本发明涉及一种降低肉胆固醇含量的饲料添加剂，尤其涉及降低猪肉胆固醇含量饲料添加剂，本发明进一步涉及所述饲料添加剂的制备方法，属于猪饲料的添加剂领域。
背景技术：
猪肉是中国人的主要肉食来源，深受人们的喜爱，然而现在的普通猪肉胆固醇都比较高。胆固醇含量过高易引发肾脏、血管、心脏、骨质疏松等疾病，因此人们对于猪肉中胆固醇含量的要求越来越高。在传统猪的养殖中，抗生素、激素、防腐剂等药物在饲料中的使用对降低胆固醇含量具有一定的作用，但随着公众生活水平的提高，追求绿色、安全、健康的生活理念己经深入人心，当下，绿色食品正以其独有的魅力受到越来越多的人的青睐，生产绿色、安全、无药物残留的食品成为食品业的发展趋势，而生产出健康的猪肉也必将是养殖业的发展方向。
现阶段，益生素和中药的使用因安全无毒、无蓄积残留、无引进潜在致病菌危害，无环境污染、无抗药性等特点，在养殖业上受到广泛重视。因此，研制一种有效降低肉中胆固醇含量的中药益生菌饲料添加剂，对于禽畜的健康发展具有重要意义。
技术实现要素：
本发明的目的之一是提供能降低禽畜肉中胆固醇含量的中药益生菌饲料添加剂，该饲料添加剂具有不含抗生素，制备工艺简单，原料来源广泛，无药物残留等优势。
本发明的目的之二是提供所述饲料添加剂的制备方法。
本发明的目的之三是将所述饲料添加剂在降低肉胆固醇含量的禽畜养殖中的应用。
为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：
本发明公开了一种降低禽畜肉中胆固醇含量的饲料添加剂，包括以下组分：蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂。
优选的，各组分的重量份为：蜡状芽孢杆菌菌剂10-18份、乳链球菌菌剂5-12份、米曲霉菌剂3-7份；
更优选的，各组分的重量份为：蜡状芽孢杆菌菌剂14份、乳链球菌菌剂8份、米曲霉菌剂5份。
其中，所述各组分的活菌含量为：蜡状芽孢杆菌为2.5×1010-3.5×1010cfu/g、乳链球菌为1.5×1010-4.5×1010cfu/g、米曲霉为1.0×1010-3.0×1010cfu/g；优选的为蜡状芽孢杆菌为3.0×1010cfu/g、乳链球菌为2.5×1010cfu/g、米曲霉为2.0×1010cfu/g。
本发明对饲料添加剂的组分进行了筛选试验。首先将蜡状芽孢杆菌菌剂、凝结芽孢杆菌菌剂、枯草芽孢杆菌菌剂、地衣芽孢杆菌菌剂、纳豆芽孢杆菌菌剂四个菌剂分别制成饲料添加剂，以8％的比例添加到基础日粮中，饲喂三个月后，屠宰，测猪肉中的胆固醇含量，结果表明由蜡状芽孢杆菌菌剂制备得到的饲料添加剂，猪肉的胆固醇含量为55.2mg/100g，明显低于无饲料添加剂组和其他菌剂制备的饲料添加剂；然后将将蜡状芽孢杆菌菌剂分别与乳链球菌菌剂、嗜热链球菌菌剂、粪链球菌菌剂、乳酸链球菌菌剂一起制成饲料添加剂，以8％的比例添加到基础日粮中，饲喂三个月后，屠宰，测猪肉中的胆固醇含量，结果表明由蜡状芽孢杆菌菌剂和乳链球菌菌剂制备得到的饲料添加剂，猪肉的胆固醇含量为50.6mg/100g，明显低于无饲料添加剂组和其他菌剂制备的饲料添加剂；最后，将蜡状芽孢杆菌菌剂和乳链球菌菌剂分别与米曲霉菌剂、黑曲霉菌剂一起制成饲料添加剂，以8％的比例添加到基础日粮中，饲喂三个月后，屠宰，测猪肉中的胆固醇含量，结果表明由蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂制成的饲料添加剂，猪肉的胆固醇含量为44.3mg/100g，明显低于无饲料添加剂组和其他菌剂制备的饲料添加剂，且无饲料添加剂组和其他饲料添加剂组间无显著性的差异。以上结果表明将蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂制备得到的饲料添加剂能有效提升猪肉的质量，可显著的降低猪肉的胆固醇含量。
在此基础上，本发明通过三因素三水平的益生菌剂量确定试验，确定了该饲料添加剂各组分的最佳用量：蜡状芽孢杆菌菌剂14份、乳链球菌菌剂8份、米曲霉菌剂5份。
本发明也公开了上述饲料添加剂的制备方法，包括：(1)将蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂分别与辅料进行混合制备得到蜡状芽孢杆菌菌剂预混剂、乳链球菌菌剂预混剂和米曲霉菌剂预混剂；
(2)将蜡状芽孢杆菌菌剂预混剂、乳链球菌菌剂预混剂和米曲霉菌剂预混剂混匀，即得；
其中，所述的辅料为淀粉与寡聚糖或果聚糖任意一种或两种的混合物；菌剂与辅料的质量比均为1:5-15，优选的为1:10。
本发明进一步公开了一种降低禽畜肉中胆固醇含量的饲料添加剂，包括以下组分：蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂、米曲霉菌剂、苋实和羊蹄草。
优选的，各组分的重量份为：蜡状芽孢杆菌菌剂10-18份、乳链球菌菌剂5-12份、米曲霉菌剂3-7份、苋实7-12份、羊蹄草4-8份；
更优选的，各组分的重量分为蜡状芽孢杆菌菌剂14份、乳链球菌菌剂8份、米曲霉菌剂5份、苋实9份、羊蹄草6份；
其中，所述各组分的活菌含量为：蜡状芽孢杆菌为2.5×1010-3.5×1010cfu/g、乳链球菌为1.5×1010-4.5×1010cfu/g、米曲霉为1.0×1010-3.0×1010cfu/g；优选的为蜡状芽孢杆菌为3.0×1010cfu/g、乳链球菌为2.5×1010cfu/g、米曲霉为2.0×1010cfu/g。
苋实为苋科植物苋的种子。性味：甘，寒。功能主治：清肝明目，通利二便。治青盲翳障，目雾不明，乳糜血尿，二便不利。
羊蹄草为菊科植物一点红的全草或带根全草。性味：苦，凉。功能主治：清热，利水，凉血，解毒。治痢疾，腹泻，便血，水肿，肠痈，聘耳，目亦，喉蛾，疔疮，肿毒。
本发明为提高饲料添加剂的效果，在含有蜡状芽孢杆菌菌剂14份、乳链球菌菌剂8份、米曲霉菌剂5份的饲料添加剂中添加了中药组分。具体为：在蜡状芽孢杆菌菌剂14份、乳链球菌菌剂8份、米曲霉菌剂5份基础上，分别添加(1)苋实9kg、茯苓6kg；(2)苋实9kg、虎杖6kg；(3)苋实9kg、黄芪6kg；(4)苋实9kg、白芍6kg；(5)苋实9kg、陈皮6kg；(6)茯苓9kg、羊蹄草6kg；(7)虎杖9kg、羊蹄草6kg；(8)黄芪9kg、羊蹄草6kg；(9)白芍9kg、羊蹄草6kg；(10)陈皮9kg、羊蹄草6kg；(11)苋实9kg、羊蹄草6kg，制成饲料添加剂。结果表明在蜡状芽孢杆菌菌剂14份、乳链球菌菌剂8份、米曲霉菌剂5份基础上添加苋实9份、羊蹄草6份的饲料添加剂12能显著降低猪肉中胆固醇的含量，达到了26.8mg/100g。以上说明蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂、米曲霉菌剂与苋实、羊蹄草之间具有显著的协同增效作用，将其配伍在一起能提高猪肉的品质，显著降低猪肉中的胆固醇含量。相比之下，将蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂、米曲霉菌剂与其它几种药物配伍在一起后，对猪肉中的胆固醇含量影响不大。
本发明还公开了上述饲料添加剂的制备方法，包括：
(1)将蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂分别与辅料进行混合制备得到蜡状芽孢杆菌菌剂预混剂、乳链球菌菌剂预混剂和米曲霉菌剂预混剂；
(2)将苋实、羊蹄草粉碎得苋实粉末、羊蹄草粉末；
(3)将蜡状芽孢杆菌菌剂预混剂、乳链球菌菌剂预混剂和米曲霉菌剂预混剂、苋实粉末、羊蹄草粉末混匀，即得。
其中，所述的辅料为淀粉与寡聚糖或果聚糖任意一种或两种的混合物。所述的辅料为淀粉与寡聚糖或果聚糖任意一种或两种的混合物；菌剂与辅料的质量比均为1:5-15，优选的为1:10。
本发明进一步又公开了所述饲料添加剂在促进禽畜生长、增强抗病性中的应用，其中，所述禽畜，包括鸡、鸭、猪、牛、羊或马；优选的为猪。
本发明所述菌剂均按照商业途径所提供的菌剂培养方式进行培养获得。
本发明技术方案与现有技术相比，具有以下有益效果：
本发明饲料添加剂中不含抗生素，制备工艺简单，原料来源广泛，成本低，经济实用，无残留、无毒副作用；能有效改善肉的品质，降低猪肉中的胆固醇含量。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但是应理解所述实施例仅是范例性的，不对本发明的范围构成限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
1、菌种来源
蜡状芽孢杆菌菌剂：ACCC03002购自中国农业微生物菌种保藏中心；
乳链球菌菌剂：ACCC11048购自中国农业微生物菌种保藏中心；
米曲霉菌剂：CGMCC NO.3.4437购自中国普通微生物菌种保藏管理中心。
本发明所用到的菌剂均按照购买菌种时所给出的方法(培养基的种类以及扩增方法)制备得到(均能从商业途径购买得到)。
实施例1 饲料添加剂的制备
(1)称取各组分：蜡状芽孢杆菌菌剂10kg、乳链球菌菌剂5kg、米曲霉菌剂3kg；
(2)将蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂分别与辅料进行混合制备得到蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂预混剂，其中，所用辅料为淀粉与寡聚糖的混合物，菌剂与辅料的质量比均为1:5；
(3)将上述制备的菌剂预混剂，混合均匀，即得。
实施例2 饲料添加剂的制备
(1)称取各组分：蜡状芽孢杆菌菌剂18kg、乳链球菌菌剂12kg、米曲霉菌剂7kg；
(2)将蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂分别与辅料进行混合制备得到蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂预混剂，其中，所用辅料为淀粉与果聚糖的混合物，菌剂与辅料的质量比均为1:15；
(3)将上述制备的菌剂预混剂，混合均匀，即得。
实施例3 饲料添加剂的制备
(1)称取各组分：蜡状芽孢杆菌菌剂14kg、乳链球菌菌剂8kg、米曲霉菌剂5kg；
(2)将蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂分别与辅料进行混合制备得到蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂预混剂，其中，所用辅料为淀粉与寡聚糖的混合物，菌剂与辅料的质量比均为1:10；
(3)将上述制备的菌剂预混剂，混合均匀，即得。
实施例4 饲料添加剂的制备；
(1)称取各组分：蜡状芽孢杆菌菌剂10kg、乳链球菌菌剂5kg、米曲霉菌剂3kg、苋实7kg、羊蹄草4kg；
(2)将蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂分别与辅料进行混合制备得到蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂预混剂，其中，所用辅料为淀粉与果聚糖的混合物，菌剂与辅料的质量比均为1:5；
(3)将苋实、羊蹄草进行粉碎，得到苋实粉末、羊蹄草粉末；
(4)将上述制备的菌剂预混剂和苋实粉末、羊蹄草粉末，混合均匀，即得。
实施例5 饲料添加剂的制备
(1)称取各组分：蜡状芽孢杆菌菌剂18kg、乳链球菌菌剂12kg、米曲霉菌剂7kg、苋实12kg、羊蹄草8kg；
(2)将蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂分别与辅料进行混合制备得到蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂预混剂，其中，所用辅料为淀粉与果聚糖的混合物，菌剂与辅料的质量比均为1:15；
(3)将苋实、羊蹄草进行粉碎，得到苋实粉末、羊蹄草粉末；
(4)将上述制备的菌剂预混剂和苋实粉末、羊蹄草粉末，混合均匀，即得。
实施例6 饲料添加剂的制备
(1)称取各组分：蜡状芽孢杆菌菌剂14kg、乳链球菌菌剂8kg、米曲霉菌剂5kg、苋实9kg、羊蹄草6kg；
(2)将蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂分别与辅料进行混合制备得到蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂预混剂，其中，所用辅料为淀粉与果聚糖的混合物，菌剂与辅料的质量比均为1:10；
(3)将苋实、羊蹄草进行粉碎，得到苋实粉末、羊蹄草粉末；
(4)将上述制备的菌剂预混剂和苋实粉末、羊蹄草粉末，混合均匀，即得。
实验例1 饲料添加剂的益生菌组分筛选实验
1、实验方法
1.1 单一组分筛选
将(1)蜡状芽孢杆菌菌剂、(2)凝结芽孢杆菌菌剂、(3)枯草芽孢杆菌菌剂、(4)地衣芽孢杆菌菌剂、(5)纳豆芽孢杆菌菌剂分别与辅料制备得到5种饲料添加剂，其中，所用辅料为淀粉与寡聚糖的混合物，菌剂与辅料的质量比均为1:10。选择日龄接近、体重相近、健康状况良好仔猪240头，采用完全随机试验设计，分为6组，每组40头。将制备得到的饲料添加剂以8％的比例添加到猪的基础日粮中，分别饲喂上述仔猪，其中一组作为对照只饲喂基础日粮，待饲喂3个月后，屠宰，测定猪肉中的胆固醇含量。
1.2 两两复合组分筛选
将蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂、嗜热链球菌菌剂、粪链球菌菌剂、乳酸链球菌菌剂分别与辅料制备得到菌剂预混剂，其中，所用辅料为淀粉与寡聚糖的混合物，菌剂与辅料的质量比均为1:10，然后将蜡状芽孢杆菌菌剂预混剂分别与(1)乳链球菌菌剂、(2)嗜热链球菌菌剂、(3)粪链球菌菌剂、(4)乳酸链球菌菌剂的预混剂以1:1的比例混合制成饲料添加剂，选择日龄接近、体重相近、健康状况良好仔猪200头，采用完全随机试验设计，分为5组，每组40头。将制备得到的饲料添加剂以8％的比例添加到猪的基础日粮中，分别饲喂上述仔猪，其中一组作为对照只饲喂基础日粮，待饲喂3个月后，屠宰，测定猪肉中的胆固醇含量。
1.3 三三复合组分筛选
将蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂、米曲霉菌剂、黑曲霉菌剂分别与辅料制备得到菌剂预混剂，其中，所用辅料为淀粉与寡聚糖的混合物，菌剂与辅料的质量比均为1:10，然后将蜡状芽孢杆菌菌剂预混剂和乳链球菌菌剂预混剂分别与(1)米曲霉菌剂、(2)黑曲霉菌剂的预混剂以1:1:1的比例混合制成饲料添加剂，选择日龄接近、体重相近、健康状况良好仔猪120头，采用完全随机试验设计，分为3组，每组40头。将制备得到的饲料添加剂以8％的比例添加到猪的基础日粮中，分别饲喂上述仔猪，其中一组作为对照只饲喂基础日粮，待饲喂3个月后，屠宰，测定猪肉中的胆固醇含量。
2、实验结果
2.1 单一组分筛选
从表1中可以看出：不同饲料添加剂对猪肉的胆固醇含量具有重要影响。由蜡状芽孢杆菌菌剂制备得到的饲料添加剂，猪肉的胆固醇含量为55.2mg/100g，明显低于无饲料添加剂组和其他菌剂制备的饲料添加剂。以上表明蜡状芽孢杆菌菌剂能显著提高猪肉品质，降低猪肉的胆固醇含量。
表1 不同饲料添加剂对猪肉胆固醇含量的影响
2.2 两两复合组分筛选
从表2中可以看出：不同饲料添加剂对猪肉的胆固醇含量具有重要影响。由蜡状芽孢杆菌菌剂和乳链球菌菌剂制备得到的饲料添加剂，猪肉的胆固醇含量为50.6mg/100g，明显低于无饲料添加剂组和其他菌剂制备的饲料添加剂。以上表明蜡状芽孢杆菌菌剂和乳链球菌菌剂能显著提高猪肉品质，降低猪肉的胆固醇含量。
表2 不同饲料添加剂对猪肉胆固醇含量的影响
1.3 三三复合组分筛选
从表3中可以看出：不同饲料添加剂对猪肉的胆固醇含量具有重要影响。由蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂制备得到的饲料添加剂，猪肉的胆固醇含量为44.3mg/100g，明显低于无饲料添加剂组和其他菌剂制备的饲料添加剂。以上表明蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂和米曲霉菌剂能显著提高猪肉品质，降低猪肉的胆固醇含量。
表3 不同饲料添加剂对猪肉胆固醇含量的影响
实验例2 饲料添加剂的组分用量筛选实验
1、试验方法
在实验例1基础上，将蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂、米曲霉菌剂三因素三水平(表4)制备得到饲料添加剂；选择日龄接近、体重相近、健康状况良好仔猪1120头，采用完全随机试验设计，分为28组，每组40头。将制备得到的饲料添加剂以8％的比例添加到猪的基础日粮中，分别饲喂上述仔猪，其中一组作为对照只饲喂基础日粮，待饲喂3个月后，屠宰，测定猪肉中的胆固醇含量。
表4 因素水平表(单位：kg)
2、试验结果
用以上饲料添加剂饲喂猪三个月后，猪肉中胆固醇的含量见表5，从表中可以看出，a2+b2+c2猪的胆固醇含量最低，且明显低于其他组合，因此，选择a2+b2+c2(即蜡状芽孢杆菌菌剂14份、乳链球菌菌剂8份、米曲霉菌剂5份)组成饲料添加剂，与猪基础日粮混合后饲喂猪使得猪肉的品质得到了改善，胆固醇含量明显降低。
表5 不同饲料添加剂对猪肉胆固醇含量的影响
实验例3 饲料添加剂的中药组分筛选实验
1、试验方法
1.1 饲料添加剂的制备
饲料添加剂1，按照以下重量称取各组分：蜡状芽孢杆菌菌剂14kg、乳链球菌菌剂8kg、米曲霉菌剂5kg；
制备方法：将上述菌剂分别与辅料混合制得预混剂，其中，所用辅料为淀粉与寡聚糖的混合物，菌剂与辅料的质量比均为1:10，将制得的预混剂混匀，即得。
饲料添加剂2：在饲料添加剂1基础上添加粉碎后的苋实9kg、茯苓6kg；
饲料添加剂3：在饲料添加剂1基础上添加粉碎后的苋实9kg、虎杖6kg；
饲料添加剂4：在饲料添加剂1基础上添加粉碎后的苋实9kg、黄芪6kg；
饲料添加剂5：在饲料添加剂1基础上添加粉碎后的苋实9kg、白芍6kg；
饲料添加剂6：在饲料添加剂1基础上添加粉碎后的苋实9kg、陈皮6kg；
饲料添加剂7：在饲料添加剂1基础上添加粉碎后的茯苓9kg、羊蹄草6kg；
饲料添加剂8：在饲料添加剂1基础上添加粉碎后的虎杖9kg、羊蹄草6kg；
饲料添加剂9：在饲料添加剂1基础上添加粉碎后的黄芪9kg、羊蹄草6kg；
饲料添加剂10：在饲料添加剂1基础上添加粉碎后的白芍9kg、羊蹄草6kg；
饲料添加剂11：在饲料添加剂1基础上添加粉碎后的陈皮9kg、羊蹄草6kg；
饲料添加剂12：在饲料添加剂1基础上添加粉碎后的苋实9kg、羊蹄草6kg。
1.2饲喂方法
选择日龄接近、体重相近、健康状况良好仔猪480头，采用完全随机试验设计，分为12组，每组40头。将制备得到的饲料添加剂1-12以8％的比例添加到猪的基础日粮中，分别饲喂上述仔猪，待饲喂3个月后，屠宰，测定猪肉中的胆固醇含量。
2、试验结果
猪肉中胆固醇含量见表6。
表6 不同饲料添加剂对猪生长性能的影响
从表中可以看出，由蜡状芽孢杆菌菌剂14kg、乳链球菌菌剂8kg、米曲霉菌剂5kg制成的饲料添加剂1饲喂猪三个月后，猪肉的胆固醇含量为40.1mg/100g。在蜡状芽孢杆菌菌剂14kg、乳链球菌菌剂8kg、米曲霉菌剂5kg基础上，添加苋实9kg、羊蹄草6kg的饲料添加剂12能显著降低猪肉中胆固醇的含量，达到了26.8mg/100g。其他各组无显著性差异。以上说明蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂、米曲霉菌剂与苋实、羊蹄草之间具有显著的协同增效作用，将其配伍在一起能提高猪肉的品质，显著降低猪肉中的胆固醇含量。相比之下，将蜡状芽孢杆菌菌剂、乳链球菌菌剂、米曲霉菌剂与其它几种药物配伍在一起后，对猪肉中的胆固醇含量影响不大。