专利名称：一种改良厌氧双相血培养瓶的制作方法
技术领域：
本发明属于体外诊断试剂领域，特别涉及一种改良厌氧双相血培养瓶。背景技术：
血培养是临床维生素检查中最重要的项目之一。临床几乎所有的发热性疾病，如多种细菌性传染病、肺炎、脑膜炎、泌尿系统感染、以及发热待查等，均可能因细菌进入血液而引起菌血症、败血症。厌氧双相血培养瓶主要用于血液中厌氧菌的体外培养。所谓双相血培养，是指培养瓶中存在双相培养基，即固相和液相。培养时，先将血液以无菌操作方式注入液相培养基轻轻摇匀并浸润固相培养基表面，再进行常规培养。此双相系统形成不同的氧浓度梯度，利于对氧浓度要求不同的厌氧菌的生长。并且固相的存在使分离培养变得简单，无污染，便于菌落的观察，以及后续的药敏试验及菌种鉴定。为了尽快对病人作针对性抗菌治疗，准确、及时的血培养结果就尤为重要。而厌氧双相血培养基的质量好坏则对血培养的厌氧菌的阳性检出率的高低和检出时间起着决定性的作用。然而目前市场上常用的厌氧双相血培养瓶的质量却参差不齐，不容乐观。由于厌氧菌对环境条件的要求非常苛刻，只能在低氧分压的条件下生长，而不能在空气(18%氧气)和(或)10%二氧化碳浓度下的培养基上生长。故现有的厌氧双相血培养瓶大都不能很好地培养厌氧菌。质量低劣的培养基不仅容易漏检，降低厌氧菌的阳性检出率，而且有可能因为呈“假阴性”而造成误诊，这样不仅会延长患者的治疗时间、增加医疗费用，有时甚至会失去宝贵的治愈机会。
发明内容
本发明为了弥补现有技术的不足，提供了一种配方齐全、适合厌氧菌生长的改良厌氧双相血培养瓶。本发明是通过如下技术方案实现的
一种改良厌氧双相血培养瓶，包括由CDC厌氧琼脂构成的固相和由含抗凝剂的厌氧肉汤组成的液相，所述固相和液相分别由以下重量份数的原料配制而成
(1)固相中，⑶C厌氧肉汤350 400份、琼脂粉200 300份、酵母浸粉45 55份、核酸15 25份、谷氨酸钠5 15份、维生素CO. 003^0. 005份，其余为去离子水，共计10000份；
(2)液相中，⑶C厌氧肉汤35(Γ400份、酵母浸粉45 55份、聚茴香脑磺酸钠2 3份、辅酶10. 05 O. 15份、维生素仏0. 5 I. 5份、维生素K3O. 001 O. 003份、维生素B12O. 0005 O. 0007份、L-谷氨酰胺f 3份、L-胱氨酸O. 2^0. 3份、L-半胱氨酸盐酸盐5飞份、精氨酸5飞份、腺嘌呤硫酸盐O. Γ0. 3份、鸟嘌呤盐酸盐O. 005^0. 007份、维生素CO. 003^0. 005份、异维生素CO. ΟΟΓΟ. 005份，其余为去离子水，共计10000份。其优选的固相和液相中，各原料的重量配比为
(1)固相中，CDC厌氧肉汤385份、琼脂粉230份、酵母浸粉50份、核酸20份、谷氨酸钠10份、维生素CO. 004份，其余为去离子水，共计10000份；
(2)液相中，⑶C厌氧肉汤385份、酵母浸粉50份、聚茴香脑磺酸钠2.5份、辅酶10. 10份、维生素B6L O份、维生素K3O. 002份、维生素B12O. 0006份、L-谷氨酰胺2份、L-胱氨酸O. 22份、L-半胱氨酸盐酸盐5. 18份、精氨酸5. 5份、腺嘌呤硫酸盐O. 2份、鸟嘌呤盐酸盐
O.006份、维生素CO. 004份、异维生素CO. 0045份，其余为去离子水，共计10000份。本发明的改良厌氧双相血培养瓶中添加有除氧剂维生素C和异维生素C，适宜的环境条件更能促进血中厌氧细菌的快速繁殖。本发明的原料成分齐全，营养丰富，十分适宜厌氧菌的生长。固相中除了有⑶C厌氧肉汤、酵母浸粉等营养成分和琼脂粉等凝固物质外，更是添加了核酸和谷氨酸钠作为细菌生长刺激剂，以及维生素C这种除氧剂。实验结果表明更能有效的加速厌氧菌的生长，这样的一种配方组合，能够大大缩短厌氧阳性菌的发现时间，特别是一些具有传染性的厌氧病原菌，缩短检出时间，更有利于医院及时确定作消毒隔离或转院处理，避免造成更严重的医院感染。液相中除了加入了 CDC厌氧肉汤、酵母浸粉等基础营养物质以外，更是添加了各种必需营养素如L-谷氨酰胺、精氨酸、L-胱氨酸、L-半胱氨酸盐酸盐等完整的氨基酸系列；维生素B6、维生素K3、维生素B12等复合维生素；最适浓度的抗凝剂SPS，可有效中和溶菌酶、抑制吞噬细胞以及使某些氨基糖苷类抗生素失活，使细菌更好地生长；更是比常规血培养基多加了很多独特的生长因子辅酶I、腺嘌呤硫酸盐、鸟嘌呤盐酸盐等，能为厌氧菌的生长提供丰富的营养。本发明中合理的配方比例和完善的营养成分以及更适宜厌氧菌生长的环境条件更有利于各种厌氧菌的生长。并能大大提高阳性检出率和检出时间，培养结果准确及时，对于临床诊断和治疗具有极其重要的意义。
具体实施方式
实施例I:
一种改良厌氧双相血培养瓶，包括由CDC厌氧琼脂构成的固相和由含抗凝剂的厌氧肉汤组成的液相，所述固相和液相分别由以下重量份数的原料配制而成
(1)固相中，CDC厌氧肉汤350g、琼脂粉200g、酵母浸粉45g、核酸15g、谷氨酸钠5g、维生素CO. 003g,其余为去离子水,共计IOkg ；
(2)液相中，⑶C厌氧肉汤350g、酵母浸粉45g、聚茴香脑磺酸钠2g、辅酶10.05g、维生素B6O. 5g、维生素K3O. OOlg、维生素B12O. 0005g、L-谷氨酰胺lg、L_胱氨酸O. 2g、L_半胱氨酸盐酸盐5g、精氨酸5g、腺嘌呤硫酸盐O. lg、鸟嘌呤盐酸盐O. 005g、维生素CO. 003g、异维生素CO. 004g,其余为去离子水,共计10kg。实施例2:
一种改良厌氧双相血培养瓶，包括由CDC厌氧琼脂构成的固相和由含抗凝剂的厌氧肉汤组成的液相，所述固相和液相分别由以下重量份数的原料配制而成
(1)固相中，CDC厌氧肉汤400g、琼脂粉300g、酵母浸粉55g、核酸25g、谷氨酸钠15g、维生素CO. 005g,其余为去离子水,共计IOkg ；
(2)液相中，⑶C厌氧肉汤400g、酵母浸粉55g、聚茴香脑磺酸钠3g、辅酶10.15g、维生素B6L 5g、维生素K3O. 003g、维生素B12O. 0007g、L_谷氨酰胺3g、L_胱氨酸O. 3g、L_半胱氨酸盐酸盐6g、精氨酸6g、腺嘌呤硫酸盐O. 3g、鸟嘌呤盐酸盐O. 007g、维生素CO. 005g、异维生素CO. 005g,其余为去离子水,共计10kg。
实施例3
一种改良厌氧双相血培养瓶，包括由CDC厌氧琼脂构成的固相和由含抗凝剂的厌氧肉汤组成的液相，所述固相和液相分别由以下重量份数的原料配制而成
(1)固相中，CDC厌氧肉汤385g、琼脂粉230g、酵母浸粉50g、核酸20g、谷氨酸钠10g、维生素CO. 004g，其余为去离子水，共计IOkg ；
(2)液相中，⑶C厌氧肉汤385g、酵母浸粉50g、聚茴香脑磺酸钠2.5g、辅酶10. 10g、维生素B6L 0g、维生素K3O. 002g、维生素B12O. 0006g、L_谷氨酰胺2g、L_胱氨酸O. 22g、L_半胱氨酸盐酸盐5. 18g、精氨酸5. 5g、腺嘌呤硫酸盐O. 2g、鸟嘌呤盐酸盐O. 006g、维生素CO. 004g、异维生素CO. 0045g,其余为去离子水,共计10kg。
权利要求
1.一种改良厌氧双相血培养瓶，包括由CDC厌氧琼脂构成的固相和由含抗凝剂的厌氧肉汤组成的液相，其特征为，所述固相和液相分别由以下重量份数的原料配制而成(1)固相中，CDC厌氧肉汤350 400份、琼脂粉200 300份、酵母浸粉45 55份、核酸15 25份、谷氨酸钠5 15份、维生素CO. 003、. 005份，其余为去离子水，共计10000份；(2)液相中，⑶C厌氧肉汤35(Γ400份、酵母浸粉45 55份、聚茴香脑磺酸钠2 3份、辅酶10. 05、. 15份、维生素B6O. 5 I. 5份、维生素K3O. 001 O. 003份、维生素B12O. 0005 O. 0007份、L-谷氨酰胺I 3份、L-胱氨酸O. 2、. 3份、L-半胱氨酸盐酸盐5飞份、精氨酸5飞份、腺嘌呤硫酸盐O. Γθ. 3份、鸟嘌呤盐酸盐O. 005^0. 007份、维生素CO. 003^0. 005份、异维生素CO. ΟΟΓΟ. 005份，其余为去离子水，共计10000份。
2.根据权利要求I所述的改良厌氧双相血培养瓶，其特征为，所述固相和液相分别由以下重量份数的原料配制而成(I)固相中，CDC厌氧肉汤385份、琼脂粉230份、酵母浸粉50份、核酸20份、谷氨酸钠10份、维生素CO. 004份，其余为去离子水，共计10000份；(2)液相中，⑶C厌氧肉汤385份、酵母浸粉50份、聚茴香脑磺酸钠2. 5份、辅酶10. 10份、维生素B6L O份、维生素K3O. 002份、维生素B12O. 0006份、L-谷氨酰胺2份、L-胱氨酸O. 22份、L-半胱氨酸盐酸盐5. 18份、精氨酸5. 5份、腺嘌呤硫酸盐O. 2份、鸟嘌呤盐酸盐O. 006份、维生素CO. 004份、异维生素CO. 0045份，其余为去离子水，共计10000份。
全文摘要
本发明属于体外诊断试剂领域，特别公开了一种改良厌氧双相血培养瓶。该改良厌氧双相血培养瓶，固相由CDC厌氧肉汤、琼脂粉、酵母浸粉、核酸、谷氨酸钠、维生素C按一定重量配比，添加去离子水混合配制而成。液相由CDC厌氧肉汤、酵母浸粉、SPS、辅酶I，维生素B6、维生素K3、维生素B12、L-谷氨酰胺、L-胱氨酸、L-半胱氨酸盐酸盐、精氨酸、腺嘌呤硫酸盐、鸟嘌呤盐酸盐、维生素C、异维生素C，按一定重量配比，添加去离子水混合配制而成。本发明中合理的配方比例和完善的营养成分以及更适宜厌氧菌生长的环境条件更有利于各种厌氧菌的生长。并能大大提高阳性检出率和检出时间，培养结果准确及时，对于临床诊断和治疗具有极其重要的意义。
文档编号C12M1/24GK102925344SQ20121047610
公开日2013年2月13日 申请日期2012年11月22日 优先权日2012年11月22日
发明者宁春华, 聂晖, 孟俊华, 崔兰兰, 霍雨艳, 李福川, 陈玉芹, 谭坤 申请人:济南百博生物技术有限责任公司