发酵熟化胎盘溶液的制造方法与流程

本发明涉及作为健康食品用原料或化妆品用原料而使用的发酵熟化胎盘溶液的制造方法。

背景技术：

在从哺乳动物独有的器官即胎盘(placenta)提取的胎盘提取物中，含有氨基酸或酶类等各种各样的有效成分。因此，胎盘提取物作为健康食品或化妆品的原料等使用，其中特别是从安全性的方面来看，多使用从猪或羊、马的胎盘提取的胎盘提取物。

此处，在专利文献1中，提出一种含有猪的胎盘的健康食品的制造方法，以水分变为50％(重量)～80％(重量)的方式将猪的胎盘煮沸之后，加入具有发酵作用的包含酵母菌以及乳酸菌的发酵液，在发酵前或者发酵中途加入葡萄糖，以20℃～35℃使其发酵24h～72h。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本国特开2005-185242号公报

技术实现要素：

发明要解决的技术问题

但是，在作为健康食品或化妆品等的原料而使用的情况下，优选是尽可能地增加胎盘溶液的吸收性或有效成分，但是如专利文献1记载的发明那样，仅在煮沸之后发酵24h～72h，不能充分地使胎盘溶液的吸收性或有效成分增加。

因此，本发明的目的在于，提供一种使胎盘溶液的吸收性或有效成分增加的发酵熟化胎盘溶液的制造方法。

用于解决上述技术问题的方案

技术方案1所述的本发明的发酵熟化胎盘溶液的制造方法是在猪、羊或马的胎盘溶液中，加入具有发酵作用的酵母菌使胎盘发酵以及熟化，其特征在于，将相对于胎盘溶液的重量比为6～15％的黑糖添加至胎盘溶液使其发酵，并在发酵后使其熟化。

技术方案2所述的本发明，其特征在于，在技术方案1所述的发酵熟化胎盘溶液的制造方法中，具有：黑糖添加工序，将黑糖添加至胎盘溶液；杀菌工序，在黑糖添加工序之后，以80～100℃的温度加热杀菌20分钟～60分钟；冷却工序，在杀菌工序之后，强制冷却到35℃以下的温度；发酵工序，在冷却工序之后，加入酵母菌，以20℃～35℃的温度发酵1个月；熟化工序，在发酵工序之后，以20℃～25℃的温度熟化2个月。

技术方案3所述的本发明，其特征在于，在技术方案2所述的发酵熟化胎盘溶液的制造方法中，在熟化完成后测量的SAMe以及SA氨基酸的浓度，大于等于将相对于胎盘溶液的重量比为10％的蔗糖代替黑糖添加至胎盘溶液，进行从杀菌工序至熟化工序而产生的SAMe以及SA氨基酸的浓度。

技术方案4所述的本发明，其特征在于，在技术方案2所述的发酵熟化胎盘溶液的制造方法中，在熟化完成后测量的SAMe以及SA氨基酸的浓度，大于等于将相对于胎盘溶液的重量比为10％的葡萄糖代替黑糖添加至胎盘溶液，进行从杀菌工序至熟化工序而产生的SAMe以及SA氨基酸的浓度。

技术方案5所述的本发明，其特征在于，在技术方案2～4中的任一项所述的发酵熟化胎盘溶液的制造方法中，在熟化工序之后的固体成分中所测量的分子量分布为：低于200的是10～20％，1000～3000的是30～40％，3000～6000的是20～25％。

技术方案6所述的本发明，其特征在于，在技术方案2～4中的任一项所述的发酵熟化胎盘溶液的制造方法中，在熟化工序之后的固体成分中，包含10mol％以上的丙氨酸、0.4mol％以上的胱氨酸。

技术方案7所述的本发明，其特征在于，在技术方案2～4中的任一项所述的发酵熟化胎盘溶液的制造方法中，在熟化工序之后的固体成分中，包含300mg/100g以上的钠、100mg/100g以上的钙、15mg/100g以上的镁、2mg/100g以上的烟酸、2mg/100g以上的锌。

发明效果

根据本发明，能够得到吸收性较高且能够使有效成分增加，通过混合在化妆品中而提高保湿力，通过混合在健康食品中而口味温和的胎盘提取物。

附图说明

图1是示出SA氨基酸的活性氧消除作用的图。

图2是示出SA氨基酸的过氧化脂质的抑制作用的图。

图3是示出涂抹混合有SA氨基酸的化妆品后肌肤的角质水分量的推移的图。

图4是示出涂抹混合有SA氨基酸的化妆品后肌肤的经皮水分蒸散量的推移的图。

图5是示出SA氨基酸的MMP-1活性抑制作用的图。

图6是示出添加重量比3％、6％、10％、15％的黑糖至胎盘溶液，熟化完成后测量产生的SAMe以及SA氨基酸并进行比较的图。

图7是示出在不同的时机向胎盘溶液添加黑糖的实验中，在熟化完成后对产生的SAMe以及SA氨基酸进行测量的结果的图。

图8是示出在使发酵期间不同的实验中，测量产生的SAMe以及SA氨基酸的结果的图。

图9是示出在使熟化期间不同的实验中，测量产生的SAMe以及SA氨基酸的结果的图。

图10是示出本发明的一个实施例的发酵熟化胎盘的分子量分布的图。

图11是示出该发酵熟化胎盘的成分的图。

图12是示出该发酵熟化胎盘的矿物质、维生素含量的图。

具体实施方式

本发明的第一实施方式的发酵熟化胎盘溶液的制造方法是，将相对于胎盘溶液的重量比为6～15％的黑糖添加至胎盘溶液使其发酵，发酵后使其熟化。根据本实施方式，能够得到吸收性较高能够使有效成分增加，通过混合在化妆品中而提高保湿力，通过混合在健康食品中而口味温和的胎盘。

本发明的第二实施方式，在第一实施方式的发酵熟化胎盘溶液的制造方法中，具有：黑糖添加工序，将黑糖添加至胎盘溶液；杀菌工序，在黑糖添加工序之后，以80～100℃的温度加热杀菌20分钟～60分钟；冷却工序，在杀菌工序之后，强制冷却到35℃以下的温度；发酵工序，在冷却工序之后，加入酵母菌，以20℃～35℃的温度发酵1个月；熟化工序，在发酵工序之后，以20℃～25℃的温度熟化2个月。根据本实施方式，尤其能够提高SAMe以及SA氨基酸的浓度。

此处，SAMe是指S-腺苷甲硫氨酸,SA氨基酸是指超活性氨基酸。

SAMe(S-腺苷甲硫氨酸)是1974年在世界首次以作为抑郁症的治疗药物而在欧洲开发。此外，在美国特别是作为对关节炎有效果的营养辅助剂而深受欢迎，除了关节炎之外，对抑郁症、肝病等也有效果。特别是关节炎的患者有着逐年增加的趋势，对有助于关节的健康食品等的需求增加。

此外，SA氨基酸(超级活性氨基酸)是具有三个作用的氨基酸。

第一个作用是活性氧抑制效果。因为活性氧的结构不稳定，所以成为与皮肤的DNA或脂质、蛋白质相结合从而引起细胞损伤，导致皮肤老化的一个原因。

图1是通过次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶类生成O₂^-，测量与SA氨基酸共存时的O₂^-的生成量，由此示出SA氨基酸的活性氧消除作用。使用显色试剂即硝基四氮唑蓝检测O₂^-。此处，显示O₂^-消除与SA氨基酸的浓度相关。

此外，图2是示出SA氨基酸对以使用四氧嘧啶化学产生的O₂^-作为引发剂的脂质过氧化反应的抑制作用的图。另外，公知四氧嘧啶化学产生O₂^-，造成氧化应激。此处显示，SA氨基酸与其他的抗氧化剂相比较，显著地抑制脂质的氧化。

第二个作用是保湿效果。图3、4示出低值的角质水分量，以对意识到皮肤的粗糙、干燥等的7名40～60岁的成年女性(平均年龄47.1岁)为对象，示出实施公开实验的结果，图3是示出涂抹混合有SA氨基酸的化妆品后肌肤的角质水分量(μs)的推移的图，图4是示出涂抹混合有SA氨基酸的化妆品后肌肤的经皮水分蒸散量(g/m²·h)的推移的图。将试验期间设定为8周，早晚2次清洗后适量涂抹含有SA氨基酸的产品。在试验开始日以及试验开始的4、8周之后测量肌肤的角质水分量以及经皮水分蒸散量，并进行评价。此处，通过8周的持续使用，在持续使用含有SA氨基酸产品的部位，角质水分量明显地上升。可知这是角质的水分保持功能本身改善后的结果。观察到经皮水分蒸散量呈降低的趋势，可知干燥状态得到改善。

第三个作用是胶原蛋白产生效果。分解I型胶原蛋白的酶即MMP-1，通过暴露在UVA(紫外线A波)中而被激活。图5是为了评价SA氨基酸对MMP-1活性的抑制，而对被UVA促进的MMP-1的活性是否被SA氨基酸抑制进行实际验证的结果。使各种浓度的SA氨基酸共存于正常人的成纤维细胞中，照射UVA，24小时后回收培养基，测量该MMP-1活性。由此，示出SA氨基酸对MMP-1活性的抑制与浓度有关。

根据本实施方式的发酵熟化胎盘溶液的制造方法，能够得到一种胎盘溶液，熟化完成后测量的SAMe以及SA氨基酸的浓度，大于等于将相对于胎盘溶液的重量比为10％的蔗糖代替黑糖添加至胎盘溶液，进行从杀菌工序至熟化工序而产生的SAMe以及SA氨基酸的浓度。

根据本实施方式的发酵熟化胎盘溶液的制造方法，能够得到一种胎盘溶液，熟化完成后测量的SAMe以及SA氨基酸的浓度，大于等于将相对于胎盘溶液的重量比为10％的葡萄糖代替黑糖添加至胎盘溶液，进行从杀菌工序至熟化工序而产生的SAMe以及SA氨基酸的浓度。

根据本实施方式的发酵熟化胎盘溶液的制造方法，能够得到如下的胎盘溶液，在熟化工序之后的固体成分所测量的分子量分布为：低于200的是10～20％，1000～3000的是30～40％，3000～6000的是20～25％，通过均衡地混合各种分子量的氨基酸或肽，能够提高保湿效果。

根据本实施方式的发酵熟化胎盘溶液的制造方法，在熟化工序之后的固体成分中，包含10mol％以上的丙氨酸、0.4mol％以上的胱氨酸。

丙氨酸与胱氨酸是对人体给予有效影响的氨基酸之一。丙氨酸是多含于蚬贝或蛤蜊等的贝类中的氨基酸，作为除了改善肝功能以外，还能够提高免疫机能的氨基酸，多含于健康食品中。胱氨酸是2分子半胱氨酸结合后的氨基酸，作为构成角蛋白这种蛋白质的氨基酸，多含于头发和指甲中。作为美白效果，因为具有抑制生成黑色素的酪氨酸酶的活性，所以多混合于化妆品等。

根据本实施方式的发酵熟化胎盘溶液的制造方法，在熟化工序之后的固体成分中，包含300mg/100g以上的钠、100mg/100g以上的钙、15mg/100g以上的镁、2mg/100g以上的烟酸、2mg/100g以上的锌。

近年来，这些矿物质的摄取量呈降低倾向。例如，调查结果显示，成人对钾的摄取比食物摄取标准2015年版中规定的摄取目标低大约10％～20％或更多。特别是20多岁～60多岁的人对锌的摄取量显著不足，与食物摄取标准规定的建议量相比，男女对锌的摄取量都低于建议量的约10％。15岁以上的年龄层对镁的摄取量不充足，20多岁的人中近30％的人对镁的摄取量不足。因这些矿物质的摄取不足，除了会导致女性的低体重化或骨质疏松症以外，还会存在糖尿病的感染风险增高的趋势。因此，矿物质的摄取对于现代人而言可以说是重要的课题之一。

实施例

以下对本发明的一个实施例的发酵熟化胎盘溶液的制造方法进行说明。

本实施方式的发酵熟化胎盘溶液具有：黑糖添加工序，将黑糖添加至胎盘溶液；杀菌工序，在黑糖添加工序之后，以80～100℃的温度加热杀菌20分钟～60分钟；冷却工序，在杀菌工序之后，强制冷却到35℃以下的温度；发酵工序，在冷却工序之后，加入酵母菌，以20℃～35℃的温度发酵1个月；熟化工序，在发酵工序之后，以20℃～25℃的温度熟化2个月。

胎盘提取物粉末是从猪、羊或者马的胎盘(placenta)除去皮膜组织，剁碎绒毛组织，通过冻结酶提取法提取提取物，进而从该提取物除去杂质，相对于胎盘的重量％为8％左右。

此外，在具有发酵作用的酵母菌中，能够使用例如酵母(Saccharomyces)属、假丝酵母(Candida)属、球拟酵母(Torulopsis)属、接合酵母(Zygosaccharomyces)属、裂殖酵母(Schizosaccharomyces)属、毕赤酵母(Pinchia)属、汉森酵母(Hansenula)属、克鲁维酵母(Kluyveromyces)属、德巴利酵母(Debaryomyces)属。

黑糖添加工序中添加的黑糖，相对于胎盘溶液重量比为6～15％，更优选是6～10％。

图6是添加相对于胎盘溶液的重量比为3％(实施例1)、6％(实施例2)、10％(实施例3)、15％(实施例4)的黑糖，熟化完成后测量产生的SAMe以及SA氨基酸，将产生最多SAMe以及SA氨基酸的胎盘溶液作为100进行比较的图。作为比较例，使用相对于胎盘溶液的重量比为10％的蔗糖(比较例1)、以及10％的葡萄糖(比较例2)。

在SAMe的产生中，6～15％的黑糖大于等于10％的蔗糖，6～10％的黑糖高于10％的蔗糖以及10％的葡萄糖。

在SA氨基酸的产生中，3～15％的黑糖高于10％的蔗糖以及10％的葡萄糖，尤其是6～10％的黑糖能产生高浓度的SA氨基酸。

接着，对黑糖的添加时机进行说明。

图7是将在以下情况下产生的SAMe以及SA氨基酸进行比较的实验结果：在发酵开始时添加100％(整个量)，在发酵开始时添加80％发酵中途添加20％，在发酵开始时添加50％发酵中途添加50％，在发酵开始时添加80％熟化开始时添加20％，在发酵开始时添加50％熟化开始时添加50％。

添加相对于胎盘溶液的重量比为6％的黑糖，整个量以100表示。除了发酵开始时之外，在发酵中途或者熟化开始时添加一部分黑糖的情况下在熟化完成后测量的SAMe以及SA氨基酸的浓度，都低于仅在发酵开始时添加黑糖的情况下在熟化完成后测量的SAMe以及SA氨基酸的浓度。

因此，在关注SAMe以及SA氨基酸的情况下，优选是仅在发酵开始时添加黑糖。

在黑糖添加工序之后加热杀菌。加热杀菌后，例如在60分钟以内，使用冷水循环装置，冷却到35℃以下，优选是冷却到25℃。糖和氨基酸在共存的状态下过度加热的话，由于糖和氨基酸结合，或者结构变化，发酵熟化的效果降低，熟化后的胎盘溶液会变色或气味受到影响。

接着，对发酵工序进行说明。

图8是对发酵期间不同情况下的SAMe以及SA氨基酸的产生进行比较的实验结果。在熟化完成后对产生的SAMe以及SA氨基酸进行测量，将产生SAMe以及SA氨基酸最多的作为100进行比较。另外，虽然发酵温度是20℃～35℃即可，但本实验中是以25℃进行发酵的。

如图8所示，虽然相对于0.5个月的发酵期间，发酵期间为1个月的情况下SAMe以及SA氨基酸的产生会增加，但是在发酵期间为1.5个月的情况下SAMe以及SA氨基酸的产生会减少。

因此，胎盘溶液的发酵期间优选是1个月。

接着，对熟化工序进行说明。

图9是对熟化期间不同情况下的SAMe以及SA氨基酸的产生进行比较的实验结果。在熟化完成后对产生的SAMe以及SA氨基酸进行测量，将产生SAMe以及SA氨基酸最多的作为100进行比较。另外，虽然熟化温度是20℃～35℃即可，但本实验中是以25℃进行熟化的。发酵期间为1个月。

如图9所示，虽然相对于1.5个月的熟化期间，熟化期间为2个月的情况下SAMe以及SA氨基酸的产生会增加，但是熟化期间为2.5个月的情况下SAMe以及SA氨基酸的产生会减少。

图10示出本实施例的发酵熟化胎盘溶液的固体成分的分子量分布。将未发酵熟化的胎盘溶液的固体成分作为比较例。

本实施例的发酵熟化胎盘溶液，使用相对于胎盘溶液的重量比为6％的黑糖。此外，从发酵熟化后的胎盘溶液(胎盘提取物)除去水分得到粉末状的固体成分(胎盘提取物粉末)。

本实施例的发酵熟化胎盘溶液的固体成分与未发酵熟化的胎盘溶液的固体成分相比较，能够观察到熟化工序后测量的分子量分布，在低于200、1000～3000、3000～6000中存在明显的差异，低于200的是10～20％，1000～3000的是30～40％，3000～6000的是20～25％。

图11示出本实施例的发酵熟化胎盘溶液的固体成分。将未发酵熟化的胎盘溶液的固体成分作为比较例。

本实施例的发酵熟化胎盘溶液的固体成分与未发酵熟化的胎盘溶液的固体成分相比较，熟化工序后测量的成分特别是丙氨酸与胱氨酸大幅度地增加，丙氨酸为10mol％以上，胱氨酸为0.4mol％以上。

此外，其他的必需氨基酸即赖氨酸、组氨酸、缬氨酸、苏氨酸、色氨酸以及谷氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸等的氨基酸在熟化工序后有增加的趋势。

赖氨酸除了提高肝功能之外，作为抗体或荷尔蒙、酶等的原料对身体的组织进行修复。组氨酸作用于关节，在慢性关节风湿症等的预防、改善中发挥效果。缬氨酸除了改善肝功能之外，还对身体的肌肉增强或疲劳进行缓解。此外，苏氨酸也改善肝功能，作为促进成长的营养素起作用。色氨酸作为脑内神经递质，具有使精神机能稳定的效果。谷氨酸多含于肝或猪肉中，因很快被身体吸收而成为能量源。丝氨酸含于大豆等，具有抑制肌肤老化的效果。此外天冬酰胺以及天冬氨酸将有害物质氨排出体外，除了保护中枢神经系统之外，还具有促进能量代谢并促进缓解疲劳的效果。

图12示出本实施例的发酵熟化胎盘溶液的固体成分的矿物质、维生素含量。将未发酵熟化的胎盘溶液的固体成分作为比较例。

本实施例的发酵熟化胎盘溶液的固体成分与未发酵熟化的胎盘溶液的固体成分相比较，熟化工序之后测量的成分，特别是钠、钙、镁、烟酸、锌、维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆大幅度地增加，含有300mg/100g以上的钠、100mg/100g以上的钙、15mg/100g以上的镁、2mg/100g以上的烟酸、2mg/100g以上的锌、0.1mg/100g以上的维生素B₁、0.1mg/100g以上的维生素B₂、0.05mg/100g以上的维生素B₆。

在SAMe的分析中，使用薄层色谱分析(TLC)以及HPLC定量。

TLC的样品配制是以1.5N盐酸室温下进行1小时的提取。

展开试剂使用比例为4：1：2的1-丁醇：乙酸：水，利用茚三酮显色进行检测。

HPLC定量使用“GL sciences株式会社GL-7400型号”机器，使用色谱柱(株式会社Chemco Chemcopak Nucleosil 100-10SA)，流动相的流速为1.0ml/分，以0.05M(NH₄)₂HPO₄(pH3.0)20分钟，接着0.5M(NH₄)₂HPO₄(pH3.0)5分钟变化组分梯度进行，以260nm进行检测。分析方法是后藤等的方法(参考文献：《清酒醪中的S-腺苷蛋氨酸的定量与变化》日本酿造协会杂志(「清酒醪中のS－アデノシルメチオニンの定量と変化」日本醸造協会誌)，1992年)。

SA氨基酸的分析使用HPLC定量。

使用“GL sciences株式会社GL-7400型号”机器，使用层析柱(GL sciences株式会社Inertsil ODS-4)，在流速为1.0ml/分的甲醇：0.1％H₃PO₄＝2:98的流动相中进行，以260nm进行检测。分析方法是GL sciences株式会社的分析应用程序(Data.No.LB110-0919)。

工业实用性

本发明的制造方法制造的发酵熟化胎盘溶液，能够作为健康食品或化妆品原料使用。