低胆固醇稀奶油及其制备方法和β-环糊精回收方法

低胆固醇稀奶油及其制备方法和β-环糊精回收方法
【专利摘要】本发明公开了低胆固醇稀奶油及其制备方法和β-环糊精回收方法。低胆固醇稀奶油的制备方法包括如下步骤：β-环糊精在己二酸作用下进行交联反应，得交联β-环糊精；将均质、杀菌后的稀奶油在30-50℃下与交联β-环糊精搅拌混合均匀，搅拌的速度为850-1500rpm；用水稀释0.5-2倍后，离心、排渣，即可。β-环糊精回收方法包括如下步骤：将醋酸、异丙醇和吸附胆固醇的交联β-环糊精混合均匀，经过超声波处理、搅拌、离心，即可。使用本发明低胆固醇制备方法制得的低胆固醇稀奶油，胆固醇含量非常低，质量稳定，打发性良好，使用β-环糊精回收方法提升β-环糊精回收利用率。
【专利说明】低胆固醇稀奶油及其制备方法和β-环糊精回收方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及低胆固醇稀奶油及其制备方法和β-环糊精回收方法。
【背景技术】
[0002]据2010年世界健康组织(World Health Organization,WHO)调查表明，心血管疾病是十大导致人类死亡的疾病之一。每年约有16.7百万人死于各种心血管疾病，占到全球每年死亡总人数的29.2%。临床试验已经证明血液中高胆固醇含量与心血管疾病有着直接的关系，可以通过控制饮食中胆固醇的摄入量来控制人体胆固醇的含量(Pyorala，1987)。
[0003]乳制品中胆固醇含量较高，脂肪含量为3.6 %的牛奶中，胆固醇含量约为13.14mg/100g，脂肪含量为36%的稀奶油中胆固醇含量为137mg/100g，对于心血管疾病患者如高血压、动脉硬化和冠心病患者而言，低胆固醇含量的乳制品对于其健康有重要的作用。
[0004]人们曾尝试用各种理化方法来去除食品的胆固醇含量，如蒸馏法、超临界萃取和吸附法等，但这些方法处理后，乳脂的加工性质受到一定的破坏，吸附剂通常为特定的化学物质，脱除胆固醇后在食品不易除去，安全性也有待考究；超临界萃取法设备投资较大，经济成本较高。因此寻求无毒安全且能有效去除乳品中胆固醇的方法，对生产低胆固醇乳制品有重要意义。β_环糊精分子具有略呈锥形的中空圆筒立体环状结构，在其空洞结构中，外侧上端(较大开口端)由C2和C3的仲羟基构成，下端(较小开口端)由C6的伯羟基构成，具有亲水性，而空腔内由于受到C-H键的屏蔽作用形成了疏水区，且中心腔体的直径与胆固醇分子相近，因此能够很好的包裹非极性的胆固醇。
[0005]β -CD的溶解性较差，化学性质稳定，易于分离，且价格低廉，对人体无害，在很多国家都是允许使用的一种食品添加剂。目前已经有一些研究关于采用β_环糊精去除食品中的胆固醇。
[0006]虽然有研究表明环糊精处理能够有效的降低稀奶油中胆固醇的含量，但是由于处理后乳脂肪球膜在剪切条件下被破坏，脂肪球粒径减小，无法形成有硬度的泡沫结构，从而会损害搅打后稀奶油的泡沫稳定性。现有的脱除稀奶油中胆固醇工艺主要是关注胆固醇去除率，并没有考虑到去除后对奶油的加工性质的影响。
[0007]另外，现有的脱除稀奶油中胆固醇的工艺中，环糊精吸附胆固醇后进行离心排渣，直接当做废料排弃至环境中，这不仅造成原料浪费，生产成本较高，且会对环境造成污染，因此对β-环糊精进行回收从而循环的用于脱除胆固醇的研究具有重要意义。

【发明内容】

[0008]本发明要解决的技术问题是为了克服现有技术中的环糊精和交联环糊精在脱除稀奶油中的胆固醇的时候会对稀奶油泡沫稳定性产生不利影响，无法同时满足胆固醇的高脱除率和产品稀奶油的打发性和泡沫稳定性，并且β-环糊精无法进行回收利用的缺陷，提供一种低胆固醇稀奶油及其制备方法和一种β_环糊精回收方法。本发明利用交联β-环糊精脱除稀奶油中的胆固醇，脱除效率高，方法简单，并且制备得到的低胆固醇稀奶油打发性佳，泡沫稳定性好，并且配合利用本发明β-环糊精回收方法可以大幅提升β-环糊精的回收利用率，成本降低，不会对环境造成污染。
[0009]本发明提供一种低胆固醇稀奶油的制备方法，其包括如下步骤:
[0010](I) 环糊精在己二酸作用下进行交联反应，得交联环糊精；
[0011](2)将均质、杀菌后的稀奶油在30_50°C下与所述的交联β-环糊精搅拌混合均匀，所述的搅拌的速度为850-1500rpm ；
[0012](3)用水稀释0.5-2倍后，离心、排渣，即可。
[0013]步骤(I)中，所述的交联反应的过程为本领域常规，较佳地包括如下步骤:溶胀后的β -环糊精的水溶液，在PH值为8.5?10.5的条件下，室温温度下，在己二酸的作用下，β-环糊精发生交联反应。
[0014]其中，所述的交联反应的时间较佳的为60-180min，更佳地为90min，
[0015]其中，较佳地，所述的pH值为10。
[0016]其中，较佳地，所述的β -环糊精与水混合的质量体积比为100g/80ml。
[0017]其中，较佳地，所述的己二酸的添加量为I?7g己二酸/100gi3-环糊精水溶液。所述的己二酸的添加量更佳地为5.5g/100gi3 -环糊精水溶液。
[0018]其中，较佳地，所述的己二酸和所述的环糊精的质量比为100:3?100:7。
[0019]其中，较佳地，调所述的pH值的方式是将Imol/LNaOH溶液或lmol/LKOH溶液加入至溶胀后的环糊精水溶液中。
[0020]其中，所述的室温温度为本领域常规的室温温度，一般为10_30°C，较佳地为25?30。。。
[0021]步骤(I)中，较佳地，交联反应后进行后处理。所述的后处理为本领域常规的交联反应后的后处理，较佳地为:用lmol/L醋酸溶液调节pH值至4-6、过滤、洗涤、干燥和筛选。
[0022]后处理中，所述的过滤的方式较佳地为使用whatman paper2号滤纸进行过滤。所述的洗涤的方式较佳地为用水洗涤1-5次，更佳地为3次，每次用水量为150ml。所述的干燥的温度较佳的为40-70°C,更佳地为65°C ;所述的干燥的时间较佳的为4-12h,更佳地为6h。所述的筛选的方式较佳地为用100目筛子进行筛选。
[0023]步骤(2)中，所述的稀奶油为本领域常规的稀奶油，一般是是由原料乳经离心机分离，标准化后得到的产物。所述的稀奶油的脂肪质量含量百分比较佳地为36%。
[0024]步骤(2)中，所述的均质和杀菌为本领域常规操作。所述的均质的温度较佳地为40-50°C，更佳地为50°C ;所述的均质的压力较佳地为10-30Mpa，更佳地为20Mpa。所述的杀菌较佳地为巴氏杀菌，所述的巴氏杀菌的温度较佳的为72-75 °C，所述的巴氏杀菌的时间较佳的为12-18s。
[0025]步骤(2)中，较佳地，所述的稀奶油在35_45°C下与所述的交联β -环糊精搅拌混合均匀，更佳地在40 V下混合均匀。
[0026]步骤(2)中，所述的交联环糊精与所述的稀奶油的质量体积比例较佳地为1-15% (w/v)，更佳地为5-10%，最佳地为8%。
[0027]步骤(2)中，所述的搅拌的速度较佳地为1000-1200rpm，更佳地为1200rpm。
[0028]步骤(3)中所述的稀释的倍数较佳地为I倍。[0029]步骤(3)中所述的离心、排渣的过程为本领域常规操作。所述的离心的时间较佳的为5-10min，更佳地为7min ;所述的离心的速度较佳地为3000-12000rpm，更佳地为8000-10000rpmo
[0030]本发明提供了一种由上述制备方法制备的低胆固醇稀奶油。
[0031]本发明还提供一种β -环糊精的回收方法，其包括如下步骤:
[0032]将醋酸、异丙醇和吸附胆固醇的交联环糊精混合均匀，经过超声波处理、搅拌、离心，即可。
[0033]其中，所述的醋酸与所述的异丙醇的添加量质量比较佳地为1:9?9:1，更佳地为
1:3?3:1，最佳地为1:1。
[0034]其中，所述的醋酸和异丙醇的总量和所述的吸附胆固醇的交联环糊精的质量比较佳地为1:1?1:5，更佳地为1:3。
[0035]其中，较佳地，先混合所述的醋酸和异丙醇后再与所述的吸附胆固醇的交联β -环糊精混合。
[0036]其中，所述的交联环糊精为本领域常规的具有吸附胆固醇能力的交联环糊精。较佳地为，上述稀奶油制备方法步骤(I)中得到的交联β-环糊精。
[0037]其中，所述的吸附胆固醇的交联环糊精为本领域常规的交联环糊精吸附胆固醇之后形成的物质，较佳地为上述稀奶油制备方法步骤(3)排渣得到的产物。
[0038]其中，所述的超声波处理为本领域常规操作。所述的超声波处理的功率较佳地为800?1500w，更佳的为IOOOw ;所述的超声波处理的时间较佳的为l_10min，更佳地为3_8min,最佳地为5min。
[0039]其中，所述的搅拌的速率较佳地为50-150rpm，更佳地为IOOrpm ;所述的搅拌的温度较佳地为40-60°C，更佳地为50°C ;所述的搅拌的时间较佳地为l_3h，更佳地为2h。
[0040]其中，较佳地，在所述的搅拌后经过冷却，冷却至25_30°C后，再进行所述的离心。
[0041]其中，所述的离心为本领域常规操作。所述的离心的速率较佳地为3000-10000rpm,更佳地为6000_8000rpm ;所述的离心的时间较佳地为l_6min，更佳地为5min。
[0042]其中，一般所述的离心、排渣得沉淀物，将沉淀物进行干燥，得β -环糊精。所述的干燥为本领域常规操作，所述的干燥的温度较佳地为40-70°C,更佳地为65°C ;所述的干燥的时间较佳地为4-12h，更佳地为6h。
[0043]本发明上述回收方法回收而得的环糊精可以反复用于制备低胆固醇稀奶油过程当中，将回收得到的β_环糊精进行交联反应，再脱除稀奶油中的胆固醇，从吸附胆固醇的交联环糊精中回收环糊精，大大提高了 环糊精的利用率。
[0044]在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
[0045]本发明所用试剂和原料均市售可得。
[0046]本发明的积极进步效果在于:使用本发明低胆固醇制备方法制得的低胆固醇稀奶油，胆固醇含量非常低，质量稳定，打发性良好，可广泛用于蛋糕裱花、蛋挞制做、或冰激凌的生产中。己二酸交联环糊精配合制备方法中的其他步骤脱除稀奶油中的胆固醇，实现了胆固醇脱除率高的同时满足了终产品稀奶油打发性好，泡沫稳定佳等好的效果，而且对后续回收也比较有利。用本发明回收方法从现有技术常规的或本发明中的吸附了胆固醇的交联β-环糊精中回收β-环糊精后，可以重复用于稀奶油中以脱除胆固醇，降低了生产成本，有很好的经济效益。
【具体实施方式】
[0047]下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
[0048]一、材料与试剂
[0049]试剂:β -环糊精:欣荣进出口贸易有限公司，
[0050]稀奶油:光明乳业股份有限公司乳品四厂；
[0051]己二酸，氢氧化钠，醋酸，胆固醇、邻苯二甲醛、浓硫酸、无水乙醇、正己烷、冰乙酸、邻苯三酚、氢氧化钾、甲醇、乙酸锌、亚铁氰化钾、盐酸，石油醚、甲基红、异丙醇:均购于中国医药集团上海化学试剂公司。
[0052]二、检测方法
[0053]测定脱除胆固醇后的稀奶油中胆固醇含量和环糊精的残留量。
[0054]1、胆固醇测定参考文献(《邻苯二甲醛-硫酸比色法测定稀奶油中胆固醇含量》耿倩，生庆海，顾瑞霞.2004，32 (9):37?39)。具体如下:
[0055]1.1工作曲线的制作
[0056]胆固醇标准溶液的制备:准确称量200mg胆固醇用正己烷溶解并定容至100ml，得到质量浓度为2g/L的胆固醇标准储备液；再吸取IOml储备液用正己烷定容至100ml，得到质量浓度为0.2g/L的胆固醇标准工作液。
[0057]1.2测定波长选择
[0058]吸取胆固醇标准工作液O和0.5ml，于真空干燥箱内60°C挥发干溶剂，加入0.2ml冰乙酸，0.4ml邻苯二甲醛-乙醇溶液(lmg/ml )，4ml混合酸(1:1冰乙酸-浓硫酸)，漩涡混勻,冷却，显色15min,在480_650nm处扫描,结果在553nm处有最大吸收，因此选择测定波长为 553nm。
[0059]1.3工作曲线的建立
[0060]吸取胆固醇工作液0、0.2,0.4,0.6、0.8和1ml，按照上述方法显色后在波长553nm处测定吸光度。以胆固醇含量对吸光度做工作曲线。为线性关系。
[0061]1.4样品预处理
[0062]称取Ig稀奶油样品(记录实际重量)置于有塞子试管内，加入2ml邻苯三酚-甲醇(8g/L),5ml氢氧化钾-甲醇(0.2g/ml),与80°C水浴阜化30min (每隔2min混合几秒)；力口入IOml正己烷，萃取；取上层液以2000r/min，IOmin离心得上清液。
[0063]1.5样品检测
[0064]取处理后上清液1ml，按照上述方法显色后在波长553nm处测定吸光度值，得样品胆固醇含量为:
[0065]稀奶油中胆固醇含量=CV/V’ X1/W
[0066]其中:C为测得的OD值在胆固醇标准曲线上显示的胆固醇量(mg) ；V为萃取用正己烷体积(mL) ;V’为取出的上清液体积(mL) ;W为稀奶油重量(g)。
[0067]2、β-环糊精的测定具体方法如下。
[0068]准确称取IOg稀奶油样品，置于250ml分液漏斗中，用IOOml石油醚去脂肪，水相移到250ml容量瓶中，60°C水浴放置30min，冷却，加入5ml乙酸锌溶液和5ml亚铁氰化钾溶液，定容，混匀，用干燥滤纸过滤，出去初滤液，滤液备用。吸取50ml滤液置于IOOml容量瓶中,加15ml盐酸(体积比1:1)，沸水浴水解30min冷却后加入I滴甲基红指示剂,用氢氧化钠中和溶液至透明的橙黄色，定容。
[0069]实施例1
[0070]1、环糊精和己二酸的交联反应
[0071]将IOOgP -⑶加入至80mL的蒸懼水中，于室温下搅拌30min后,加入3g的己二酸，用IM的氢氧化钠溶液调节pH为10，继续将混合物于室温下搅拌Ih后加入IM的乙酸溶液调节pH为4。采用whatman2号滤纸过滤溶液,去滤洛用150ml蒸懼水水洗3次,然后将滤渣于40°C烘箱中干燥12h，所得即为β-环糊精和己二酸的交联物。
[0072]其中whatman2号滤纸过滤后的滤液收集测定其中β -环糊精含量，通过以下公式即可计算出与己二酸发生交联反应的环糊精量:
[0073]交联β-环糊精量(gi3-环糊精/g己二酸)=A_B/C，其中A为添加的β -环糊精的总量，即IOOg ；Β为滤液中的β -环糊精量；C为添加的己二酸的含量。
[0074]此方法中交联的β-环糊精量为19.79 (gi3_环糊精/g己二酸)。
[0075]2、β -环糊精和己二酸交联物去除稀奶油中胆固醇
[0076]新鲜稀奶油标准化脂肪含量为36%，预热至40°C后以IOMPa压力进行均质，采用72°C条件杀菌12s，冷却至30°C后，在稀奶油中按照1%的比例加入环糊精和己二酸交联物。将混合物在30°C下进行搅拌,搅拌时间为5min,搅拌速率为850rpm,然后用蒸懼水将混合物稀释0.5倍，稀释完成后进行离心排渣，离心速率为3000rpm，离心时间为5min。
[0077]该产品中胆固醇的脱出率为90.74%。
[0078]3、回收β_环糊精
[0079]取一定量排渣得到沉淀物，加入乙酸和异丙醇混合物(两者比例为1:9)，沉淀物与乙酸和异丙醇混合物的比例为1:1，将其用超声波1000W处理lmin，然后在40°C下以50rpm搅拌Ih,冷却至室温后3000rpm下离心6min,70°C下干燥4h,得β-环糊精。β-环糊精的回收率按照以下公式计算:
[0080]回收率(％)=l-a_b/a，其中a为离心后所取沉淀物质量(g)，b为回收的β -环糊精的质量(g)。
[0081]β -环糊精的回收率为99.24%。
[0082]实施例2
[0083]1、环糊精和己二酸的交联反应
[0084]将IOOgP -⑶加入至80mL的蒸懼水中，于室温下搅拌3h后，加入7g的己二酸,用IM的氢氧化钠溶液调节pH为10，继续将混合物于室温下搅拌90min后加入IM的乙酸溶液调节pH为4。采用whatman2号滤纸过滤溶液,去滤洛用150ml蒸懼水水洗4次,然后将滤渣于70°C烘箱中干燥4h，所得即为β -环糊精和己二酸的交联物，其中whatman2号滤纸过滤后的滤液收集测定其中环糊精含量，通过以下公式即可计算出与己二酸发生交联反应的β-环糊精量:
[0085]交联β-环糊精量(gi3-环糊精/g己二酸)=A_B/C，其中A为添加的β -环糊精的总量，即100g ；Β为滤液中的β -环糊精量；C为添加的己二酸的含量。
[0086]此方法中交联的环糊精量为13.95 (gi3_环糊精/g己二酸)。
[0087]2、β -环糊精和己二酸交联物去除稀奶油中胆固醇
[0088]新鲜稀奶油标准化脂肪含量为36%，预热至55°C后以30MPa压力进行均质，采用75°C条件杀菌12s，冷却至50°C后，在稀奶油中按照15%的比例加入β -环糊精和己二酸交联物。将混合物在50°C下进行搅拌,搅拌时间为45min,搅拌速率为1500rpm,然后用蒸懼水将混合物稀释2倍，稀释完成后进行离心排渣，离心速率为12000rpm，离心时间为lOmin。
[0089]该产品中胆固醇的脱出率为92.22%。
[0090]3、回收β_环糊精[0091]取一定量排渣得到沉淀物，加入乙酸和异丙醇混合物(两者比例为9:1)，沉淀物与乙酸和异丙醇混合物的比例为3:1，将其用超声波1200W处理lOmin，然后在60°C下以150rpm搅拌3h,冷却至室温后1000Orpm下离心lmin,40°C下干燥12h,得β -环糊精。β -环糊精的回收率按照以下公式计算:
[0092]回收率(％)=l-a_b/a，其中a为离心后所取沉淀物质量(g)，b为回收的β -环糊精的质量(g)。
[0093]β-环糊精的回收率为99.33%。
[0094]实施例3
[0095]1、环糊精和己二酸的交联反应
[0096]将100g β -⑶加入至80mL的蒸懼水中，于室温下搅拌90min后，加入5g的己二酸，用IM的氢氧化钠溶液调节pH为10，继续将混合物于室温下搅拌90min后加入IM的乙酸溶液调节pH为4。采用whatman2号滤纸过滤溶液,去滤洛用150ml蒸懼水水洗3次,然后将滤渣于65°C烘箱中干燥6h，所得即为β-环糊精和己二酸的交联物，其中whatman2号滤纸过滤后的滤液收集测定其中环糊精含量，通过以下公式即可计算出与己二酸发生交联反应的β-环糊精量:
[0097]交联β-环糊精量(gi3-环糊精/g己二酸)=A_B/C，其中A为添加的β -环糊精的总量，即100g ；Β为滤液中的β -环糊精量；C为添加的己二酸的含量。
[0098]此方法中交联的环糊精量为18.89化3-环糊精/^己二酸)。
[0099]2、β -环糊精和己二酸交联物去除稀奶油中胆固醇
[0100]新鲜稀奶油标准化脂肪含量为36%，预热至50°C后以20MPa压力进行均质，采用72°C条件杀菌15s，冷却至40°C后，在稀奶油中按照8%的比例加入β-环糊精和己二酸交联物。将混合物在40°C下进行搅拌，搅拌时间为30min，搅拌速率为1200rpm，然后用蒸馏水将混合物稀释I倍，稀释完成后进行离心排渣，离心速率为lOOOOrpm，离心时间为6min。
[0101]该产品中胆固醇的脱出率为96.74%。
[0102]3、回收β-环糊精
[0103]取一定量排渣得到沉淀物，加入乙酸和异丙醇混合物(两者比例为3:9)，沉淀物与乙酸和异丙醇混合物的比例为5:1，将其用超声波800W处理5min，然后在50°C下以IOOrpm搅拌2h,冷却至室温后8000rpm下离心5min,65°C下干燥4h,得β-环糊精。β-环糊精的回收率按照以下公式计算:
[0104]回收率(％)=l-a_b/a，其中a为离心后所取沉淀物质量(g)，b为回收的β -环糊精的质量(g)。
[0105]β-环糊精的回收率为98.31%。
[0106]实施例4
[0107]1、环糊精和己二酸的交联反应
[0108]将IOOgP -⑶加入至80mL的蒸懼水中，于室温下搅拌90min后，加入5g的己二酸，用IM的氢氧化钠溶液调节pH为10，继续将混合物于室温下搅拌90min后加入IM的乙酸溶液调节pH为4。采用whatman2号滤纸过滤溶液,去滤洛用150ml蒸懼水水洗3次,然后将滤渣于65°C烘箱中干燥6h，所得即为β -环糊精和己二酸的交联物，其中whatman2号滤纸过滤后的滤液收集测定其中环糊精含量，通过以下公式即可计算出与己二酸发生交联反应的β-环糊精量:
[0109]交联β-环糊精量(gi3-环糊精/g己二酸)=A_B/C，其中A为添加的β -环糊精的总量，即IOOg ；Β为滤液中的β -环糊精量；C为添加的己二酸的含量。
[0110]此方法中交联的β-环糊精量为19.09 (gi3_环糊精/g己二酸)。
[0111]2、β-环糊精和己二酸交联物去除稀奶油中胆固醇
[0112]新鲜稀奶油标准化脂肪含量为36%，预热至50°C后以15MPa压力进行均质，采用72°C条件杀菌15s，冷却至40°C后，在稀奶油中按照9%的比例加入β-环糊精和己二酸交联物。将混合物在40°C下进行搅拌，搅拌时间为30min，搅拌速率为1200rpm，然后用蒸馏水将混合物稀释I倍，稀释完成后进行离心排渣，离心速率为lOOOOrpm，离心时间为6min。
[0113]该产品中胆固醇的脱出率为96.41%。
[0114]3、回收β-环糊精
[0115]取一定量排渣得到沉淀物，加入乙酸和异丙醇混合物(两者比例为3:1)，沉淀物与乙酸和异丙醇混合物的比例为5:1，将其用超声波1000W处理5min，然后在50°C下以IOOrpm搅拌2h,冷却至室温后8000rpm下离心5min,60°C下干燥6h,得β-环糊精。β-环糊精的回收率按照以下公式计算:
[0116]回收率(％)=l-a_b/a，其中a为离心后所取沉淀物质量(g)，b为回收的β -环糊精的质量(g)。
[0117]β-环糊精的回收率为98.13%。
[0118]实施例5
[0119]1、环糊精和己二酸的交联反应
[0120]将IOOgP -⑶加入至80mL的蒸懼水中，于室温下搅拌90min后，加入6g的己二酸，用IM的氢氧化钠溶液调节pH为10，继续将混合物于室温下搅拌90min后加入IM的乙酸溶液调节pH为4。采用whatman2号滤纸过滤溶液,去滤洛用150ml蒸懼水水洗4次,然后将滤渣于65°C烘箱中干燥6h，所得即为β -环糊精和己二酸的交联物，其中whatman2号滤纸过滤后的滤液收集测定其中环糊精含量，通过以下公式即可计算出与己二酸发生交联反应的β-环糊精量:
[0121]交联β-环糊精量(gi3-环糊精/g己二酸)=A_B/C，其中A为添加的β -环糊精的总量，即IOOg ；Β为滤液中的β -环糊精量；C为添加的己二酸的含量。[0122]此方法中交联的β-环糊精量为18.56 (gi3_环糊精/g己二酸)。
[0123]2、环糊精和己二酸交联物去除稀奶油中胆固醇
[0124]新鲜稀奶油标准化脂肪含量为36%，预热至45°C后以20MPa压力进行均质，采用72°C条件杀菌15s，冷却至35°C后，在稀奶油中按照9%的比例加入β-环糊精和己二酸交联物。将混合物在35°C下进行搅拌，搅拌时间为30min，搅拌速率为1200rpm，然后用蒸馏水将混合物稀释I倍，稀释完成后进行离心排渣，离心速率为lOOOOrpm，离心时间为6min。
[0125]该产品中胆固醇的脱出率为98.24%。
[0126]3、回收β-环糊精
[0127]取一定量排渣得到沉淀物，加入乙酸和异丙醇混合物(两者比例为1:1)，沉淀物与乙酸和异丙醇混合物的比例为5:1，将其用超声波800W处理5min，然后在50°C下以IOOrpm搅拌2h,冷却至室温后8000rpm下离心5min,50°C下干燥8h,得β-环糊精。β-环糊精的回收率按照以下公式计算:
[0128]回收率(％)=l-a_b/a，其中a为离心后所取沉淀物质量(g)，b为回收的β -环糊精的质量(g)。
[0129]β-环糊精的回收率为99.42%。
[0130]对比例I
[0131]本对比例中用环糊精直接用来脱除稀奶油中胆固醇，工艺条件如下:
[0132]1、β -环糊精和己二酸的交联反应
[0133]将IOOgP -⑶加入至80mL的蒸懼水中，于室温下搅拌60min后,加入5.5g的己二酸，用IM的氢氧化钠溶液调节pH为10.2，继续将混合物于室温下搅拌60min后加入IM的乙酸溶液调节pH为4。采用whatman2号滤纸过滤溶液,去滤洛用150ml蒸懼水水洗3次，然后将滤渣于60°C烘箱中干燥6h，所得即为β -环糊精和己二酸的交联物，其中whatman2号滤纸过滤后的滤液收集测定其中β_环糊精含量，通过以下公式即可计算出与己二酸发生交联反应的环糊精量:
[0134]交联β-环糊精量(gi3-环糊精/g己二酸)=A_B/C，其中A为添加的β -环糊精的总量，即IOOg ；Β为滤液中的β -环糊精量；C为添加的己二酸的含量。
[0135]此方法中交联的环糊精量为17.78 (gi3_环糊精/g己二酸)。
[0136]2、使用上述交联环糊精去除稀奶油中胆固醇
[0137]新鲜稀奶油标准化脂肪含量为36%，预热至55°C后以20MPa压力进行均质，采用72°C条件杀菌15s，冷却至40°C后，在稀奶油中按照10%的比例加入β-环糊精。将混合物在40°C下进行搅拌，搅拌时间为30min，搅拌速率为3000rpm，然后用蒸馏水将混合物稀释2倍，稀释完成后进行离心排渣，离心速率为lOOOOrpm，离心时间为8min。
[0138]该产品中胆固醇的脱出率为80.94%。
[0139]3、回收β-环糊精
[0140]取一定量排渣得到沉淀物，加入乙酸和异丙醇混合物(两者比例为1:3)，沉淀物与乙酸和异丙醇混合物的比例为3:1，将其用功率为850W的超声波处理8min，然后在50°C下以IOOrpm搅拌2h,冷却至室温后8000rpm下离心5min。β -环糊精的回收率按照以下公式计算:
[0141]回收率(％)=l-a_b/a，其中a为离心后所取沉淀物质量(g)，b为回收的β -环糊精的质量(g)。
[0142]β-环糊精的回收率为97.13%。
[0143]对比例2
[0144]1、β -环糊精和己二酸的交联反应
[0145]将IOOgP -⑶加入至80mL的蒸懼水中，于室温下搅拌90min后，加入6g的己二酸，用IM的氢氧化钠溶液调节pH为10.0，继续将混合物于室温下搅拌60min后加入IM的乙酸溶液调节pH为4。采用whatman2号滤纸过滤溶液,去滤洛用150ml蒸懼水水洗3次，然后将滤渣于65°C烘箱中干燥4h，所得即为β -环糊精和己二酸的交联物，其中whatman2号滤纸过滤后的滤液收集测定其中β_环糊精含量，通过以下公式即可计算出与己二酸发生交联反应的环糊精量:
[0146]交联β-环糊精量(gi3-环糊精/g己二酸)=A_B/C，其中A为添加的β -环糊精的总量，即IOOg ；Β为滤液中的β -环糊精量；C为添加的己二酸的含量。
[0147]此方法中交联的环糊精量为15.18 (gi3_环糊精/g己二酸)。
[0148]2、使用上述交联环糊精去除稀奶油中胆固醇
[0149]新鲜稀奶油标准化脂肪含量为36%，预热至55°C后以20MPa压力进行均质，采用72°C条件杀菌15s，冷却至40°C后，在稀奶油中按照10%的比例加入β-环糊精。将混合物在40°C下进行搅拌，搅拌时间为30min，搅拌速率为300rpm，然后用蒸馏水将混合物稀释2倍，稀释完成后进行离心排渣，离心速率为lOOOOrpm，离心时间为8min。
[0150]该产品中胆固醇的脱出率为87.34%。
[0151]3、回收β-环糊精
[0152]取一定量排渣得到沉淀物，加入乙酸和异丙醇混合物(两者比例为1:3)，沉淀物与乙酸和异丙醇混合物的比例为3:1，将其用功率为1000W的超声波处理8min，然后在50°C下以IOOrpm搅拌2h,冷却至室温后8000rpm下离心5min。β-环糊精的回收率按照以下公式计算:
[0153]回收率(％)=l-a_b/a，其中a为离心后所取沉淀物质量(g)，b为回收的β -环糊精的质量(g)。
[0154]β-环糊精的回收率为98.02%。
[0155]对比例3
[0156]1、环糊精和己二酸的交联反应
[0157]将IOOgP -⑶加入至80mL的蒸懼水中，于室温下搅拌90min后,加入6g的己二酸，用IM的氢氧化钠溶液调节pH为9.0，继续将混合物于室温下搅拌60min后加入IM的乙酸溶液调节pH为4。采用whatman2号滤纸过滤溶液，去滤渣用150ml蒸馏水水洗3次，然后将滤渣于50°C烘箱中干燥7h，所得即为β -环糊精和己二酸的交联物，其中whatman2号滤纸过滤后的滤液收集测定其中环糊精含量，通过以下公式即可计算出与己二酸发生交联反应的β-环糊精量:
[0158]交联β-环糊精量(gi3-环糊精/g己二酸)=A_B/C，其中A为添加的β -环糊精的总量，即IOOg ；Β为滤液中的β -环糊精量；C为添加的己二酸的含量。
[0159]此方法中交联的β-环糊精量为17.28 (gi3_环糊精/g己二酸)。
[0160]2、环糊精和己二酸交联物去除稀奶油中胆固醇[0161]新鲜稀奶油标准化脂肪含量为36%，预热至35°C后以IOMPa压力进行均质，采用72°C条件杀菌15s，冷却至30°C后，在稀奶油中按照5%的比例加入β-环糊精和己二酸交联物。将混合物在25°C下进行搅拌,搅拌时间为3min,搅拌速率为1500rpm,进行离心排洛，离心速率为3000rpm,离心时间为15min。
[0162]该产品中胆固醇的脱出率为86.43%。
[0163]3、回收β-环糊精
[0164]取一定量排渣得到沉淀物，加入乙酸和异丙醇混合物(两者比例为1:3)，沉淀物与乙酸和异丙醇混合物的比例为7:1，将其用超声波1200W处理15min，然后在40°C下以IOOrpm搅拌2h,冷却至室温后8000rpm下离心5min。β -环糊精的回收率按照以下公式计算:
[0165]回收率(％)=l-a_b/a，其中a为离心后所取沉淀物质量(g)，b为回收的β -环糊精的质量(g)。
[0166]β-环糊精的回收率为63.11%。
[0167]对比例4
[0168]1、环糊精和己二酸的交联反应
[0169]将IOOgP -⑶加入至80mL的蒸懼水中，于室温下搅拌120min后，加入6g的己二酸，用IM的氢氧化钠溶液调节pH为9.0，继续将混合物于室温下搅拌90min后加入IM的乙酸溶液调节pH为5。采用whatman2号滤纸过滤溶液,去滤洛用150ml蒸懼水水洗3次,然后将滤渣于50°C烘箱中干燥7h，所得即为β -环糊精和己二酸的交联物，其中whatman2号滤纸过滤后的滤液收集测定其中环糊精含量，通过以下公式即可计算出与己二酸发生交联反应的β-环糊精量:
[0170]交联β-环糊精量(gi3-环糊精/g己二酸)=A_B/C，其中A为添加的β -环糊精的总量，即IOOg ；Β为滤液中的β -环糊精量；C为添加的己二酸的含量。
[0171]此方法中交联的β-环糊精量为16.98 (gi3_环糊精/g己二酸)。
[0172]2、环糊精和己二酸交联物去除稀奶油中胆固醇
[0173]新鲜稀奶油标准化脂肪含量为36%，预热至35°C后以IOMPa压力进行均质，采用72°C条件杀菌15s，冷却至30°C后，在稀奶油中按照5%的比例加入β-环糊精和己二酸交联物。将混合物在25°C下进行搅拌,搅拌时间为3min,搅拌速率为1500rpm,然后用蒸懼水将混合物稀释2倍，稀释完成后进行离心排渣，离心速率为3000rpm，离心时间为15min。
[0174]该产品中胆固醇的脱出率为95.93%。
[0175]3、回收β-环糊精
[0176]取一定量排渣得到沉淀物，加入乙酸和异丙醇混合物(两者比例为1:8)，沉淀物与乙酸和异丙醇混合物的比例为7:1，将其在40°C下以IOOrpm搅拌2h，冷却至室温后8000rpm下离心5min。β -环糊精的回收率按照以下公式计算:
[0177]回收率(％)=l-a_b/a，其中a为离心后所取沉淀物质量(g)，b为回收的β -环糊精的质量(g)。
[0178]β-环糊精的回收率为53.81%。
[0179]效果实施例1
[0180]将实施例3、对比例3和对比例4中回收的β环糊精重新与己二酸交联后进行胆固醇脱除试验，并进行再一次的β-环糊精回收，如此循环反复，则每次β-环糊精的回收率和胆固醇脱除率如表1。
[0181]表1实施例3回收的β-环糊精的胆固醇脱除率
[0182]
【权利要求】
1.一种低胆固醇稀奶油的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤: (1)β-环糊精在己二酸作用下进行交联反应，得交联β-环糊精； (2)将均质、杀菌后的稀奶油在30-50°C下与所述的交联环糊精搅拌混合均匀，所述的搅拌的速度为850-1500rpm ； (3)用水稀释0.5-2倍后，离心、排渣，即可。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的交联反应的过程包括如下步骤:溶胀后的β -环糊精的水溶液，在pH值为8.5~10.5的条件下，室温温度下，在己二酸的作用下，环糊精发生交联反应。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的交联反应的时间为60-180min； 和/或，所述的己二酸的添加量为I~7g己二酸/100g β -环糊精水溶液，较佳地为5.5g/100gi3-环糊精水溶液； 和/或，所述的己二酸和所述的β -环糊精的质量比为100:3~100:7 ； 和/或，调所述的PH值的方式是将Imol/LNaOH溶液或lmol/L KOH溶液加入至溶胀后的β-环糊精水溶液中； 和/或，所述的室温温度为25~30°C ； 和/或，所述的交联反应后进行后处理；所述的后处理为:用lmol/L醋酸溶液调节pH值至4-6、过滤、洗涤、干燥和筛选。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，后处理中，所述的过滤的方式为使用whatman paper2号滤纸进行过滤；和/或，所述的洗漆的方式为用水洗漆1-5次,较佳地为3次,每次用水量为150ml ;和/或,所述的干燥的温度为40-70°C,较佳地为65°C,所述的干燥的时间为4-12h,较佳地为6h ;和/或,所述的筛选的方式为用100目筛子进行筛选。
5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的均质的温度为40-50°C，较佳地为50°C;和/或，所述的均质的压力为10-30Mpa，较佳地为20Mpa ;和/或，所述的杀菌为巴氏杀菌，所述的巴氏杀菌的温度较佳的为72-75°C，所述的巴氏杀菌的时间较佳的为12-18s ； 和/或，步骤(2)中，所述的稀奶油在35-45°C下与所述的交联环糊精搅拌混合均匀，较佳地在40 0C下混合均匀； 和/或，步骤(2)中，所述的交联环糊精与所述的稀奶油的质量体积比例为1-15%(w/v)，较佳地为5-10%，更佳地为8% ； 和/或，步骤(2)中，所述的搅拌的速度为1000-1200rpm，较佳地为1200rpm ； 和/或，步骤(3)中所述的离心的时间为5-10min,较佳地为7min ;所述的离心的速度为 3000-12000rpm，较佳地为 8000_10000rpm。
6.—种如权利要求1-5任一项所述的制备方法制备的低胆固醇稀奶油。
7.—种β_环糊精的回收方法，其特征在于，其包括如下步骤: 将醋酸、异丙醇和吸附胆固醇的交联环糊精混合均匀，经过超声波处理、搅拌、离心，即可。
8.如权利要求7所述的回收方法，其特征在于，所述的醋酸与所述的异丙醇的添加量质量比为1:9~9:1 ; 和/或，所述的醋 酸和异丙醇的总量和所述的吸附胆固醇的交联β-环糊精的质量比为 1:1 ~1:5 ; 和/或，先混合所述的醋酸和异丙醇后再与所述的吸附胆固醇的交联环糊精混合； 和/或，所述的吸附胆固醇的交联β -环糊精为如权利要求1-5任一项所述的制备方法步骤(3)排渣得到的产物； 和/或，所述的超声波处理的功率为800~1500? ;所述的超声波处理的时间为1-1Omin ； 和/或，所述的搅拌的速率为50-150rpm所述的搅拌的温度为40_60°C，；所述的搅拌的时间为l_3h ； 和/或，在所述的搅拌后经过冷却，冷却至25-30°C后，再进行所述的离心； 和/或，所述的离心的速率为3000-10000rpm ;所述的离心的时间为l_6min ； 和/或，所述的离心后排渣得沉淀物，将沉淀物进行干燥；所述的干燥的温度为40-700C ;所述的干燥的时间为4-12h。
9.如权利要求8所述的回收方法，其特征在于，所述的醋酸与所述的异丙醇的添加量质量比为1:3~3:1 ; 和/或，所述的醋酸 和异丙醇的总量和所述的吸附胆固醇的交联β-环糊精的质量比为 1:3 ; 和/或，所述的超声波处理的功率为1000w ;所述的超声波处理的时间为3-8min ； 和/或，所述的搅拌的速率为IOOrpm;所述的搅拌的温度为50°C;所述的搅拌的时间为2h ； 和/或，所述的离心的速率为6000-8000rpm ;所述的离心的时间为5min ； 和/或，所述的干燥的温度为65°C ;所述的干燥的时间为6h。
10.如权利要求9所述的回收方法，其特征在于，所述的醋酸与所述的异丙醇的添加量质量比为I:1 ; 和/或，所述的超声波处理的时间为5min。
【文档编号】A23C13/16GK103891905SQ201410142429
【公开日】2014年7月2日 申请日期:2014年4月10日 优先权日:2014年4月10日
【发明者】孙颜君, 郭本恒, 莫蓓红, 刘振民, 郑远荣, 石春权, 朱培, 焦晶凯, 凌勇飚 申请人:光明乳业股份有限公司