本发明涉及养生食品领域，具体而言，涉及一种具有抗宫颈癌作用的养生食品及其制备方法。
背景技术：
：子宫颈癌，简称宫颈癌，是发生在宫颈阴道部或移行带的鳞状上皮细胞交界处的恶性肿瘤，是妇女最常见恶性肿瘤之一。临床表现早期大多无明显症状，或仅在阴道检查时，可见浅表糜烂。一旦出现症状多已达中、晚期。常见的症状是阴道出血和白带增多。本病属中医学“崩漏”、“带下”、“血枯”等范畴，临床上一般分为湿毒下注、肝郁气滞、肝肾阴虚和脾肾阳虚等症型。无论是在发达国家，还是在发展中国家，宫颈癌都严重威胁女性生命和，是妇女最常见的恶性肿瘤之一。特别是今年来由于生活环境污染、思想开放、过早性生活等原因，宫颈癌的发病年龄呈现出年轻化趋势，且发病率逐渐增高。目前，宫颈癌的主要治疗方式为化学药物治疗、放射治疗和手术治疗，上述治疗方式虽然有效，但同时也会给患者在生理和心理上带来极大痛苦，例如，放疗和化疗会导致患者呕吐、脱发等，手术则会造成创口。患者在接受上述治疗后生存质量严重下降。而食疗由于无毒副作用、不易产生耐药性而成为被广泛接受的一种辅助治疗癌症的方式。但目前还没有能够有效辅助治疗宫颈癌，提升患者生存质量的养生食品。有鉴于此，特提出本发明。技术实现要素：本发明的第一目的在于提供一种具有抗宫颈癌作用的养生食品，该食品能够抑制宫颈癌细胞增殖和促进宫颈癌细胞凋亡，减轻宫颈癌患者的痛苦，提高其生存质量。本发明的第二目的在于提供一种所述具有抗宫颈癌作用的养生食品的制备方法，通过该方法可以快速、便捷地制备获得上述养生食品，便于规模化生产。为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：一种具有抗宫颈癌作用的养生食品，按重量份计，所述养生食品主要由以下原料制备而成：沙蚕25～35份，小球藻15～20份，牡蛎15～20份和辅料10～15份。沙蚕，俗称海蜈蚣、海蚂蟥、海蚕或海虫，具有极高的营养价值和药用价值。《本草纲目》记载“海蚕”的药用功效：久服补虚赢，令人光泽，轻身延年不老。现代科学研究发现，沙蚕富含硫胍基衍生物、生物甾醇、深海羟基高铁血红素、海蚯蚓素、嘌呤核苷酸、牛磺酸、蚓激酶、纤溶酶以及溶菌酶等药用成分，以及免疫氨基酸(谷氨酸和甘氨酸)、人体必需氨基酸、活性肽和不饱和脂肪酸脂类等营养成分。小球藻，一种球形单细胞淡水藻类，直径3～8μm，是世界上最早的生命之一。小球藻细胞壁坚厚，胞内含有小球藻特有的促生长因子(chlorellagrowthfactor,cgf)、丰富的蛋白质、人体必需氨基酸、多糖、色素、脂肪酸以及维生素和矿物元素，具有全面而均衡的营养价值。因此，小球藻具有增强机体免疫力，吸附体内毒素，调血压、降血脂，抗氧化、抗疲劳，抗感染和抗炎症的功效。牡蛎，俗称海蛎子、蚝等。《本草纲目》记载，牡蛎肉“炙食甚美，令人细肌肤、美颜色”。《神农本草经》记载牡蛎具有敛阴、潜阳、止汗、化痰、软坚的功用。现代科学研究发现，牡蛎中富含蛋白质、生物活性肽、糖原、牛磺酸、epa、dha以及维生素、锌、钙、硒、铁等生物活性成分，具有降血糖，降血压，增强免疫功能，抗氧化，对肺癌细胞和人白血病细胞具有明显的细胞增殖抑制作用。本发明上述养生食品由沙蚕、小球藻、牡蛎和辅料为主要原料制备而成。尽管沙蚕、小球藻和牡蛎是本领域已知具有保健养生功效的药食两用的海产品，但现有技术并没有记载上述原料单独或组合使用具有抑制宫颈癌细胞增殖的作用。而本发明出人意料地发现，沙蚕搭配小球藻和牡蛎可以抑制宫颈癌细胞的增殖，增强宫颈癌患者的体质，缓解患者的痛楚，提升宫颈癌患者的生命质量。本发明还对沙蚕、小球藻胶和牡蛎的配比进行调整，使沙蚕与小球藻和牡蛎在功能上能够更好地互相配合，协同增效，进一步增强所述养生食品抑制癌细胞增殖和促进癌细胞凋亡的能力。在一些实施方式中，按重量份计，所述养生食品主要由以下原料制备而成：沙蚕27～33份，小球藻15～18份，牡蛎15～18份和辅料10～13份。在一些实施方式中，按重量份计，所述养生食品主要由以下原料制备而成：沙蚕29～31份，小球藻16～17份，牡蛎16～18份和辅料12～13份。在一些实施方式中，按重量份计，所述养生食品主要由以下原料制备而成：沙蚕25份，小球藻15份，牡蛎15份和辅料10份。在一些实施方式中，按重量份计，所述养生食品主要由以下原料制备而成：沙蚕35份，小球藻20份，牡蛎20份和辅料15份。所述养生食品主要由以下原料制备而成：沙蚕30份，小球藻17份，牡蛎18份和辅料12份。在一些实施方式中，所述沙蚕选自双齿围沙蚕、弯齿围沙蚕、独齿围沙蚕、多齿围沙蚕、扁齿围沙蚕、日本刺沙蚕、锐足全刺沙蚕、矾沙蚕和吻沙蚕中的一种或多种。在一些实施方式中，所述沙蚕为双齿围沙蚕；优选地，所述双齿围沙蚕为福建漳州东山岛水域捕获或养殖的双齿围沙蚕。本发明所述方法优选以双齿围沙蚕作为原料，双齿围沙蚕为进化上保守的古生物，富含各种营养物质和活性物质，其氨基酸、微量元素、甾醇、牛磺酸、蚓激酶、纤溶酶和多肽的含量都明显优于其他沙蚕，因此，以双齿围沙蚕为原料可以提升本发明所述食品的养生功能。更优选地，本发明所述方法以福建漳州东山岛水域养殖或捕获的双齿围沙蚕为原料。福建漳州东山岛位于北纬23°33′-23°47′，东经117°17′-117°35'，属于典型的亚热带海域，受闽粤沿岸流、黑潮暖流和南海暖流等多种流系支配，该水域的水质清澈、无重金属污染或富营养化，溶解氧的含量高。在该水域养殖或捕获的双齿围沙蚕生长状态好、活力高、营养物质含量丰富、无重金属污染。因此，本发明优选以该水域获得的双齿围沙蚕为原料，可以显著提升本发明所述养生食品的品质。在一些实施方式中，所述小球藻选自蛋白核小球藻、普通小球藻或椭圆小球藻中的一种或多种；优选地，所述小球藻为蛋白核小球藻。在一些实施方式中，所述牡蛎选自近江牡蛎、长牡蛎、熊本牡蛎、葡萄牙牡蛎和香港巨牡蛎中的一种或多种；优选地，所述牡蛎为近江牡蛎。。在一些实施方式中，所述辅料选自淀粉、糖粉、糊精、乳糖、可压性淀粉、微晶纤维素中的一种或多种；优选地，所述辅料为淀粉和糊精；更优选地，所述淀粉为玉米淀粉，所述糊精为麦芽糊精；更优选地，所述玉米淀粉为非转基因玉米淀粉。在一些实施方式中，所述养生食品为片剂、粉剂、颗粒剂、丸剂或膏剂；优选地，所述养生食品为膏剂。本发明还涉及制备上述养生食品的方法，所述方法将各原料混合在一起，制成所述养生食品。本发明上述方法通过简单的混合即可快速、便捷地制备得到具有抗宫颈癌作用的养生食品，便于规模化生产。在一些实施方式中，所述方法还包括在混合之前，按以下方式对沙蚕进行预处理：将沙蚕放在-16～-12℃下静置3～6h；之后取出晒干；晒干后的沙蚕在80～105℃下烤制3～6h；然后粉碎烤制好的沙蚕。本发明上述方法通过在-16～-12℃的低温下处理以及在80～105℃烤制的特殊方式对沙蚕进行处理。其中低温处理能够使沙蚕处于休眠状态，保持沙蚕海参的新鲜度，避免营养物质的流失，同时，低温还能杀死附着在沙蚕上的细菌；而高温烤制实际上熟制过程，使得沙蚕可以直接食用，同时，加热可以进一步的杀菌以及使蛋白酶失活，避免有效成分被降解。与现有技术相比，本发明的有益效果为：1)、本发明所述养生食品具有抑制宫颈癌细胞增殖，增强宫颈癌患者体质，提升宫颈癌患者的生命质量的作用。2)、本发明所述养生食品优选以双齿围沙蚕，尤其是福建漳州东山岛水域的双齿围沙蚕作为原料制备而成，所述沙蚕富含生物甾醇、氨基酸、微量元素、活性肽、牛磺酸、蚓激酶和纤溶酶等活性物质，营养丰富、活性成分含量高、无重金属污染，能够进一步提升所述养生食品的品质。3)、本发明所述制备方法可以简单、快捷地制备获得上述具有抗宫颈癌作用的养生食品，便于规模化生产；并且，本发明所述方法还对沙蚕进行特殊加工，使得最后制备得到的养生食品具有安全卫生、活性成分保存完好等优点。具体实施方式下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。实施例1按以下方式制备具有抗宫颈癌作用的养生食品：1、预处理沙蚕：取新鲜活体15～22cm长的沙蚕，放入海水或盐水中13℃恒温静置48h，使得沙蚕将体内杂物自然排泄干净；将杂物排泄干净后的沙蚕放在-14℃下静置4h，使沙蚕保持休眠状态，同时杀死依附在沙蚕上的细菌；将沙蚕取出，在十万级无尘阳光房中自然晒干，使沙蚕的含水量低至6％；取晒干后的沙蚕在98℃下烤制4h，使沙蚕的含水量低至3％；将烤制好的沙蚕冷却至室温后，用水冷磨粉机将沙蚕粉碎至200目。2、预处理小球藻：将小球藻藻液离心获得小球藻藻泥，然后将小球藻藻泥在-50℃冷冻干燥，研磨粉碎后得到小球藻粉。3、预处理牡蛎：新鲜牡蛎清洗干净后去壳，加入2-4倍体积的磷酸缓冲液，匀浆提取30min左右，离心，超滤后直接冷冻干燥得到牡蛎粉。4、按重量份计，将沙蚕粉、小球藻粉、牡蛎粉、非转基因玉米淀粉和麦芽糊精按25份、15份、15份、5份和5份的比例，在40℃下恒温高速混合，之后用压片机压制成片剂。实施例2按以下方式制备具有抗宫颈癌作用的养生食品：1、预处理沙蚕：取新鲜活体15～22cm长的沙蚕，放入海水或盐水中13℃恒温静置48h，使得沙蚕将体内杂物自然排泄干净；将杂物排泄干净后的沙蚕放在-14℃下静置4h，使沙蚕保持休眠状态，同时杀死依附在沙蚕上的细菌；将沙蚕取出，在十万级无尘阳光房中自然晒干，使沙蚕的含水量低至6％；取晒干后的沙蚕在98℃下烤制4h，使沙蚕的含水量低至3％；将烤制好的沙蚕冷却至室温后，用水冷磨粉机将沙蚕粉碎至200目。2、预处理小球藻：将小球藻藻液离心获得小球藻藻泥，然后将小球藻藻泥在-50℃冷冻干燥，研磨粉碎后得到小球藻粉。3、预处理牡蛎：新鲜牡蛎清洗干净后去壳，加入2-4倍体积的磷酸缓冲液，匀浆提取30min左右，离心，超滤后直接冷冻干燥得到牡蛎粉。4、按重量份计，将沙蚕粉、小球藻粉、牡蛎粉、非转基因玉米淀粉和麦芽糊精按30份、17份、18份、7份和5份的比例，在40℃下恒温高速混合，之后用压片机压制成片剂。实施例3按以下方式制备具有抗宫颈癌作用的养生食品：1、预处理沙蚕：取新鲜活体15～22cm长的沙蚕，放入海水或盐水中13℃恒温静置48h，使得沙蚕将体内杂物自然排泄干净；将杂物排泄干净后的沙蚕放在-14℃下静置4h，使沙蚕保持休眠状态，同时杀死依附在沙蚕上的细菌；将沙蚕取出，在十万级无尘阳光房中自然晒干，使沙蚕的含水量低至6％；取晒干后的沙蚕在98℃下烤制4h，使沙蚕的含水量低至3％；将烤制好的沙蚕冷却至室温后，用水冷磨粉机将沙蚕粉碎至200目。2、预处理小球藻：将小球藻藻液离心获得小球藻藻泥，然后将小球藻藻泥在-50℃冷冻干燥，研磨粉碎后得到小球藻粉。3、预处理牡蛎：新鲜牡蛎清洗干净后去壳，加入2-4倍体积的磷酸缓冲液，匀浆提取30min左右，离心，超滤后直接冷冻干燥得到牡蛎粉。4、按重量份计，将沙蚕粉、小球藻粉、牡蛎粉、非转基因玉米淀粉和麦芽糊精按35份、20份、20份、7份和8份的比例，在40℃下恒温高速混合，之后用压片机压制成片剂。对比例1参照实施例2制备具有抗宫颈癌作用的养生食品，区别仅在于，将预处理沙蚕的步骤省略，并将沙蚕从制备组合物养生食品的原料中去除。对比例2参照实施例2制备具有抗宫颈癌作用的养生食品，区别仅在于，将预处理小球藻的步骤省略，并将小球藻从制备养生食品的原料中去除。对比例3参照实施例2制备具有抗宫颈癌作用的养生食品，区别仅在于，将预处理牡蛎的步骤省略，并将牡蛎从制备养生食品的原料中去除。对比例4参照实施例2制备具有抗宫颈癌作用的养生食品，区别仅在于，按重量份计，将沙蚕粉、小球藻粉、牡蛎、非转基因玉米淀粉和麦芽糊精按15份、20份、15份、6份和5份的比例，在40℃下恒温高速混合，之后用压片机压制成片剂。对比例5参照实施例2制备具有抗宫颈癌作用的养生食品，区别仅在于，按重量份计，将沙蚕粉、小球藻粉、牡蛎、非转基因玉米淀粉和麦芽糊精按40份、10份、20份、7份和8份的比例，在40℃下恒温高速混合，之后用压片机压制成片剂。实验例11、取实施例1～3和对比例1～5制备的养生食品，用70％乙醇提取，然后去除乙醇，用dmem培养基稀释，制成每毫升dmem培养基含300mg所述保健食品的提取液。2、细胞增殖的测定(mtt法)：取对数生长期的hela细胞，以1×104个/孔接种到96孔培养皿中，过夜贴皿后，分别加入200μl不含提取液的dmem培养基(对照组)、含实施例1～3所述保健品的提取液的dmem培养基(实验组1～3)和含对比例1～5所述保健品的提取液的dmem培养基(对比组1～5)，培养72h后，加入5mg/ml的mtt20μl，37℃孵育4h，弃上清，没空加入200μldmso，振荡，使结晶溶解，上机检测570nm处吸光度a值。细胞生长抑制率＝(1-实验组或对比组平均a值/对照组平均a值)×100％。具体检测结果见表1。3、流式细胞仪检测细胞凋亡率：hela细胞按1×105个/ml接种于6孔板中，24h后分别换1ml不含提取液的dmem培养基(对照组)、含实施例1～3所述保健品的提取液的dmem培养基(实验组1～3)和含对比例1～5所述保健品的提取液的dmem培养基(对比组1～5)；48h后，用胰酶消化收集各组细胞，用annexinv-fitckit检测样本中凋亡细胞所占比率。具体检测结果见表1。根据表1所示数据可知，本发明实施例1～3制备的保健食品对hela细胞的增殖有显著的抑制作用，并同时促进hela细胞的凋亡。根据实验组1～3和对比组1～3的比较可知，实施例1～3所述保健食品的抑制增殖和促进凋亡的作用主要是由沙蚕、小球藻和牡蛎之间的复配所产生的。而通过比较实验组1～3和对比组4～5可知，沙蚕、小球藻和牡蛎的用量配比也影响所述养生产品抑制hela细胞增殖和促进hela细胞凋亡的功效，沙蚕、小球藻和牡蛎之间的质量配比在25～35:15～20:15～20的范围内，所述养生产品的效果最好。表1养生食品对hela细胞增殖和凋亡的影响细胞生长抑制率(％)细胞凋亡率(％)对比组02.13实验组141.625.6实验组248.730.2实验组342.328.4对比组112.36.87对比组221.813.4对比组320.414.6对比组431.220.3对比组533.522.0实验例2召集90名宫颈癌i期患者，随机分为9组，分别为对照组、实验组1～3和对比组1～5，其中，对照组只接受正常的治疗，实验组1～3和对比组1～5在接受正常的治疗之外，每天还分别服用实验例1～3和对比例1～5制备而成的养生食品，每天服用3次，每次300mg，持续服用2个月。2个月后对患者进行癌痛评估和生活质量评估，具体结果见表2。采用nrs评分对患者进行癌痛评估，以0～10分次序评估疼痛程度，其中0～3分代表轻度疼痛，4～6分为中度疼痛，7～10分代表重度疼痛。采用fact-g评分对两组患者进行生活质量评估。fact-g量表包括情感状况(pwb)、功能状况(swb)、生理状况(ewb)、社会/家庭状况(fwb)4个部分，内含精力、日常生活、疼痛、家庭精神支持、对疾病接纳度、交流、悲伤、紧张、工作。睡眠等调目，每个条目计0～4分，每项得分与患者生活质量评估呈正相关。总体fact-g评分为pwb+swb+eqb+fwb的和。根据表2所示数据可知，实验组1～3患者在富有实施例1～3制备的养生食品后，其疼痛感显著低于对照组，生活质量则高于对照组。而通过比较实验组1～3和对比组1～3可知，实施例1～3所述养生食品的功效主要是由沙蚕、小球藻和牡蛎之间的复配产生的，并且上述复配效果还与三者之间的用量有关(比较实验组1～3和对比组4～5)，所述沙蚕、小球藻和牡蛎的质量比在25～35:15～20:15～20的范围内时，所述养生产品的效果最好。表2养生食品对患者生活质量的影响最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，但本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。当前第1页12