鹿牛羊马驴猪动物皮组织dna的pcr鉴定用引物体系的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种鹿牛羊马驴猪动物皮组织DNA的PCR鉴定用引物体系，该引物体系可一次性检测多达六个动物物种，达到对常见动物物种基本覆盖的目的；且本发明引物均仅对各自物种目标片段进行特异性扩增，不会与其他物种起反应，因此也能适用于一次PCR反应中导入两种及以上引物对的多重PCR反应，从而能有效缩短实验时间；此外在进行PCR时，使用优化的特定PCR反应体系及反应程序，采用统一PCR检测方法，简化了检测流程，建立了快速高效且特异性高的鉴定方式，从而有效地鉴定鹿皮/鹿皮胶制品的真伪及掺假情况，为鹿皮产品的质量控制提供了现代分子生物学的检测手段；此外该引物体系还能配合相关试剂制成试剂盒，方便使用，同时为工业化生产及应用提供了可能，其应用前景极好。
【专利说明】鹿牛羊马驴猪动物皮组织DNA的PCR鉴定用引物体系
【技术领域】
[0001]本发明涉及分子生物学领域，尤其涉及鹿、牛、羊、马、驴和猪动物皮组织DNA的PCR鉴定用引物体系及PCR鉴定方法，以及相应的试剂盒，适用于上述六种动物皮组织及其制品的快速检测及鉴定，尤其适用于鹿皮及鹿皮胶的快速防伪鉴定。
【背景技术】
[0002]鹿皮是我国的传统中药，药用历史悠久。早在《本草纲目》中就有鹿皮“补气，涩精，敛疮”功效的记载；《四川中药志》中也记载了其“能补气，涩虚滑，治妇女白带，血崩不止，肾虚滑精，涂一切疮”。以梅花鹿或马鹿的皮为原料加工精制而成的鹿皮胶富含多种氨基酸与微量元素，具有补血止血、补肾壮阳等多种营养保健作用。《北京市中药炮制规范》描述鹿皮胶味咸，性温，归肝，肾经，主治补气，涩虚精，强筋健骨，可用于身体瘦弱，腰酸耳鸣，头晕目眩，虚弱久咳，痰中带血，虚喘气短，妇女经血不调，崩漏带下，性偏于温，既能补阳，又可滋阴补血、止血。
[0003]利用现代技术测定鹿皮胶成分[张潇予，徐厚平，刘代成，鹿皮胶的成分分析，山东师范大学学报，2010,25 (4)]，发现其中包括8种必需氨基酸，包括赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸，均为人类不能自身合成的必需氨基酸，对于身体发育、新陈代谢都具有重要作用。将鹿皮胶的氨基酸组成与阿胶(即驴皮胶)进行对t匕，结果显示二者基本 一致。这些都说明鹿皮胶与阿胶一样，具有很大的药用保健价值及市场价值。然而对鹿皮产品完整的科学数据，特别是特型鉴定方面的数据尚无处可查，尤其是当鹿皮、驴皮等原材料制成皮胶产品后单单利用传统目测及理化分析并不能很有效地判别这些性质十分相似的皮胶样品。
[0004]在这种情况下，利用高科技的技术建立分子生物学鉴定手段，能够为人们提供经现代科学技术鉴定的高质量鹿皮及鹿皮胶产品。现代分子生物学技术具有可靠、灵敏、快速的特点，尤其是对于干燥、加热、蒸煮等处理过的样品仍旧能保持检测的准确性。利用聚合酶链式反应(PCR)技术可以从微量DNA样品中灵敏地扩增出特定的DNA片段，并且通过引物序列的差异来有效保证反应的特异性。因此PCR技术被广泛应用于物种鉴定、检测等领域，在防止假冒、掺假、保证产品质量、维护消费者权益方面发挥了巨大的作用。
[0005]本公司
【发明者】党平, 宋平, 王瑜, 杜雨威 申请人:苏州市红冠庄国药饮片有限公司