本发明涉及动物健康养殖技术领域，具体涉及缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方、使用方法、应用及饲料。
背景技术：
随着水产养殖及饲料工业的发展，饲料蛋白资源的短缺已成为世界普遍存在的问题，成为水产养殖业发展的严重制约因子之一。
棉粕是我主产的植物蛋白源之一。棉籽经过压榨后得出的面饼，再经过浸出工艺将里面的大部分残油分离出来，得到该产品。与豆粕等原料相比较：棉粕含有的粗蛋白可达40％，甚至高至44％，与豆粕的粗蛋白质含量不相上下；同时棉粕的价格较豆粕低廉，来源广泛，我国的棉粕产量高，年产量为1200万吨以上。由于鱼类的特殊生理特点，使得棉粕成为鱼类饲料重要的优质廉价的蛋白质饲料源。但棉粕中含有的棉酚对养殖鱼类动物有害，严重限制其在鱼类饲料中使用。
最新研究表明：棉酚是诱导鱼类肠炎发生的重要原因之一，其特征表现为：肠道上皮细胞空泡化，皱襞两侧上皮细胞脱落，皱襞顶端变平，严重影响鱼类营养物质的消化吸收和生长。
且鱼肠炎是我国草鱼等主要养殖鱼类的常见疾病之一。鱼类肠炎的致死率通常在50％，有时甚至高达90％，是危害严重的淡水养殖鱼类疾病，每年造成数亿人民币的经济损失。
基于此，研究并设计缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方、使用方法、应用及饲料。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是：提供缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方、使用方法、饲料，可有效预防棉酚诱导鱼肠炎的发生，提高鱼类生长速度、疾病抵抗能力。
本发明的另一目的在于：提供缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方的应用，可广泛应用于淡水养殖鱼类。
本发明解决上述技术问题采用的技术方案，缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方，由以下重量份的组分组成：锌0.0046-0.0081份，亮氨酸1.24-1.87份，叶酸0.00013-0.00019份。
优选，所述缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方，由以下重量份的组分组成，锌0.0052-0.0073份，亮氨酸1.33-1.67份，叶酸0.00014-0.00018份。
优选，所述缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方，由以下重量份的组分组成，锌0.0065份，亮氨酸1.65份，叶酸0.00015份。
优选，所述缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方，由以下重量份的组分组成，锌0.0046份，亮氨酸1.24份，叶酸0.00013份。
优选，所述缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方，由以下重量份的组分组成，锌0.0081份，亮氨酸1.87份，叶酸0.00019份。
其中，微量元素锌是鱼类必需的矿物营养素，是碳酸酐酶、碱性磷酸酶、谷氨酸脱氢酶等许多酶的成分或激活剂，对维持细胞膜的结构及功能的功能非常关键。本发明人经过多次试验发现，添加适量锌可提高鱼类肌肉钙含量和胶原蛋白含量，可提高鱼肌肉的保水性，可有效改善肉品质、口感。锌能有效缓解棉酚诱导的鱼肠上皮细胞空泡化的发生。
其中，亮氨酸能促进鱼的头肾生长发育，增强头肾抗氧化能力，提高白细胞数量，增强白细胞吞噬能力，提高先天性免疫能力和获得性免疫能力，保障鱼体健康，减少发病率和用药量。锌能有效缓解棉酚诱导的鱼肠道皱襞两侧上细胞脱落的发生。
其中，叶酸是鱼必需的水溶性维生素，以四氢叶酸的形式参与一碳单位转移，参与蛋白质、核酸的合成和氨基酸代谢。适宜的叶酸可提高鱼的头肾和脾脏的抗氧化能力，促进头肾和脾脏的生长发育，提高白细胞的数量，增强白细胞吞噬能力，以增强鱼体抵抗棉酚诱导产生的鱼肠炎，效缓解棉酚诱导的鱼肠皱襞顶端平化的发生。
本发明技术方案中，将组分磷，异亮氨酸，叶酸三个营养组方以特定的比例混合后作为缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方，对于本领域技术人员而言组方中组分的选择和配比的要求非常严格，要解决棉酚诱导鱼肠炎导致鱼肠道上皮细胞空泡化，皱襞两侧上皮细胞脱落，皱襞顶端变平，影响鱼类营养物质的消化吸收和生长的问题，就需要找到解决该技术问题的具体组分、及组方的具体配比，对于组方的组成成分和各成分的用量比例的变化，对产品的预防棉酚诱导鱼肠炎肠道上皮空泡化、皱襞两侧上皮细胞脱落，皱襞顶端变平，改善鱼类生产性能，促进肠道生长发育，提高肌肉品质和病菌缓解能力等技术效果上会产生很大差异。其中组分增加或者某一种组分的用量比例发生变化，所相应的其他组分的用量或辅料也会发生不可预知的变化，因此对于营养组方中的组成成分和各成分的用量比例的变化后能够达到预防由于棉酚诱导鱼肠炎的发生，降低肠道上皮空泡化，皱襞上皮细胞脱落和皱襞顶端变平的发生率等技术效果的技术方案，并不是本领域的技术人员通过有限次实验或者简答的推理就能够得出的。
本发明所述营养组方能有效缓解棉酚诱导养殖鱼类肠炎的发生，肠道上皮的空泡化，皱襞两侧上皮细胞的脱落和皱襞顶端变平的发生率较未使用该营养组方的情况分别降低91.6％、87.0％和91.5％以上。
本发明解决上述技术问题采用的技术方案，一种缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方的使用方法，将上述比例的营养组方加入到基础饲料中。
优选，所述营养组方与基础饲料的重量比为1.2：98.8-1.9：98.1，即得实验饲料。
优选，将实验饲料搅拌、混合、制粒，颗粒直径2—5mm，每日按2.5—5.5wt％鱼体重的量饲喂，饲喂50—60天，每日饲喂3—4次。
其中，基础饲料可为含250mg/kg棉酚的实验饲料，主要成分为鱼粉、大豆浓缩蛋白、大米蛋白粉、玉米淀粉和α-淀粉。基础饲料也可为如鱼粉、肉粉、豆粕、菜粕、棉粕、次粉、鱼油、豆油、麦麸、米糠等，为本领域技术技术人员所公知。
基础饲料可通过包括但不限于申请号CN2016102763586制备获得，按照上述使用方法饲喂鱼类，营养组方发挥良好的缓解棉酚诱导鱼肠炎的效果。
实验饲料经制粒获得后，可置于4℃温度中保存备用。
本发明解决上述技术问题采用的技术方案，一种缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方的应用，所述营养组方应用于淡水养殖的鲤科鱼类。
本发明所述的缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方及含有该营养组方的饲料可适用于草鱼、鲤鱼等淡水养殖鱼类，尤其适用于草鱼。
本发明解决上述技术问题采用的技术方案，一种含有缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方的饲料，优选，100重量份的饲料中，含有1.2-1.9wt％的营养组方，该处饲料又称鱼饲料或实验饲料。
本发明与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果：
(1)本发明所述缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方，可有效预防由于棉酚诱导鱼肠炎的发生，肠道上皮的空泡化，皱襞两侧上皮细胞的脱落和皱襞顶端变平的发生率较未使用该营养组方的情况91.6％、87.0％和91.5％以上。
(2)本发明所述缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方及含有该营养组方的鱼饲料，提供鱼类生长必需的氨基酸、微量元素，可提高鱼类的生长速度、肌肉品质、疾病缓解能力，同时具有操作方便、成本低等优势。
(3)本发明所述的营养组方的使用方法，严格根据鱼类的生长周期，鱼类的食用量、鱼类生长周期内食用的棉酚对鱼肠炎的诱导情况等因素科学饲养，提高鱼类生长性能，肠道生长发育性能、免疫能力，且饲养方法操作性强。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例，对本发明作进一步的详细说明，本发明的示意性实施方式及其说明仅用于解释本发明，并不作为对本发明的限定。
本实施例中所述的性能测试为本领域技术人员采用的常规测试方法。
实施例1：
缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方，按照重量份数计，取锌0.0065份，亮氨酸1.65份，叶酸0.00015份，混合后制得营养组方S1。
为了便于说明本实施例中S1的应用效果，按照申请号CN2016102763586所述方法建立鱼肠炎模型，将223-232g的生长中期草鱼192尾作为建立肠炎模型的对象，随机分为2个处理组，每组3个重复，每个重复32尾鱼，组间初始体重无显著差异。试验组的日粮为含有规定比例营养组方的鱼饲料，对照组的日粮为不添加营养组方的相同重量的鱼饲料。对照组和试验组中的基础饲料成分相同。
将营养组方S1加入到基础饲料中，即实验饲料D1，基础饲料的制备方法可采用CN2016102763586获得，具体地，基础饲料含棉酚，主要成分为鱼粉、大豆浓缩蛋白、大米蛋白粉、玉米淀粉和α-淀粉。实验饲料是在基础饲料中添加1.7wt％的本发明营养组方，制粒，颗粒直径为5mm，置于4℃冰箱中保存备用。
将选择的草鱼饲养在1立方米的网箱中，分别投喂上述制备的饲料，将实验饲料搅拌、混合、制粒，颗粒直径2—5mm，每日按1.7wt％鱼体重的量饲喂，饲喂60天，每日饲喂3—4次。
对实施例1中添加缓解棉酚诱导鱼肠炎的营养组方处理的鱼采用腹腔注射嗜水气单胞菌的方式进行攻毒，以检测鱼肠道、脾脏和头肾免疫和病菌缓解能力，测定相关指标，并记录在表1中。
实施例2：
按照重量份数计，锌0.0046份，亮氨酸1.24份，叶酸0.00013份，混合后制得营养组方S2。
其余操作方法与实施例1相同，其鱼肠道、脾脏和头肾免疫和病菌缓解能力检测数据记录在表1中。
实施例3：
取锌0.0081份，亮氨酸1.87份，叶酸0.00019份，混合后制得营养组方S3。
其余操作方法与实施例1相同，其鱼肠道、脾脏和头肾免疫和病菌缓解能力检测数据记录在表1中。
对比实施例1：
按照重量份数计，锌0.0043份，亮氨酸1.21份，叶酸0.00012份，混合后制得营养组方DS1。
其余操作方法与实施例1相同，其鱼肠道、脾脏和头肾免疫和病菌缓解能力检测数据记录在表1中。
对比实施例2：
按照重量份数计，取锌0.0082份，亮氨酸1.88份，叶酸0.00021份，混合后制得营养组方DS2。
其余操作方法与实施例1相同，其鱼肠道、脾脏和头肾免疫和病菌缓解能力检测数据记录在表1中。
上述实施例1-3，对比实施例1、2与实施例1采用相同的方式进行试验，S1、S2、S3、DS1、DS2营养组方添加量为鱼饲料总量1.7wt％，1.2wt％、1.9wt％、2.2wt％、1.3wt％，实施例1中按照添加1.7wt％营养组方的饲料进行饲养，实施例2—3，对比实施例1和2的饲养时间相同。分别测试实施例1-3，对比实施例1、2中的各项数据列于结果如表1所示。
表1
从上表1中可以看出，相对于对照组即对比实施例1-2，采用本发明所述配方的营养组方喂食养殖鱼后，均能有效抵抗棉酚诱导养殖鱼类肠炎发生，实验组即实施例1-3，鱼肠道上皮细胞空泡化，皱襞两侧上皮细胞脱落，皱襞顶端变平的发生率均较对照组及对比组即对比实施例2-3中鱼有大幅下降，肠道上皮的空泡化，皱襞两侧上皮细胞的脱落和皱襞顶端变平的发生率分别降低91.6％、87.0％和91.5％以上。
而且，通过实施例1-3与对比实施例1-2相对比，可以看出，组成营养组方的各营养物质的含量对于养殖鱼缓解棉酚诱导肠炎发生的影响很大，采用在本发明所述范围内的营养组方饲喂的养殖鱼能有效抵抗棉酚诱导鱼肠炎发生，而采用不在本发明所述范围内的营养组方饲喂的养殖鱼的有效抵抗棉酚诱导鱼肠炎发生的效果改善不明显，甚至于还可能较未采用营养组方饲喂的养殖鱼的抵抗棉酚诱导鱼肠炎发生的效果还差，对比例1-2的养殖鱼的肠道上皮的空泡化，皱襞两侧上皮细胞的脱落和皱襞顶端变平的发生率达到93.2％、67.5％和78.4％以上。
综上，本发明所述的营养组方及含有该组方的饲料均能有效抵抗芥酸诱导鱼肠炎发生，肠道上皮的空泡化，皱襞两侧上皮细胞的脱落和皱襞顶端变平的发生率分别降低91.6％、87.0％和91.5％以上，保障了肠道的健康；同时改善鱼类生产性能，促进肠道生长发育，提高肌肉品质和病菌抵抗能力。具有使用方便、成本低等优点。
以上所述的具体实施方式，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施方式而已，并不用于限定本发明的保护范围，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。