一种产蛋后期蛋鸡饲料及其应用的制作方法

本发明涉及畜禽养殖业中的饲料生产领域，具体涉及一种产蛋后期蛋鸡饲料及其应用。

背景技术：

浓蛋白高度和哈氏单位是衡量鸡蛋蛋清品质的关键指标，直接关系到鸡蛋的新鲜度、营养特性和消费者的认可度。一般而言，浓蛋白高度和哈氏单位值越大，说明鸡蛋蛋清越黏稠，蛋清品质越好。商品代产蛋鸡经过整个高峰期的产蛋过程，随着产蛋鸡周龄的增长，产蛋鸡机体清除自由基的能力降低，活性氧积累，产生氧化应激，导致产蛋性能和鸡蛋品质变差，浓蛋白高度和哈氏单位降低。氧化应激严重时，输卵管膨大部发生氧化损伤，影响膨大部的蛋清蛋白合成、分泌功能。

茶多酚，又名抗氧灵、防哈灵、维多酚，淡黄色至茶褐色略带茶香的粉末固体或结晶；是茶叶中提取的多羟酚类化合物的总称，包括黄烷醇类、黄酮类、花色苷类、黄酮醇类及酚类等。具清除自由基、抑制脂质过氧化作用，有较强抗氧化作用，其中儿茶素化合物占茶多酚总量的65％-80％。因此，茶多酚是潜在的用于改善产蛋后期蛋鸡的产蛋性能和鸡蛋蛋清品质的天然植物添加剂。钒过量引起产蛋鸡的输卵管膨大部发生氧化损伤，导致鸡蛋蛋清品质降低，茶多酚能有效缓解钒过量引起的浓蛋白高度和哈氏单位的降低。由此，茶多酚可能通过改善输卵管膨大部的氧化损伤，提高鸡蛋浓蛋白高度和哈氏单位。前期研究结果显示，0.02％茶多酚有效提高青年产蛋鸡机体抗氧化能力。

技术实现要素：

针对产蛋后期蛋鸡的产蛋性能、鸡蛋蛋清品质降低的现象，本发明提供了一种能够提高产蛋后期蛋鸡的产蛋性能、鸡蛋蛋清品质、改善输卵管膨大部组织形态的饲料，维持并延长产蛋鸡较高的产蛋性能、鸡蛋蛋清品质，对提高蛋禽业的生产经济效益具有重要意义。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种产蛋后期蛋鸡饲料，由以下重量份的原料制备而成：玉米63.3份、豆粕24.63-24.65份、大豆油0.5份、石粉9.6份、磷酸氢钙0.9份、氯化钠0.3份、50％氯化胆碱0.11份、dl-蛋氨酸0.11份、益康xp0.3份、植酸酶0.01份、蛋鸡微量元素预混料0.2份，蛋鸡维生素预混料0.02份，茶多酚0-0.02份；所述茶多酚是从绿茶中经水提取的多酚类混合物，茶多酚含量为66.73％，儿茶素为37.25％；其中，所述儿茶素中含d-儿茶素(dc)1.25％、表儿茶素(ec)9.76％、表没食子儿茶素(egc)8.41％、表没食子儿茶素没食子酸酯(egcg)12.49％、表儿茶素没食子酸酯(ecg)5％。

上述的一种产蛋后期蛋鸡饲料可用于提高蛋鸡产蛋性能、改善鸡蛋蛋清品质、改善输卵管膨大部组织形态，所述蛋鸡为产蛋64周龄以后的蛋鸡。

本发明在制备时，茶多酚应先与少量豆粕混匀后，再与其他原料、预混料混合，避免茶多酚在与豆油混合时，发生结块现象。同时，防止茶多酚的活性成分与预混料发生反应，影响添加效果。

本发明具有以下有益效果：

经试验证实，本发明所提供的饲料饲喂产蛋后期蛋鸡后，可提高产蛋性能、鸡蛋蛋清品质，改善输卵管膨大部组织形态。因此，该饲料在改善产蛋后期蛋鸡的产蛋性能、鸡蛋蛋清品质，以及输卵管膨大部组织形态等方面具有良好的应用前景，具有显著的经济效益。

附图说明

图1为本发明实施例中卵黏蛋白sds-page电泳图谱；

图中，0：标准分子量；1、2、3：对照组；4、5、6：茶多酚组。

图2为本发明实施例中200mg/kg茶多酚对产蛋后期蛋鸡的膨大部粘膜皱襞组织形态的影响。

图3为本发明实施例中200mg/kg茶多酚对产蛋后期蛋鸡的膨大部粘膜腺上皮组织形态的影响。

图4为本发明实施例中200mg/kg茶多酚饲粮对的鸡蛋浓蛋白高度的影响。

图5为本发明实施例中200mg/kg茶多酚饲粮对鸡蛋哈氏单位的影响。

具体实施方式

为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

以下实施例中所使用的茶多酚为无锡太阳绿宝科技有限公司的茶多酚。

实施例1

表1试验配方组成(％)

选取64周龄海兰褐产蛋鸡180只，随机分成2组，每组6个重复，每重复15只鸡。本发明涉及的茶多酚是由无锡太阳绿宝科技有限公司提供(批次号：505083)。预饲期1周，试验期10周。计算1-5周、5-10周和1-10周的产蛋率、平均蛋重、平均日采食量和料蛋比(表2)。于试验期第4周末、第6周末、第8周末、第10周末，每重复采集5枚蛋样，以色列orka公司生产的蛋品质测定仪测定浓蛋白高度和哈氏单位(见表3)。

表2200mg/kg茶多酚饲粮对产蛋性能的影响

从表2可知，饲养试验的第5-10周，饲粮添加200mg/kg的茶多酚组产蛋率显著高于对照组，且料蛋比显著低于对照组(p＜0.05)；第1-10周，200mg/kg茶多酚组的产蛋率显著高于对照组，同时料蛋比显著降低(p＜0.05)。综上，添加200mg/kg的茶多酚饲粮连续饲喂5周后，可显著提高蛋鸡的产蛋率，同时显著提高饲料效率。

表3200mg/kg茶多酚饲粮对鸡蛋蛋清品质的影响

从试验结果表3可知，与对照组相比，茶多酚组显著提高鸡蛋的浓蛋白高度、哈氏单位(p＜0.05)。因此，添加200mg/kg茶多酚饲粮，能改善产蛋后期蛋鸡的鸡蛋蛋清品质。

实施例2

表4试验配方组成(％)

选取64周龄海兰褐产蛋鸡180只，随机分成2组，每组6个重复，每个重复15只鸡。本发明涉及的茶多酚是由无锡太阳绿宝科技有限公司提供(批次号：505083)。预饲期1周，试验期10周。

试验期末，每重复采集3枚蛋样，将新鲜鸡蛋去壳后，用分蛋器将蛋清和蛋黄分离，将新鲜蛋清液体进行真空冷冻干燥处理，冻干后在最短时间内且干燥空气下用密封袋将冻干蛋清粉收集，测定蛋白羰基、巯基含量和表面疏水性等指标(见表5)。

蛋白巯基含量采用分光光度法测定，蛋白质羰基含量、蛋白定量(双缩脲法)按试剂盒说明测定，所用试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

蛋白表面疏水性测定方法：精确称取0.1g冻干样品，利用0.1mol/l(ph7.0)的磷酸盐缓冲液溶解，定容在100ml的容量瓶中，经均质机均质，取15ml在10000r/min离心15min，除去不溶性氮，同时采用双缩脲法测定清液中蛋白含量(试剂盒测定)。然后清液用0.1mol/lph7.0的磷酸盐缓冲液将各样品蛋白浓度稀释到0.01-0.1mg/ml之间，取5个浓度梯度值，每10ml不同浓度的稀释样品中加入50μl的ans溶液(8mmol/l，用0.1mmol/lph7磷酸盐缓冲液配制)。空白ans(1-苯胺基-8-萘磺酸)荧光溶液+相应的缓冲液作对照。用1cm比色皿在ls55荧光分光光度计上测吸光度值。测量条件：激发波长390nm、发射波长470nm、狭缝宽10nm，室温20℃。然后取荧光强度的平均值对蛋白浓度作曲线，曲线初始阶段斜率即为蛋白分子的表面疏水性指数。

表5200mg/kg茶多酚饲粮对蛋清蛋白羰基、总巯基含量及表面疏水性的影响

从试验结果表5可知，与对照组相比，茶多酚组显著降低蛋清蛋白羰基含量和表面疏水性指数(p＜0.05)，显著升高巯基含量(p＜0.05)。因此，添加200mg/kg茶多酚的饲粮，能显著降低鸡蛋蛋清蛋白氧化程度，改善产蛋后期蛋鸡的鸡蛋蛋清品质。

实施例3

表6试验配方组成(％)

选取64周龄海兰褐产蛋鸡180只，随机分成2组，每组6个重复，每个重复15只鸡。本发明涉及的茶多酚是由无锡太阳绿宝科技有限公司提供(批次号：505083)。预饲期1周，试验期10周。

卵黏蛋白的制备：试验期末，每重复取3枚蛋，20目网筛将浓蛋清与稀蛋清分离，移除系带后，0.1mol/lnacl溶液稀释浓蛋清并于4℃低速磁力搅拌50min(搅拌过程不应起泡，防止蛋白变性)，用1mol/lhcl调节ph至6.0，搅拌30min，于4℃冰箱中静置过夜，次日将混合液在低温离心机离心15min(15000×g，4℃)，弃上清液。用0.5mol/lnacl溶液溶解沉淀，调节ph至6.0，4℃下搅拌1h，静置4h，再经冷冻离心(15000×g，4℃)，沉淀用去离子水洗涤3次，每次清洗后按上述条件离心，沉淀部分冻干、称重，于-20℃冷藏备用。

制备得到的卵黏蛋白进行sds-page凝胶电泳：取2mg卵黏蛋白提取物溶于2ml0.01mol/ltris-hcl(ph7.0)缓冲液(含有10μl/ml的2-巯基乙醇和1％(w/v))后，取20μl卵黏蛋白样品与5μl上样缓冲液混匀，混匀后100℃煮5min。采用tris-hcl缓冲系统进行垂直电泳检测。电泳条件：5％浓缩胶电压80v，30min，8％分离胶电压120v，1h。

由新鲜鸡蛋中浓蛋白中提取的卵黏蛋白sds-page电泳图如图1。本试验用含sds和β-巯基乙醇的tris-hcl缓冲液溶解卵黏蛋白，使卵黏蛋白各亚基变性分离。对照组、茶多酚组中卵黏蛋白均可电泳分离出三个亚基条带：β-亚基、α2-亚基和α1-亚基。由各组卵黏蛋白亚基条带可以看出，β-亚基条带最为清晰，α2-、α1-亚基条带较浅，茶多酚组中各重复的β-亚基条带灰度值明显大于对照组，茶多酚组中各重复的α2-、α1-亚基较明显，而对照组中各重复的α2-亚基几乎消失。

因此，添加200mg/kg茶多酚的饲粮，能保护浓蛋白中卵黏蛋白亚基的氧化降解，改善蛋鸡产蛋后期的鸡蛋蛋清品质。

实施例4

表7试验配方组成(％)

选取64周龄海兰褐产蛋鸡180只，随机分成2组，每组6个重复，每个重复15只鸡。本发明涉及的茶多酚是由无锡太阳绿宝科技有限公司提供(批次号：505083)。预饲期1周，试验期10周。试验期末，以重复为单位随机选取体重相近的健康蛋鸡，屠宰后取输卵管膨大部样品固定于福尔马林溶液，he染色，光学显微镜下观察组织学变化(见图2、3及表8)。

由图3、4及表5结果显示，茶多酚组的粘膜皱襞粗大，皱襞高度、腺上皮厚度和纤毛高度显著高于对照组(p<0.05)。固有层腺体发达，腺体数量多、密度大，管状腺的腺细胞肥大，管状腺内可见大量糖原及分泌颗粒，未见腺体萎缩。在粘膜表层丰富的纤毛细胞中，可见大量颗粒细胞及分泌颗粒。

对照组的局部粘膜皱襞萎缩，腺上皮厚度和纤毛高度明显变矮，粘膜固有层变薄，多数粘膜皱襞固有层可见管状腺萎缩，萎缩部位腺体数量明显减少，萎缩腺体内可见散在空泡，糖原和分泌颗粒明显减少。因此，200mg/kg茶多酚饲粮能有效改善产蛋后期蛋鸡的输卵管膨大部组织形态的恶化。

表8200mg/kg茶多酚对蛋鸡产蛋后期的输卵管膨大部组织形态的影响

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。