技术领域：本发明属于营养保健食品领域，具体涉及一种复合真菌多糖功能性食品。
背景技术：
：真菌多糖又称多聚糖，是生物有机体内普遍存在的一类生物大分子，不仅参与组织细胞骨架的构成，而且是多种内源性生物活性分子的重要组成成分。有一定的调节机体免疫功能的作用，其作用是多途径、多环节、多靶点的，如促进免疫细胞增殖与分化，分泌各种淋巴因子，调节神经-内分泌-免疫调节网络(NIM)的平衡等。真菌多糖对细胞有着极强的修复作用。服用真菌多糖保健食品，能及时补充细胞间质中缺乏的多糖等物质，使受损的细胞得到及时的修复，达到保持细胞健康、延长细胞寿命、从而实现人体健康的目的。上海医科大学李瑞等试验发现，真菌多糖能显著提高细胞膜的流动性和封闭度，衰老的细胞用真菌多糖培养后，封闭度提高11％，流动性提高32％，细胞膜流动性、封闭性的提高，表明细胞生理功能得到提高。现代科技表明，真菌多糖是食用菌中所含的最重要的药效成分。是一种β-型的多糖，具有广泛的药理活性。灵芝、冬虫夏草、木耳、银耳、香菇、猴头菇、白灵菇、竹黄、云芝、鸡腿蘑、松茸、桑黄等食用菌，都含有真菌多糖。中国发明专利201110407414.2公布了一种具有保健作用的真菌营养液，该营养液以香菇、灰树花、猴头菇、云芝等真菌为主要原料，辅以低聚木糖、异麦芽酮糖醇、牛磺酸、赖氨酸、维生素E、黄原胶和水等营养素加工而成，原料配伍科学，协同作用，具有提高人体免疫力和促进机体胃粘膜损伤修复双功能保健作用。益生菌，是一类对宿主有益的活性微生物，是定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。其广泛应用于生物工程、工农业、食品安全以及生命健康领域。调节肠胃功能紊乱是益生菌最广为人知的功能之一，除此之外，益生菌还具有产生营养物质、抵抗细菌病毒的感染以及预防治疗某些疾病的功能。本发明将提供一种添加有益生菌的复合真菌多糖组合物，兼具真菌多糖提高免疫力的功能以及益生菌的保健功效，改善目前保健品效果单一、复合功能不理想的问题。
技术实现要素：
：为了解决上述问题，本发明提供一种复合真菌多糖功能性食品，由以下重量份数的原料组成：香菇多糖20-50份，灰树花多糖20-50份，牛磺酸1-12份，L-赖氨酸盐酸盐3-25份，低聚木糖2-50份，茶树茶氨酸0.3-4份，麦精10-80份，植物乳杆菌粉剂10-20份。所述香菇多糖的制备方法如下：(1)取香菇子实体，装入有0.3-0.5％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、40KHz清洗5-10min，然后于-21—-25℃冷冻10-30min，立即进行粉碎；(2)粉碎后的香菇与水以1：3-5(m:v)的比例混合，调整温度为40-60℃，pH为5.0-7.0，加入香菇子实体质量0.1-0.3％的纤维素酶酶解1-2.5小时后调整温度到80-95℃保持2-5分钟，调整温度到50℃、随后添加香菇子实体质量0.1-0.3％风味蛋白酶进行酶解,酶解温度40-50℃、pH值6-7，控制温度在90-95℃，酶解时间1-2小时，离心分离获得上清液；(3)上清液减压浓缩得浓缩液，添加浓缩液3倍体积的95％乙醇，4℃下醇析24h，弃去上清液，再加入与初始浓缩液等体积的无水乙醇静置30min后，弃去上清液，沉淀洗涤3次，喷雾干燥，即得香菇多糖；所述香菇子实体粉碎至粒径在0.5mm以下；所述灰树花多糖提取方法同香菇多糖；所述植物乳杆菌粉剂由植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)XH制备，该菌已于2015年11月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)，保藏号为CGMCCNO.11763，保藏地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所，邮编：100101；所述植物乳杆菌粉剂中活菌含量为：7×1012-9×1012cfu/g；所述植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法如下：(1)取斜面上的植物乳杆菌CGMCCNO.11763一环，接入装有50mL培养基MRS(无琼脂)(葡萄糖浓度为150g/L)培养基的250mL三角瓶中，200rpm，37℃培养12-16h，使菌体处于对数生长中期；(2)将对数期的菌种接入发酵培养基中，接种量为10-15％，35-38℃下100-200rpm培养8-12小时，溶氧控制10％(通气0.5L/min)，之后再厌氧培养60-70小时；发酵完毕发酵液静置沉淀、离心得到沉淀物，然后添加沉淀物质量1倍的载体，混合均匀，50℃流化床干燥即得植物乳杆菌粉剂，载体重量组成为：酸奶粉25份，糊精12份。所述发酵培养基组成如下：蛋白胨10-12g，牛肉膏10-12g，酵母膏5-8g，柠檬酸氢二铵2-4g，葡萄糖20-25g，吐温801-2mL，乙酸钠5-7g，磷酸氢二钾2-3g，硫酸镁0.58-0.6g，硫酸锰0.25-0.3g，胆固醇100-120mg，中草药粉剂5-8g，蒸馏水1000mL，pH6.2～6.6；所述胆固醇的添加方法为：先用无水乙醇溶解胆固醇，配制浓度为10-12mg/mL的胆固醇溶液,然后按一定比例添加到培养基中，使胆固醇最终浓度为100-120μg/mL；所述中草药粉剂的制备方法如下：称取五味子10-20份；党参10-15份；山楂10-20份；分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下，然后于容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水，控制温度45-60℃保持2～4h，加入混合酶制剂进行酶解，调节pH值为6-7，酶解2-4h，最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，110W功率下超声萃取0.5～1.5h，过滤；滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药粉剂；所述混合酶添加量为混合物料总重量的5-10％；所述混合酶的重量份数组成为：木聚糖酶15-20份，β-淀粉酶10-15份，果胶酶10-15份，酸性蛋白酶10-15份，酸性磷酸酶5-10份；所述乙醇和丙醇的质量比例为1：1-2。所述复合真菌多糖及其组合物的功能性食品的制备方法为：按本领域常规方法加工为片剂、粉剂、颗粒剂、软胶囊、硬胶囊等，直接服用，也可以作为食品原料使用。有益效果：1、本发明所提供的复合真菌多糖及其组合物的功能性食品中除含有香菇多糖、灰树花多糖外还含有植物乳杆菌CGMCCNO.11763，该菌株①降解亚硝酸盐速度快，分解能力达到10.9mg/h/kg，可有效的分解人们由于饮食不当而摄入的亚硝酸盐；②该菌对胆固醇降解率高，可达到64.76％，尤其适用于肥胖人群及三高患者；③该菌黏附能力高，测定的自凝集率为95.71％，可有效地定植于胃肠道系统中，充分发挥其生理活性作用。2、本发明所提供的植物乳杆菌培养方法中，发酵培养基中添加有中药成分五味子、党参和山楂，这三种重要成分的添加可有效提高植物乳杆菌的耐酸耐胆盐能力，从而提高其在人体肠道中发挥的作用。3、本发明所提供的植物乳杆菌培养方法中，发酵培养基中以可溶性形式添加有胆固醇，发酵完成后可有效提高菌株降解胆固醇的能力。由于本发明提供的产品中添加有所述植物乳杆菌，使得本发明除了具有提高人体免疫力能力外，还具有较好的降解胆固醇的能力。具体实施方式：实施例1：一种复合真菌多糖功能性食品一种复合真菌多糖功能性食品，由以下重量份数的原料组成：香菇多糖20份，灰树花多糖50份，牛磺酸1份，L-赖氨酸盐酸盐3份，低聚木糖2份，茶树茶氨酸0.3份，麦精10份，植物乳杆菌粉剂20份；按照上述配方比例称取各组分，粉碎，过80目筛，然后混合10min，得粉剂。所述香菇多糖的制备方法如下：(1)取香菇子实体，装入有0.3％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、40KHz清洗5min，然后于-21℃冷冻10min，立即进行粉碎；(2)粉碎后的香菇与水以1：3(m:v)的比例混合，调整温度为40℃，pH为5.0，加入香菇子实体质量0.1％的纤维素酶酶解1小时后调整温度到80℃保持2分钟，调整温度到50℃、随后添加香菇子实体质量0.1％风味蛋白酶进行酶解,酶解温度40℃、pH值6，控制温度在90℃，酶解时间1小时，离心分离获得上清液；(3)上清液减压浓缩得浓缩液，添加浓缩液3倍体积的95％乙醇，4℃下醇析24h，弃去上清液，再加入与初始浓缩液等体积的无水乙醇静置30min后，弃去上清液，沉淀洗涤3次，喷雾干燥，即得香菇多糖；所述香菇子实体粉碎至粒径在0.5mm以下；所述灰树花多糖提取方法同香菇多糖；所述植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法如下：(1)取斜面上的植物乳杆菌CGMCCNO.11763一环，接入装有50mL培养基MRS(无琼脂)(葡萄糖浓度为150g/L)培养基的250mL三角瓶中，200rpm，37℃培养12h，使菌体处于对数生长中期；(2)将对数期的菌种接入发酵培养基中，接种量为10％，35℃下100rpm培养8小时，溶氧控制10％(通气0.5L/min)，之后再厌氧培养60小时；发酵完毕发酵液静置沉淀、离心得到沉淀物，然后添加沉淀物质量1倍的载体，混合均匀，50℃流化床干燥即得植物乳杆菌粉剂，载体重量组成为：酸奶粉25份，糊精12份。所述发酵培养基组成如下：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，柠檬酸氢二铵2g，葡萄糖20g，吐温801mL，乙酸钠5g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁0.58g，硫酸锰0.25g，胆固醇100mg，中草药粉剂5g，蒸馏水1000mL，pH6.2；所述胆固醇的添加方法为：先用无水乙醇溶解胆固醇，配制浓度为10mg/mL的胆固醇溶液,然后按一定比例添加到培养基中，使胆固醇最终浓度为100μg/mL；所述中草药粉剂的制备方法如下：称取五味子10份；党参10份；山楂10份；分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下，然后于容器中均匀混合并添加3倍重量的水，控制温度45℃保持2h，加入混合酶制剂进行酶解，调节pH值为6，酶解2h，最后添加混合物料0.5倍重量乙醇和丙醇的混合物，110W功率下超声萃取0.5h，过滤；滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药粉剂；所述混合酶添加量为混合物料总重量的5％；所述混合酶的重量份数组成为：木聚糖酶15份，β-淀粉酶10份，果胶酶10份，酸性蛋白酶10份，酸性磷酸酶5份；所述乙醇和丙醇的质量比例为1：1。实施例2一种复合真菌多糖功能性食品一种复合真菌多糖功能性食品，由以下重量份数的原料组成：香菇多糖50份，灰树花多糖20份，牛磺酸12份，L-赖氨酸盐酸盐25份，低聚木糖50份，茶树茶氨酸4份，麦精80份，植物乳杆菌粉剂10份；按照上述配方比例称取各组分，粉碎，过80目筛，然后混合10min，得粉剂。所述香菇多糖的制备方法如下：(1)取香菇子实体，装入有0.5％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、40KHz清洗5-10min，然后于-25℃冷冻30min，立即进行粉碎；(2)粉碎后的香菇与水以1：5(m:v)的比例混合，调整温度为60℃，pH为7.0，加入香菇子实体质量0.3％的纤维素酶酶解2.5小时后调整温度到95℃保持5分钟，调整温度到50℃、随后添加香菇子实体质量0.3％风味蛋白酶进行酶解,酶解温度50℃、pH值7，控制温度在95℃，酶解时间2小时，离心分离获得上清液；(3)上清液减压浓缩得浓缩液，添加浓缩液3倍体积的95％乙醇，4℃下醇析24h，弃去上清液，再加入与初始浓缩液等体积的无水乙醇静置30min后，弃去上清液，沉淀洗涤3次，喷雾干燥，即得香菇多糖；所述香菇子实体粉碎至粒径在0.5mm以下；所述灰树花多糖提取方法同香菇多糖；所述植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法如下：(1)取斜面上的植物乳杆菌CGMCCNO.11763一环，接入装有50mL培养基MRS(无琼脂)(葡萄糖浓度为150g/L)培养基的250mL三角瓶中，200rpm，37℃培养16h，使菌体处于对数生长中期；(2)将对数期的菌种接入发酵培养基中，接种量为15％，38℃下200rpm培养12小时，溶氧控制10％(通气0.5L/min)，之后再厌氧培养70小时；发酵完毕发酵液静置沉淀、离心得到沉淀物，然后添加沉淀物质量1倍的载体，混合均匀，50℃流化床干燥即得植物乳杆菌粉剂，载体重量组成为：酸奶粉25份，糊精12份。所述发酵培养基组成如下：蛋白胨12g，牛肉膏12g，酵母膏8g，柠檬酸氢二铵4g，葡萄糖25g，吐温802mL，乙酸钠7g，磷酸氢二钾3g，硫酸镁0.6g，硫酸锰0.3g，胆固醇120mg，中草药粉剂8g，蒸馏水1000mL，pH6.6；所述胆固醇的添加方法为：先用无水乙醇溶解胆固醇，配制浓度为12mg/mL的胆固醇溶液,然后按一定比例添加到培养基中，使胆固醇最终浓度为120μg/mL；所述中草药粉剂的制备方法如下：称取五味子20份；党参15份；山楂20份；分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下，然后于容器中均匀混合并添加6倍重量的水，控制温度60℃保持4h，加入混合酶制剂进行酶解，调节pH值为7，酶解4h，最后添加混合物料3倍重量乙醇和丙醇的混合物，110W功率下超声萃取1.5h，过滤；滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药粉剂；所述混合酶添加量为混合物料总重量的10％；所述混合酶的重量份数组成为：木聚糖酶20份，β-淀粉酶15份，果胶酶15份，酸性蛋白酶15份，酸性磷酸酶10份；所述乙醇和丙醇的质量比例为1：2。实施例3：一种复合真菌多糖功能性食品一种复合真菌多糖功能性食品，由以下重量份数的原料组成：香菇多糖35份，灰树花多糖35份，牛磺酸6份，L-赖氨酸盐酸盐15份，低聚木糖35份，茶树茶氨酸2份，麦精40份，植物乳杆菌粉剂15份；按照上述配方比例称取各组分，粉碎，过80目筛，然后混合10min，得粉剂。所述香菇多糖的制备方法如下：(1)取香菇子实体，装入有0.4％碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200W、40KHz清洗5-10min，然后于-23℃冷冻20min，立即进行粉碎；(2)粉碎后的香菇与水以1：4(m:v)的比例混合，调整温度为50℃，pH为6.0，加入香菇子实体质量0.2％的纤维素酶酶解1.5小时后调整温度到85℃保持3分钟，调整温度到50℃、随后添加香菇子实体质量0.2％风味蛋白酶进行酶解,酶解温度45℃、pH值6.5，控制温度在92℃，酶解时间1.5小时，离心分离获得上清液；(3)上清液减压浓缩得浓缩液，添加浓缩液3倍体积的95％乙醇，4℃下醇析24h，弃去上清液，再加入与初始浓缩液等体积的无水乙醇静置30min后，弃去上清液，沉淀洗涤3次，喷雾干燥，即得香菇多糖；所述香菇子实体粉碎至粒径在0.5mm以下；所述灰树花多糖提取方法同香菇多糖；所述植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法如下：(1)取斜面上的植物乳杆菌CGMCCNO.11763一环，接入装有50mL培养基MRS(无琼脂)(葡萄糖浓度为150g/L)培养基的250mL三角瓶中，200rpm，37℃培养12-16h，使菌体处于对数生长中期；(2)将对数期的菌种接入发酵培养基中，接种量为12％，37℃下150rpm培养10小时，溶氧控制10％(通气0.5L/min)，之后再厌氧培养65小时；发酵完毕发酵液静置沉淀、离心得到沉淀物，然后添加沉淀物质量1倍的载体，混合均匀，50℃流化床干燥即得植物乳杆菌粉剂，载体重量组成为：酸奶粉25份，糊精12份。所述发酵培养基组成如下：蛋白胨11g，牛肉膏11g，酵母膏6g，柠檬酸氢二铵3g，葡萄糖22g，吐温801.5mL，乙酸钠6g，磷酸氢二钾2.5g，硫酸镁0.6g，硫酸锰0.25g，胆固醇110mg，中草药粉剂6g，蒸馏水1000mL，pH6.5；所述胆固醇的添加方法为：先用无水乙醇溶解胆固醇，配制浓度为11mg/mL的胆固醇溶液,然后按一定比例添加到培养基中，使胆固醇最终浓度为110μg/mL；所述中草药粉剂的制备方法如下：称取五味子15份；党参12份；山楂15份；分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下，然后于容器中均匀混合并添加5倍重量的水，控制温度50℃保持3h，加入混合酶制剂进行酶解，调节pH值为6.5，酶解3h，最后添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物，110W功率下超声萃取1h，过滤；滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药粉剂；所述混合酶添加量为混合物料总重量的8％；所述混合酶的重量份数组成为：木聚糖酶18份，β-淀粉酶12份，果胶酶12份，酸性蛋白酶12份，酸性磷酸酶8份；所述乙醇和丙醇的质量比例为1：1.5。实施例4效果实验1、植物乳杆菌CGMCCNO.11763的培养(1)取斜面上的植物乳杆菌CGMCCNO.11763一环，接入装有50mL培养基MRS(无琼脂)(葡萄糖浓度为150g/L)培养基的250mL三角瓶中，200rpm，37℃培养12h左右，使菌体处于对数生长中期。(2)将对数期的菌种接入装有发酵培养基的5L发酵罐中。接种量为10％，37℃下100rpm培养8小时，对数前期溶氧控制10％(通气0.5L/min)，后期厌氧培养63小时。发酵培养基：①：蛋白胨11g，牛肉膏11g，酵母膏6g，柠檬酸氢二铵3g，葡萄糖22g，吐温801.5mL，乙酸钠6g，磷酸氢二钾2.5g，硫酸镁0.6g，硫酸锰0.25g，胆固醇110mg，中草药粉剂6g，琼脂18.0g，蒸馏水1000mL，pH6.5；②：删去①中的胆固醇；③：删去①中的中草药粉剂；2、降解胆固醇能力测定步骤1中分别以发酵培养基①和②为发酵培养基完成发酵后，分别取1ml发酵液离心并用无菌水洗涤2遍后重悬于1ml无菌水中，分别接种于10mL的MRS胆固醇液体培养基(胆固醇含量0.1mg/ml,pH6.2)中，37℃的恒温静置分别培养20h、40h、60h备用，取以上培养不同时间的菌液样品各1ml,9000r/min，4℃下离心10min，得到发酵上清液，邻苯二甲醛法测定上清液中胆固醇含量(具体为：取各上清液0.1ml于相应的试管中,加冰醋酸0.3ml,1mg/ml的邻苯二甲醛0.15ml，缓缓加入浓硫酸1.0ml，混合均匀。室温静置10min，于550nm下测吸光值)。每一处理3个重复，以同样方法制作胆固醇标准曲线，计算上清液中胆固醇含量及降解率,结果见表1。可知，CGMCCNO.11763对胆固醇有很好的降解作用，60h小时后，降解率可达到64.76％。并且，添加有胆固醇的培养基所培养出的CGMCCNO.11763降解胆固醇的能力显著提高。表1对胆固醇的降解情况。3、耐胆盐实验步骤1中分别以发酵培养基①和③为发酵培养基完成发酵后，分别取1ml发酵液离心并用无菌水洗涤2遍后重悬于1ml无菌水中，分别接种于含有不同胆盐(含量梯度为0.0％、0.4％、0.6％、1％)的10mLMRS液体培养基(pH＝6.4)，置于37℃下分别培养0、2、4h，每个处理3个重复。各取1ml样品菌液于9ml生理盐水中混匀，制备稀释度溶液，取0.1ml稀释液于MRS中涂布，于37℃生化培养箱中倒置培养48小时(每个稀释度做3个平行)记录计算平板上的菌数个数。结果见表2。可知该菌在胆盐浓度为1％处理4h后菌的生长量依然达到0.51±0.92×107(cfu/ml)，有很好的耐胆盐能力，而采用添加有中草药成分的培养基，其耐胆盐能力有效提高。表2耐胆盐能力检测(×107cfu/ml)4、耐酸实验步骤1中分别以发酵培养基①和③为发酵培养基完成发酵后，分别取1ml发酵液离心并用无菌水洗涤2遍后重悬于1ml无菌水中，分别接种于不同pH值(pH梯度为1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0)的10mLMRS液体培养基，置于37℃下分别培养0、2、4h，每一处理3个重复。各取1ml样品菌液于9ml生理盐水中混匀，制备稀释溶液，取0.1ml稀释液于MRS中涂布，于37℃生化培养箱中倒置培养48小时(每个稀释度做3个平行)记录平板上的菌落个数。结果见表3。说明该菌具有很强的耐酸能力，且添加有中草药成份的培养基能有效提高该菌的耐酸性。表3耐酸能力检测(×107cfu/ml)5、亚硝酸盐分解实验步骤1中以①培养基，发酵过程中根据亚硝酸盐的消耗速率流加20g/L的亚硝酸钠溶液，培养2-3天。发酵结束后，计算发酵过程植物乳杆菌CGMCCNO.11763对亚硝酸钠的降解速率。结果发现：在该条件下，XH对亚硝酸钠的降解速率可以达到653mg/h/L。6、黏附能力测定培养CGMCCNO.11763(MRS液体培养基)、大肠杆菌DH5α(LB液体培养基)24h得发酵液，分别置于3000r/min、4℃下离心10min，收集菌泥，分别用pH＝7.0的无菌磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤菌泥2次(即在菌落中加入PBS，震荡混合均匀后，置于3000r/min、4℃下离心10min，收集菌体)。自凝集率(％)：用无菌的PBS将菌泥CGMCCNO.11763制成在波长600nm处的吸光值为0.4±0.1(A0)的悬浮菌液及菌悬液,静置24h后测定吸光值A24，自凝集率(％)公式为(A0—A24)/A0。；凝集率(％)：将CGMCCNO.11763和大肠杆菌DH5α的悬菌液调节成在波长600nm处的吸光值为0.6±0.1(A0)的混合悬浮菌液。静置24h后测定吸光值A24，凝集率(％)公式为(A0—A24)/A0。测定结果见表5，可知CGMCCNO.11763的自凝集率为95.71％，有很强的黏附能力。表5黏附能力表实施例5本发明具有改善胃肠功能的营养保健食品的益生性试验将本发明实施例3制备的产品，用无菌水制备成活菌数为2×1010CFU/mL的益生菌溶液，于4℃保存备用；1、模拟胃液及肠液的耐受试验：取100g/L的盐酸16.4mL加蒸馏水稀释，使pH值分别为1.5、2.5和3.5，取100mL稀盐酸溶液，分别加入1g胃蛋白酶，使其充分溶解，得模拟胃液，微孔滤膜除菌(0.22μm)备用。取磷酸二氢钾6.8g，加水500mL使溶解，用0.1moL/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰蛋白酶10g，加水100mL使溶解，将两液混合后，加水稀释至1000ml，得模拟肠液，微孔滤膜除菌(0.22μm)备用。取1mL保存好的益生菌溶液加入到9mL的模拟胃液中(即十倍逐级稀释)，并迅速在振荡器上充分混匀，然后置于30-45℃静置培养2-4h。分别在1h、2h、3h、4h的时候取出培养液并立即计数残存活菌数，与原活菌数进行比较，结果表明，活菌存活率为97％。然后取在人工胃液中消化不同时间的培养液各1mL，分别接种于9mLpH值为6.8的人工肠液中，置于30-45℃静置培养2-4h，并分别在0、3、6、24h取样，测定其活菌数，与原活菌数进行比较，结果表明活菌存活率为99％。2、模拟胆盐的耐受试验：用胰液素制成1g/L的溶液，并在溶液中加入0.8％的猪胆盐，用10％的NaOH调整pH为8.0，然后用0.45μm微滤膜过滤并除菌。将0.5mL保存好的益生菌溶液接种到4.5mL模拟胆盐中，培养24h后得到培养液，计数残存的活菌数。将培养液在灭菌生理盐水中十倍逐级稀释至10-8，并用MRS倾注，然后置于35℃静置培养24h。结果表明活菌存活率为99％。以上试验结果表明，本发明营养保健食品中的益生菌益生性(耐pH性、耐胆盐)较强，非常适合人体胃肠环境，在模拟胃肠环境中存活率大，可有效改善胃肠功能。需要说明的是：本发明实施例1-3制备的营养保健食品同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。实施例7本发明对降胆固醇效果实验1.实验材料1.1实验动物及饲料昆明种小鼠，♂性，体重(20±2)g，由广州中医药大学实验动物中心提供；普通饲料为市售小鼠饲料；高脂饲料由为60％普通饲料+10％猪油+10％奶粉+10％蛋黄粉+7％白糖+2％花生+0.5％盐+0.5％麻油；1.2试剂总胆固醇试剂盒(TCH，浙江东欧诊断产品有限公司)饲喂试剂配置：样品液：2g实施例3产品加入50mL超纯水，振荡混匀，即得；对照液：纯水；2.方法2.1小鼠的分组与饲养小鼠适应性喂养5天后，随机分为2组：空白组、实验组，每组20只；饲喂75天；空白组：高脂饲料，给纯水，体积与样品液溶液体积相同；实验组：高脂饲料，给样品液800mg/kg.d；末次给药后，禁食不禁水12小时，眼眶取血制备血清，依试剂盒说明书方法测定总胆固醇(TC)；实验结果如下：组别实验前75天空白组2.32±0.253.15+0.32实验组2.33±0.152.39+0.27由实验结果可知，实验前后，实验组和对照组小鼠血清中胆固醇差异显著，本发明所述产品对降低血清中胆固醇含量具有明显的效果。