶作用时间法、粘度下降法、DNS显色法、紫外吸收测定法、纳尔逊-索模吉法和染料释放分析法中的一种。
8.根据权利要求1所述的一种以麻类纤维果胶为底物的纺织专用果胶酶酶活力的测定方法，其特征在于步骤O)中所述的纺织专用果胶酶为kourzyme Np果胶酶。
9.根据权利要求1所述的一种以麻类纤维果胶为底物的纺织专用果胶酶酶活力的测定方法，其特征在于步骤O)中所得到的纺织专用果胶酶的酶活力用于测定纺织专用果胶酶的酶活力比，即以麻类纤维果胶为底物测定的酶活力与以苹果果胶为底物测定的酶活力之比；酶活力比> 1的果胶酶适合于纤维加工，基酶活比小于1的果胶酶适合于食品或饲料加工。
全文摘要
本发明涉及一种以麻类纤维果胶为底物的纺织专用果胶酶酶活力的测定方法，包括(1)从麻类植物中提取果胶，得麻类纤维果胶；(2)将上述的麻类纤维果胶溶于缓冲溶液中，制成1-4g/l的果胶溶液；取1-3ml上述的果胶溶液在30-70℃恒温下预热5-30min，然后加入纺织专用果胶酶，再加入1-5ml缓冲液，在30-70℃恒温下处理10-120min，最后测定纺织专用果胶酶的酶活。本发明的纺织专用果胶酶酶活力的测定方法，操作简便，底物原料来源广泛，成本低；采用麻类纤维果胶作为纺织专用果胶酶酶活测定的底物，能提高纺织专用果胶酶酶活测定的准确性。
文档编号C12Q1/34GK102533936SQ20121000407
公开日2012年7月4日 申请日期2012年1月6日 优先权日2012年1月6日
发明者付康丽, 陆大年, 陈小湘 申请人:东华大学